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1、熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供 包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù)從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過(guò)對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長(zhǎng)掃描范圍一般是190650nm ,發(fā)射波長(zhǎng)掃描范圍是200800nm ??捎糜谝后w、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描。熒光分光光度計(jì)具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、用樣量少、方法簡(jiǎn)便、工作曲線線形范圍寬等優(yōu)點(diǎn),可以廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)和藥理學(xué)、有機(jī)和無(wú)機(jī)化學(xué)等
2、領(lǐng)域?;窘Y(jié)構(gòu)與原理:由高壓汞燈或氤燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過(guò)濾過(guò)和反射后, 被光電倍增管所接受, 然后以圖或數(shù)字的形式顯示 出來(lái)。熒光分光光度計(jì)的工作原理:物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過(guò)程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光。不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級(jí)的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜;, 因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來(lái)定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。在溶液中,當(dāng)熒光物質(zhì)的
3、濃度較低時(shí),其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系 , 即 IF=KC, 利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析,與紫外-可見(jiàn)分光光度法類似,熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。熒光分光光度計(jì)基本結(jié)構(gòu)和原理圖(1) 光源:為高壓汞蒸氣燈或氤弧燈,后者能發(fā)射出強(qiáng)度較大的連續(xù)光譜,且在300nm -400nm 范圍內(nèi)強(qiáng)度幾乎相等,故較常用。(2) 激發(fā)單色器:置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或第一單色器,篩選出特定的激發(fā)光譜。(3) 發(fā)射單色器:置于樣品室和檢測(cè)器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器,常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。(4) 樣品室:通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(
4、粉末或片狀樣品)組成。測(cè)量液體時(shí),光源與檢測(cè)器成直角安排;測(cè)量固體時(shí),光源與檢測(cè)器成銳角安排。(5) 檢測(cè)器:一般用光電管或光電倍增管作檢測(cè)器??蓪⒐庑盘?hào)放大并轉(zhuǎn)為電信號(hào)。功能特點(diǎn)(1) 熒光發(fā)射光譜選擇某一固定波長(zhǎng)的光激發(fā)樣品,記錄樣品中產(chǎn)生的熒光發(fā)射強(qiáng)度與發(fā)射波長(zhǎng)間的函數(shù)關(guān)系,即得熒光發(fā)射光譜。(2) 熒光激發(fā)光譜選定某一熒光發(fā)射波長(zhǎng)記錄熒光發(fā)射強(qiáng)度作為激發(fā)光波長(zhǎng)的函數(shù),即得熒光激發(fā)光譜。(3) 時(shí)間分辨技術(shù);可用于對(duì)混合物中光譜重疊但有壽命差異的組分進(jìn)行分辨并分別測(cè)量。時(shí)間分辨熒光測(cè)定公式如下:P(t) = P0 EXP (-t /)式中 P(t) :擬合指數(shù)函數(shù)P0:強(qiáng)度取值EXP:指
