課題1菊花的組織培養(yǎng)（PPT31頁(yè))VIP

1、菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng) 植物的組織培養(yǎng)又叫植物的組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)離體培養(yǎng)，指植物的組織，指植物的組織、器官或細(xì)胞等在器官或細(xì)胞等在離體條件離體條件下，通過(guò)下，通過(guò)無(wú)菌無(wú)菌操作，操作，在在人工控制條件人工控制條件下（一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素、下（一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素、溫度等其他外界條件）進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的溫度等其他外界條件）進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株完整植株的技術(shù)。的技術(shù)。 一、一、植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的概念的概念概念：概念：原因：原因：（回想）植物組織培養(yǎng)原理：（回想）植物組織培養(yǎng)原理：植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性是指細(xì)胞的全能性是指已分化已分化的細(xì)胞具有的細(xì)胞具

2、有發(fā)育成完整個(gè)體的發(fā)育成完整個(gè)體的潛能潛能。生物體的每一個(gè)細(xì)胞生物體的每一個(gè)細(xì)胞都是都是由同一個(gè)受由同一個(gè)受精卵有絲分裂精卵有絲分裂而來(lái)，而來(lái)，都含有該物種所都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)特有的全套遺傳物質(zhì)1. 什么叫分化？（其實(shí)質(zhì)是什么什么叫分化？（其實(shí)質(zhì)是什么?）2. 什么是愈傷組織？愈傷組織的細(xì)胞有什么是愈傷組織？愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)？什么特點(diǎn)？3. 什么叫脫（去）分化、再分化？什么叫脫（去）分化、再分化？4. 如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化？如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化？ （閱讀（閱讀32-33頁(yè)解決下列問(wèn)題頁(yè)解決下列問(wèn)題）二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程基因的

3、選擇性表達(dá)基因的選擇性表達(dá) 愈傷組織愈傷組織二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程 離體器官、 組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 或胚狀體三、影響植物組織培養(yǎng)的因素：三、影響植物組織培養(yǎng)的因素：1、材料（外植體）的選取、材料（外植體）的選取（1）不同植物的組織培養(yǎng)難度不同）不同植物的組織培養(yǎng)難度不同 什么樣的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？什么樣的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？ （2）同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同）同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同 什么樣的組織容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？什么樣的組織容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？容易進(jìn)行無(wú)性生殖的植物，如煙草、胡蘿卜容易進(jìn)行無(wú)性生殖的植物，如煙草

4、、胡蘿卜幼齡、保存時(shí)間短的組織幼齡、保存時(shí)間短的組織菊花的組織培養(yǎng)一般選用何種材料？菊花的組織培養(yǎng)一般選用何種材料？未開(kāi)花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝未開(kāi)花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝2、營(yíng)養(yǎng)成分（培養(yǎng)基）、營(yíng)養(yǎng)成分（培養(yǎng)基）（1）植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基？）植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基？ MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基大量元素大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有機(jī)物有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等 （2）MS培養(yǎng)基的主要成分？培養(yǎng)基的主要成分？培養(yǎng)基中的各種成分的作用是什么？培養(yǎng)基中的各種成分的

5、作用是什么？大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞需要的各種無(wú)機(jī)大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞需要的各種無(wú)機(jī)鹽；蔗糖提供碳源的同時(shí)維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、鹽；蔗糖提供碳源的同時(shí)維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是滿足離體植物細(xì)胞的特殊營(yíng)養(yǎng)維生素等物質(zhì)主要是滿足離體植物細(xì)胞的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需求物質(zhì)需求課本課本33頁(yè)旁欄思考：頁(yè)旁欄思考：微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主，微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)3、植物激素、植物激素（1）關(guān)鍵激素是什么？）關(guān)鍵激素是什么？（2）兩種激素的使用順序不同，結(jié)果不同）兩種激素的使用順序不同，結(jié)果不同（3）兩種激素的用量比

6、不同，植物發(fā)育方向不同）兩種激素的用量比不同，植物發(fā)育方向不同4、pH、溫度、光照等、溫度、光照等 菊花組織培養(yǎng)的菊花組織培養(yǎng)的PH？溫度？光照？溫度？光照？植物組織培養(yǎng)的過(guò)程植物組織培養(yǎng)的過(guò)程離體的植物組織或細(xì)胞愈傷組織根和芽完整的植物體脫分化再分化制備制備MS固固體培養(yǎng)基體培養(yǎng)基外植體消毒外植體消毒 接種接種 培培 養(yǎng)養(yǎng)栽栽 培培四、實(shí)驗(yàn)操作四、實(shí)驗(yàn)操作 移移 栽栽流水流水沖洗沖洗無(wú)菌紙吸干無(wú)菌紙吸干70%酒精酒精無(wú)無(wú)菌水菌水沖洗沖洗無(wú)菌紙吸干無(wú)菌紙吸干0.1%氯化氯化汞汞無(wú)菌水無(wú)菌水沖洗至少三次之上沖洗至少三次之上（流水是為消毒嗎？能消毒的是什么？（流水是為消毒嗎？能消毒的是什么？無(wú)菌水

7、沖洗是為了干啥？）無(wú)菌水沖洗是為了干啥？）（哪（哪6步？）步？）1、配制各種母液、配制各種母液（大量元素、微量元素（大量元素、微量元素各濃縮多少倍？用量較小的有機(jī)物呢？）各濃縮多少倍？用量較小的有機(jī)物呢？）2、配制培養(yǎng)基、配制培養(yǎng)基（菊花組培是否添加植物激（菊花組培是否添加植物激素？）素？）3、滅菌、滅菌（哪種滅菌方法？）（哪種滅菌方法？）注意接種時(shí)的各種無(wú)菌操作。注意接種時(shí)的各種無(wú)菌操作。將菊花莖段插入培養(yǎng)基時(shí)特別應(yīng)注意什么？將菊花莖段插入培養(yǎng)基時(shí)特別應(yīng)注意什么？最好在哪兒培養(yǎng)？溫度？光照？定期消毒？最好在哪兒培養(yǎng)？溫度？光照？定期消毒？直接移栽到土壤中嗎？直接移栽到土壤中嗎？MS固體培養(yǎng)基

