生物分離初級分離

1、初級分離初級分離生物分離的一般流程生物分離的一般流程原料液原料液細(xì)胞分離細(xì)胞分離( (離心，過濾離心，過濾) )細(xì)胞胞內(nèi)產(chǎn)物細(xì)胞胞內(nèi)產(chǎn)物細(xì)胞破碎細(xì)胞破碎碎片分離碎片分離清液胞外產(chǎn)物清液胞外產(chǎn)物粗分離粗分離( (鹽析、萃取、超過濾等鹽析、萃取、超過濾等) )純化純化( (層析、電泳層析、電泳) )脫鹽脫鹽( (凝膠過濾、超過濾凝膠過濾、超過濾) )濃縮濃縮( (超過濾超過濾) )精制精制( (結(jié)晶、干燥結(jié)晶、干燥) )包含體包含體溶解溶解( (加鹽酸胍、脲加鹽酸胍、脲) )復(fù)性復(fù)性v初級分離：初級分離：是指從菌體發(fā)酵液、細(xì)胞培養(yǎng)液、胞內(nèi)提取液（細(xì)胞破碎液）及其他各種生物原料中，初步提取目標(biāo)產(chǎn)物，

2、使目標(biāo)產(chǎn)物得到濃縮和初步分離的下游加工過程。v初級分離的對象具有體積大、雜質(zhì)含量高等體積大、雜質(zhì)含量高等特點(diǎn)，因此初級分離技術(shù)應(yīng)具有操作成本低、適合大操作成本低、適合大規(guī)模生產(chǎn)規(guī)模生產(chǎn)的優(yōu)勢。v初級分離方法：初級分離方法：固液分離（離心、過濾）、膜固液分離（離心、過濾）、膜分離、萃取、吸附、沉淀分級和泡沫分離等。分離、萃取、吸附、沉淀分級和泡沫分離等。 雜質(zhì)種類雜質(zhì)種類a.a.高價(jià)無機(jī)離子（高價(jià)無機(jī)離子（CaCa2+2+、MgMg2+2+、FeFe2+2+）b.b.雜蛋白雜蛋白c.c.多糖多糖d.d.色素色素高價(jià)無機(jī)離子的去除方法高價(jià)無機(jī)離子的去除方法1.1.CaCa2+ 2+ 草酸、草酸鈉草

3、酸、草酸鈉形成草酸鈣沉淀形成草酸鈣沉淀2.2.MgMg2+2+三聚磷酸鈉三聚磷酸鈉形成三聚磷酸鈉鎂可溶性絡(luò)合物形成三聚磷酸鈉鎂可溶性絡(luò)合物3.3.FeFe2+ 2+ 黃血鹽黃血鹽普魯士蘭沉淀普魯士蘭沉淀雜蛋白的去除方法雜蛋白的去除方法等電點(diǎn)沉淀等電點(diǎn)沉淀：蛋白質(zhì)一般以膠體狀態(tài)存在于發(fā)酵液中。蛋白質(zhì)一般以膠體狀態(tài)存在于發(fā)酵液中。l在酸性溶液中帶正電荷；在酸性溶液中帶正電荷；l在堿性溶液中帶負(fù)電荷。在堿性溶液中帶負(fù)電荷。在某一在某一pHpH下，凈電荷為零，溶解度最小，稱為等電點(diǎn)。下，凈電荷為零，溶解度最小，稱為等電點(diǎn)。一般采用等電點(diǎn)沉淀、酸堿沉淀一般采用等電點(diǎn)沉淀、酸堿沉淀l在酸性溶液中，蛋白質(zhì)與

4、一些陰離子在酸性溶液中，蛋白質(zhì)與一些陰離子，如三氯乙，如三氯乙酸鹽、水楊酸鹽、鎢酸鹽、苦味酸鹽、鞣酸鹽、過酸鹽、水楊酸鹽、鎢酸鹽、苦味酸鹽、鞣酸鹽、過氯酸鹽等形成沉淀；氯酸鹽等形成沉淀；l在堿性溶液中，蛋白質(zhì)與一些陽離子，在堿性溶液中，蛋白質(zhì)與一些陽離子，如如AgAg+ +、CuCu2+2+、ZnZn2+2+、FeFe3+3+和和PbPb2+2+等形成沉淀。等形成沉淀。酸堿沉淀：使蛋白質(zhì)與鹽或離子形成沉淀。酸堿沉淀：使蛋白質(zhì)與鹽或離子形成沉淀。 酶解法酶解法可將混合液中的不溶性多糖物質(zhì)酶解，使其轉(zhuǎn)化為溶解度較大的單糖，從而改變流體的流動(dòng)特性，提高過濾速率。 多糖的去除多糖的去除有色物質(zhì)的去除有

