基因工程試題庫(kù)

1、基因工程試題庫(kù)（一）一、選擇題（單選或多選） （每題2分，共計(jì)20分）1.下面哪一種特性不是密碼所具有的? ( ) (a)偏愛(ài)性 (b)簡(jiǎn)并性(c)重疊性 (d)連續(xù)性 2. 黏性末端連接法，不僅操作方便，而且( ) (a)產(chǎn)生新切點(diǎn) (b)易于回收外源片段(c)載體不易環(huán)化 (d)影響外源基因的表達(dá) 3. 用菌落雜交法篩選重組體時(shí)，( ) (a)需要外源基因的表達(dá) (b)不需要外源基因的表達(dá)(c)要根據(jù)克隆基因同探針的同源性 (d)上述說(shuō)法都正確 4. DNA在染色體的常染色質(zhì)區(qū)壓縮多少倍?( )(a)6倍 (b)10倍 (c)40倍 (d)240倍 (c)1000倍 10000倍 5. 對(duì)

2、于一個(gè)特定的起點(diǎn)，引發(fā)體的組成包括： ( ) (a)在起始位點(diǎn)與DnaG引發(fā)酶相互作用的一個(gè)寡聚酶 (b)一個(gè)防止DNA降解的單鏈結(jié)合蛋白 (c)DnaB解旋酶和附加的DnaC，DnaT，PriA等蛋白 (d)DnaB，單鏈結(jié)合蛋白，DnaC，DnaT，PriA蛋白和DnaG引發(fā)酶(e)DnaB解旋酶，DnaG引發(fā)酶和DNA聚合酶 6. 下面哪些是在反轉(zhuǎn)錄病毒中發(fā)現(xiàn)的基因?( )(a)gag (b)pol (c)env (d)OnC 7. 下列哪些基因以典型的串聯(lián)形式存在于真核生物基因組?( )(a)球蛋白基因 (b)組蛋白基因 (c)rRNA基因 (d)肌動(dòng)蛋白基因 8. 以下關(guān)于抗體類型轉(zhuǎn)

3、變的敘述哪些是正確的?( ) (a)每種重鏈具有不同的功能 (b)類型轉(zhuǎn)變的次序按染色體上重鏈排列順序進(jìn)行 (c)一旦一種類型轉(zhuǎn)換發(fā)生，其他的轉(zhuǎn)換將不再進(jìn)行(d)也可通過(guò)可變剪接改變重鏈 9. 下列哪些轉(zhuǎn)錄因子含有TBP?( )(a)TFB (b)TFA (c)SLl (d)TFD (e)TFB (f)UBFl 10剪接小體的組裝( ) (a)按有序的途徑一步步完成 (b)涉及snRNP與水溶性蛋白(即不是任何snRNP組分的蛋白) (c)不需要ATP (d)伴隨著多次snRNP的重組合(e)以上都正確 二、判斷題（每題1分，共計(jì)10分）1  一個(gè)帶有反向重復(fù)序列的雙鏈DNA經(jīng)變性后

4、，復(fù)性時(shí)其單鏈可形成發(fā)夾環(huán)。 ( )2切核酸酶不能在雙鏈DNA的gap和nick處切割DNA。 ( ) 3.用限制性內(nèi)切核酸酶Hae分別切割載體DNA和供體DNA后，可用E.coli DNA連接酶進(jìn)行連接。 ( )4 蛋白質(zhì)合成時(shí)，每加入一個(gè)氨基酸要水解4個(gè)高能磷酸鍵(4個(gè)密碼子)，所消耗的總能量比起DNA轉(zhuǎn)錄(每加入一個(gè)核苷酸用兩個(gè)高能磷酸鍵，6個(gè)密碼子)要少。( )5tRNAfMet的反密碼子是TAC。 ( )6. ColEl是惟一用作基因工程的自然質(zhì)粒載體，它具有四環(huán)素抗性標(biāo)記，因而很容易選擇。 ( ) 7. 不匹配的黏性末端可以通過(guò)部分填補(bǔ)后進(jìn)行連接。 ( )8. 用DNA探針同RNA

5、分子雜交在測(cè)定一已知基因在某一細(xì)胞中是否表達(dá)時(shí)是很有用的，但不能用于檢測(cè)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)、終止位點(diǎn)或內(nèi)含子的位置。 ( )9. NC(硝酸纖維素膜)和尼龍膜都可作為電轉(zhuǎn)移DNA支持物。 ( )10. 因?yàn)榻M蛋白H4在所有物種中都是一樣的，可以預(yù)期該蛋白基因在不同物種中也是一樣的。 ( )三、填空（每空2分，共計(jì)20分）1  如果用限制性內(nèi)切核酸酶切割雙鏈DNA產(chǎn)生3突出的黏性末端，則可以用進(jìn)行3末端標(biāo)記。如果用限制性內(nèi)切核酸酶切割DNA產(chǎn)生的是3突出的黏性末端，可以用進(jìn)行3末端標(biāo)記。 2  復(fù)制叉上DNA雙螺旋的解旋作用由-催化的，它利用來(lái)源于ATP水解產(chǎn)生的能量沿DNA鏈單向

