高考生物第十單元第36講

1、第36講微生物的利用考綱要求1.大腸桿菌的培養(yǎng)和分離。2.分離以尿素為氮源的微生物。考點一大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1大腸桿菌(1)特性：革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌。(2)細(xì)菌的繁殖：以分裂的方式繁殖，分裂速度很快。2細(xì)菌的擴(kuò)大培養(yǎng)擴(kuò)大培養(yǎng)用LB液體培養(yǎng)基，劃線分離用LB固體平面培養(yǎng)基。3分離培養(yǎng)基滅菌倒平板接種劃線分離培養(yǎng)觀察50 mL LB液體培養(yǎng)基和50 mL LB固體培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿高壓蒸汽滅菌將培養(yǎng)基分別倒入4個滅菌后的培養(yǎng)皿中，水平放置，使之形成平面在裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中接種大腸桿菌，培養(yǎng)12 h用接種環(huán)在接種有大腸桿菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固體培養(yǎng)基的平板上連續(xù)劃線，蓋好培養(yǎng)皿

2、培養(yǎng)皿倒置(蓋在下面)，放在37 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1224 h后，可看到劃線的末端出現(xiàn)不連續(xù)的單個菌落4.消毒和滅菌比較比較項目理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能5.微生物接種的兩種常用方法比較比較劃線分離法涂布分離法工具接種環(huán)玻璃刮刀原理通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細(xì)菌細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的細(xì)胞群體，即菌落將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在

3、一起的微生物將被分散成單個細(xì)菌細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落特點方法簡單，但不適宜計數(shù)單菌落更易分開，但操作復(fù)雜些目的使培養(yǎng)基上形成單個細(xì)菌細(xì)胞繁殖而來的子細(xì)胞群體菌落思維診斷(1)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌(2013·江蘇，18A)(×)(2)從有機(jī)廢水中分離分解有機(jī)物的微生物時，接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(2013·江蘇，18C)(×)(3)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細(xì)胞的傷害(2013·重慶，5A)()(4)無菌操作的對象只要是沒有生物活性的材料(如培養(yǎng)基、接種環(huán)等)都可采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅

4、菌(×)題組大腸桿菌的分離和培養(yǎng)1檢驗飲用水的細(xì)菌含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。請回答下列與檢驗飲用水有關(guān)的問題：(1)要測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)量，常采用_法，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度_，然后將上述的水樣用涂布器分別涂布到_的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時_(填“是”或“否”)需要對照組。原因：_。(2)下面所示的四種菌落分布圖中，不可能由上述方法得到的是_。(3)大腸桿菌的培養(yǎng)條件是無菌，培養(yǎng)基配制時需加入氯化鈉，以維持_。配制培養(yǎng)基時先_(填“調(diào)節(jié)pH”或“滅菌”)后_(填“調(diào)節(jié)pH”或“滅菌”)。答案(1)涂布分離稀釋LB固體培養(yǎng)基是因為需要判斷培

5、養(yǎng)基使用之前是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格)(2)D(3)滲透壓調(diào)節(jié)pH滅菌2請回答下列有關(guān)細(xì)菌的培養(yǎng)與分離問題。(1)環(huán)衛(wèi)部門要檢測某地飲用水的大腸桿菌超標(biāo)問題，通常采用_法。用此法分離時，需要將待測水樣稀釋若干倍，再取_mL稀釋度不同的待測樣品加在固體培養(yǎng)基上，用_涂布在培養(yǎng)基平面上，蓋好培養(yǎng)皿并將培養(yǎng)皿倒置，在37 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1224 h，可以得到相互分開的菌落。計數(shù)時為了減小誤差，每個濃度的待測樣品_。(2)如圖4支試管分別代表4種微生物在半固體培養(yǎng)基(瓊脂含量3.5 g/L)中的生長狀態(tài)，最可能是大腸桿菌生長狀態(tài)的是_。(3)從土壤中分離出有脲酶的細(xì)菌時，在配制好尿素固體培

