酶聯(lián)免疫吸附試驗論文：影響ELISA檢測HBsAg結(jié)果的常見因素

1、論文發(fā)表專家一顧中國學術(shù)期刊洌wwv/酶聯(lián)免疫吸附試驗論文：影響ELISA檢測HBsAg結(jié)果的常見因素【摘要】目的：探討血清標本因素對酶聯(lián)免疫吸附法(elisa)檢測乙型肝炎表面抗原(hbsag)結(jié)果的影響。方法用同一批號試劑對不同狀態(tài)的血清標本進行同步檢測，并對結(jié)果進行綜合比較分析。結(jié)果：引起結(jié)果錯誤的主要原因是有溶血或渾濁的血清。結(jié)論應針對血清標本的具體情況進行不同的處理?！娟P(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗；乙型肝炎表面抗原；抗凝劑酶聯(lián)免疫吸附法(elisa)檢測hbsag因具有靈敏度高、特異性強等優(yōu)點而被廣泛應用，但在日常工作中檢測hbsag常遇到假陽性率高、重復性不好的現(xiàn)象。hbsag假陽性結(jié)

2、果易給廣大體檢人員造成大的精神壓力，易引起體檢人員對檢測人員的投訴，同時對檢驗機構(gòu)易造成不良的聲譽1。針對這一現(xiàn)象，為了使檢驗結(jié)果更加準確、假陽性率更低，筆者采用同一種試劑對不同的血清標本進行重復測定分析，現(xiàn)報告如下。1資料與方法1.1血清標本采靜脈血做乙肝兩對半的血清標本均來自來我院進行單位職工年度體格檢查。I一論文發(fā)袤專家一)中國學術(shù)期刊風v/1.2試劑和儀器上海科華生物工程有限公司生產(chǎn)的乙肝hbsag酶聯(lián)免疫試劑盒，深圳雷杜酶標儀和洗板機。1. 3分組和檢測方法嚴格按照說明書進行操作，在操作過程中，小心吸取血清，避免人為造成影響2。分3類情況進行觀察。a組：不抗凝血液標本：取96份不抗凝

3、血液標本，每份分為三管，分別靜置0.5、1、2h后用3OOOr/min離心15min，取出血清分別檢測hbsag。b組：加抗凝劑標本：采集50份靜脈血標本，每份標本分別用不抗凝管、肝素鈉抗凝管、edta2ka管、枸櫞酸鈉管這4種管各裝I管，其中不抗凝標本靜置2h后3000r/min離心15min,另3管靜置2h析出血漿。c組：含血細胞標本：從體檢人員中抽出45例健康人血液標本(hbsag陰性者)。取45份血清和血細胞每份血清1.2ml，血細胞0.2ml。把0.2ml的血細胞加生理鹽水，校正紅細胞計數(shù)為1.0X1012l-1，然后按表1進行稀釋制成含有不同血細胞的血清標本，然后對含有不同濃度血細

4、胞的標本進行hbsag的檢測。2結(jié)果2. 1a組不抗凝標本hbsa9檢測結(jié)果標本自凝0.5、1、2h的hbsag陽性率分別為10.42%(10/96)、3.12%(3/96)和0。I一論文發(fā)袤專家一)中國學術(shù)期刊鳳2.2b組加不同抗凝劑標本hbsa9檢測結(jié)果依照不同血液處理方式，不抗凝血、edta2k抗凝血、肝素鈉抗凝血、枸櫞酸鈉抗凝血的hbsa9陽性率分別為0、0、8.0%(4/50)和0。2.3c組合有不同濃度血細胞標本hbsag檢測結(jié)果隨著標本中含血細胞濃度的增高(0.0625X1012I-10.125X1012I-1、0.250X1012l-1)，檢測hbsag陽性率也隨之升高，依次為6.7%(3/45)、77.8%(35/45)和100%(45/45)。3討論血液中心和血站對供血者健康檢查標準中hbv的篩查要求也是hbsag陰性1。因此，hbsag檢測的結(jié)果是否準確具有非常重要的意義。血清是最常用的elisa標本，血漿中除含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成分等同于血清，除特殊情況外，在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本3。用elisa一步法檢測乙肝兩對半，簡化了操作步驟，縮短了檢驗時間；同時，應用高親和力的單克隆抗體或，高純度抗原，檢測的敏感性和特異性都有顯著提高。但實驗原理、實驗步驟及