6、移動(dòng)。 3.過(guò)-基因重組，游動(dòng)DNA序列和一些病毒可進(jìn)人或離開(kāi)一條目的染色體。4.DNA中兩種常見(jiàn)的自發(fā)突變是由于腺嘌呤、鳥(niǎo)嘌呤與脫氧核糖間的N-糖基連接斷裂而導(dǎo)致的-和使胞嘧啶變?yōu)槟蜞奏ざ鴮?dǎo)致的-。 5.在所有細(xì)胞中，都有一種特別的識(shí)別一密碼子AUG，它攜帶一種特別的氨基酸，即-，作為蛋白質(zhì)合成的起始氨基酸。 6. 真核生物有兩種DNA連接酶，連接酶I主要是參與-，而連接酶則是參與-。 四、簡(jiǎn)答題（每題3分，共計(jì)30分）1.N甲酰甲硫氨酸-tRNA的功能是什么? 2.請(qǐng)列舉剪接體組裝過(guò)程中的各個(gè)步驟，其中哪一個(gè)復(fù)合物是具有活性的剪接體?3.RNA聚合酶的內(nèi)部啟動(dòng)子位于起始位點(diǎn)下游50個(gè)核苷酸

7、的位置，它是如何被定位并正確起始轉(zhuǎn)錄的? 4.人線粒體DNA的哪些特征表明了其基因組的組織方式具有經(jīng)濟(jì)性? 5.TnlO元件只有在自己的轉(zhuǎn)座酶基因具有活性時(shí)發(fā)生轉(zhuǎn)座(與利用基因組中TnlO元件表達(dá)的轉(zhuǎn)座酶的情況正好相反)，這種偏愛(ài)的原因是什么? 6.葡萄糖是如何影響涉及糖代謝的操縱子(葡萄糖敏感型操縱子)的表達(dá)? 7.寫(xiě)出利用突變研究以下問(wèn)題的步驟： (1)氨基酸X的代謝途徑；(2)E.coli中細(xì)胞分裂的控制。 8. 對(duì)于所有具有催化能力的內(nèi)含子，金屬離子很重要。請(qǐng)舉例說(shuō)明金屬離子是如何作用的。9.大腸桿菌染色體的分子量大約是2.5x 109Da1)，核苷酸的平均分子量是330Da，兩個(gè)鄰近

8、核苷酸對(duì)之間的距離是0.34nm；雙螺旋每一轉(zhuǎn)的高度(即螺距)是3.4nm，請(qǐng)問(wèn)： (1)該分子有多長(zhǎng)?(2)該DNA有多少轉(zhuǎn)? 10.什么是順?lè)醋?用“互補(bǔ)”和“等位基因”說(shuō)明“基因”這個(gè)概念。 五、設(shè)計(jì)分析題（每題5分，共計(jì)10分）1. 在一個(gè)體外蛋白翻譯系統(tǒng)，poly(UC)可被翻譯成由Phe和Cys組成的蛋白，但其中 沒(méi)有Ala。1962年Chapeville用拉內(nèi)鎳(Raney nickel)處理攜帶Cys的tRNA，削弱了Cys與Ala的連接，當(dāng)這種被改變的氨酰tRNA用于體外系統(tǒng)中時(shí)，Ala能摻人蛋白中，解釋該結(jié)果的重要性。 2. 現(xiàn)在對(duì)人類基因組的主要研究工作是進(jìn)行基因組的序列

9、測(cè)定。然而，有人根據(jù)人類基因組是由重復(fù)序列組成為由，認(rèn)為反復(fù)對(duì)同一種DNA進(jìn)行測(cè)序是不明智的。你能否擬定兩份計(jì)劃，一份計(jì)劃應(yīng)保證僅僅單一序列DNA被測(cè)序，第二個(gè)計(jì)劃應(yīng)允許僅僅轉(zhuǎn)錄的單一DNA序列被測(cè)序。請(qǐng)簡(jiǎn)述你的兩份計(jì)劃。 六、問(wèn)答題（10分） 討論原核生物基因表達(dá)的聚合作用反應(yīng)定向的重要性。假如核糖體從3端到5端讀它的模板mRNA的話，那么將會(huì)發(fā)生什么情況? 基因工程試題庫(kù)（二）一、選擇題（單選或多選） （每題2分，共計(jì)20分） 1.Ds元件： ( ) (a)是自主轉(zhuǎn)座元件 (b)是染色體斷裂的位點(diǎn) (c)與Ac元件相似 (d)內(nèi)部有缺失 ， (e)沒(méi)有末端倒位重復(fù)(f)靠一種非復(fù)制機(jī)制轉(zhuǎn)座

10、 2.假基因是由于不均等交換后，其中一個(gè)拷貝失活導(dǎo)致的。選出下面關(guān)于此過(guò)程的正確敘述。( ) (a)失活點(diǎn)可通過(guò)比較沉默位點(diǎn)變化的數(shù)量和置換位點(diǎn)變化的數(shù)量來(lái)確定 (b)如果假基因是在基因復(fù)制后立即失活，則它在置換位點(diǎn)比沉默位點(diǎn)有更多的變化 (c)如果假基因是在基因復(fù)制后經(jīng)過(guò)相當(dāng)長(zhǎng)一段時(shí)間才失活，則它在置換位點(diǎn)與沉默位點(diǎn)有相同數(shù)量的變化 3. 哪些有關(guān)免疫球蛋白基因重排的敘述是正確的?( ) (a)所有物種中V基因的數(shù)目是一樣的 (b)J是恒定區(qū)的一部分 (c)各部分連接時(shí)，將產(chǎn)生缺失或重排(d)當(dāng)一個(gè)等位基因中發(fā)生有意義的重排時(shí)，另一個(gè)等位基因也發(fā)生重排 4.選出所有正確的選項(xiàng)：( ) (a)

