微生物學(xué)總結(jié)

1、1脂多糖能阻攔 溶酶菌、青霉素、去污劑、若干染料等進(jìn)入細(xì)胞，因其的存在，G-更能抵抗毒物和抗生素的毒害。其結(jié)構(gòu)靠Ca+離子維持2抗酸細(xì)菌-一種特殊的G+細(xì)菌，被酸性染料負(fù)染后不能被鹽酸乙醇脫色，故稱抗酸細(xì)菌 細(xì)胞壁含大量 分枝菌酸；構(gòu)造類似G- 古生菌-細(xì)胞壁假肽聚糖 缺壁細(xì)菌-自發(fā)缺壁（L型細(xì)菌）、人工去除（原生質(zhì)體、球狀體）、自然長期進(jìn)化（支原 體）3原核生物細(xì)胞質(zhì)不流動(dòng)45菌毛多數(shù)存在與G-致病菌種，性菌毛一般見于G-的雄性菌株6能產(chǎn)芽孢的主要是G+的兩個(gè)屬，有些還產(chǎn)生伴孢晶體，有毒殺作用7微體-氧化酶和過氧化氫酶，保護(hù)細(xì)胞免受H2O2毒害8出芽繁殖-酵母菌屬的無性繁殖就是這種類型的繁殖

2、；裂殖酵母菌無性繁殖就象細(xì)菌一樣，母細(xì)胞一分為二的繁殖(1) 游動(dòng)孢子 (zoospore) 鞭毛菌的菌絲可直接形成或發(fā)育成各種形狀的游動(dòng)孢子囊，游動(dòng)孢子囊內(nèi)的原生質(zhì)體分割成許多小塊，小塊逐漸變圓，圍以薄膜而形成游動(dòng)孢子。游動(dòng)孢子腎形、梨形或球形，具一或二根鞭毛，在水中游動(dòng)一段時(shí)間后，鞭毛收縮，產(chǎn)生細(xì)胞壁進(jìn)行休眠，然后萌發(fā)形成新個(gè)體。(2) 孢囊孢子 (Sporangiospores) 接合菌無性繁殖所產(chǎn)生的孢子生在孢子囊內(nèi)，孢子囊一般生于營養(yǎng)菌絲或孢囊梗的頂端。孢子囊內(nèi)的原生質(zhì)體割裂成許多小塊，每一塊發(fā)育成一個(gè)孢囊孢子，數(shù)量一般都相當(dāng)大。(3) 分生孢子 (Conidiospore 或 Co

3、nidium) 子囊菌和半知菌類的無性孢子是分生孢子。簡單的分生孢子是由特化菌絲先端通過一定方式發(fā)生的，其下方的特化菌絲叫分生孢子梗 (conidio phore) 。梗有單生的，散生的，成叢的，還有成束的。有的分生孢子梗自墊狀菌絲生出，使產(chǎn)孢總體結(jié)構(gòu)呈盤狀，叫分生孢子盤。有的菌種是在菌絲堆上生出分生孢子梗和分生孢子。還有些真菌的分生孢子生在覆碗狀或球形的分生孢子器中。(4) 厚垣孢子 (chlamydospore) 有些真菌在菌絲頂端或中間產(chǎn)生一個(gè)孢子，它的外圍被厚壁包圍著，叫厚垣孢子，也叫厚壁孢子。(5) 節(jié)孢子 (arthrospore) 有些真菌菌絲發(fā)生斷裂后成為節(jié)孢子9真菌的有性孢子