5、數(shù)運(yùn)算符t:時(shí)間取值T:熒光平均時(shí)間壽命應(yīng)用:對(duì)經(jīng)光源激發(fā)后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)或經(jīng)化學(xué)處理后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)成份分析,可應(yīng)用于生 物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化工等部門(mén)。難免感嘆一生的碌碌無(wú)為,恨時(shí)光短暫,荒廢了最好的光陰。人過(guò)中年,不停跟時(shí)間妥協(xié),之所以不爭(zhēng)搶,處世淡然,完全是經(jīng)過(guò)世故的淬煉,達(dá)到心智的成熟。輩子時(shí)光在匆忙中流逝,誰(shuí)都無(wú)法挽留。多少人前半生忙忙碌碌,奔波追逐,后半生回望過(guò)去,有朋友問(wèn)我,怎樣寫(xiě)出滋潤(rùn)心靈的文字?是要查字典,引用名言,還是有什么規(guī)律?我笑著回,隨心隨意,不為難自己。你為難自己,就要刻意去效仿,你不隨心隨意就要被名利世俗困 擾,自然心態(tài)會(huì)有偏差,文字也染上了俗氣?,F(xiàn)實(shí)生活中,
6、不乏完美主義者,終日在不食人間煙火的意境中活著,虛擬不切合實(shí)際。如此,唯有活在當(dāng)下,才是真正的人生箋言。常常想,不想活在過(guò)去的人,是經(jīng)歷了太多的大起大 落,不想被束縛在心靈蝸居里的人,是失去的太多,一番大徹大悟后,對(duì)視的眼神定會(huì)愈發(fā)清澈,坦然笑對(duì)人生的雨雪冰霜。對(duì)于隨波逐流的人們,難免要被世俗困擾,不問(wèn)過(guò)去,不畏將來(lái)又將是怎么樣的一種糾葛,無(wú)從知曉。不得不說(shuō),人是活在矛盾中的。既要簡(jiǎn)單,又難淡然,掙扎在名利世俗中,一切身不由己,又有那樣的生活是我們自己想要的呢?人前,你笑臉相迎,帶著偽裝的面具,不敢輕易得罪人;人后,黯然傷懷,總感嘆命運(yùn)的不公平,人生的不如意;常常仰望別人的幸福,而忽視了自己,
7、卻不知你與他所想要的幸福,都 只得一二,十之八九只有在希冀中追求,不是嗎?人活一輩子,心懷夢(mèng)想,蒼涼追夢(mèng),難能可貴的是執(zhí)著向前,義無(wú)反顧,最懼怕瞻前顧后,退縮不前。一生短暫如光影交錯(cuò),有幾個(gè)人能放下?tīng)拷O,有幾個(gè)人能不難為自己,活的精彩呢!我們的一生,是匆忙的行走,誰(shuí)的人生,不是時(shí)刻在被命運(yùn)捉弄中前行。我想,我是無(wú)法和命運(yùn)抗衡的,卻又時(shí)刻想做真實(shí)的自己。眼下的生活是一面鏡子,對(duì)照著卑微的自己,心有萬(wàn) 千光芒,無(wú)法放棄的卻總是太多太多。中年,人生的分水嶺,不再有小女孩的浪漫情懷,撒嬌賣萌,穿著也越發(fā)簡(jiǎn)單,舒適即可。年輕時(shí)可以穿緊身裙,牛仔褲,甚至小一碼的高跟鞋,不惜磨破了腳板,夾痛了腳趾,依舊笑
8、魘如花,人前賣弄。年少時(shí),青春做硬碼,別人的一句贊美能心頭飄飄然,走在馬路上,陌生男子的回頭率,成了青春的資本,忘乎所以。年齡越大,對(duì)身邊的一切似乎沒(méi)了熱情,爭(zhēng)吵,攀比,打扮,都沒(méi)了興趣。有人說(shuō),女人要愛(ài)自己,打扮的漂漂亮亮的才行,而我卻恰恰相反,正如有一天涂了口紅出門(mén),兒子嚇了一跳, 一句太庸俗,再昂貴品牌的口紅你都不適合,讓我啞然失笑。原來(lái),他寧愿喜歡素面朝天的媽媽,也不想要矯揉造作的中年婦女,我必須保持最初的簡(jiǎn)潔,亦或簡(jiǎn)單。居家女人雖平庸,卻總想活出真我。不喜歡的東西,學(xué)會(huì)舍棄,生活趨于安靜。每天打理家務(wù),照顧子女,空閑的時(shí)間看看書(shū),散散步,陪婆婆去買(mǎi)菜,少一些功利心,多一些平常心, 生