11、基因必須經(jīng)過(guò)完全的甲基化才能表達(dá) (b)具有活性的DNA是非甲基化的 (c)隨著發(fā)育階段的改變，DNA的甲基化也要發(fā)生變化(d)在DNA復(fù)制過(guò)程中，通過(guò)識(shí)別半甲基化的酶，甲基化得以保存 5. 參與前體mRNA剪接的snRNP( ) (a)與一組Sm蛋白結(jié)合 (b)含有獨(dú)特的蛋白(即不存在任何其他snRNP的蛋白) (c)其RNA和蛋白組分都是其作用不可缺少的 (d)主要通過(guò)蛋白組分與前體mRNA結(jié)合(e)以上都正確 6. 下列關(guān)于核糖體肽酰轉(zhuǎn)移酶活性的敘述正確的是：( ) (a)肽酰轉(zhuǎn)移酶的活性存在于核糖體大亞基中(50S或60S) (b)它幫助將肽鏈的C末端從肽酰tRNA轉(zhuǎn)到A位點(diǎn)上氨酰tR

12、NA的N末端 (c)通過(guò)氨酰tRNA的脫乙酰作用，幫助氨酰tRNA的N末端從A位點(diǎn)移至P位點(diǎn)中肽酰tRNA 的C末端 (d)它水解GTP以促進(jìn)核糖體的轉(zhuǎn)位(e)它將肽酰tRNA去?；?7. 下面有關(guān)限制酶的敘述哪些是正確的?( ) (a)限制酶是外切酶而不是內(nèi)切酶 (b)限制酶在特異序列(識(shí)別位點(diǎn))對(duì)DNA進(jìn)行切割 (c)同一種限制酶切割DNA時(shí)留下的末端序列總是相同的 (d)一些限制酶在識(shí)別位點(diǎn)內(nèi)稍有不同的點(diǎn)切割雙鏈DNA，產(chǎn)生黏末端(e)一些限制酶在識(shí)別位點(diǎn)內(nèi)相同的位置切割雙鏈DNA，產(chǎn)生平末端 8. 下列哪一種酶作用時(shí)需要引物? ( ) (a)限制酶 (b)末端轉(zhuǎn)移酶 (c)反轉(zhuǎn)錄酶(d

13、)DNA連接酶 9.pBR322是一種改造型的質(zhì)粒，含有兩個(gè)抗性基因，其中四環(huán)素抗性基因來(lái)自：( )(a) ColEl (b)Ri質(zhì)粒 (c)pSCl01 (d)pUCl8 10. M13噬菌體基因組編碼10個(gè)基因，在它的成熟過(guò)程中起調(diào)節(jié)作用的蛋白是( )(a)gp2蛋白 (b)gp5蛋白 (c)gp7蛋白 (d)gp9蛋白 二、判斷題（每題1分，共計(jì)10分）1  Cot1/2與基因組大小相關(guān)。 ( )2 通過(guò)原位菌落雜交得到的陽(yáng)性克隆即是重組體，但不能判斷插入的外源基因是否進(jìn)行了表達(dá)。 ( )3.在染色體步移中，可通過(guò)DNA測(cè)序知道已到達(dá)所感興趣的基因。 ( )4PCR既能用于擴(kuò)增

14、任何天然存在的核苷酸序列，又能重新設(shè)計(jì)任何天然核苷酸序列的兩個(gè)末端。 因此，任意兩個(gè)天然存在的DNA序列都能快速有效的擴(kuò)增，并拼接在一起。( )5 以黏粒為載體的重組體雖然在平板上生長(zhǎng)的速度不同，但是轉(zhuǎn)化子中插入片段的擴(kuò)增量是相同的。 ( )6. 酚法和堿法分離質(zhì)粒DNA都要用溶菌酶破壁，但堿法用的溶菌酶的濃度要高。 ( )7. 任何一種質(zhì)粒都可以用氯霉素?cái)U(kuò)增的方法，增加它的拷貝數(shù)。 ( )8. 用外切酶作系列缺失突變時(shí)，可以從突出的3端開(kāi)始。 ( )9. 負(fù)責(zé)噬菌體DNA合成的酶是在裂解循環(huán)的晚期形成的。 ( )10. 一般性重組需要交換的雙方都有一長(zhǎng)段同源DNA序列，而位點(diǎn)專一重組僅需要短

15、而專一的核苷酸序列，某些情況下，只需要交換雙方中的一方具有該序列即可。 ( )三、填空（每空2分，共計(jì)20分）1反向轉(zhuǎn)錄酶(reversetranscriptase)是由kDa和kDa兩個(gè)亞單位組成的二聚體，作用時(shí)以RNA為模板合成DNA。 2質(zhì)?？截悢?shù)是指細(xì)胞中-。 3黏粒(cosmid)是質(zhì)粒噬菌體雜合載體，它的復(fù)制子來(lái)自-、COS位點(diǎn)序列來(lái)自-，最大的克隆片段達(dá)到-kb。 4在分離DNA時(shí)要使用金屬離子螯合劑，如EDTA和檸檬酸鈉等，其目的是-。5平末端連接法(blunt end ligation)的連接效率比黏性末端連接的效率低得多，所以通常在連接反應(yīng)體系中適量添加促進(jìn)大分子凝聚的凝聚