6、養(yǎng)基后，加入尿素溶液往往要通過_過濾，使之無菌。由于脲酶能水解尿素，會使培養(yǎng)基中的酚紅指示劑變?yōu)開，從而在其菌落周圍出現(xiàn)_。答案(1)涂布分離0.1玻璃刮刀至少涂布三個平板，取其平均值(2)D(3)G6玻璃砂漏斗紅色著色的環(huán)帶 (1)配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的注意事項倒平板的適宜溫度是60 左右，溫度過高會燙手，過低培養(yǎng)基又會凝固。平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(2)平板劃線操作的注意事項第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)。灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。劃線用力

7、大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破?？键c二分離以尿素為氮源的微生物1菌種特點含有脲酶，可以通過降解尿素作為其生長的氮源。2培養(yǎng)基用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)，以LB全營養(yǎng)培養(yǎng)基為對照。3實驗原理(1)篩選以尿素為氮源的微生物，可使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)選擇。(2)細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成NH3，致使pH升高，使酚紅指示劑變紅。4實驗步驟制備培養(yǎng)基：將已滅菌的LB固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基分別倒入兩個培養(yǎng)皿中，搖勻，平放至凝固制備細(xì)菌懸液：用1 g土樣配制不同濃度的細(xì)菌懸液用涂布分離法分離細(xì)菌：將不同濃度的土壤稀釋液分別加入到有LB培養(yǎng)基和尿素培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，并用玻璃刮

8、刀涂布到整個平面上培養(yǎng)：將培養(yǎng)皿倒置，在37 恒溫箱中培養(yǎng)2448 h觀察：培養(yǎng)基中菌落數(shù)量5反應(yīng)的鑒定在配制培養(yǎng)基時，加入指示劑酚紅，培養(yǎng)時細(xì)菌將尿素分解產(chǎn)生堿性的氨，使培養(yǎng)基上菌落周圍出現(xiàn)著色的環(huán)帶。思維診斷(1)選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類(×)(2)從物理性質(zhì)的角度看，選擇培養(yǎng)基多屬于固體培養(yǎng)基()(3)對細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)只能采用涂布分離法，而不能用劃線分離法(×)(4)篩選能分解尿素的細(xì)菌所利用的培養(yǎng)基中，尿素是唯一的氮源()(5)分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時，可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低(×)題組分離以尿素為氮源的微生物1在以尿素為唯一氮

9、源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑的目的是()A篩選出能分解尿素的細(xì)菌B對分離的菌種作進(jìn)一步鑒定C作細(xì)菌的營養(yǎng)成分D如指示劑變藍(lán)就能準(zhǔn)確地認(rèn)定該菌能分解尿素答案B解析篩選出能分解尿素的細(xì)菌用選擇培養(yǎng)基即可，不需要加指示劑。加入指示劑的培養(yǎng)基，目的都是對要分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定。2現(xiàn)從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌，實驗過程如下圖所示：請回答：(1)欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌，將土壤用_進(jìn)行一系列的梯度稀釋，同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布_個平板，通常以每個培養(yǎng)皿中有_個以內(nèi)的單菌落的那一組稀釋倍數(shù)為最合適。(2)接種后的培養(yǎng)皿_于37 的恒溫箱中培養(yǎng)。若培養(yǎng)基中存在含脲酶的細(xì)菌，其菌落周圍會出現(xiàn)

10、_，這是由于尿素被分解產(chǎn)生氨氣，遇培養(yǎng)基中的_產(chǎn)生的顏色變化，從而證明這一菌株能以尿素為氮源。(3)分離能利用尿素的細(xì)菌時所用的培養(yǎng)基成分上最主要的特點是_。(4)下列操作需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行的是_(多選)。A稱取葡萄糖、瓊脂糖等培養(yǎng)基成分B倒平板C涂布平板D微生物的培養(yǎng)(5)與LB全營養(yǎng)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)相比，尿素培養(yǎng)基上的菌落數(shù)只有少數(shù)菌落的原因是_。答案(1)無菌水320(2)倒置紅色環(huán)帶酚紅指示劑(3)以尿素作為唯一氮源的(固體)培養(yǎng)基(4)BC(5)土壤中能利用尿素的細(xì)菌在土壤菌群中只占極少數(shù)1培養(yǎng)基中觀測指標(biāo)的分析(1)培養(yǎng)基中的酸堿指示劑產(chǎn)生顏色變化(變紅)，標(biāo)志著存在脲酶水解尿

