HPLC在化學(xué)纖維禁用偶氮染料、表面活性劑烷基苯磺酸鈉的分析應(yīng)用

1、HPLC在化學(xué)纖維禁用偶氮染料、表面活性劑烷基苯磺酸鈉的分析應(yīng)用主講人：潘媛媛主講人單位：賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司UltiMate 3000液相色譜儀 擁有最全面的高效液相色譜級(jí)別：從納升級(jí)液相色譜、常規(guī)液相色譜到半制備級(jí)液相色譜 通用及生化專用 HPLC 的生產(chǎn)、研發(fā)在歐洲德國(guó)（Softron / Gynkotek：HPLC及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)）荷蘭（LC Packings：納升及毛細(xì)管級(jí)液相色譜） 常規(guī)及超高效液相色譜柱；生化分析柱的生產(chǎn)及研發(fā)在美國(guó)總部各種硅膠基質(zhì)反相柱、混合基質(zhì)柱（Acclaim系列品牌）各種聚合物基質(zhì)生化專用的高效離子交換柱、整體柱生化兼容液相色譜技術(shù)Hypersil

2、、Syncronis、Accucore系列硅膠柱；多孔石墨化炭黑柱 特殊的 HPLC 檢測(cè)器（2009年收購(gòu)的 ESA 公司）電噴霧檢測(cè)器（Corona CAD）庫(kù)倫檢測(cè)器（CouloChem III和CoulArray）UltiMate 3000 液相色譜的各種組合 Binary and Quaternary UHPLC systems 1000 bar up to 5 mL/min 800 bar up to 8 mL/min Oven temp 5 - 110 C 200 Hz DAD, MWD, VWD, FLD Improved sub 2-m particle column com

3、patibility Ultrafast/ultra resolution system UHPLC auto method scouting 多種配置 應(yīng)用領(lǐng)域廣泛 流速范圍從納升級(jí)至半制備級(jí) UHPLC Compatible Dedicated x2 Dual LC System 2 Systems-in-One Auto Appl. Switching Parallel and Tandem On-line SPE-LC Auto method Scouting Auto off-line 2D-LC Comprehensive on-line 2D-LC所有的UltiMate 3000

4、系統(tǒng)已全面兼容UHPLC+ 可靠性高；緊湊 積木式；靈活性 UHPLC Compatible 獨(dú)特的 x2 雙梯度液相色譜系統(tǒng) 各種高級(jí)液相色譜應(yīng)用 串聯(lián)及并聯(lián) 在線樣品處理 自動(dòng)方法開發(fā) 自動(dòng)離線多維色譜 在線多維色譜UHPLC Compatible UHPLC system for the Nano/Cap flow range 20 nL/min 50 L/min at up to 800 bar Continuous direct flow New standard in retention time precision Snap-in valves nanoViper fitting

5、 system for easy operationBasicStandardx2 DualRSLCx2 Dual RSLCRSLCnano雙三元梯度泵DPG-3600SD/RS自動(dòng)進(jìn)樣器 WPS-3000(TSL) 分流式進(jìn)樣環(huán) 壓力耐受 620 bar (SD)1000 bar (RS) 進(jìn)樣體積： 0.01 -100 L 最大進(jìn)樣可更改至 500 L 進(jìn)樣周期：15s 超低交差污染率： 0.005% Caffeine 溫控和非溫控自動(dòng)進(jìn)樣器 專利的閥切換技術(shù)6柱溫箱 TCC-3000 控溫范圍 5-85C (最大室溫以下18 C),RS為5-110C 有效的流動(dòng)相預(yù)調(diào)節(jié)器 (2 L st

6、andard, optional 7 and 11 L) 有效的柱后冷卻裝置(standard cooler inserts: 2.2 L) 2個(gè)切換閥 (2P-6P, 2P-10P and 6P-7P, 1034 bar) 切換閥外置安裝、維護(hù)簡(jiǎn)單、方便 最多可放置12根色譜柱 最長(zhǎng)可放置30cm長(zhǎng)色譜柱 4個(gè)色譜柱識(shí)別器7Dionex液相色譜檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器VWD、DAD、MWD （常規(guī)型、快速型）CAD電噴霧檢測(cè)器（常規(guī)型、快速型）庫(kù)侖（陣列）檢測(cè)器熒光檢測(cè)器（常規(guī)型、快速型）質(zhì)譜檢測(cè)器色譜柱-Acclaim 系列-Dionex 除了完善常規(guī)反相色譜柱外；近年的主要的研發(fā)精力放在了混