16、劑，以提高平末端DNA連接的效率。常用的凝聚劑是-。 6. 通過(guò)-，兩個(gè)單鏈的互補(bǔ)DNA分子一起形成個(gè)完全雙鏈螺旋,人們認(rèn)為這個(gè)反應(yīng)從一個(gè)慢的-步驟開(kāi)始。四、簡(jiǎn)答題（每題4分，共計(jì)32分）1.當(dāng)剪接的分支位點(diǎn)被移到內(nèi)含子內(nèi)的另一個(gè)位置，其活性將會(huì)消失。相反，正確位置附近隱藏的一個(gè)分支位點(diǎn)被激活。請(qǐng)作出解釋。 2.線粒體DNA的突變率與細(xì)胞核DNA突變率有什么不同?為什么? 3.在什么過(guò)程中會(huì)形成一個(gè)共整合體?它的結(jié)構(gòu)是什么? 4.什么是安慰誘導(dǎo)物? 5.在工業(yè)微生物菌種的選育中，人們喜歡用誘變的方法篩選解除了酶合成阻遏的突變株，而不要解除了酶活性反饋抑制的突變株。請(qǐng)解釋原因。 6.描述滾環(huán)復(fù)制

17、過(guò)程及其特征。 7.為什么DNA雙螺旋中維持特定的溝很重要? 8.為什么只有DNA適合作為遺傳物質(zhì)? 五、設(shè)計(jì)分析題（每題5分，共計(jì)10分）1某公司要招聘技術(shù)人員加入他們的抗病毒小組幫助設(shè)計(jì)新藥對(duì)抗艾滋病病毒感染。為了得到這份工作，要求應(yīng)聘者設(shè)計(jì)一個(gè)方案來(lái)阻止艾滋病病毒基因表達(dá)但不影響宿主基因的表達(dá)。你能設(shè)計(jì)嗎? 2.一種野生型Ecoli菌株的一種蛋白質(zhì)的108位為Val殘基，分離出三種突變體(A，B和C)發(fā)現(xiàn)它們?cè)谶@個(gè)位置分別是Gly,Glu和Leu。A和B的回復(fù)突變株中這個(gè)位置上的氨基酸分別是Trp和Iys，突變C沒(méi)有做進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)，A，B和C中哪兩個(gè)菌株的雜交將會(huì)由于108位密碼內(nèi)的交換

18、而產(chǎn)生野生型重組體? 六、問(wèn)答題（8分） 討論原核生物基因表達(dá)的聚合作用反應(yīng)定向的重要性。假如核糖體從3端到5端讀它的模板mRNA的話，那么將會(huì)發(fā)生什么情況? 基因工程試題庫(kù)（三）一、選擇題（單選或多選） （每題2分，共計(jì)20分）1.為了正確地構(gòu)建一個(gè)真核基因組的物理圖譜：( )。 (a)必須有可能清晰地分離各個(gè)染色體(通過(guò)脈沖場(chǎng)凝膠電泳) (b)必須從單倍體細(xì)胞(配子)中分離DNA，這樣避免了由二倍體細(xì)胞中同源染色體的存在而產(chǎn)生的干擾信息 (c)必須進(jìn)行單個(gè)染色體分析，這只能在細(xì)胞分裂后期進(jìn)行 (d)必須找到對(duì)于每個(gè)染色體只切割一次的限制酶 (e)必須首先分離核DNA和細(xì)胞器DNA，然后對(duì)它

19、們分別作圖 2. 下列酶中，除( )外都具有磷酸酶的活性 (a)核酸外切酶 (b)外切酶(c)單核苷酸激酶 (d)堿性磷酸酶 3. 同一種質(zhì)粒DNA，以三種不同的形式存在，電泳時(shí)，它們的遷移速率是：( ) (a)OC DNA>SC DNP>LDNA (b)SC DNA>L DNA>OC DNA(c)L DNA>OC DNA>SC DNA (d)SC DNA>OC DNA>L DNA 4. 關(guān)于M13的IG區(qū)，下列說(shuō)法中哪一項(xiàng)不妥當(dāng)?( ) (a)具有正負(fù)鏈的復(fù)制起點(diǎn) (b)具有噬菌體DNA被包裝的信號(hào) (c)具有150個(gè)堿基的AT富集區(qū)(d)具有

20、八個(gè)回文序列，可形成五個(gè)發(fā)夾環(huán) 5. 用堿法分離質(zhì)粒DNA時(shí)，染色體DNA之所以可以被除去，是因?yàn)椋? ) (a)染色體DNA斷成了碎片 (b)染色體DNA分子量大，而不能釋放(c)染色體變性后來(lái)不及復(fù)性 (d)染色體未同蛋白質(zhì)分開(kāi)而沉淀 6. 在DNA的酶切反應(yīng)系統(tǒng)中，通常：( ) (a)用SSC緩沖液 (b)加入Mg2+作輔助因子 (c)加入BSA等保護(hù)劑(d)上述說(shuō)法中，有兩項(xiàng)是正確的 7. 在利用lacZ失活的顯色反應(yīng)篩選法中，IPTG的作用是( ) (a)誘導(dǎo)宿主的肽的合成 (b)誘導(dǎo)宿主的肽的合成 (c)作為酶的作用底物(d)作為顯色反應(yīng)的指示劑 8. DNA在30nm纖絲中壓縮多