11、素的作用，從而證明這一菌株能以尿素為氮源。紅色環(huán)狀區(qū)域的大小代表脲酶活性的強(qiáng)弱和含量的多少。紅色區(qū)域越大，表明菌株利用尿素的能力越強(qiáng)。(2)與全營養(yǎng)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)比較，尿素培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌落，這一現(xiàn)象表明能利用尿素的細(xì)菌在土壤菌群中只占極少部分。2微生物篩選過程中必要的兩種對照培養(yǎng)基及其作用對照組作用現(xiàn)象結(jié)論未接種培養(yǎng)基有無雜菌污染的判斷未接種的培養(yǎng)皿中無菌落生長未被雜菌污染接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基篩選作用的確認(rèn)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)大于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目選擇培養(yǎng)基具有篩選作用探究高考明確考向1幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本

12、并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下：請回答：(1)在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有_，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會出現(xiàn)_色環(huán)帶。(2)下列對尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是_滅菌。A高壓蒸汽 B紫外燈照射C70%酒精浸泡 D過濾(3)步驟X表示_。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液_到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得_菌落。(4)在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在_中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致_。(5)臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的_分解為NH3和14CO2。答案(1)脲酶紅(2)D(3)接種涂布

13、單(4)恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落(5)尿素解析(1)幽門螺桿菌(Hp)含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會分解，對尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過濾。(3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基滅菌、倒平板接種培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上即可。(4)微生物培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無法形成單菌落。(5)幽門螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2，

14、故臨床上常用14C呼氣試驗檢測人體內(nèi)幽門螺桿菌的存在。2(2014·新課標(biāo)，39改編)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用涂布分離法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用劃線分離法分離水樣中的細(xì)菌。操作時，接種環(huán)通過_滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一

15、次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。 (3)示意圖A和B中，_表示的是用涂布分離法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)的利用率。答案(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)解析(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。0.1 mL稀釋液中平均

16、有(393837)/338個活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1380，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×1003.8×104，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.8×104×1 0003.8×107。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到迅速徹底滅菌的目的。在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性，是用劃線分離法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布，是用涂布分離法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)

17、果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高了營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。3(2011·新課標(biāo)，39)有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}：(1)在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_和_。(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力_。(4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)

18、過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無菌技術(shù)要求實驗操作應(yīng)在酒精燈_附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。答案(1)原油選擇(2)劃線分離法涂布分離法(3)強(qiáng)(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰解析(1)可以將所需要的微生物從混雜的微生物群中分離出來的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。欲篩選出能降解原油的菌株，則培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無其他碳源，這樣不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，能降解原油的細(xì)菌才能在只含原油這一碳源的培養(yǎng)基上生存。(2)分離純化菌種時，接種的方法有劃線分離法和涂布分離法，其目的都是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單菌落，以便于純化菌種。(3)降解

19、原油能力越強(qiáng)的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大。(4)實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌(如接種環(huán))、干熱滅菌(如培養(yǎng)皿)和高壓蒸汽滅菌(如培養(yǎng)基)等。無菌技術(shù)要求整個實驗操作都要在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍微生物的污染。練出高分1請回答關(guān)于微生物利用的問題：(1)人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需要，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)物質(zhì)稱培養(yǎng)基。培養(yǎng)基之所以有_、_和半固體培養(yǎng)基等三種，主要是培養(yǎng)基中所加的_含量不同。(2)微生物個體是肉眼看不見的，但固體培養(yǎng)基上的微生物的_是可見的，該結(jié)構(gòu)的特征常常是鑒定菌種的主要依據(jù)之一。(3)培養(yǎng)微生物的操作必須實行無菌操作，以防止_的入侵等作用。無菌操作主要包

