實驗一-微生物學實驗須知及基礎技術

1、光線光線明亮明亮 室內室內潔凈潔凈 空氣空氣清新清新 充足的充足的電源電源抗腐蝕抗腐蝕實驗臺實驗臺 櫥柜櫥柜 準備準備(緩沖緩沖)間間 工作間工作間 紫外線殺菌燈紫外線殺菌燈固定的工作臺固定的工作臺空氣凈化裝置空氣凈化裝置 盛裝有液體試樣的玻璃儀器盛裝有液體試樣的玻璃儀器盛裝固體樣品的玻璃容器盛裝固體樣品的玻璃容器量取液體試樣的玻璃儀器量取液體試樣的玻璃儀器測量用玻璃儀器測量用玻璃儀器其他用途的玻璃儀器其他用途的玻璃儀器 試管、離心管、比色管、發(fā)酵管、三角瓶、試管、離心管、比色管、發(fā)酵管、三角瓶、燒杯、滴瓶、圓底燒瓶、蒸餾燒瓶、碘量燒杯、滴瓶、圓底燒瓶、蒸餾燒瓶、碘量瓶、試劑瓶瓶、試劑瓶表面皿

2、、培養(yǎng)皿、干燥器、表面皿、培養(yǎng)皿、干燥器、秤量瓶秤量瓶刻度吸管、容量吸管、微量移刻度吸管、容量吸管、微量移液器、容量瓶、量筒、量杯液器、容量瓶、量筒、量杯 血球計數板、血蓋片、載玻片、蓋玻片血球計數板、血蓋片、載玻片、蓋玻片 過濾漏斗、染色缸、玻過濾漏斗、染色缸、玻璃珠、玻璃管、玻璃棒璃珠、玻璃管、玻璃棒 接種工具和方法接種工具和方法在實驗室或工廠實踐中，用得最多的接種工具是在實驗室或工廠實踐中，用得最多的接種工具是接種環(huán)、接種針。由于接種要求或方法的不同，接接種環(huán)、接種針。由于接種要求或方法的不同，接種針的針尖部常做成不同的形狀，有刀形、耙形等種針的針尖部常做成不同的形狀，有刀形、耙形等之分

3、。在固體培養(yǎng)基表面要將菌液均勻涂布時，需之分。在固體培養(yǎng)基表面要將菌液均勻涂布時，需要用到涂布棒。要用到涂布棒。接種和分離工具接種和分離工具1接種針接種針 2.接種環(huán)接種環(huán) 3.接種鉤接種鉤 4.5.玻璃涂棒玻璃涂棒 6.接種圈接種圈 7.接種鋤接種鋤 8.小解剖刀小解剖刀二、基礎實驗技能二、基礎實驗技能 （一）玻璃儀器的清潔方法（一）玻璃儀器的清潔方法 玻璃儀器玻璃儀器吸管、滴管吸管、滴管 帶油污器皿帶油污器皿2%NaOH2%NaOH熱溶液浸熱溶液浸10-15min10-15min 水洗水洗 稀稀HCl洗洗 水洗水洗裝有強堿或強酸容器裝有強堿或強酸容器 浸于洗液或浸于洗液或2%的鹽酸數小時的

4、鹽酸數小時 自來自來水充洗干凈水充洗干凈 干燥后滅菌備用干燥后滅菌備用清水沖洗清水沖洗 熱肥皂水清潔熱肥皂水清潔 清清水沖數次水沖數次 蒸餾水沖洗蒸餾水沖洗 完后應立即用清水和蒸餾水沖洗即可完后應立即用清水和蒸餾水沖洗即可 用畢立即放入盛有大量水的缸內用畢立即放入盛有大量水的缸內,用水多次沖用水多次沖,最后蒸餾水洗最后蒸餾水洗不應對玻璃器有所損傷；不應對玻璃器有所損傷；用過的器皿應立即洗滌；用過的器皿應立即洗滌；裝有傳染性微生物容器，先浸在裝有傳染性微生物容器，先浸在5%5%石炭酸或石炭酸或1-3%1-3% 次氯酸鈉溶液內或蒸煮滅菌后，再洗滌；次氯酸鈉溶液內或蒸煮滅菌后，再洗滌；盛過有毒物品的