21、少倍?( )(a) 6倍 (b)10倍 (c)40倍 (d)240倍 (e)1000倍 10000倍9. 在I型剪接的過(guò)程中，( ) (a)游離的G被共價(jià)加到內(nèi)含子的5，端 (b)GTP被水解 (c)內(nèi)含子形成套馬索結(jié)構(gòu) (d)在第一步，G的結(jié)合位點(diǎn)被外來(lái)的G占據(jù)，而在第二步時(shí)，被3，剪接位點(diǎn)的G所取代 (e)被切除的內(nèi)含子繼續(xù)發(fā)生反應(yīng)，包括兩個(gè)環(huán)化反應(yīng) 10. DNA多聚體的形成要求有模板和一個(gè)自由3，-OH端的存在。這個(gè)末端的形成是靠： ( ) (a)在起點(diǎn)或?qū)槠纹鹗嘉稽c(diǎn)(3，-GTC)上的一個(gè)RNA引發(fā)體的合成 (b)隨著鏈替換切開(kāi)雙鏈DNA的一條鏈 (c)自由的脫氧核糖核苷酸和模板

22、一起隨機(jī)按Watson-Crick原則進(jìn)行配對(duì) (d)靠在3，末端形成環(huán)(自我引發(fā))(e)一種末端核苷酸結(jié)合蛋白結(jié)合到模板的3，末端 二、判斷題（每題1分，共計(jì)10分）1大多數(shù)看家基因編碼低豐度的mRNA。 ( )2TnlO高水平表達(dá)轉(zhuǎn)座酶。 ( )3當(dāng)一個(gè)噬菌體侵染一個(gè)合適的大腸桿菌寄主細(xì)胞時(shí)，通常是裂解性侵染，釋放出幾百個(gè)子代噬菌體；更少見(jiàn)的是，它會(huì)整合到寄主染色體中，產(chǎn)生帶有原噬菌體染色體的溶原菌。 ( )4噬菌體整合到大腸桿菌基因組上是由一個(gè)位點(diǎn)專一的拓?fù)洚悩?gòu)酶(整合酶)催化的，它可以識(shí)別在兩條染色體上短的特異DNA序列。 ( )5.DNA的53合成意味著當(dāng)在裸露3'-OH的基

23、團(tuán)中添加dNTP時(shí)，除去無(wú)機(jī)焦磷酸DNA鏈就會(huì)伸長(zhǎng)。 ( )6.不匹配的黏性末端是不能通過(guò)黏性末端連接的。 ( )7. 核酸雜交的原理是根據(jù)DNA分子間互補(bǔ)。 ( )8. 用寡聚DNA進(jìn)行高度嚴(yán)緊的雜交可用于胎兒遺傳病的診斷，可檢測(cè)到因單個(gè)核苷酸變化而造成的基因突變。 ( ) 9. 低豐度的mRNA不僅拷貝數(shù)少，而且種類也少。 ( )10.插入到質(zhì)粒DNA中的EB可以用正丁醇抽提除去。 ( )三、填空（每空2分，共計(jì)20分）1偶然情況下，在同一基因兩個(gè)稍微不同拷貝(等位基因)間發(fā)生重組的過(guò)程中，一個(gè)等位基因經(jīng)過(guò)-過(guò)程會(huì)被另一等位基因代替。 2據(jù)估計(jì)，單倍體人基因組包括50000個(gè)基因，如果每個(gè)

24、世代每個(gè)基因的突變率為5×10-5， 那么，每個(gè)個(gè)體中存在-剛產(chǎn)生的突變。 3.蛋白質(zhì)合成的起始過(guò)程很復(fù)雜，包括一系列被催化的步驟。 4-年，美國(guó)斯坦福大學(xué)等在-工發(fā)表了題為：“將新的遺傳信息插入SV40病毒DNA的生物化學(xué)方法：含有噬菌體基因和Ecoli半乳糖操縱子的環(huán)狀SV40 DNA”的論文，標(biāo)志著基因工程技術(shù)的誕生。這一工作具有劃時(shí)代的意義，但是他們并沒(méi)有-。 5完全的回文序列具有兩個(gè)基本的特點(diǎn)，就是：(1)一- (2)-。6. 質(zhì)粒的消失同染色體基因的突變是不同的，前者不能恢復(fù)，后者可以通過(guò)-恢復(fù)該基因的性狀。四、簡(jiǎn)答題（每題3分，共計(jì)30分）1.你打算擴(kuò)增下圖所示的兩段序

25、列之間的DNA，請(qǐng)從所列出的引物中選出合適的一對(duì)。 5-GACCTGTGGAAGCCATACGGGATTG-3 3-CTGGACACCTTCGGTATGCCCTAAC-5 引物1 引物2 5'-GACCTGTGGAAGC 5-CATACGGGATTG 5-CTGGACACCTTCG 5-GTATGCCCTAAC 5'-CGAAGGTGTCCAG 5-GTTAGGGCATAC 5'-GCTTCCACAGGTC 5-CAATCCCGTATG 2.可變剪接如何控制果蠅中的性別分化? 3.哪些轉(zhuǎn)錄因子含有TBP?為什么它們被稱為定位因子?請(qǐng)用一個(gè)模型解釋為什么所有三種RNA聚合