8、成分及比例固體培養(yǎng)基成分及比例蛭石珍珠巖1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無(wú)菌操作（酒精、酒精燈、接種的無(wú)菌操作（酒精、酒精燈灼燒）灼燒）4、無(wú)菌箱中的培養(yǎng)；、無(wú)菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間、移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間在整個(gè)操作過(guò)程中，是如何來(lái)實(shí)現(xiàn)在整個(gè)操作過(guò)程中，是如何來(lái)實(shí)現(xiàn)無(wú)菌無(wú)菌環(huán)境的？環(huán)境的？35頁(yè)旁欄思考：頁(yè)旁欄思考：至少做一組以上的重復(fù)。對(duì)照實(shí)驗(yàn)用一個(gè)不接至少做一組以上的重復(fù)。對(duì)照實(shí)驗(yàn)用一個(gè)不接種的空白培養(yǎng)基與接種的培養(yǎng)基一同培養(yǎng)，用種的空白培養(yǎng)基與接種的

9、培養(yǎng)基一同培養(yǎng)，用以說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格，沒(méi)有被雜菌污染。以說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格，沒(méi)有被雜菌污染。課題延伸（略）練習(xí)練習(xí)1.答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物抗性差，對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長(zhǎng)，如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)生長(zhǎng)，如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前物一旦受到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄，因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作。功盡棄，因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作。2.答：外植體的生理狀態(tài)是成

10、功進(jìn)行組織培養(yǎng)答：外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。菊菊花花的的組組織織培培養(yǎng)養(yǎng)再分化再分化材料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、材料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件外植體的消毒外植體的消毒接種接種基本原理基本原理:細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性基本過(guò)程基本過(guò)程:脫分化脫分化愈傷組織愈傷組織影響因素：影響因素：操作流程：操作流程：配制配制MS固體培固體培養(yǎng)基養(yǎng)基培養(yǎng)培養(yǎng)移栽移栽栽培栽培9、靜夜四無(wú)鄰，荒居舊業(yè)貧。22.4.1522.4.15Friday, April

11、15, 202210、雨中黃葉樹(shù)，燈下白頭人。7:20:177:20:177:204/15/2022 7:20:17 AM11、以我獨(dú)沈久，愧君相見(jiàn)頻。22.4.157:20:177:20Apr-2215-Apr-2212、故人江海別，幾度隔山川。7:20:177:20:177:20Friday, April 15, 202213、乍見(jiàn)翻疑夢(mèng)，相悲各問(wèn)年。22.4.1522.4.157:20:177:20:17April 15, 202214、他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國(guó)見(jiàn)青山。2022年4月15日星期五上午7時(shí)20分17秒7:20:1722.4.1515、比不了得就不比，得不到的就不要。2022年4月上

12、午7時(shí)20分22.4.157:20April 15, 202216、行動(dòng)出成果，工作出財(cái)富。2022年4月15日星期五7時(shí)20分17秒7:20:1715 April 202217、做前，能夠環(huán)視四周；做時(shí)，你只能或者最好沿著以腳為起點(diǎn)的射線向前。上午7時(shí)20分17秒上午7時(shí)20分7:20:1722.4.159、沒(méi)有失敗，只有暫時(shí)停止成功！。22.4.1522.4.15Friday, April 15, 202210、很多事情努力了未必有結(jié)果，但是不努力卻什么改變也沒(méi)有。7:20:177:20:177:204/15/2022 7:20:17 AM11、成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的積累。22

13、.4.157:20:177:20Apr-2215-Apr-2212、世間成事，不求其絕對(duì)圓滿，留一份不足，可得無(wú)限完美。7:20:177:20:177:20Friday, April 15, 202213、不知香積寺，數(shù)里入云峰。22.4.1522.4.157:20:177:20:17April 15, 202214、意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。2022年4月15日星期五上午7時(shí)20分17秒7:20:1722.4.1515、楚塞三湘接，荊門(mén)九派通。2022年4月上午7時(shí)20分22.4.157:20April 15, 202216、少年十五二十時(shí)，步行奪得胡馬騎。2022年4

14、月15日星期五7時(shí)20分17秒7:20:1715 April 202217、空山新雨后，天氣晚來(lái)秋。上午7時(shí)20分17秒上午7時(shí)20分7:20:1722.4.159、楊柳散和風(fēng)，青山澹吾慮。22.4.1522.4.15Friday, April 15, 202210、閱讀一切好書(shū)如同和過(guò)去最杰出的人談話。7:20:177:20:177:204/15/2022 7:20:17 AM11、越是沒(méi)有本領(lǐng)的就越加自命不凡。22.4.157:20:177:20Apr-2215-Apr-2212、越是無(wú)能的人，越喜歡挑剔別人的錯(cuò)兒。7:20:177:20:177:20Friday, April 15, 202213、知人者智，自知者明。勝人者有力，自勝者強(qiáng)。22.4.1522.4.157:20:177:20:17April 15, 202214、意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。2022年4月15日星期五上午7時(shí)20分17秒7:20:1722.4.1515、最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過(guò)于提升自我。2022年4月上午7時(shí)20分22.4.157:20April 15, 202216、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。2022年4月15日星期五7時(shí)20分17秒7:20:1715 April 202217、一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。