人類性染色質(zhì)標(biāo)本制作

1、人類性染色質(zhì)標(biāo)本的制人類性染色質(zhì)標(biāo)本的制作與觀察作與觀察 實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康囊?、了解一、了解X染色質(zhì)的不同檢測方法及意義。染色質(zhì)的不同檢測方法及意義。二、掌握二、掌握X染色質(zhì)的形態(tài)特點。染色質(zhì)的形態(tài)特點。三、初步掌握顯微鏡下三、初步掌握顯微鏡下X染色質(zhì)的識別方法染色質(zhì)的識別方法實驗原理實驗原理人類性染色質(zhì)人類性染色質(zhì)（sex chromatin boby）是在間期）是在間期細(xì)胞核中染色體的異染色質(zhì)部分顯示出來的一種細(xì)胞核中染色體的異染色質(zhì)部分顯示出來的一種特殊結(jié)構(gòu)，其包括特殊結(jié)構(gòu)，其包括X染色質(zhì)和染色質(zhì)和Y染色質(zhì)。染色質(zhì)。Lyon假說假說：英國遺傳學(xué)家：英國遺傳學(xué)家Mary Lyon 在在196

2、1年年首先提出了上述首先提出了上述X染色體失活假說，即染色體失活假說，即Lyon假說假說其要點是：雌性哺乳動物細(xì)胞內(nèi)只有一條其要點是：雌性哺乳動物細(xì)胞內(nèi)只有一條X染染色體有活性，另一條失活并固縮，后者在間期細(xì)色體有活性，另一條失活并固縮，后者在間期細(xì)胞表現(xiàn)為性染色質(zhì)；失活發(fā)生在胚胎的早期；胞表現(xiàn)為性染色質(zhì)；失活發(fā)生在胚胎的早期；失活是隨機(jī)的，即失活的失活是隨機(jī)的，即失活的X染色體既可來自父染色體既可來自父親也可來自母親，但一個細(xì)胞某條親也可來自母親，但一個細(xì)胞某條X旦失活，旦失活，由該細(xì)胞繁衍而來的子細(xì)胞都具有同一條失活的由該細(xì)胞繁衍而來的子細(xì)胞都具有同一條失活的X染色體。染色體。 劑量補償效

3、應(yīng)劑量補償效應(yīng)：使細(xì)胞核中具有兩份或兩份以上基因：使細(xì)胞核中具有兩份或兩份以上基因的個體和只有一份基因的個體出現(xiàn)相同表型的遺傳效的個體和只有一份基因的個體出現(xiàn)相同表型的遺傳效應(yīng)。應(yīng)。 對于性染色體來講，包括人類在內(nèi)的哺乳動物雌對于性染色體來講，包括人類在內(nèi)的哺乳動物雌性個體的每一體細(xì)胞中有兩條性個體的每一體細(xì)胞中有兩條X染色體，所以在染色體，所以在X染色染色體上的基因劑量有兩份，而雄性個體只有一條體上的基因劑量有兩份，而雄性個體只有一條 X染色染色體，基因劑量只有一份。劑量補償效應(yīng)使體，基因劑量只有一份。劑量補償效應(yīng)使 X連鎖性狀連鎖性狀的表現(xiàn)在雌雄個體之間并無不同。的表現(xiàn)在雌雄個體之間并無不

4、同。1932年美國遺傳年美國遺傳學(xué)家學(xué)家H.J.馬勒首先在果蠅中發(fā)現(xiàn)了這種效應(yīng)，并把它馬勒首先在果蠅中發(fā)現(xiàn)了這種效應(yīng)，并把它看作是維持雌雄兩性生物基因表達(dá)的一致所特有的一看作是維持雌雄兩性生物基因表達(dá)的一致所特有的一種遺傳效應(yīng)。種遺傳效應(yīng)。 器材器材：染色缸，顯微鏡，載玻片，鑷子，滴管，：染色缸，顯微鏡，載玻片，鑷子，滴管，擦鏡紙等。擦鏡紙等。 試劑試劑：乙醇，甲醇，冰乙酸，流堇染料，乙醚，：乙醇，甲醇，冰乙酸，流堇染料，乙醚，香柏油，甲醇冰乙醇固定液等。香柏油，甲醇冰乙醇固定液等。 材料材料：帶有毛囊的發(fā)根。：帶有毛囊的發(fā)根。 實驗材料實驗材料 實驗步驟實驗步驟1、取材取材 取取2 3根頭發(fā)

5、，要帶有完整的毛囊組織。根頭發(fā)，要帶有完整的毛囊組織。2、軟化與涂片軟化與涂片 加加1滴滴40%醋酸軟化毛囊，醋酸軟化毛囊，5 10min后，刮下毛囊，棄發(fā)干，涂片后，刮下毛囊，棄發(fā)干，涂片1cm2大小，烘大小，烘干。干。3、固定固定 加固定液加固定液2 3滴，晾干。滴，晾干。4、水解水解 放入放入5N HCL中中10min，自來水沖洗，自來水沖洗2min，稍干后染色。稍干后染色。5、染色染色 加入數(shù)滴流堇染液，染色加入數(shù)滴流堇染液，染色10 15min沖洗，晾干。沖洗，晾干。6、觀察計數(shù)觀察計數(shù) 在顯微鏡下觀察并計數(shù)。在顯微鏡下觀察并計數(shù)。注意事項注意事項1、染料要現(xiàn)用現(xiàn)配。、染料要現(xiàn)用現(xiàn)配。2、要正確使用顯微鏡，避免損傷顯微鏡。、要正確使用顯微鏡，避免損傷顯微鏡。3、計數(shù)時要注意避開干擾因