食品質(zhì)量安全檢測新技術(shù)

1、目錄目錄1 緒論2 樣品預(yù)處理新技術(shù)3 儀器檢測技術(shù)4 免疫分析檢測技術(shù)5 分子生物學檢測技術(shù)1緒論緒論n1.1食品質(zhì)量安全檢測概況n1.1.1重大意義n是食品科學技術(shù)和文化水平的綜合反映；是企業(yè)生存、發(fā)展的關(guān)鍵；是消費者日常生活質(zhì)量的保障；是進入市場的通行證。n1.1.2常用標準n按標準級別分：世界范圍通用標準，國外先進標準；n按標準化性質(zhì)分：技術(shù)標準，管理標準；n中國標準：國家標準，行業(yè)標準，地方標準，企業(yè)標準。1緒論緒論n1.2食品質(zhì)量安全檢測技術(shù)種類n傳統(tǒng)檢測技術(shù)傳統(tǒng)檢測技術(shù)：n感官檢測、物理檢測、化學檢測感官檢測、物理檢測、化學檢測n新技術(shù)：新技術(shù)：n色譜法、光譜法、免疫法、分子生物

2、學方法、色譜法、光譜法、免疫法、分子生物學方法、生物傳感器和生物芯片等。生物傳感器和生物芯片等。1緒論n1.3食品質(zhì)量安全發(fā)展趨勢n對食品安全檢測方法的速度要求越來越高n對食品安全檢測方法的靈敏度要求越來越高n檢測方法的特異性要求越來越高n一次實驗同時分析多種污染物n檢測方法的操作更為簡便和容易掌握n檢測方法的“無試劑化”以及分析儀器的微型化和便攜化n液液萃取n固相萃取技術(shù)(SPE)n固相微萃取技術(shù)(SPME)n液相微萃取技術(shù)（LPME）n快速溶劑萃取技術(shù)(ASE)n基質(zhì)固相分散萃取技術(shù)(MSPDE)n超臨界流體萃取技術(shù)(SFE)n亞臨界水萃取技術(shù)（SWE） 2樣品前處理新技術(shù)樣品前處理新技術(shù)

3、3 儀器檢測技術(shù)儀器檢測技術(shù)n3.1色譜法色譜法：n分為氣相色譜和液相色譜n3.2色譜色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法：質(zhì)譜聯(lián)用法：n氣相色譜氣相色譜質(zhì)譜質(zhì)譜 ；氣相色譜；氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜；高效液相色串聯(lián)質(zhì)譜；高效液相色譜譜質(zhì)譜；高效液相色譜質(zhì)譜；高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜；毛細管電泳串聯(lián)質(zhì)譜；毛細管電泳質(zhì)譜；質(zhì)譜；n3.3痕量無機鹽定量：痕量無機鹽定量：原子發(fā)射光譜（原子發(fā)射光譜（AES）原子吸收光譜（）原子吸收光譜（AAS）電感耦合等）電感耦合等離子體質(zhì)譜離子體質(zhì)譜(ICP-MS）儀器檢測技術(shù)儀器檢測技術(shù)痕量無機物定量痕量無機物定量電感耦合等離子體質(zhì)譜電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS）原子發(fā)射光譜（原子發(fā)射光

4、譜（AES）原子吸收光譜（原子吸收光譜（AAS）毛細管電泳毛細管電泳質(zhì)譜（質(zhì)譜（CE-MS）氣相色譜氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜串聯(lián)質(zhì)譜 (GC-MS/MS)色譜色譜質(zhì)譜聯(lián)用質(zhì)譜聯(lián)用高效液相色譜高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）高效液相色譜高效液相色譜質(zhì)譜（質(zhì)譜（LC-MS）氣相色譜氣相色譜質(zhì)譜質(zhì)譜 （GC-MS）色譜色譜液相色譜液相色譜氣相色譜氣相色譜高選擇性 分離單組份定性定量 高效能高靈敏度 檢出限量低至10-1l g的物質(zhì)，適于微量和痕量分析。氣相色譜分析氣相色譜分析系統(tǒng)構(gòu)成 氣路系統(tǒng)，進樣系統(tǒng)，分離系統(tǒng)，檢測系統(tǒng)工作原理 樣品高溫瞬間汽化-色譜柱分離-檢測適用 易揮發(fā)的小分子有機