4、有哪幾種？卵孢子：卵菌中的有性孢子為卵孢子，當(dāng)繁殖時(shí)在菌絲上先生出藏卵器和雄器，雄器的核移入藏卵器與卵球結(jié)合后形成雙倍體的卵孢子。在不同的菌種中卵球可能一個(gè)，也可能多個(gè) 。接合孢子：接合菌的有性孢子為接合孢子。來自兩個(gè)不同菌株的同形配偶囊，互相接觸后，接觸處的胞壁溶解，來自雙方的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核融合起來形成一個(gè)雙倍體的接合孢子子囊孢子：子囊菌的有性孢子為子囊孢子。雙核菌絲產(chǎn)生幼小子囊，其中的雙核進(jìn)行核配后減數(shù)分裂產(chǎn)生 4 個(gè)新核，再分裂一次形成 8 個(gè)核，然后以核為中心逐步形成單倍體的子囊孢子，一個(gè)子囊內(nèi)往往有 8 個(gè)子囊孢子。擔(dān)孢子：擔(dān)子菌的有性孢子為擔(dān)孢子。擔(dān)孢子的形成過程與子囊孢子相似，不

5、同的是核配后減數(shù)分裂所形成的 4 個(gè)核不再進(jìn)行分裂； 以核為中心所形成的擔(dān)孢子最終在擔(dān)子外部形成；擔(dān)子有縱隔的，也有生橫隔的，多數(shù)是單室無隔。10簡述病毒粒子的構(gòu)造及其各部分功能。構(gòu)造：典型病毒粒的構(gòu)造基本成分是核酸和蛋白質(zhì)，核酸位于它的中心，稱為核心或基因組；蛋白質(zhì)包圍在核心周圍，形成了衣殼；有的病毒還被有包膜核酸是病毒的遺傳物質(zhì)，儲(chǔ)存著它本身的遺傳信息，是進(jìn)行繁殖的必不可少的部分；蛋白質(zhì)外殼是病毒粒的主要支架結(jié)構(gòu)和抗原成分，有保護(hù)核酸等作用；包膜的性質(zhì)及其有無與該病毒宿主的專一性和侵入等功能有關(guān)11病毒的對(duì)稱體制有哪幾種？螺旋對(duì)稱（煙草花葉病毒）和二十面體對(duì)稱（腺病毒），還有的復(fù)雜病毒實(shí)質(zhì)

6、上是上述兩種對(duì)稱相結(jié)合的結(jié)果，稱復(fù)合對(duì)稱（T偶數(shù)噬菌體）12 病毒的復(fù)制：吸附，穿入，脫殼，轉(zhuǎn)錄、翻譯，組裝、成熟、釋放13 一步生長曲線：描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線潛伏期（隱晦期-復(fù)制核酸，合成核衣殼，無侵染性胞內(nèi)累積期-已具侵染性，開始裝配噬菌體粒子）裂解期 平穩(wěn)期14溶源性： 自發(fā)裂解/子代細(xì)菌均具溶源性/誘發(fā)裂解/免疫性/復(fù)愈15原核生物的細(xì)胞核有什么特點(diǎn)？細(xì)菌細(xì)胞核以外的遺傳物質(zhì)是什么，并簡述其定義。無核膜包裹、無固定形態(tài)的原始細(xì)胞核，是原核生物所特有的，核區(qū)的化學(xué)成分是一個(gè)大型的環(huán)狀雙鏈dna分子，一般不含蛋白質(zhì)質(zhì)粒-存在于細(xì)菌染色體外或附加于細(xì)菌染色體上的能夠自我復(fù)制、穩(wěn)定

7、遺傳的遺傳物質(zhì)，絕大多數(shù)由dna分子組成16微生物的六大營養(yǎng)要素是什么碳源：一切能滿足微生物生長繁殖所需碳元素的營養(yǎng)源氮源：凡能提供微生物生長繁殖所需氮元素的營養(yǎng)源【牛肉膏、蛋白胨】能源：能為微生物生命活動(dòng)提供最初能量來源的營養(yǎng)物或輻射能生長因子：是一類對(duì)調(diào)節(jié)微生物正常代謝所必需，但不能用簡單的碳、氮源自行合成的微量有機(jī)物【維生素 培養(yǎng)基中生長因子來源：酵母膏、玉米漿、麥芽汁等】無機(jī)鹽：可為微生物提供除碳、氮源以外的各種重要元素水：微生物代謝活動(dòng)中不可缺少性，能提供H、O元素17微生物的營養(yǎng)類型有那四種，各自特點(diǎn)。光能無機(jī)營養(yǎng)型：以光能為能源，以無機(jī)物為氫供體，以二氧化碳為碳源光能有機(jī)營養(yǎng)型：