7、合基質(zhì)的色譜柱上 使用混合基質(zhì)色譜柱益處不同類型物質(zhì)同時(shí)分離可調(diào)整選擇性簡(jiǎn)化流動(dòng)相Acclaim PolarAdvantage (PA)Acclaim 300 C18 Acclaim 120 C18Acclaim 120 C82000 Acclaim SurfactantAcclaim PolarAdvantage II (PA2)Acclaim Organic Acid (OA) Acclaim Explosives E1Acclaim Explosives E2Acclaim Mixed-Mode HILIC (HPLC2007)Acclaim Mixed-Mode WAX (PittCo

8、n2007)(HPLC2003)(HPLC2002)(PittCon2001)(PittCon2005)(PittCon2004)(PittCon2006)20012002200320042005200620072008Acclaim 2.2 m RSLC (HPLC2008)Acclaim Mixed-Mode WCX (PittCon2008)20092010We started here Acclaim Trinity P1 (PittCon2009)More Acclaim 2.2 m RSLC Acclaim 300 3m Acclaim HILIC-10 3m Acclaim Ph

9、enyl 2011 Acclaim SEC-1000 5m 色譜柱-Hyper系列-Thermo5um, 1.7um，無(wú)氰基柱特殊色譜柱：LCMS柱、HyperCarb柱、PFP柱、Bio系列色譜柱色譜柱型號(hào)型號(hào)常規(guī)色譜柱Hypersil Gold系列Hypurity系列生物分子Biobasic系列；Betabasic系列極性和可選擇性aQ、Aquastar等擴(kuò)展pH型Hypurity系列；Hypercarb經(jīng)典型Hypersil系列；Hypersil BDSLC/MSKappa cappillary系列；Dash HTS系列離子交換硅膠基質(zhì) SAX和SCX類型體積排阻HyperGel OP系

10、列；BioSEC系列保護(hù)柱相應(yīng)的各類型SPE柱RP、IEX基質(zhì)超高效色譜柱Syncronis系列增強(qiáng)核色譜柱Accucore C18、aQ 、Ph、 PFP、HILICThermo Fisher Syncronis 色譜柱色譜柱檢測(cè)C18C8aQPhAminoSiO2HILIC硅膠粒徑和粒徑分布是是是是是是是孔徑和比表面積是是是是是是是鍵合相載碳量是是是是是是色譜疏水保留是是是是疏水選擇性是是是是空間選擇性是是是是氫鍵容量是是是是對(duì)堿性化合物的活性是是是是離子交換容量（pH 2.7）是是是是陰離子交換檢測(cè)是是正相檢測(cè)是HILIC保留與選擇性色譜柱裝填反相裝填檢測(cè)是是是是正相裝填檢測(cè)是是HILI

11、C裝填檢測(cè)是雙梯度液相色譜的配置 常規(guī)雙梯度液相色譜系統(tǒng)常規(guī)雙梯度液相色譜系統(tǒng)UltiMate 3000，DGP3600SDUltiMate 3000，DGP3600M（微流速系統(tǒng)）UltiMate 3000，DGP3600AB（分析流速；生物兼容系統(tǒng)）UltiMate 3000，DGP3600MB（微流速；生物兼容系統(tǒng)）配常規(guī)自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱（常規(guī)柱切換閥）、各種色譜柱及常規(guī)檢測(cè)器 超高效（超高效（U-HPLC）雙梯度液相色譜系統(tǒng)）雙梯度液相色譜系統(tǒng)UltiMate 3000，DGP3600RS（RSLC）配RSLC自動(dòng)進(jìn)樣器（專利的高壓進(jìn)樣閥）、柱溫箱（高壓柱切換閥）、RSLC系列色譜柱

12、及高速紫外（包括DAD）檢測(cè)器或其他類型的高速檢測(cè)器11UltiMate 3000 雙梯度所能解決的問(wèn)題1）串聯(lián)（Tandem）色譜：節(jié)省梯度平衡的沖洗時(shí)間，提高梯度方法的速度 快速分析-即在不改變已經(jīng)經(jīng)過(guò)認(rèn)證的方法的前提下，提高分析速度2）并聯(lián)（Parallel）色譜：對(duì)任何方法，都能通過(guò)共享自動(dòng)進(jìn)樣器及柱溫箱來(lái)提高一倍的分析速度 不同應(yīng)用之間的快速切換：一臺(tái)儀器同時(shí)為兩種應(yīng)用作準(zhǔn)備，連續(xù)不間斷運(yùn)行兩個(gè)不同應(yīng)用 3）二維或多維分離：通過(guò) 2D 或 3D 提高分離度 3.1）多用于生化及蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域，目前主要集中在微柱、毛細(xì)管柱及納升柱 3.2）包括近年流行的“全自動(dòng)離線”多維色譜UltiM