20、括_和滅菌；前者不能殺死芽孢和孢子，后者能殺死芽孢和孢子。(4)微生物接種的方法很多，最常用的是_和_。答案(1)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基瓊脂(凝固劑)(2)菌落(3)外來雜菌消毒(4)劃線分離法涂布分離法2在做大腸桿菌的培養(yǎng)和分離的實驗前，所用的三角瓶口或試管口都要先塞上棉塞，理由是_，再經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能使用。制作合格的棉塞的標(biāo)準(zhǔn)是_。在配制培養(yǎng)基時，除考慮無菌外，一般要測_，大腸桿菌要求在_的環(huán)境下培養(yǎng)。配制LB固體培養(yǎng)基時，應(yīng)在_的培養(yǎng)基中，加入_。將上述培養(yǎng)基分別加到三角瓶、試管或培養(yǎng)皿中時，應(yīng)用_，并注意_，否則_。制作斜面培養(yǎng)基時，其斜面長度應(yīng)不超過試管長度的_為宜。答案可以提供優(yōu)良

21、通氣條件，又可以防止雜菌污染放入三角瓶或試管口中后，周圍沒有折皺和縫隙，很容易拔出pH中性偏堿LB液體培養(yǎng)基瓊脂三角漏斗壁上不能沾有培養(yǎng)基容易發(fā)生污染1/23回答有關(guān)“大腸桿菌的培養(yǎng)和分離”的問題：(1)大腸桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)需要用LB液體培養(yǎng)基50 mL，其配方為：蛋白胨0.5 g、酵母提取物0.25 g、氯化鈉0.5 g、無菌水50 mL。培養(yǎng)基中加入一定量的氯化鈉，目的是_。(2)在制備培養(yǎng)基時，有時還需要調(diào)節(jié)酸堿度，這一步操作應(yīng)該在滅菌_(填“前”或“后”)。(3)用劃線法在LB固體平面培養(yǎng)基上分離大腸桿菌，當(dāng)接種完成后，蓋好培養(yǎng)皿蓋，將培養(yǎng)皿_，放在37 恒溫箱中培養(yǎng)1224 h，當(dāng)看到

22、劃線末端出現(xiàn)_時，表明細(xì)菌已被分離。(4)如果分離的是轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌，如何保證不被普通的大腸桿菌所污染？_。答案(1)維持一定的滲透壓(2)前(3)倒置不連續(xù)的單個菌落(4)分離時用含抗生素(如氨芐青霉素)的培養(yǎng)基4下表中給出某培養(yǎng)基的配方。請回答牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂H2O0.5 g1 g0.5 g2 g100 mL(1)蛋白胨能提供的營養(yǎng)素有_等。瓊脂的作用是_。(2)在各種成分溶化分裝前，必須進(jìn)行的重要步驟是_。(3)此培養(yǎng)基一般不適用于工業(yè)生產(chǎn)，工業(yè)生產(chǎn)常用_培養(yǎng)基。(4)此培養(yǎng)基能培養(yǎng)的細(xì)菌的同化作用類型是_。(5)若用此培養(yǎng)基純化大腸桿菌，最常用的方法是_和_。答案(1)碳源、

23、氮源、生長因子使培養(yǎng)基凝固(2)調(diào)節(jié)pH(3)液體(4)異養(yǎng)型(5)劃線分離法涂布分離法5微生物與我們的生活和健康有著密切的聯(lián)系，請回答下列問題：(1)實驗室常用的滅菌方法為_，如果實驗器材不能遇水，則用_。(2)微生物的分離提純方法主要有_和_。(3)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基根據(jù)用途不同，物理性質(zhì)有所差異。擴(kuò)大培養(yǎng)一般用_培養(yǎng)基，分離菌種用_培養(yǎng)基。它們在物理性質(zhì)上的不同主要原因是_。(4)某些微生物能利用尿素是因為它們能合成分泌_。其分解尿素的方程式為：_。答案(1)高壓蒸汽滅菌干熱滅菌(2)劃線分離法涂布分離法(3)液體固體是否含有瓊脂(4)脲酶(NH2)2C=OH2O2NH3CO26從土壤中

24、分離以尿素為氮源的細(xì)菌，實驗過程如圖所示：(1)圖中物質(zhì)A為_，若要統(tǒng)計每克土壤樣品中以尿素為氮源的細(xì)菌的活菌數(shù)目，宜采用_法接種到尿素培養(yǎng)基上，對照組配制的培養(yǎng)基為_培養(yǎng)基，若用同濃度的土壤稀釋液接種，實驗組培養(yǎng)皿中菌落數(shù)_(大于、等于或小于)對照組。在能利用尿素的細(xì)菌菌落周圍，有紅色環(huán)帶出現(xiàn)的原因是_。 (2)下列對尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是_滅菌。()A高壓蒸汽 B紫外燈照射C70%酒精浸泡 D過濾(3)下列培養(yǎng)基中，能分離出分解尿素的細(xì)菌的是()A葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水B葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水、尿素CNaCl、瓊脂糖、水、蛋白胨、酵