8、以光能為能源，以有機(jī)物為氫供體，以二氧化碳及簡單有機(jī)物為碳源化能無機(jī)營養(yǎng)型：以無機(jī)物為能源及氫供體，以二氧化碳為碳源化能有機(jī)營養(yǎng)型：以有機(jī)物為能源及碳源，以有機(jī)物為碳源18營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞方式有那四種，各自特點(diǎn)單純擴(kuò)散：不通過膜上載體蛋白運(yùn)送，運(yùn)送的物質(zhì)種類不多，主要是氧氣、二氧化碳、乙醇、甘油和某些氨基酸分子，對(duì)營養(yǎng)物的運(yùn)送缺乏選擇能力和逆濃度梯度的濃縮能力，不耗能且吸收慢促進(jìn)擴(kuò)散：通過膜上載體蛋白運(yùn)送，不消耗能量，順濃度梯度，真核細(xì)胞中較普遍，運(yùn)輸硫酸根、磷酸根、糖（真核）等主動(dòng)運(yùn)送：靠膜上載體蛋白消耗能量的逆濃度梯度運(yùn)輸，是微生物吸收營養(yǎng)的主要方式，運(yùn)送前后溶質(zhì)分子不變，運(yùn)輸有機(jī)離子、無

9、機(jī)離子、氨基酸、乳糖等糖類基團(tuán)移位：靠膜上特異性載體蛋白協(xié)助逆濃度梯度消耗能量的運(yùn)輸，但是運(yùn)送前后溶質(zhì)分子結(jié)構(gòu)改變，廣泛存在與原核生物中，主要運(yùn)送各種糖類【磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)使溶質(zhì)分子定向磷酸化】19培養(yǎng)基按對(duì)微生物的功能進(jìn)行分類可分為哪兩類，各自定義選擇性培養(yǎng)基：根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素抗性的原理而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能【加富性選擇培養(yǎng)基、抑制性選擇培養(yǎng)基】鑒別性培養(yǎng)基：在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而達(dá)到只須用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找到目的菌菌落的培養(yǎng)基【伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基EMB,其兼有抑制G+細(xì)

10、菌和促進(jìn)G-腸道菌生長的作用】C/N比: 微生物培養(yǎng)基中所含的碳源中的碳原子與氮源中氮原子的摩爾數(shù)之比。不是簡單的某碳源的重量與氮源的重量之比。因?yàn)?，不同種類的碳源和氮源，其中含碳量和含氮量差別很大。由于在微生物（尤其是一些產(chǎn)酸菌）的生長、代謝過程中會(huì)產(chǎn)生引起培養(yǎng)基pH改變的代謝產(chǎn)物，如不及時(shí)調(diào)節(jié)，就會(huì)抑制甚至殺死其自身，因而在設(shè)計(jì)此類培養(yǎng)基時(shí)，就要考慮培養(yǎng)基成分所起的調(diào)節(jié)作用，可稱作pH的內(nèi)源調(diào)節(jié) 【細(xì)菌 最適PH7.0-8.0/放線菌 最適PH7-8.5/酵母菌3.8-6.0/霉菌 最適PH4.0-6.0滲透壓(osmotic pressure): 高濃度溶液向低濃度溶液滲透時(shí)，其溶質(zhì)分子

11、所產(chǎn)生的壓力。水活度(water activity, aw)：在天然環(huán)境中，微生物可實(shí)際利用的自由水或游離水含量。在常溫常壓下，純水的aw為1.00氧化還原電位Eh（redox potential）：氧化還原系統(tǒng)中的還原劑釋放電子或氧化劑接受電子的趨勢。20天然培養(yǎng)基：一類利用動(dòng)植物或微生物體包括用其提取物制成的培養(yǎng)基【牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基組合培養(yǎng)基：是一類按微生物的營養(yǎng)要求精確設(shè)計(jì)后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基【葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基】半組合培養(yǎng)基：主要以化學(xué)試劑配制，同時(shí)還加有某些天然成分的培養(yǎng)基【馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基】21按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)作分類這一章不重要22新陳代謝：是推動(dòng)