9、活便達(dá)到了想要的簡(jiǎn)單。人過(guò)中年天過(guò)午,流逝的時(shí)間不會(huì)等我的。不想為難自己了,幾十年光陰里,不停做著事與愿違的選擇,極力說(shuō)服自己,多替別人想想,多顧及別人的感受,卻忽視了委屈的自己。我承認(rèn),給自己負(fù)擔(dān),就是難為自己。不愿意放下,就是心態(tài)使然。其實(shí),你大可不必為了別人改變自己,為自己活著,才是真理。從今天起,不愿意迎合的人,選擇放手;卑鄙下流, 虛情假意的損友,拒絕交往,只要隨心隨意,什么都不是難題。要明白,他們走近你的世界,只想利用你,卻從不顧及你的感受,既保持若即若離,又想無(wú)償索求,時(shí)刻為難著你,美其名日 這是一份難得的緣一輩子時(shí)光在匆忙中流逝,誰(shuí)都無(wú)法挽留。多少人前半生忙忙碌碌,奔波追逐,后
10、半生回望過(guò)去,難免感嘆一生的碌碌無(wú)為,恨時(shí)光短暫,荒廢了最好的光陰。人過(guò)中年,不停跟時(shí)間妥協(xié),之所以不爭(zhēng)搶,處世淡然,完全是經(jīng)過(guò)世故的淬煉,達(dá)到心智的成熟。有朋友問(wèn)我,怎樣寫(xiě)出滋潤(rùn)心靈的文字?是要查字典,引用名言,還是有什么規(guī)律?我笑著回,隨心隨意,不為難自己。你為難自己,就要刻意去效仿,你不隨心隨意就要被名利世俗困擾,自然心態(tài)會(huì)有偏差,文字也染上了俗氣?,F(xiàn)實(shí)生活中,不乏完美主義者,終日在不食人間煙火的意境中活著,虛擬不切合實(shí)際。如此,唯有活在當(dāng)下,才是真正的人生箋言。常常想,不想活在過(guò)去的人,是經(jīng)歷了太多的大起大 落,不想被束縛在心靈蝸居里的人,是失去的太多,一番大徹大悟后,對(duì)視的眼神定會(huì)愈
11、發(fā)清澈,坦然笑對(duì)人生的雨雪冰霜。對(duì)于隨波逐流的人們,難免要被世俗困擾,不問(wèn)過(guò)去,不畏將來(lái)又將是怎么樣的一種糾葛,無(wú)從知曉。不得不說(shuō),人是活在矛盾中的。既要簡(jiǎn)單,又難淡然,掙扎在名利世俗中,一切身不由己,又有那樣的生活是我們自己想要的呢?人前,你笑臉相迎,帶著偽裝的面具,不敢輕易得罪人;人后,黯然傷懷,總感嘆命運(yùn)的不公平,人生的不如意;常常仰望別人的幸福,而忽視了自己,卻不知你與他所想要的幸福,都 只得一二,十之八九只有在希冀中追求,不是嗎?人活一輩子,心懷夢(mèng)想,蒼涼追夢(mèng),難能可貴的是執(zhí)著向前,義無(wú)反顧,最懼怕瞻前顧后,退縮不前。一生短暫如光影交錯(cuò),有幾個(gè)人能放下?tīng)拷O,有幾個(gè)人能不難為自己,活的
12、精彩呢!我們的一生,是匆忙的行走,誰(shuí)的人生,不是時(shí)刻在被命運(yùn)捉弄中前行。我想,我是無(wú)法和命運(yùn)抗衡的,卻又時(shí)刻想做真實(shí)的自己。眼下的生活是一面鏡子,對(duì)照著卑微的自己,心有萬(wàn) 千光芒,無(wú)法放棄的卻總是太多太多。中年,人生的分水嶺,不再有小女孩的浪漫情懷,撒嬌賣萌,穿著也越發(fā)簡(jiǎn)單,舒適即可。年輕時(shí)可以穿緊身裙,牛仔褲,甚至小一碼的高跟鞋,不惜磨破了腳板,夾痛了腳趾,依舊笑 魘如花,人前賣弄。年少時(shí),青春做硬碼,別人的一句贊美能心頭飄飄然,走在馬路上,陌生男子的回頭率,成了青春的資本,忘乎所以。年齡越大,對(duì)身邊的一切似乎沒(méi)了熱情,爭(zhēng)吵,攀比,打扮,都沒(méi)了興趣。有人說(shuō),女人要愛(ài)自己,打扮的漂漂亮亮的才行,而我卻恰恰相反,正如有一天涂了口紅出門(mén),兒子嚇了一跳, 一句太庸俗,再昂貴品牌的口紅你都不適合,讓我啞然失笑。原來(lái),他寧愿喜歡素面朝天的媽媽,也不想要矯揉造作的中年婦女,我必須保持最初的簡(jiǎn)潔,亦或簡(jiǎn)單。居家女人雖平庸,卻總想活出真我。不喜歡的東西,學(xué)會(huì)舍棄,生活趨于安靜。每天打理家務(wù),照顧子女,空閑的時(shí)間看看書(shū),散散步,陪婆婆去買(mǎi)菜,少一些功利心,多一些平常心, 生活便達(dá)到了想要的簡(jiǎn)單。人過(guò)中年天過(guò)午,流逝的時(shí)間不會(huì)等我的。不想為難自己了,幾十年光陰里,不停做著事與愿違的選擇,極力說(shuō)服自
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