5、器皿盛過有毒物品的器皿, ,不要與其他器皿放在一起；不要與其他器皿放在一起；難洗滌的器皿不要與易洗滌的器皿放在一起；難洗滌的器皿不要與易洗滌的器皿放在一起； 強酸、堿及揮發(fā)性有毒物品，必須倒在廢水缸中強酸、堿及揮發(fā)性有毒物品，必須倒在廢水缸中（二）洗液的配制和使用（二）洗液的配制和使用主要作用主要作用:將有機物氧化成為能溶解的物質；將有機物氧化成為能溶解的物質；注意：洗液有很強的破壞作用注意：洗液有很強的破壞作用三、健康與安全三、健康與安全（一）實驗室工作安全事項（一）實驗室工作安全事項（二）實驗室意外事故的處理（二）實驗室意外事故的處理立即關閉電門、煤氣門，使用滅火器、沙土和濕立即關閉電門、

6、煤氣門，使用滅火器、沙土和濕布滅火布滅火 除盡外物，蒸餾水洗，涂以碘酒或酒精除盡外物，蒸餾水洗，涂以碘酒或酒精涂涂5%5%鞣酸、鞣酸、2%2%苦味酸或苦味酸銨苯甲酸丁脂油膏苦味酸或苦味酸銨苯甲酸丁脂油膏酸性藥品所致、堿性藥品所致灼傷、石炭灼傷酸性藥品所致、堿性藥品所致灼傷、石炭灼傷食入酸、堿、石炭酸食入酸、堿、石炭酸或蘇來或蘇來吸入非致病性菌液；吸入葡萄球菌、鏈吸入非致病性菌液；吸入葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌等；吸入白喉菌球菌、肺炎球菌等；吸入白喉菌 實驗室常用消毒方法 75% 酒精 過氧乙酸 碘伏 84消毒液 肥皂、洗衣粉實驗室常用滅菌方法 火焰灼燒法 干熱滅菌法 濕熱滅菌法 紫外滅菌（消毒

7、） 過濾除菌法火焰灼燒法火焰灼燒法常用于接種針、接種常用于接種針、接種環(huán)、接種鏟、接種鉤環(huán)、接種鏟、接種鉤和試管口的滅菌和試管口的滅菌滅菌滅菌微生物實驗的一般流程微生物實驗的一般流程常用的接種方法常用的接種方法 ）劃線接種）劃線接種 這是最常用的接種方法。即在固體這是最常用的接種方法。即在固體培養(yǎng)基表面作來回直線形的移動，就可達到接種培養(yǎng)基表面作來回直線形的移動，就可達到接種的作用。常用的接種工具有接種環(huán)，接種針等。的作用。常用的接種工具有接種環(huán)，接種針等。在斜面接種和平板劃線中就常用此法。在斜面接種和平板劃線中就常用此法。 ）三點接種）三點接種 在研究霉菌形態(tài)時常用此法。此在研究霉菌形態(tài)時常

8、用此法。此法即把少量的微生物接種在平板表面上，成等邊法即把少量的微生物接種在平板表面上，成等邊三角形的三點，讓它各自獨立形成菌落后，來觀三角形的三點，讓它各自獨立形成菌落后，來觀察、研究它們的形態(tài)。除三點外，也有一點或多察、研究它們的形態(tài)。除三點外，也有一點或多點進行接種的。點進行接種的。 ）穿刺接種）穿刺接種 在保藏厭氧菌種或研究微生物的動在保藏厭氧菌種或研究微生物的動力時常采用此法。做穿刺接種時，用的接種工具力時常采用此法。做穿刺接種時，用的接種工具是接種針。用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基。它是接種針。用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基。它的做法是：用接種針蘸取少量的菌種，沿半固體的做法是：用接種

9、針蘸取少量的菌種，沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺，如某細菌具有鞭培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺，如某細菌具有鞭毛而能運動，則在穿刺線周圍能夠生長。毛而能運動，則在穿刺線周圍能夠生長。 ）澆混接種）澆混接種 該法是將待接的微生物先放入培該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中，然后再倒入冷卻至養(yǎng)皿中，然后再倒入冷卻至45C左右的固體培養(yǎng)左右的固體培養(yǎng)基，迅速輕輕搖勻，這樣菌液就達到稀釋的目的基，迅速輕輕搖勻，這樣菌液就達到稀釋的目的。待平板凝固之后，置合適溫度下培養(yǎng)，就可長。待平板凝固之后，置合適溫度下培養(yǎng)，就可長出單個的微生物菌落。出單個的微生物菌落。 ）涂布接種）涂布接種 與澆混接種略有不同，就是先倒好與澆混接種略有不同，就是先倒好平板，讓其凝固，然后再將菌液倒入平板上面，平板，讓其凝固，然后再將菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作來回左右的涂布，讓菌液迅速用涂布棒在表面作來回左右的涂布，讓菌液均勻分布，就可長出單個的微生物的菌落。均勻分布，就可長出單個的微生物的菌落。 ）液體接種）液體接種 從固