5、色物質(zhì)的去除 色素物質(zhì)的去除，一般以使用離子交換樹脂、離子交換纖維、活性炭等材料的吸附法來脫色最為普遍。一般發(fā)酵液的脫色往往是在過濾除去菌一般發(fā)酵液的脫色往往是在過濾除去菌體后進(jìn)行體后進(jìn)行。 一、沉淀分級一、沉淀分級v沉淀是指由于物理環(huán)境的變化，使溶液中的溶質(zhì)由液相變成固相析出固相析出的過程。v采用沉淀的手段，主要是為了通過沉淀達(dá)到濃縮濃縮的目的，或者通過沉淀，固液分相后，除去留在液相或沉積在固體中的非必要成分；其次，沉淀可以將已純化的產(chǎn)品由液態(tài)變成固態(tài)，加以保存或進(jìn)一步處理。v沉淀方法用于分離純化是有選擇性的，即有選擇地沉淀雜質(zhì)沉淀雜質(zhì)或有選擇地沉淀所需成分沉淀所需成分。沉淀法沉淀法 沉淀法

6、沉淀法就是采用適當(dāng)?shù)拇胧└淖內(nèi)芤旱睦砘瘏?shù)，控制溶液的各種成分的溶解度，從而將溶液中的欲提取的成分和其它成分分開的技術(shù)。 沉淀法是最古老的分離和純化生物物質(zhì)的方法，但目前仍廣泛應(yīng)用在工業(yè)上和實(shí)驗(yàn)室中。與結(jié)晶聯(lián)系與結(jié)晶聯(lián)系 在本質(zhì)上都是新相析出的過程，主要是物理變化，當(dāng)然也存在化學(xué)反應(yīng)的沉淀或結(jié)晶。區(qū)別區(qū)別 結(jié)晶為同類分子或離子以有規(guī)則排列形式析出，沉淀為同類分子或離子以無規(guī)排列形式析出。 沉淀操作常在發(fā)酵液經(jīng)過過濾和離心過濾和離心（除去不溶性雜質(zhì)及細(xì)胞碎片）以后進(jìn)行，得到的沉析物可直接干燥制得成品或經(jīng)進(jìn)一步提純，如透析、超濾、層析或結(jié)晶制得高純度生化產(chǎn)品。 操作方式可分連續(xù)法連續(xù)法或間歇法間歇

7、法兩種，規(guī)模較小時(shí)，常采用間歇法。不管哪一種方式操作步驟通常按三步三步進(jìn)行：操作步驟操作步驟 首先加入沉淀劑;沉淀劑的陳化，促進(jìn)粒子生長；離心或過濾，收集沉淀物。加沉淀劑的方式和陳化條件對產(chǎn)物的純度、收率和沉淀物的形狀都有很大影響。沉淀法的分類沉淀法的分類v根據(jù)所加入的沉淀劑的不同，沉淀法可以分為：v（1）鹽析法；v（2）等電點(diǎn)沉淀法；v（3 3）有機(jī)溶劑沉淀法；）有機(jī)溶劑沉淀法；v（4）非離子型聚合物沉淀法；v（5）聚電解質(zhì)沉淀法；v（6）高價(jià)金屬離子沉淀法等。 除第（3）種有機(jī)溶劑沉淀法也能適用于抗生抗生素素等小分子外，其他各種方法只適用蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)等大分子。蛋白質(zhì)的表面特性蛋白質(zhì)的表面特