12、生物一切生命活動(dòng)的動(dòng)力源，通常泛指發(fā)生在活細(xì)胞中的各種分解代謝和合成代謝的總和。 生物氧化：發(fā)生在活細(xì)胞內(nèi)的一系列產(chǎn)能性氧化反應(yīng)的總稱 生物氧化可分為脫氫、遞氫和受氫3個(gè)階段；功能為產(chǎn)ATP、【H】、小分子中間代謝物； 生物氧化類型包括呼吸、無氧呼吸、發(fā)酵3種 底物脫氫的4條途徑：EMP途徑、HMP途徑、ED途徑、TCA循環(huán) 遞氫和受氫 呼吸-又稱好氧呼吸，脫下的H經(jīng)完整的呼吸鏈傳遞，最終被外源分子氧接受，產(chǎn)生水并釋放ATP形式的能量，是一種遞氫和受氫都必須在有氧條件下完成的生物氧化作用 呼吸鏈：指位于原核生物細(xì)胞膜上或真核生物線粒體上的、由一系列氧化還原電勢呈梯度差的、鏈狀排列的一組氫傳遞體

13、，其功能是把氫或電子從低氧化還原電勢的化合物處逐級(jí)傳遞到高氧化還原電勢的分子氧或其他有機(jī)、無機(jī)氧化物，并把它們還原 有氧呼吸特點(diǎn)：底物脫氫后，經(jīng)完整呼吸鏈遞氫，以分子氧作為最終受體；基質(zhì)分解的徹底，最終產(chǎn)物是CO2和H2O；釋放的能量多 無氧呼吸特點(diǎn)：以無機(jī)氧化物或有機(jī)氧化物為最終H受體；基質(zhì)分解比較徹底，最終是CO2、H2O和無機(jī)物；釋放出能量較多【硝酸鹽呼吸、硫酸鹽呼吸、硫呼吸、鐵呼吸、碳酸鹽呼吸、延胡索酸呼吸】 發(fā)酵： 廣義的“發(fā)酵”是指利用微生物生產(chǎn)有用代謝產(chǎn)物的一種生產(chǎn)方式；狹義的“發(fā)酵”是指微生物細(xì)胞將有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某種中間產(chǎn)物，同時(shí)釋放能量并產(chǎn)生

14、各種不同代謝產(chǎn)物的過程【通過EMP途徑中丙酮酸出發(fā)的發(fā)酵-丙酮丁酮梭菌進(jìn)行的丙酮、丁醇、乙醇的發(fā)酵是嚴(yán)格厭氧菌所進(jìn)行的唯一能大規(guī)模生產(chǎn)的發(fā)酵】【通過HMP途徑的發(fā)酵-異型乳酸發(fā)酵，除乳酸外還產(chǎn)生乙醇、乙酸、CO2等多種產(chǎn)物 異型乳酸發(fā)酵的經(jīng)典途徑-利用葡萄糖時(shí)產(chǎn)物為乳酸、乙醇、CO2，產(chǎn)生1分子水和1ATP；利用果糖時(shí)產(chǎn)物為乳酸、乙酸、CO2、甘露醇；利用核糖時(shí)產(chǎn)物為乳酸、乙酸、2分子水、2ATP 雙歧桿菌途徑-2分子葡萄糖可產(chǎn)3分子乙酸、2分子乳酸、5分子ATP】【ED途徑-細(xì)菌酒精發(fā)酵】【氨基酸發(fā)酵產(chǎn)能-stickland反應(yīng)】【發(fā)酵中的產(chǎn)能反應(yīng)-底物水平磷酸化】23自養(yǎng)微生物產(chǎn)ATP和還