25、母提取物、尿素D葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物(4)欲將分離得到的以尿素為氮源的細(xì)菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，應(yīng)使用_培養(yǎng)基。答案(1)無菌水涂布分離LB全營養(yǎng)小于因為能利用尿素的細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶，將培養(yǎng)基中的尿素分解，產(chǎn)生的氨使指示劑呈紅色(2)D(3)B(4)LB液體7要獲得能夠分泌脲酶的細(xì)菌的菌種，某生物興趣小組的同學(xué)設(shè)計了以下培養(yǎng)和篩選的途徑：(1)獲得菌種：要獲得較多的能夠分泌脲酶的細(xì)菌，最好取525 cm處的淺層土樣，說明這類細(xì)菌的細(xì)胞呼吸方式為_，在生態(tài)系統(tǒng)中屬于_(成分)。(2)將土樣加入無菌水中配制成懸液，并配制如圖所示的培養(yǎng)基，其中尿素在培養(yǎng)基中必須

26、是作為保證微生物生長的唯一_。向培養(yǎng)基中添加尿素的方法是待其他成分滅菌冷卻后，加入尿素溶液，而該尿素溶液要事先用_過濾，使之無菌。從物理性質(zhì)看，該培養(yǎng)基屬于_。葡萄糖：0.05 gNaCl：0.24 gK2HPO4：0.24 g瓊脂糖：1.0 g酚紅：0.5 g水：30 mL尿素：20 mL(含2g脲)(3)利用酚酞指示劑可檢測出細(xì)菌是否能分泌脲酶，原理是脲酶能使_，結(jié)果菌落周圍培養(yǎng)基呈紅色。(4)為獲取能分泌脲酶的單菌落，必須將土壤樣液進(jìn)行稀釋，并取少量稀釋土壤液用_接種于培養(yǎng)基上，培養(yǎng)皿在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時必須倒置，原因是_。(5)用涂布分離法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106

27、的培養(yǎng)基中得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確的是()A涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是209B涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是255和210，取平均值233C涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是18、209和253，取平均值160D涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是2l5、245和255，取平均值238(6)若要分離土壤中的尿素分解菌，對于采集和處理土壤樣品，下列敘述錯誤的是()A最好選擇在肥沃濕潤、動物排泄物多的土壤中取樣B采集的土樣需經(jīng)高溫滅菌后，才可以用于制取土壤稀釋液C制備土壤稀釋液時，要用無菌水D用于制備土壤稀釋液的各種器具要經(jīng)過滅菌答案(1)需氧呼吸分解者(2)氮源G6玻璃漏斗固體培養(yǎng)基(3)培

28、養(yǎng)基中的尿素分解為NH3，使周圍的pH升高(4)涂布分離法防止冷凝后的水珠從皿蓋上落入培養(yǎng)基，造成污染(5)D(6)B8下表是某同學(xué)設(shè)計的三組培養(yǎng)基：組別培養(yǎng)基a礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、甘氨酸、水、瓊脂b葡萄糖、氨基酸、維生素、無機(jī)鹽、血清、水、瓊脂c牛肉膏、蛋白胨、水、氯化鈉、瓊脂(1)其中a組培養(yǎng)基可能用于培養(yǎng)_，但在分化階段必需添加有關(guān)的_。(2)用b組培養(yǎng)基可培養(yǎng)_，但不需要添加_。(3)用c組培養(yǎng)基可檢驗硬幣上是否有細(xì)菌，培養(yǎng)一段時間后，可在此固體平板培養(yǎng)基上形成很多不同的_，從中選擇不同的類型分別接種到固體培養(yǎng)基的試管斜面上，可用于分離細(xì)菌，這種方法叫_?？捎酶锾m氏染色的方法區(qū)分不同的細(xì)菌，用革蘭氏染液染色后，再