8、性v蛋白質(zhì)的溶解行為是一個(gè)獨(dú)特的性質(zhì)，由其組成、構(gòu)象以及分子周圍的環(huán)境所決定。v一般而言，小分子蛋白質(zhì)比大分子蛋白質(zhì)更易溶解。v蛋白質(zhì)在自然環(huán)境中通常是可溶的，所以其大部分是親水的，但其內(nèi)部大部分是疏水的。v蛋白質(zhì)是兩性高分子兩性高分子電解質(zhì)，主要由20 20 種氨種氨基酸基酸組成。在水溶液中，多肽鏈中的疏水性氨疏水性氨基酸殘基基酸殘基具有向內(nèi)部折疊內(nèi)部折疊的趨勢，使親水性氨基酸殘基基本分布在蛋白質(zhì)立體結(jié)構(gòu)的外表面。一般仍有部分疏水性氨基酸殘基暴露在外表面，形成疏水區(qū)。疏水性氨基酸含量高的蛋白質(zhì)的疏水區(qū)大，疏水性強(qiáng)。因此，蛋白質(zhì)表面由不均勻分布的荷電基團(tuán)形成荷電區(qū)、親水區(qū)和疏荷電區(qū)、親水區(qū)和疏

9、水區(qū)構(gòu)成水區(qū)構(gòu)成。防止蛋白質(zhì)凝聚沉淀的屏障防止蛋白質(zhì)凝聚沉淀的屏障v蛋白質(zhì)周圍的水化層可以使蛋白質(zhì)形成穩(wěn)定的膠體溶液。v蛋白質(zhì)分子間靜電排斥作用。（存在雙電層）v因此，可通過降低蛋白質(zhì)周圍的水化層和雙電層厚度（電位）降低蛋白質(zhì)溶液的穩(wěn)定性，實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的沉淀。蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定性蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定性v蛋白質(zhì)可以看作是一個(gè)表面分布有正、負(fù)電荷的球體，這種正、負(fù)電荷是由氨基和羧基的離子化形成的，因此，蛋白質(zhì)的沉淀，實(shí)際上與膠體顆粒的凝聚和絮凝現(xiàn)象相似。靜電斥力吸引力蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)/ /膠體顆粒的凝聚和絮凝現(xiàn)象相似膠體顆粒的凝聚和絮凝現(xiàn)象相似 蛋白質(zhì)粒子在水溶液中是帶電的，帶電的原因主要是吸附溶液中

10、的離子或自身基團(tuán)的電離。因溶液是電中性的，水中應(yīng)有等當(dāng)量的反離子存在。蛋白質(zhì)表面的電荷與溶液中反離子的電荷構(gòu)成雙電層。其他沉淀法其他沉淀法金屬沉淀法金屬沉淀法聚電解質(zhì)沉淀法聚電解質(zhì)沉淀法非離子型聚合物沉淀法非離子型聚合物沉淀法蛋白質(zhì)沉淀方法蛋白質(zhì)沉淀方法有機(jī)溶劑鹽析法有機(jī)溶劑鹽析法等電點(diǎn)沉淀法等電點(diǎn)沉淀法中性鹽鹽析法中性鹽鹽析法1、用鹽析法分離蛋白質(zhì)的二種方法、用鹽析法分離蛋白質(zhì)的二種方法在一定的 pH值及溫度條件下，改變鹽的濃度（即離子強(qiáng)度）達(dá)到沉淀的目的，稱為“s”分級鹽析法。（Ks鹽析：固定pH, 溫度，改變鹽濃度）在一定的離子強(qiáng)度下，改變?nèi)芤旱膒H值及溫度，達(dá)到沉淀的目的，稱為“”分級

11、鹽析法。（鹽析：固定離子強(qiáng)度，改變pH及溫度。） 其中，Ks鹽析法（改變鹽濃度改變鹽濃度）由于蛋白質(zhì)對離子強(qiáng)度的變化非常敏感，易產(chǎn)生共沉淀現(xiàn)象，因此常用于提取液的前處理前處理。 而鹽析法（改變改變pHpH及溫度及溫度）由于溶質(zhì)溶解度變化緩慢，且變化幅度小，因此分辨率更高，常用于初步的純化初步的純化。選用鹽析用鹽的幾點(diǎn)考慮選用鹽析用鹽的幾點(diǎn)考慮v鹽析作用要強(qiáng)鹽析作用要強(qiáng)v鹽析用鹽需有較大的溶解度，能配制高濃度鹽析用鹽需有較大的溶解度，能配制高濃度v鹽析用鹽必須是惰性的鹽析用鹽必須是惰性的v來源豐富、經(jīng)濟(jì)來源豐富、經(jīng)濟(jì)鹽析后得到的產(chǎn)物，一般需要脫鹽（透析、凝膠過脫鹽（透析、凝膠過濾等）濾等）處理，

