實(shí)驗(yàn)六酶活性影響因素的測(cè)定－溫度、pH對(duì)酶活性的影響ppt課件

1、酶實(shí)驗(yàn)酶實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)六實(shí)驗(yàn)六 酶活性影響要素的測(cè)定酶活性影響要素的測(cè)定 溫度、溫度、pHpH對(duì)酶活性的對(duì)酶活性的影響影響 根本原理根本原理 酶是生物體內(nèi)具有催化功能的蛋白質(zhì)，也叫生物催化劑。生物體內(nèi)存在多種多酶是生物體內(nèi)具有催化功能的蛋白質(zhì)，也叫生物催化劑。生物體內(nèi)存在多種多樣的酶，從而使生物體在溫暖的條件下可以迅速完成復(fù)雜的代謝過(guò)程。樣的酶，從而使生物體在溫暖的條件下可以迅速完成復(fù)雜的代謝過(guò)程。酶活力受環(huán)境酶活力受環(huán)境PH值的影響極為顯著。通常各種酶只需在一定的值的影響極為顯著。通常各種酶只需在一定的PH值范圍內(nèi)才值范圍內(nèi)才表現(xiàn)出活力。一種酶表現(xiàn)活力最高時(shí)的表現(xiàn)出活力。一種酶表現(xiàn)活力最高時(shí)的pH

2、值，稱(chēng)為該酶的最適值，稱(chēng)為該酶的最適pH。低于或高于最。低于或高于最適適pH時(shí)，酶的活力均逐漸降低。不同酶的最適時(shí)，酶的活力均逐漸降低。不同酶的最適pH也不同。酶的最適也不同。酶的最適pH也受底物也受底物性質(zhì)和緩沖液性質(zhì)的影響。性質(zhì)和緩沖液性質(zhì)的影響。酶的催化作用受溫度的影響亦很大。在一定溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，酶酶的催化作用受溫度的影響亦很大。在一定溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，酶的熱變性不顯著，而酶促反響速度添加，直至到達(dá)最大值。反響速度到達(dá)最大值時(shí)的熱變性不顯著，而酶促反響速度添加，直至到達(dá)最大值。反響速度到達(dá)最大值時(shí)的溫度稱(chēng)為酶作用的最適溫度。當(dāng)溫度超越酶的最適溫度時(shí)，酶促反響急劇下

3、降，的溫度稱(chēng)為酶作用的最適溫度。當(dāng)溫度超越酶的最適溫度時(shí)，酶促反響急劇下降，直至完全停頓。一種酶的最適溫度不是完全固定的，它與作用的時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān)，普直至完全停頓。一種酶的最適溫度不是完全固定的，它與作用的時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān)，普通作用時(shí)間長(zhǎng)，最適溫度低，而作用時(shí)間短，那么最適溫度高。大多數(shù)動(dòng)物酶的最通作用時(shí)間長(zhǎng)，最適溫度低，而作用時(shí)間短，那么最適溫度高。大多數(shù)動(dòng)物酶的最適溫度為適溫度為37-40，植物酶的最適溫度為，植物酶的最適溫度為40-60。 本實(shí)驗(yàn)分別以不同溫度及不同本實(shí)驗(yàn)分別以不同溫度及不同pHpH條件下讓淀粉條件下讓淀粉酶作用于淀粉，并用碘液檢查酶促淀粉的水解程度，酶作用于淀粉，并用碘液檢查

4、酶促淀粉的水解程度，來(lái)闡明溫度及來(lái)闡明溫度及pHpH對(duì)酶活力的影響。對(duì)酶活力的影響。實(shí)驗(yàn)中以稀釋的唾液作為淀粉酶液。唾液內(nèi)的實(shí)驗(yàn)中以稀釋的唾液作為淀粉酶液。唾液內(nèi)的淀粉酶可將淀粉逐漸水解成各種不同大小的糊精分淀粉酶可將淀粉逐漸水解成各種不同大小的糊精分子，最終產(chǎn)物為麥芽糖和少量的葡萄糖。它們遇碘子，最終產(chǎn)物為麥芽糖和少量的葡萄糖。它們遇碘呈不同的顏色。直鏈淀粉即可溶性淀粉遇碘呈呈不同的顏色。直鏈淀粉即可溶性淀粉遇碘呈藍(lán)色；糊精按分子從大到小的順序，遇碘可呈藍(lán)色、藍(lán)色；糊精按分子從大到小的順序，遇碘可呈藍(lán)色、紫色、暗褐色和紅色，最小的糊精和麥芽糖遇碘不紫色、暗褐色和紅色，最小的糊精和麥芽糖遇碘不