26、酶都能與TBP發(fā)生作用? 4.RNA聚合酶起始轉(zhuǎn)錄后，起始復(fù)合物必須轉(zhuǎn)變?yōu)檠由鞆?fù)合物。因此聚合酶復(fù)合物必須解旋一小段DNA。在線性DNA上，解旋需要ATP，TFE，TFH和解旋酶活性。然而，超螺旋DNA的轉(zhuǎn)錄并不需要這些因子。請(qǐng)解釋這一現(xiàn)象。 5. 哪些細(xì)胞器帶有自身基因組?為什么這些細(xì)胞器帶有自身的基因組? 6.當(dāng)(1)DNA在兩個(gè)定向重復(fù)之間(2)DNA在兩個(gè)反向重復(fù)之間發(fā)生重組的效應(yīng)各是什么?7.列舉兩種受調(diào)控蛋白控制的、與氨基酸的生物合成有關(guān)的操縱子。 8. 為什么一個(gè)基因座的正向突變發(fā)生的頻率要比回復(fù)突變高? 9. 解釋在DNA復(fù)制過(guò)程中，后隨鏈?zhǔn)窃鯓雍铣傻摹?10.請(qǐng)問(wèn)哪些條件可促

27、使DNA復(fù)性(退火)? 五、設(shè)計(jì)分析題（每題5分，共計(jì)10分）1.一種野生型Ecoli菌株的一種蛋白質(zhì)的108位為Val殘基，分離出三種突變體(A，B和C)發(fā)現(xiàn)它們?cè)谶@個(gè)位置分別是Gly,Glu和Leu。A和B的回復(fù)突變株中這個(gè)位置上的氨基酸分別是Trp和Iys，突變C沒(méi)有做進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)，解釋上述結(jié)果并推測(cè)六種菌株中該位置上的密碼。 2. 某公司要招聘技術(shù)人員加入他們的抗病毒小組幫助設(shè)計(jì)新藥對(duì)抗艾滋病病毒感染。為了得到這份工作，要求應(yīng)聘者設(shè)計(jì)一個(gè)方案來(lái)阻止艾滋病病毒基因表達(dá)但不影響宿主基因的表達(dá)。你能設(shè)計(jì)嗎? 六、問(wèn)答題（10分）采用什么措施保證DNA化學(xué)合成的方向性和專一性？ 基因工程試題庫(kù)

28、（四）一、選擇題（單選或多選） （每題2分，共計(jì)20分）1.DNA在10nm纖絲中壓縮多少倍(長(zhǎng)度)?( ) (a) 6倍 (b)10倍 (c)40倍 (d)240倍 (e)1000倍 10000倍 2. I型剪接需要( ) (a)單價(jià)陽(yáng)離子 (b)二價(jià)陽(yáng)離子 (c)四價(jià)陽(yáng)離子 (d)U1snRNP (e)一個(gè)腺苷酸分支點(diǎn)(f)一個(gè)鳥(niǎo)嘌呤核苷酸作為輔助因子 3. 哺乳動(dòng)物線粒體和植物葉綠體基因組是靠D環(huán)復(fù)制的。下面哪一種敘述準(zhǔn)確地描述 了這個(gè)過(guò)程?( ) (a)兩條鏈都是從oriD開(kāi)始復(fù)制的，這是一個(gè)獨(dú)特的二級(jí)結(jié)構(gòu)，由DNA聚合酶復(fù) 合體識(shí)別 (b)兩條鏈的復(fù)制都是從兩個(gè)獨(dú)立的起點(diǎn)同時(shí)起始的

29、(c)兩條鏈的復(fù)制都是從兩個(gè)獨(dú)立的起點(diǎn)先后起始的(d)復(fù)制的起始是由一條或兩條(鏈)替代環(huán)促使的(e) ter基因座延遲一條鏈的復(fù)制完成直到兩個(gè)復(fù)制過(guò)程同步 4. 色氨酸操縱子的調(diào)控作用是受兩個(gè)相互獨(dú)立的系統(tǒng)控制的，其中一個(gè)需要前導(dǎo)肽的翻譯，下面哪一個(gè)調(diào)控這個(gè)系統(tǒng)?( ) (a)色氨酸 (b)色氨酰-tRNATrp (c)色氨酰-tRNA (d)cAMP(e)以上都不是 5. 玉米控制因子： ( ) (a)在結(jié)構(gòu)和功能上與細(xì)菌轉(zhuǎn)座子是相似的 (b)可能引起染色體結(jié)構(gòu)的許多變化 (c)可能引起單個(gè)玉米顆粒的表型發(fā)生許多變化 (d)在植物發(fā)育期間的不同時(shí)間都有活性 6. 以下關(guān)于假基因的陳述哪些是