12、才能進(jìn)行后續(xù)的分離操作。 常用于蛋白質(zhì)沉淀的鹽為硫酸銨、硫酸鈉和硫酸銨、硫酸鈉和氯化鈉氯化鈉。 硫酸銨硫酸銨在水中的溶解度很高但具腐蝕性，偏酸性，溶解后溶液pH下降，高pH會(huì)釋放氨。后處理困難，殘留在食品中影響風(fēng)味，在臨床醫(yī)療上有毒性，必須完全去除。 硫酸鈉硫酸鈉雖無腐蝕性但低于400C就不易溶解，因此只適用于熱穩(wěn)定性較好的蛋白質(zhì)的沉淀過程。 氯化鈉氯化鈉需要高濃度，1.5-2M。2 2、等電點(diǎn)沉淀、等電點(diǎn)沉淀 在低的離子強(qiáng)度下，調(diào)pH至等電點(diǎn)，使蛋白質(zhì)所帶凈電荷為零，降低了靜電斥力，而疏水力能使分子間相互吸引，形成沉淀。本法適用于憎水性較強(qiáng)的蛋白質(zhì)，例如酪蛋白在等電點(diǎn)時(shí)能形成粗大的凝聚物。但

13、對一些親水性強(qiáng)的蛋白質(zhì)。如明膠，則在低離子強(qiáng)度的溶液中，調(diào) pH在等電點(diǎn)并不產(chǎn)生沉淀。（1）適用于疏水性強(qiáng)的蛋白質(zhì)（2）中性鹽濃度增大時(shí)，等電點(diǎn)向偏酸方向移動(dòng)，同時(shí)最低溶解度會(huì)有所增大。 （3）無機(jī)酸通常價(jià)格便宜，無毒（4）蛋白質(zhì)對低pH敏感，易失活（5）在調(diào)節(jié)等電點(diǎn)時(shí)，如果采用鹽 酸、氫氧化鈉等強(qiáng)酸強(qiáng)堿，要注意防止酶的失活或蛋白變性。為了使pH緩慢變動(dòng)，也可用乙酸、碳酸等弱酸和碳酸鈉等弱堿。 許多能與水互溶許多能與水互溶的有機(jī)溶劑如乙醇、的有機(jī)溶劑如乙醇、丙酮、甲醇和乙腈，丙酮、甲醇和乙腈，常用于常用于低低鹽濃度下沉鹽濃度下沉淀蛋白質(zhì)淀蛋白質(zhì)。3、有機(jī)溶劑沉淀法、有機(jī)溶劑沉淀法圖圖 pH4.

14、8時(shí)人白蛋白在乙醇時(shí)人白蛋白在乙醇-水溶液中的溶解度水溶液中的溶解度1加入溶劑后會(huì)使水溶液的介電常數(shù)降低介電常數(shù)降低，而使蛋白質(zhì)分子間的靜電引力增大靜電引力增大，導(dǎo)致凝集和沉淀。2蛋白質(zhì)的溶劑化，使原來和蛋白質(zhì)結(jié)合的水被溶劑水被溶劑所取代所取代，從而降低了它們的溶解度。3有機(jī)溶劑可能破壞了蛋白質(zhì)的某種鍵如氫鍵，使其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生某種程度的變化，致使一些原來包在內(nèi)部的疏水基團(tuán)暴露疏水基團(tuán)暴露于表面，并與有機(jī)溶劑的疏水基團(tuán)結(jié)合形成疏水層，從而使蛋白質(zhì)沉淀。機(jī)理分析機(jī)理分析 不同有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)的效率受多方面的影響，需通過試驗(yàn)加以選擇。大致上以丙酮大致上以丙酮最佳，乙醇次之，甲醇更次最佳，乙醇次之，