15、原力化能自養(yǎng)微生物還原CO2所需的ATP和【H】是通過氧化無機(jī)底物獲得的。有些無機(jī)底物可以作為氫供體，逆呼吸鏈傳遞消耗ATP產(chǎn)生還原CO2的H光能自養(yǎng)微生物：1一種存在于厭氧性光合細(xì)菌中的原始光合作用機(jī)制，可在光能驅(qū)動(dòng)下通過電子的循環(huán)式傳遞完成磷酸化產(chǎn)能，稱循環(huán)光合磷酸化。在電子循環(huán)傳遞過程中，H2S等無機(jī)氫供體產(chǎn)生的還原力和ATP的產(chǎn)生是同時(shí)發(fā)生的。外源氫供體（H2S、H2、有機(jī)物）逆電子流產(chǎn)還原力，并由此使光合磷酸化與固定CO2的Calvin循環(huán)相連接2 各種綠色植物、藻類、藍(lán)細(xì)菌所共有的利用光能產(chǎn)生ATP的磷酸化反應(yīng)，電子的傳遞為非循環(huán)式，稱非循環(huán)光和磷酸化。反應(yīng)中可同時(shí)產(chǎn)ATP、還原力

16、H、O2，由水分子作為氫供體，產(chǎn)生NADPH2形式的還原力，來還原CO23 嗜鹽菌紫膜在無氧條件下，利用光能所造成的紫膜蛋白上視黃醛輔基構(gòu)象的變化，可使質(zhì)子不斷驅(qū)至膜外，從而在膜兩側(cè)建立一個(gè)質(zhì)子動(dòng)勢，再由它來推動(dòng)ATP合酶合成ATP，此即光介導(dǎo)ATP合成或紫膜光合磷酸化。23 兩用代謝途徑：分解代謝、合成代謝中均具有功能的代謝途徑【EMP、HMP、TCA】 合成代謝并非分解代謝的完全逆轉(zhuǎn)，酶的差異 相應(yīng)代謝步驟中，往往包含了完全不同的中間代謝物 分解代謝一般在線粒體、微體、溶酶體；合成代謝一般在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行 代謝物回補(bǔ)順序：指能補(bǔ)充兩用代謝途徑中因合成代謝而消耗的中間代謝物的那些反應(yīng) 乙醛酸循

17、環(huán)為TCA循環(huán)中的一條回補(bǔ)途徑 24自養(yǎng)微生物固定二氧化碳的途徑Calvin循環(huán)途徑-這一循環(huán)是光能自養(yǎng)生物和化能自養(yǎng)生物固定CO2的主要途徑。一切光能自養(yǎng)生物中，此反應(yīng)不需要光，可在黑暗條件下進(jìn)行，又稱暗反應(yīng)。分為羧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、CO2受體再生三個(gè)階段厭氧乙酰-CoA途徑-非循環(huán)式的CO2固定機(jī)制，主要存在于一些產(chǎn)乙酸菌、硫酸鹽還原菌和產(chǎn)甲烷菌等化能自養(yǎng)細(xì)菌中逆向TCA循環(huán)-在稱作綠菌屬的一些綠色硫細(xì)菌中，CO2固定通過逆向TCA循環(huán)進(jìn)行羥基丙酸途徑-少數(shù)綠色非硫細(xì)菌在以H2、H2S做電子供體進(jìn)行自養(yǎng)生活時(shí)所特有的一種CO2固定機(jī)制25生物固氮：是指大氣中的分子氮通過微生物固氮酶的催化而