30、正確的?( ) (a)它們含有終止子 (b)它們不被轉(zhuǎn)錄 (c)它們不被翻譯 (d)它們可能因上述任一種原因而失活 (e)它們會(huì)由于缺失或其他機(jī)理最終從基因組中消失(f)它們能進(jìn)化為具有不同功能的新基因 7. 位于ELC的VSG基因有一個(gè)不尋常的結(jié)構(gòu)，包括：( ) (a)不含限制性內(nèi)切酶切割位點(diǎn)的5無(wú)義區(qū) (b)由一個(gè)簡(jiǎn)單序列重復(fù)多次組成的3無(wú)義區(qū) (c) 以上都正確(d)以上都不正確 8. 以下關(guān)于亮氨酸拉鏈蛋白的敘述哪一項(xiàng)是正確的?( ) (a)它們通過(guò)保守的亮氨酸殘基與DNA結(jié)合 (b)它們與HLH蛋白相似之處是：它們都具有相鄰的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和二聚化的結(jié)構(gòu)域 (c)Jun蛋白可以形成

31、同源二聚體而Fos蛋白不可以 (d)FosJun復(fù)合物與JunJun復(fù)合物結(jié)合的DNA序列不同(e)FosJun與DNA的結(jié)合比JunJun牢固 9. 選出所有有關(guān)snRNA的正確敘述：( ) (a)snRNA只位于細(xì)胞核中 (b)大多數(shù)snRNA是高豐度的 (c)snRNA在進(jìn)化的過(guò)程中是高度保守的 (d)某些snRNA可以與內(nèi)含子中的保守序列進(jìn)行堿基配對(duì)(e)以上都正確 10. 核糖體的E位點(diǎn)是：( ) (a)真核mRNA加工位點(diǎn) (b)tRNA離開(kāi)原核生物核糖體的位點(diǎn) (c)核糖體中受EcoRI限制的位點(diǎn)(d)電化學(xué)電勢(shì)驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的位點(diǎn) 二、判斷題（每題1分，共計(jì)10分）1如果兩個(gè)不同的質(zhì)

32、?？梢苑€(wěn)定地共存于同一個(gè)細(xì)胞中，這兩種質(zhì)粒則屬于同一個(gè)不親和群。 ( )2 Bal31核酸酶(Bal31nuclease)是Ca2+依賴性的，在反應(yīng)混合物中加入EDTA便可抑制它的活性。 ( )3 限制性圖譜與限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)圖譜的最顯著的區(qū)別在于前者是一個(gè)物理圖譜而后者是一個(gè)連鎖圖。 ( )4 核糖體小亞基最基本的功能是連接mRNA與tRNA,大亞基則催化肽鍵的形成。 ( )5密碼子AUG專門(mén)起mRNA分子編碼區(qū)的終止作用。 ( )6. 當(dāng)DNA兩條鏈的復(fù)制同時(shí)發(fā)生時(shí)，它是由一個(gè)酶復(fù)合物： DNA聚合酶負(fù)責(zé)的，真核生物的復(fù)制利用3個(gè)獨(dú)立作用的DNA聚合酶，Pol的一個(gè)拷貝(為

33、了起始)和Pol的兩個(gè)拷貝(DNA多聚體化，當(dāng)MFI將RNA引發(fā)體移去之后填人)。 ( )7. 交叉鏈互換包括交叉鏈和未交叉鏈，至少其中一條鏈的磷酸骨架斷裂才可能使這個(gè)過(guò)程逆轉(zhuǎn)。 ( )8.溶源化是一個(gè)雙鏈DNA病毒的生活周期中的一種狀態(tài)，是當(dāng)病毒的基因組整合進(jìn)一個(gè)宿主細(xì)胞的基因組時(shí)形成的狀態(tài)。 ( )9. CsCl-EB密度梯度離心法純化SC DNA原理是根據(jù)EB可以較多地插入到SC DNA中，因而沉降速度較快。 ( )10. 在DNA貯存液中加一滴三氯甲烷，可防止真菌的污染。 ( )三、填空（每空1分，共計(jì)20分）1 同其他水解蛋白酶相比，蛋白水解酶K具有兩個(gè)顯著的優(yōu)點(diǎn)：(1)-(2)-。

34、2 DNA重組連接的方法大致分為四種：(1)-(2)-(3)（4）-。 3核酸雜交探針可分為兩大類： DNA探針和RNA探針。其中DNA探針又分為一 探針和探針。 4寫(xiě)出兩種合成后不被切割或拼接的RNA：-和-。 5DNA后隨鏈合成的起始要一段短的-，它是由-以核糖核苷酸為底物合成的。6. 一種主要的DNA修復(fù)途徑稱-，包括一系列-酶，它們都能識(shí)別并切去DNA上不正常堿基。7. 反向轉(zhuǎn)錄酶除具有以DNA和RNA為模板合成DNA的5-3合成酶的活性外，還具有4種酶的活性：(1)-；(2)-；(3)-；(4)-。8. 在分離質(zhì)粒DNA的菌體培養(yǎng)過(guò)程中，加入氯霉素有兩個(gè)好處：(1)- (2)-。四、

35、     簡(jiǎn)答題（每題3分，共計(jì)30分）1.假定你從黏質(zhì)沙雷氏菌中克隆了一個(gè)基因，并推測(cè)可能是依賴于鋅的金屬蛋白酶，因?yàn)樗袃蓚€(gè)組氨酸和一個(gè)谷氨酸與鋅形成鋅指結(jié)構(gòu)，請(qǐng)你設(shè)計(jì)個(gè)方案，改變其中一個(gè)組氨酸看看是否改變蛋白酶的活性？ 2.據(jù)說(shuō)前體mRNA的剪接是從型剪接進(jìn)化而來(lái)的。有什么證據(jù)可以證明這一點(diǎn)?是如何發(fā)生的?這種進(jìn)化為什么對(duì)生物體有利? 3.用負(fù)超螺旋環(huán)狀DNA樣品進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)。但是預(yù)實(shí)驗(yàn)中并沒(méi)有獲得滿意的結(jié)果，試討論改進(jìn)實(shí)驗(yàn)的可行方法。 4. RNA聚合酶特異性地轉(zhuǎn)最小分子RNA，但為什么不轉(zhuǎn)錄5.8SrRNA?5.重復(fù)序列并不是在選擇壓力下