13、ate 3000 雙梯度所能解決的問(wèn)題4）樣品On-line SPE在線前處理分析集成 SPE 小柱作樣品前處理提高自動(dòng)化直接進(jìn)較臟的樣品（如：血樣、食品樣等）在線快速脫鹽5）輔助系統(tǒng)：提高質(zhì)譜的靈敏度；提供柱后衍生系統(tǒng)等使用左泵作為輔助泵通過(guò)柱后交換流動(dòng)相增加揮發(fā)性有機(jī)溶劑比例、調(diào)節(jié)pH值、或添加輔助試劑以提高質(zhì)譜的響應(yīng)值智能化色譜解決方案 串聯(lián)液相色譜 兩個(gè)流路：一個(gè)用于分析（桔紅色）；另一個(gè)用于離線色譜柱再生（藍(lán)色）色譜柱在兩個(gè)流路間切換從運(yùn)行周期中除去沖洗及平衡色譜柱的時(shí)間 縮短運(yùn)行時(shí)間 20-50%加配一個(gè)十通閥及同批次柱，帶在線色譜柱再生功能用于串聯(lián)應(yīng)用的智能化液相色譜解決方案05

14、1015minutes051015minutes原始方法：原始方法：1根色譜柱根色譜柱串聯(lián)方法：串聯(lián)方法：2根色譜柱根色譜柱分析在線平衡分析離線平衡C1 離線平衡C2 離線平衡C1 離線平衡C2 離線平衡C1 離線平衡C2 離線平衡C2C1C2C1C2C1C2C1C1C1C1C116=+1 x 雙梯度系統(tǒng)雙梯度系統(tǒng)（DGLC+2個(gè)檢測(cè)器）個(gè)檢測(cè)器）2 x 單獨(dú)單獨(dú)LC系統(tǒng)系統(tǒng)智能化色譜解決方案 并聯(lián)液相色譜智能化色譜解決方案 并聯(lián)液相色譜 兩套獨(dú)立的流路共享一個(gè)自動(dòng)進(jìn)樣器及柱溫箱；變色龍軟件把其配置為兩套系統(tǒng) 提供兩臺(tái)獨(dú)立系統(tǒng)的能力：獨(dú)立控制；軟件管理自動(dòng)進(jìn)樣器共享可運(yùn)行不同應(yīng)用程序下的兩套樣

15、品橘色位置進(jìn)樣，閥切換，藍(lán)色位置進(jìn)樣加配一個(gè)六通及一個(gè)檢測(cè)器共享液相色譜部件智能化色譜解決方案 并聯(lián)液相色譜Method A (7 min) runs on the right pump and column 1Method B (5 min) runs on the left pump and column 2Inj.Inj.Inj.Inj.Inj.Inj.Inj.Inj.Inj.二維色譜及多維色譜免疫親和-反相二維色譜不同餾分再次分離012min51015min012min51015min智能化色譜解決方案 兩維色譜免疫親和免疫親和-反相二維色譜法反相二維色譜法( IMAC-RP-LC)分

16、析磷?；姆治隽柞；牟槐Ａ艚M分的二維分離不保留組分的二維分離保留組分的二維分離保留組分的二維分離免疫免疫親親和色和色譜譜不保留不保留組組分分免疫免疫親親和色和色譜譜可保留可保留組組分分Valve is in position 1Valve is in position 2一維免疫親和色譜一維免疫親和色譜Acclaim C18,120A二維反相分離二維反相分離ABAB 雙三元液相色譜在偶氮染料和表面活性劑烷基苯磺酸鈉的分析應(yīng)用在線固相萃?。∣n-Line SPE）技術(shù) 特點(diǎn)：減低手工操作需求、節(jié)約時(shí)間；且重現(xiàn)性高方便于直接進(jìn)樣；更快、更經(jīng)濟(jì)可以自動(dòng)化；無(wú)人照管操作過(guò)夜或過(guò)周末減少接觸對(duì)人體有害