18、還原成氨的過程，生物界只有原核生物才具有固氮能力 固氮微生物-自生固氮菌、共生固氮菌、聯(lián)合固氮菌【必須在植物根際、葉面、動(dòng)物腸道等處】 生物固氮反應(yīng)六要素：ATP提供、還原力H及其傳遞載體、固氮酶、還原底物-N2、鎂離子、嚴(yán)格的厭氧微環(huán)境 測定固氮酶活力的方法：微量克氏定氮法、同位素法，后采用乙炔還原法 大多數(shù)固氮微生物生命活動(dòng)包括生物固氮所需大量能量都是來自好氧呼吸和非循環(huán)光合磷酸化抗氧保護(hù)機(jī)制-藍(lán)細(xì)菌的異形胞【超氧化物歧化酶SOD】、非異形胞【時(shí)間分隔】、豆科植物的類菌體26肽聚糖是許多重要抗生素呈現(xiàn)其選擇毒力的物質(zhì)基礎(chǔ)27測生長量：直接法【測體積法、測干重】；間接法【比濁法-分光光度法，

19、生理指標(biāo)法】 測繁殖數(shù)：直接法【計(jì)數(shù)板、活菌染色】、間接法【平板菌落計(jì)數(shù)法-適用于各種好厭氧 菌或厭氧菌；亨蓋特滾管技術(shù)-厭氧菌】28獲得微生物同步生長的方法【環(huán)境條件誘導(dǎo)法；機(jī)械篩選法-膜洗脫法較常用】29影響延滯期長短因素【接種齡、接種量、培養(yǎng)基成分、種子損傷度30指數(shù)期微生物整個(gè)群體生理特性較一致，細(xì)胞各成分平衡增長和生長速率恒定等，故是用作代謝、生理和酶學(xué)等研究的好材料，是增值噬菌體的最適宿主，也是用做種子的最佳材料31穩(wěn)定期是某些以生產(chǎn)菌體或代謝產(chǎn)物為目的的發(fā)酵生產(chǎn)的最佳收貨時(shí)期，對(duì)維生素、氨基酸等進(jìn)行生物測定來說是最佳測定時(shí)期32微生物的高密度培養(yǎng)用于多肽類藥物的生產(chǎn)實(shí)踐 具體方法

20、【選取最佳培養(yǎng)基成分、適時(shí)補(bǔ)料、濃高溶解氧的濃度、防止有害代謝產(chǎn)物的生 成、保持合適PH】 33微生物培養(yǎng)法概論 在混合菌樣中獲得純菌株的方法主要有 平板劃線法、稀釋涂布平板法 和 稀釋倒平板法 好氧菌的固體培養(yǎng) ：試管斜面，培養(yǎng)皿瓊脂平板 厭氧菌的固體培養(yǎng)：1）高層瓊脂柱 2）厭氧培養(yǎng)皿 3）亨蓋特滾管技術(shù) 推動(dòng)了嚴(yán)格厭氧 菌的分離和研究 4）厭氧罐 5）厭氧手套箱 用嚴(yán)格厭氧方法制成的培養(yǎng)基：PRAS培養(yǎng)基34有害微生物的控制滅菌 ：采用強(qiáng)烈的理化因素是任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長繁殖的能力的措施消毒 ：采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體或動(dòng)植物有害的病菌原

21、，而對(duì)被消毒對(duì)象基本無害的措施。例如 對(duì)啤酒牛奶等消毒處理的巴氏消毒法防腐：1 低溫 2 缺氧 3 干燥 4 高滲 5 高酸度 6 高醇度 7 加防腐劑化療 ：即化學(xué)治療 具有高度選擇毒力 化學(xué)治療劑：磺胺類35高溫滅菌的種類 ：1 干熱滅菌法： 最徹底的是灼燒 2濕熱滅菌法（消毒）一百攝氏度以上加壓蒸汽進(jìn)行滅菌 常壓法：1） 巴斯消毒法 2）煮沸消毒法 3）間歇滅菌法36評(píng)價(jià)藥效和毒性的三個(gè)指標(biāo)【最低抑制濃度MIC（藥效）、半致死劑量LD50和最低致死劑量MLD（毒效）】臨床最早使用的消毒劑：石炭酸 抗代謝藥物代表 磺胺類藥物 抗生素的活力稱為效價(jià)；各種抗生素有不同的制菌范圍 即抗菌譜37