15、甲醇更次。 蛋白質(zhì)分子量越高，越容易沉淀出來，所需有機(jī)溶劑也越少。 在低離子強(qiáng)度和等電點(diǎn)附近，容易沉淀。 有機(jī)溶劑沉析的特點(diǎn)有機(jī)溶劑沉析的特點(diǎn)v分辨率高；分辨率高；v溶劑容易分離，并可回收使用；溶劑容易分離，并可回收使用；v產(chǎn)品潔凈，不需要脫鹽處理；產(chǎn)品潔凈，不需要脫鹽處理；v容易使蛋白質(zhì)等生物大分子失活容易使蛋白質(zhì)等生物大分子失活；應(yīng)注意在應(yīng)注意在低溫下低溫下操作；操作；v成本高成本高 20 20世紀(jì)世紀(jì)6060年代非離子型聚合物開始用于分離年代非離子型聚合物開始用于分離血纖維蛋白原和免疫球蛋白，從此高相對分子質(zhì)血纖維蛋白原和免疫球蛋白，從此高相對分子質(zhì)量非離子聚合物沉淀蛋白質(zhì)的方法被廣泛使

16、用，量非離子聚合物沉淀蛋白質(zhì)的方法被廣泛使用，如：如：聚乙二醇聚乙二醇（PEGPEG）、聚乙烯吡咯烷酮（）、聚乙烯吡咯烷酮（PVPPVP）、葡聚糖等。、葡聚糖等。 4、非離子型聚合物沉淀法、非離子型聚合物沉淀法 基于基于體積不相容性體積不相容性，即，即PEGPEG分子從溶劑中空分子從溶劑中空間排斥蛋白質(zhì)，優(yōu)先水合作用的程度取決于所間排斥蛋白質(zhì)，優(yōu)先水合作用的程度取決于所用用PEGPEG的分子大小和濃度，排斥體積與的分子大小和濃度，排斥體積與PEGPEG分子分子大小的平方根有關(guān)。大小的平方根有關(guān)。 PEGPEG沉淀作用的機(jī)理沉淀作用的機(jī)理 體系的溫度只需控制在室溫條件下； 沉淀的顆粒較大，產(chǎn)物易

17、收集；PEG非但不會(huì)使大多數(shù)蛋白質(zhì)變性，且可提高其穩(wěn)定性。 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)PEG難從蛋白質(zhì)溶液中除去。 聚電解質(zhì)聚電解質(zhì)是含有重復(fù)離子化基團(tuán)的水溶性聚合物，可用于蛋白質(zhì)沉淀的聚電解質(zhì)有聚丙烯酸、聚乙烯亞胺、羧甲基纖維素和離子型多糖如肝素等。 機(jī)理：機(jī)理：蛋白質(zhì)分子的相反電荷與聚電解質(zhì)結(jié)合，形成一個(gè)多分子絡(luò)合物，類似于絮凝絮凝，起架橋作用，當(dāng)絡(luò)合物超過游離蛋白質(zhì)的溶解度極限值時(shí)，就發(fā)生沉淀。另外，還有鹽析和降低水化程度鹽析和降低水化程度的作用。5、聚電解質(zhì)沉淀法、聚電解質(zhì)沉淀法1. 能與羧基、胺基等含氮化合物以及含氮雜環(huán)化合物強(qiáng)烈結(jié)合的金屬離子，如：Mn2+、Fe2+、Co2+、Ni2+、Cu

18、2+、Zn2+、Cd2+；6、金屬沉淀法、金屬沉淀法沉淀機(jī)理沉淀機(jī)理：金屬離子與蛋白質(zhì)分子中的特殊部位金屬離子與蛋白質(zhì)分子中的特殊部位起反應(yīng)造成的。起反應(yīng)造成的。金屬離子沉淀蛋白質(zhì)可分為三類：金屬離子沉淀蛋白質(zhì)可分為三類：2. 能與羧酸結(jié)合而不與含氮化合物結(jié)合的金屬離子，如：Ca2+、Ba2+、Mg2+、Pb2+；3. 與巰基化合物強(qiáng)烈結(jié)合的金屬離子，如：Hg2+、Ag+、Pb2+。 實(shí)際使用時(shí)，金屬離子的濃度常為0.02 mol/L。7 7、其它沉淀方法、其它沉淀方法 （1 1）親和沉淀）親和沉淀 親和沉淀是利用蛋白質(zhì)與特定的生物的或合成的分子(免疫配位體、基質(zhì)、輔酶等)之間高度專一性的相互