17、物質(zhì)的機(jī)會(huì) 應(yīng)用領(lǐng)域：食品及飲料分析實(shí)驗(yàn)室環(huán)保實(shí)驗(yàn)室制藥及臨床實(shí)驗(yàn)室 第一維SPE小柱從基體中分離待測(cè)物； 將待測(cè)物轉(zhuǎn)移至分析柱上分離、測(cè)定(洗脫液無(wú)須吹干、定容) 分析過(guò)程中，SPE 小柱同時(shí)進(jìn)行清洗、再生方便地、完全自動(dòng)化 進(jìn)大體積進(jìn)樣地行復(fù)雜樣品的前處理樣品分餾轉(zhuǎn)移 / 分離分離 / 清洗智能化色譜解決方案 在線固相萃取 / 濃縮123456123456123456聚合物溶液中偶氮二異丁腈（AIBN）的分析 背景：偶氮二異丁腈（ABIN）聚合反應(yīng)的引發(fā)劑。目前測(cè)定AIBN含量的方法主要是分光光度法，該方法樣品基質(zhì)干擾大。AIBN本身紫外吸收不是很強(qiáng)，因此靈敏度低。 AIBN的分解溫度低，

18、因此檢測(cè)器 不能用質(zhì)譜（MS）或者是蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）。樣品沉降聚合物后，對(duì)樣品溶液進(jìn)行濃縮，由于此樣品溶液中仍含有基質(zhì)，常規(guī)濃縮法氮吹及凍干將基質(zhì)也一并濃縮，基質(zhì)干擾大、且易堵柱。 戴安方法采用On-line SPE-HPLC方法，濃縮及檢測(cè)過(guò)程不涉及加熱，且大部分基質(zhì)被在線去除，干擾小。From Beijing Lab-Zhao Xiutai色譜條件：色譜條件：分析柱：Acclaim 120 C18 5um, 4.6 mm x 150 mm SPE柱：Acclaim 120 C18 卡套柱芯， 5 m 4.3*10mm流動(dòng)相組成：左泵（SPE）：流動(dòng)相：10%MeAC + 90%

19、H2O流速：1ml/min 右泵（分析）：流動(dòng)相：50%MeAC+50% H2O流速：1ml/min柱溫：20 進(jìn)樣器溫度：20 檢測(cè)波長(zhǎng)：346 nm進(jìn)樣量：2.5ml時(shí)間（min）閥位置01-276-1131-27.08.810.011.312.513.815.016.318.0-15.00.010.020.011-stUV_VIS_223-stUV_VIS_235-stUV_VIS_247-stUV_VIS_2510-stUV_VIS_2mAUmin54321AIBNWVL:346 nm7.08.810.011.312.513.815.016.318.0-5.012.525.035.01

20、S2UV_VIS_22S2 加標(biāo)UV_VIS_2mAUmin21AIBNWVL:346 nm聚合物中AIBN分析條件及譜圖From Beijing Lab-Zhao Xiutai紡織品中線性十二烷基苯磺酸鹽(LAS)的分析 背景：LAS是一種陰離子表面活性劑，生物降解性差，且具有微毒性。歐盟的生態(tài)標(biāo)簽(Eco-Labe1)是由歐盟執(zhí)法委員會(huì)根據(jù)880/92法令建立的，在其最新標(biāo)準(zhǔn)中，將直鏈烷基苯磺酸鹽(LAS)列入了禁用紡織品助劑的范圍。 紡織品中LAS的分析方法：GB 23325-2009 紡織品 表面活性劑的測(cè)定 線性烷基苯磺酸鹽，方法采用LC-MS/MS分析，檢出限為2mg/kg。C10

21、-C14五種化合物的保留時(shí)間為4.67-5.23min。 戴安方法利用雙三元高效液相系統(tǒng)（DGLC-3600），采用在線固相萃取方式（On-line SPE）對(duì)樣品進(jìn)行富集后再進(jìn)行HPLC檢測(cè)。100uL樣品進(jìn)樣即可達(dá)到總含量0.15 mg/kg的檢出限（通過(guò)增大進(jìn)樣體積還可以進(jìn)一步降低檢出限），該方法突出的優(yōu)點(diǎn)是實(shí)現(xiàn)了不同碳鏈的LAS色譜峰可達(dá)到基線分離，不必使用質(zhì)譜，紫外檢測(cè)器即可。靈敏度高，回收率好，在線的SPE柱可重復(fù)多次使用，節(jié)約了成本，實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化前處理。From Beijing Lab-Zhao XiutaiDetermination of SurfactantLinear Alkylbenzene