22、生物最本質(zhì)的屬性【遺傳、變異】38原核生物的基因調(diào)控系統(tǒng)【操縱子和它的調(diào)節(jié)基因，操縱子包括結(jié)構(gòu)基因（轉(zhuǎn)錄、翻譯）、操縱基因（與阻遏物結(jié)合控制結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄）、啟動(dòng)基因】39質(zhì)粒在基因工程中的應(yīng)用【克隆載體】 優(yōu)點(diǎn)【體積小；穩(wěn)定維持高拷貝數(shù)；易分離；可插入較多外源DNA；結(jié)構(gòu)清楚，各種核 酸內(nèi)切酶可酶解位點(diǎn)任意選用；兩個(gè)選擇性抗藥標(biāo)記；方便的通過選擇性導(dǎo)入】40基因突變的自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的證明實(shí)驗(yàn)有哪幾個(gè)？（1） Luria等的變量試驗(yàn) （2） Newcombe的涂布實(shí)驗(yàn)（3） Lederberg等的影印平板試驗(yàn)41誘發(fā)突變：通過人為的方法，利用物理、化學(xué)或生物因素顯著提高基因自發(fā)突變頻率的手段【

23、堿基置換、移碼突變（吖啶類燃料）、染色體畸變】自發(fā)突變：無人工干預(yù)下自然發(fā)生的低頻率突變【天然宇宙射線、DNA復(fù)制中堿基錯(cuò)誤配對(duì)、有害代謝產(chǎn)物、轉(zhuǎn)座因子】三致【致突變、致畸變、致癌變】42突變株的篩選方法產(chǎn)量突變株的篩選：瓊脂塊培養(yǎng)法【關(guān)鍵是用打孔器取出含有一個(gè)小菌落的瓊脂塊并對(duì)它們作分別培養(yǎng)】抗藥性突變株的篩選：梯度平板法營養(yǎng)缺陷型突變株篩選過程：誘變、淘汰野生型（抗生素法-適用于細(xì)菌，殺死正常生長型、菌絲過濾法-適用于絲狀生長的真菌和放線菌）、檢出缺陷型（夾層培養(yǎng)法、限量補(bǔ)充培養(yǎng)法、逐個(gè)檢出法、影印平板法）、鑒定缺陷型（生長譜法）42真核生物的基因重組：有性雜交，準(zhǔn)性雜交43基因工程流程：

24、目的基因的取得；優(yōu)良載體的選擇；目的基因與載體DNA的體外重組；重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞；重組受體細(xì)胞的篩選和鑒定；“工程菌”或“工程細(xì)胞”的大規(guī)模培養(yǎng)44菌種的衰退、復(fù)壯、保藏衰退：某純種微生物群體中個(gè)別個(gè)體由于發(fā)生自發(fā)突變的結(jié)果，而使該物種原有一系列生物學(xué)性狀發(fā)生衰退性的量變或質(zhì)變的現(xiàn)象【是一個(gè)量變到質(zhì)變的逐步演化過程】復(fù)壯【純種分離法、通過宿主體內(nèi)復(fù)壯-病原菌、淘汰已衰退個(gè)體】兩種最有效的方法保藏【冷凍干燥保藏法、液氮保藏法】45整個(gè)生物圈要獲得繁榮昌盛和發(fā)展，能量來源于太陽，元素來源主要依賴微生物所推動(dòng)的生物地球化學(xué)循環(huán)46氮素循環(huán)：生物固氮【N2、NH4+】、硝化作用【NH4+、NO2-