5、顯顏色。由于在不同溫度，不同顯顏色。由于在不同溫度，不同pHpH條件下唾液淀粉條件下唾液淀粉酶的活性高低不同，那么淀粉被水解的程度不同，酶的活性高低不同，那么淀粉被水解的程度不同，所以，可由酶反響混合物遇碘所呈現(xiàn)的顏色來(lái)判別所以，可由酶反響混合物遇碘所呈現(xiàn)的顏色來(lái)判別上述諸要素對(duì)酶活性的影響。上述諸要素對(duì)酶活性的影響。操作步驟操作步驟2. 溫度對(duì)酶活力的影響溫度對(duì)酶活力的影響 取3支試管，編號(hào)后各參與淀粉溶液2毫升。將第1，2號(hào)試管放入37恒溫水浴中保溫，第3號(hào)試管放入冰水中冷卻，5分鐘后，向第1號(hào)試管中參與煮沸515分鐘的稀釋唾液1毫升，向第2，3號(hào)試管加稀釋唾液各1毫升。搖勻，20分鐘后取

6、出3支試管，各加碘化鉀碘溶液2滴，混勻，比較各管溶液的顏色。判別淀粉被唾液酶水解的程度，并闡明溫度對(duì)唾液酶活性的影響。1.1.稀釋的新穎唾液：稀釋的新穎唾液： 取唾液適量，量取取唾液適量，量取 一定體積，用蒸餾水稀釋一定體積，用蒸餾水稀釋2020倍。倍。3.pH值對(duì)酶活力的影響值對(duì)酶活力的影響 取取8支支10毫升刻度試管毫升刻度試管,編號(hào)。按下表中的比例編號(hào)。按下表中的比例,用取樣用取樣器添加器添加 0.2M 磷酸氫二鈉溶液和磷酸氫二鈉溶液和 0.1M 檸檬酸溶液檸檬酸溶液,制備制備PH5.0-8.0的的8種緩沖溶液種緩沖溶液.錐形瓶錐形瓶號(hào)號(hào)0.2M0.2M磷酸氫二鈉磷酸氫二鈉( (毫升毫升

7、) )0.1M0.1M檸檬酸檸檬酸( (毫毫升升) )緩沖液緩沖液PHPH1 12 23 34 45 56 67 78 85.155.155.805.806.316.316.926.927.727.728.698.699.369.369.729.724.854.854.204.203.693.693.083.082.282.281.311.310.640.640.280.285.05.05.65.66.06.06.46.46.86.87.27.27.67.68.08.0 取9支枯燥的試管,編號(hào).將8支刻度試管中不同pH的緩沖液各取3毫升,分別參與相應(yīng)的號(hào)碼(1-8號(hào))的試管中.然后,再向每個(gè)試

8、管中添加0.5淀粉溶液2毫升.第9號(hào)試管與第5號(hào)試管的內(nèi)容物一樣. 向第9號(hào)試管中參與50-100倍的唾液2毫升,搖勻后放入37恒溫水浴中保溫. 每隔1分鐘由第9號(hào)試管中取出1滴混合液,置于白瓷板上,加1滴碘化鉀-碘溶液,檢驗(yàn)淀粉的水解程度,待結(jié)果呈橙黃色時(shí),取出試管,記錄保溫時(shí)間.留意：掌握第9號(hào)試管的水解程度是本實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵之一. 以以1分鐘的間隔分鐘的間隔,依次向第依次向第1至第至第8號(hào)試管號(hào)試管中參與稀釋中參與稀釋100倍的唾液倍的唾液2毫升毫升,搖勻搖勻,并以并以1分鐘的間隔依次將分鐘的間隔依次將8支試管放入支試管放入37恒溫水恒溫水浴中保溫浴中保溫.然后然后,按照第按照第9 號(hào)試管的保溫時(shí)間號(hào)試管的保溫時(shí)間,依次將各管迅速取出依次將各管迅速取出,并立刻參與碘化鉀并立刻參與碘化鉀-碘碘溶液溶液2滴滴,充分搖勻充分搖勻.察看各管呈現(xiàn)的顏色察看各管呈現(xiàn)的顏色,判判別在不同別在不同pH值下淀粉被水解的程度值下淀粉被水解的程度,可以看可以看出出PH對(duì)唾液淀粉酶活性的影響對(duì)唾液淀粉酶活性的影響,并確定其最并確定其最適適pH.思索題：將乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和適量思索題：將乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和適量水混合裝入一個(gè)容器內(nèi)，