血球計(jì)數(shù)板使用

1、血球計(jì)數(shù)板使用血球計(jì)數(shù)板使用一、血球計(jì)數(shù)板的規(guī)格 人教版建議使用2mm2mm0.1mm方格 蘇教版推薦使用1mm1mm0.1mm方格 計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室兩種規(guī)格 11625型的計(jì)數(shù)板 將計(jì)數(shù)室放大，可見它含16中格，一般取四角：1、4、13、16四個(gè)中方格（100個(gè)小方格）計(jì)數(shù) 。細(xì)胞個(gè)數(shù)1mL100個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/ 100 40010000稀釋倍數(shù) 22516型的計(jì)數(shù)板 中央大方格以雙線等分成25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格，供細(xì)胞計(jì)數(shù)用（見圖三）。一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格（80個(gè)小方格）的細(xì)胞數(shù)。 細(xì)胞個(gè)數(shù)1mL80個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/ 80 40010000稀釋倍數(shù) 二、血球

2、計(jì)數(shù)板的使用方法步驟 1鏡檢計(jì)數(shù)室。在加樣前，先對計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)； 2加樣品。將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計(jì)數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細(xì)胞懸液的量以不超過計(jì)數(shù)室臺(tái)面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去； 3計(jì)數(shù)。稍待片刻（約5min），待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部后，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄。三、血球計(jì)數(shù)板的使用注意事項(xiàng) 1每天定時(shí)取樣計(jì)數(shù)，記錄數(shù)據(jù)。 2從試管中吸出培

3、養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均勻。 3如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)對培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于酵母菌的計(jì)數(shù)。具體方法是：搖勻試管，取1mL酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無菌水稀釋，稀釋n倍后，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有45個(gè)酵母細(xì)胞為宜。特別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計(jì)數(shù)。 4活酵母有芽殖現(xiàn)象，若芽體達(dá)到母細(xì)胞大小的一半時(shí)，即可作為兩個(gè)菌體計(jì)數(shù)，若芽體小于母細(xì)胞一半時(shí)為1個(gè)酵母細(xì)胞。 5對于壓在方格界線上的酵母菌應(yīng)當(dāng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，一般可采取“數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線”的原則處理，另兩邊不計(jì)數(shù)。 6計(jì)數(shù)一個(gè)樣品要

4、從兩個(gè)計(jì)數(shù)室中計(jì)得的平均數(shù)值來計(jì)算，對每個(gè)樣品可計(jì)數(shù)三次，再取其平均值。計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)不時(shí)調(diào)節(jié)焦距，才能觀察到不同深度的菌體。按公式計(jì)算每1ml（或10mL）菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)。 7血球計(jì)數(shù)板的清潔血球計(jì)數(shù)板使用后，用自來水沖洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干，或用95%的乙醇、無水乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑脫水使其干燥。通過鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復(fù)清洗直到干凈為止。例題 例1：用血球計(jì)數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，若計(jì)數(shù)室為1mm1mm0.1mm方格，由400個(gè)小方格組成，如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)先 后再計(jì)數(shù)。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每

5、個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個(gè)。 稀釋 2108 解析 ：根據(jù)公式：540010000102108 例2：檢測員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由2516400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為01 mm3?，F(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻 個(gè)mL 解析 ：酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)1mL80個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/ 80 40010000稀釋倍數(shù)n/ 8040010000105n105

6、例3（2008江蘇高考31）（4）在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，直接從靜置的培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)原液計(jì)數(shù)的做法是錯(cuò)誤的，正確的方法是 _和 。（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計(jì)數(shù)板的做法是錯(cuò)誤的，正確的方法是 。搖勻培養(yǎng)液后再取樣 培養(yǎng)后期的樣液稀釋后再計(jì)數(shù) 浸泡和沖洗 例4：（2009福建高考1 ） 下列對有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是 ( )A.在觀察洋蔥細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中，將已經(jīng)解離、漂洗、染色的根尖置于載玻片上，輕輕蓋上蓋玻片后即可鏡檢B.對酵母菌計(jì)數(shù)時(shí)，用吸管吸取培養(yǎng)液滴滿血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室及其四周邊緣，輕輕蓋上蓋玻片后即可鏡檢C.在葉綠體色素提取實(shí)驗(yàn)中，研磨綠葉時(shí)應(yīng)加一些有機(jī)溶劑，如無水乙醇等D

7、.檢測試管中的梨汁是否有葡萄糖，可加入適量斐林試劑后，搖勻并觀察顏色變化C1（7分）酵母菌是探究細(xì)胞呼吸方式、種群數(shù)量變化的理想實(shí)驗(yàn)材料。血球計(jì)數(shù)板是酵母菌計(jì)數(shù)的常用工具。結(jié)合所學(xué)知識(shí)，回答下列問題：（1）酵母菌與大腸桿菌相比，在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是酵母菌具有 。（2）酵母菌常被用來探究細(xì)胞呼吸的方式，是因?yàn)樗?。以核膜為界限的細(xì)胞核 在有氧和無氧條件下都能生存（屬于兼性厭氧菌） （3）血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室長和寬各為1mm，深度為0.1mm，其中2516型的血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室以雙線等分成25個(gè)中方格，每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格。一般計(jì)數(shù)時(shí)選取的中方格位于計(jì)數(shù)室的 。下圖1表示的是其中一個(gè)中方格的情

8、況，對該中方格中的酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)的結(jié)果是 個(gè)。如果計(jì)數(shù)的幾個(gè)中方格中的細(xì)胞平均數(shù)為20個(gè)，則1mL培養(yǎng)液中酵母菌的總數(shù)為 個(gè)。四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格 245106 （4）某同學(xué)為探究溫度對酵母菌種群數(shù)量變化的影響，得到上圖2所示結(jié)果，由此并不能得出酵母菌的最適培養(yǎng)溫度為25。為了確定培養(yǎng)酵母菌的最適溫度，需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路： 。在25左右再設(shè)計(jì)以上的溫度梯度 2.在生態(tài)學(xué)中，通常要從種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)等三個(gè)層次開展研究。 在“探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化”實(shí)驗(yàn)中，用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行抽樣檢測。下圖是血球計(jì)數(shù)板放大圖，第一次抽樣檢測結(jié)果是4個(gè)中方格中共有40個(gè)酵母菌，則每毫升菌液中含有酵母菌 個(gè)。所計(jì)算出的酵母菌是 （從以下選項(xiàng)中選擇）。 A.活的菌數(shù) B.死的菌數(shù) C.總菌數(shù) D.新增殖的菌1.6106C“離離原上草，一歲一枯榮。野火燒不盡，春風(fēng)吹又生。遠(yuǎn)芳侵古道，晴翠接荒城?！痹娭锌审w現(xiàn)出群落的 現(xiàn)象。研究群落通常要研究其豐富度，探究土壤中小動(dòng)物優(yōu)勢種的種類及