25、、NO3-】、同化性硝酸鹽還原作用【NO3-、NH4+、生物體有機(jī)氮】、氨化作用【生物體有機(jī)氮、NH4+】、銨鹽同化作用【NH4+、生物體有機(jī)氮】、異化性硝酸鹽還原作用【NO3-、NO2-】、反硝化作用（脫氨作用）【NO2-、NO、N2O、N2】、亞硝酸氨化作用【NO2-、NH4OH、NH4+】47微生物污水處理方法、裝置【完全混合曝氣法（活性污泥）、生物轉(zhuǎn)盤法（生物被膜）、厭氧污泥消化器】48決定傳染結(jié)局的三大因素病原體【其數(shù)量、致病特性、侵入方式是決定傳染結(jié)局中的最主要因素】宿主的免疫力【免疫防御、免疫穩(wěn)定、免疫監(jiān)視】環(huán)境因素 毒力（致病力） 病原菌 侵入數(shù)量 侵入門徑 侵襲力：病原菌突破

26、宿主防線，并能于宿主體內(nèi)定居、繁殖、擴(kuò)散的能力，稱侵襲力。有三種能力：吸附和侵入能力；繁殖與擴(kuò)散能力；對(duì)宿主防御機(jī)能的抵抗能侵入途徑：呼吸道（結(jié)核桿菌）、消化道、皮膚傷口（破傷風(fēng)桿菌）、泌尿生殖道、其他途徑免疫：是機(jī)體識(shí)別和排除抗原性異物的一種保護(hù)性功能，在正常條件下，它對(duì)機(jī)體有利；在異常條件下，也可損害機(jī)體比較項(xiàng)目外毒素內(nèi)毒素產(chǎn)生菌革蘭氏陽性菌為主革蘭氏陰性菌化學(xué)成分蛋白質(zhì)脂多糖釋放時(shí)間活菌隨時(shí)分泌死菌溶解后釋放抗原性完全抗原，抗原性強(qiáng)不完全抗原，抗原性弱或無毒性強(qiáng)弱引起宿主發(fā)燒不明顯明顯制成類毒素能不能熱穩(wěn)定性60到100即破壞耐熱性強(qiáng)存在狀態(tài)細(xì)胞外，游離態(tài)結(jié)合在細(xì)胞壁上內(nèi)毒素的靈敏檢驗(yàn)法

27、【鱟試劑法】49非特異性免疫：凡在生物生長進(jìn)化過程中形成，屬于先天即有、相對(duì)穩(wěn)定、無特殊針對(duì)性的對(duì)付病原體的天然抵抗力。分為四部分：表皮和屏障結(jié)構(gòu)、吞噬細(xì)胞及其吞噬作用（細(xì)胞因素）、正常體液或組織中的抗菌物質(zhì)（體液因素）、炎癥反應(yīng)皮膚與粘膜：第一道防線 表皮和屏障結(jié)構(gòu) 屏障結(jié)構(gòu)：血腦屏障、血胎屏障 多形核白細(xì)胞：嗜中性粒細(xì)胞吞噬細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 主要功能：吞噬和殺菌抗原提呈免疫調(diào)節(jié)抗癌 50補(bǔ)體的本質(zhì)是一類酶原，能被任何抗原-抗體的復(fù)合物激活。補(bǔ)體系統(tǒng)包括：補(bǔ)體固有成分、補(bǔ)體調(diào)控分子、補(bǔ)體受體。激活途徑：經(jīng)典途徑、凝集素途徑、替換途徑。作用：趨化作用、免疫粘附作用、溶解或殺傷細(xì)胞、中和病毒干擾素：高等動(dòng)物細(xì)胞在病毒或dsRNA等誘生劑的刺激下，所產(chǎn)生的一種具有高活性、廣譜抗病毒等功能的特異性糖蛋白。用于病毒病、癌癥治療。51特異性免疫：主要功能是識(shí)別非自身和自身的抗原物質(zhì)，并對(duì)它產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從而保證機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定狀態(tài)。免疫器官：中樞免疫器官（一級(jí)淋巴器官）是免疫細(xì)胞發(fā)生、分化、成熟的部位。有骨髓（形成各類淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和血細(xì)胞，B細(xì)胞成熟部位），胸腺（T細(xì)胞分化和成熟的場所），法氏囊（鳥類特有）。外周免疫器官主要是脾臟、淋巴結(jié)免疫細(xì)胞：泛指一切具有免疫功能的細(xì)胞，包括各