19、作用而設(shè)計(jì)出來的一種特殊選擇性的分離技術(shù)。該方法提供了一個(gè)從復(fù)雜混合物中分離提取出單一產(chǎn)品的有效方法。 其沉淀原理不是依據(jù)蛋白質(zhì)溶解度的差異，而是依據(jù)“吸附”有特殊蛋白質(zhì)的聚合物的溶解度的大小。 初始階段：將一個(gè)目標(biāo)蛋白質(zhì)與鍵合在可溶性載體上的親和配體絡(luò)合成沉淀； 所得沉淀物用一種適當(dāng)?shù)木彌_溶液進(jìn)行洗滌，洗去可能存在的雜質(zhì)； 用一種適當(dāng)?shù)脑噭⒛繕?biāo)蛋白質(zhì)從配體中離解出來。該技術(shù)的三個(gè)步驟：該技術(shù)的三個(gè)步驟：2.2.選擇性變性沉淀法選擇性變性沉淀法v選擇一定的條件使溶液中存在的某些雜蛋白等選擇一定的條件使溶液中存在的某些雜蛋白等雜質(zhì)變性沉淀雜質(zhì)變性沉淀下來，而與目的物分開，這種分下來，而與目的物

20、分開，這種分離方法就稱為離方法就稱為選擇性變性沉淀法。選擇性變性沉淀法。3.3.選擇性溶劑沉淀法選擇性溶劑沉淀法v核酸的沉淀分離，可以選擇適宜的溶劑進(jìn)行處理核酸的沉淀分離，可以選擇適宜的溶劑進(jìn)行處理，使蛋白質(zhì)等雜質(zhì)變性沉淀而獲得核酸，這種方，使蛋白質(zhì)等雜質(zhì)變性沉淀而獲得核酸，這種方法又稱為法又稱為選擇性溶劑沉淀法選擇性溶劑沉淀法。選擇沉淀方法的依據(jù)選擇沉淀方法的依據(jù)選擇沉淀方法時(shí)，應(yīng)從以下幾方面綜合考慮：選擇沉淀方法時(shí)，應(yīng)從以下幾方面綜合考慮： 沉淀劑是否會(huì)引起蛋白質(zhì)分子破壞；沉淀劑是否會(huì)引起蛋白質(zhì)分子破壞； 沉淀劑本身的性質(zhì)；沉淀劑本身的性質(zhì)； 沉淀操作的成本、難易程度；沉淀操作的成本、難易

21、程度； 殘留沉淀劑的去除難度，最終產(chǎn)品的產(chǎn)率及純度殘留沉淀劑的去除難度，最終產(chǎn)品的產(chǎn)率及純度的要求等。的要求等。二、泡沫分離二、泡沫分離泡沫分離又稱泡沫吸附分離技術(shù)。泡沫分離原理泡沫分離原理泡沫分離過程是利用待分離物質(zhì)本身具有表面活性(如表面活性劑)或能與表面活性劑通過化學(xué)的、物理的力結(jié)合在一起(如金屬離子、有機(jī)化合物、蛋白質(zhì)和酶等)，在鼓泡塔中被吸附在氣泡表面，得以富集，藉氣泡上升帶出溶劑主體，達(dá)到凈化主體液、濃縮待分離物質(zhì)的目的。分離作用主要取決于組分在氣液界面上吸附的選擇性和程度，其本質(zhì)是各種物質(zhì)在溶液中表面活性的差異。泡沫分離法的分類泡沫分離法的分類泡沫分離是以氣泡為介質(zhì)，利用組分的表面活性差進(jìn)行分離的一種分離方法無泡沫分離無泡沫分離是指用鼓泡進(jìn)行分離，但不一定形成泡沫層，可分鼓泡分餾和溶媒浮選。泡沫分離泡沫分離按分離對象是溶液還是含有固體離子的懸浮液、膠體溶液而分成泡沫分餾和泡沫浮選 。 泡沫浮選泡沫浮選用于分離不溶解的物質(zhì)，按照被分離對象用于分離不溶解的物質(zhì)，按照被分離對象是分子還是膠體，是大顆粒還是小顆粒等等，又可是分子還是膠體