36、存在，因此能快速積累突變。這些特性表明重復(fù)序列相互間應(yīng)存在很大的不同，但事實(shí)并不是這樣的。請(qǐng)舉例說(shuō)明。 6.列出一個(gè)轉(zhuǎn)座子插入到一個(gè)新位點(diǎn)所要求的步驟。 7. 原核生物的核糖體RNA和tRNA相對(duì)較穩(wěn)定并且半衰期長(zhǎng)，而mRNA卻不穩(wěn)定，很快被降解，請(qǐng)解釋這種穩(wěn)定性的差異。 8. 一個(gè)基因間阻遏物突變?cè)鯓幼瓒袅艘粋€(gè)錯(cuò)義突變? 9. 描述Matthew和Franklin所做的證明DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)。 10. 真核基因組的哪些參數(shù)影響Cot1/2值? 五、設(shè)計(jì)分析題（每題5分，共計(jì)10分）1.蜜二糖是lac操縱子的弱誘導(dǎo)物，它通常在自己的透性酶作用下進(jìn)入細(xì)胞。但如果細(xì)胞在42下生長(zhǎng)，透性酶失去活

37、性，則蜜二糖只有在lacY透性酶存在的情況下才能進(jìn)入細(xì)胞。這樣，42下lacY-和lacP-的突變株不能在以蜜二糖為惟一碳源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。如何通過(guò)這種特性分離lac操縱子的組成型突變? 2. 許多自發(fā)突變涉及DNA中單堿基的置換，而且當(dāng)它們發(fā)生在編碼序列之內(nèi)時(shí)可能引起多肽中單個(gè)氨基酸的置換。當(dāng)Try被其他氨基酸替代時(shí)可能是由于哪些單堿基的置換?六、問(wèn)答題（10分）說(shuō)明溴化乙啶-氯化銫密度梯度離心純化DNA的原理？ 基因工程試題庫(kù)（五）一、選擇題（單選或多選） （每題2分，共計(jì)20分）1.bHLH蛋白( ) (a)在環(huán)中含有保守的堿性氨基酸 (b)不能形成同源二聚體 (c)非誘導(dǎo)表達(dá) (d)通

38、過(guò)它們堿性區(qū)與HLH相互作用 (e)只有與HLH形成異源二聚體后才與DNA結(jié)合(f)以上都不是 2. 轉(zhuǎn)酯反應(yīng)：( ) (a)不需要ATP (b)拆開(kāi)一個(gè)化學(xué)鍵后又形成另一個(gè)化學(xué)鍵 (c)涉及對(duì)糖磷骨架OH基團(tuán)的親核攻擊(d)以上都正確 3. 真核起始因子eIF-3的作用是：( ) (a)幫助形成亞基起始復(fù)合物(eIF-3,GTP,Met-tRNA,40S) (b)幫助亞基起始復(fù)合物(三元復(fù)合物，40S)與mRNA5'端的結(jié)合 (c)若與40S亞基結(jié)合，防止40S與60S亞基的結(jié)合 (d)與mRNA5'端帽子結(jié)構(gòu)相結(jié)合以解開(kāi)二級(jí)結(jié)構(gòu)(e)激活核糖體GTP酶，使亞基結(jié)合可在GTP

39、水解時(shí)結(jié)合，同時(shí)釋放eIF-2 4. 限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)是：( ) (a)用于遺傳的“指紋結(jié)構(gòu)”模式分析的技術(shù) (b)二倍體細(xì)胞中的兩個(gè)等位基因限制性圖譜的差別 (c)物種中的兩個(gè)個(gè)體限制性圖譜間的差別 (d)兩種物種個(gè)體間的限制性圖譜差別(e)兩種酶在單個(gè)染色體上限制性圖譜的差別 5. 從Ecoli中分離的連接酶： ( ) (a)需要ATP作輔助因子 (b)需要NAD作輔助因子 (c)可以進(jìn)行平末端和黏性末端連接(d)作用時(shí)不需要模板 6. ColEl是惟一用作基因工程載體的自然質(zhì)粒，這種質(zhì)粒： ( ) (a)是松弛復(fù)制型 (b)具有四環(huán)素抗性(c)能被氯霉素?cái)U(kuò)增 (d)能產(chǎn)生腸桿菌素 7. Mu噬菌體也是一種轉(zhuǎn)座元件，這種轉(zhuǎn)座元件( ) (a)可引起寄主的突變 (b)可用于細(xì)胞內(nèi)的基因工程 (c)具有轉(zhuǎn)座酶基因(d)以上說(shuō)法都正確 8. 在分離mRNA的溶液中，Mg2+離子的濃度不能低于05mmolL，因?yàn)榈土耍? ) (a)mRNA會(huì)降解 (b)mRN