5、物 難揮發(fā)性成分經(jīng)衍生化檢測氣相色譜在食品安全檢測中的應(yīng)用氣相色譜在食品安全檢測中的應(yīng)用n反式脂肪酸的檢測（衍生，F(xiàn)ID)n苯，氯苯，氯酚類（直接進樣， FID）n有機氯農(nóng)藥（ECD)n有機磷農(nóng)藥（FPD)原理：原理：氣相色譜分離與質(zhì)譜定性定量結(jié)合氣相色譜分離與質(zhì)譜定性定量結(jié)合應(yīng)用：應(yīng)用：1. 對食品中殘留物進行分析 MS是一個通用型檢測器，對大多數(shù)有機化合物都有比較好的響應(yīng)，根據(jù)特征離子強度定量多種成分的同時分析多種成分的同時分析- -殘留分析的趨勢之一殘留分析的趨勢之一 適合大批量農(nóng)殘檢測。適合大批量農(nóng)殘檢測。2. 對未知物分析 準確測定未知組分的相對分子質(zhì)量。 高效液相色譜儀的應(yīng)用高效液

6、相色譜儀的應(yīng)用 分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。n蘇丹紅n三聚氰胺n合成色素n生物毒素n敵敵畏n雙酚A 適用于高沸點、大分子、 強極性和熱穩(wěn)定性差的化 合物的分析。適于復(fù)雜基質(zhì)樣品,特別是食品，生物樣品中的農(nóng)獸藥殘留的定性定量分析。利于多組分分析。 上世紀80年代初建立的一種將等離子體與四級質(zhì)譜儀相連接的分析儀器。 電感磁場與氦氣作用產(chǎn)生高達7000K的高溫等離子體, 基本上能使所有元素電離成單電荷的離子, 然后進入質(zhì)譜儀, 定性和定量檢測各種一定質(zhì)荷比的離子n靈敏度高，一般檢出限可達ppb級n線性范圍寬, 一般濃度范圍跨越五個數(shù)量級n選擇性高, 元素之間測

7、定相互干擾少n操作快速, 并能進行多元素分析n有同位素信息n在一定質(zhì)量數(shù)范圍內(nèi), 儀器能提供穩(wěn)定均勻的響應(yīng)。電感耦合等離子體質(zhì)譜電感耦合等離子體質(zhì)譜主要特點應(yīng)用 ICP-MS 已廣泛應(yīng)用于生物樣品、環(huán)境樣品、藥物樣品、食品樣品和稀土元素等方面的分析研究 利用ICP-MS 測定飼料中的銅、鋅、鐵、錳、鉻、鎘、鉛、砷和硒等微量元素，回收率在86%115%，檢出限達到10 - 9 級。 基于抗原、抗體的特異性識別和結(jié)合反應(yīng)的分析方法，通過對抗原或抗體進行標記(酶、熒光物質(zhì)、放射性同位素標記等)，利用標記物的信號放大作用,與現(xiàn)代測試技術(shù)相結(jié)合，對樣品中特定的目標物進行定性定量檢測。方法建立：半抗原合成

8、 人工抗原合成 抗體制備 方法建立 樣本前處理方法 方法評價 特異性強、靈敏度高 方便快捷、分析容量大、檢測成本低 可提供系列化的產(chǎn)品以及技術(shù)，產(chǎn)品可以商業(yè)化。免疫分析檢測技術(shù)免疫分析檢測技術(shù)酶聯(lián)免疫分析酶聯(lián)免疫分析熒光免疫分析免疫傳感器免疫傳感器膜載體免疫分析膜載體免疫分析仿生免疫分析流動注射免疫分析免疫-PCR技術(shù)蛋白質(zhì)芯片技術(shù)蛋白質(zhì)芯片技術(shù)放射免疫分析傳統(tǒng)免疫分析技術(shù)傳統(tǒng)免疫分析技術(shù) 抗原抗體特異識別反應(yīng)與酶的催化放大作用相結(jié)合，酶的相應(yīng)底物呈顏色反應(yīng)，顏色深淺與待測標本含量成比例，標準曲線定量。 試紙條n定性檢測技術(shù)，其特點是以微孔膜作為固相載體。標記物可用酶或各種有色微粒子，定性地判

9、別出樣品是否含有某種有害物，含量是否超過規(guī)定標準。 試紙條技術(shù)試紙條技術(shù)酶標記免疫檢測：以酶作為示蹤標記物膠體金標記免疫檢測：以膠體金作為示蹤標記物 將高靈敏的傳感器技術(shù)與特異性免疫反應(yīng)相結(jié)合的一種新型生物傳感器。n利用生物活性物質(zhì)（如酶、抗原、抗體、細胞、組織等） 或分子印跡聚合物作為傳感器的識別元件n識別元件與樣品中的待測物質(zhì)發(fā)生特異性反應(yīng),通過適當 的換能器將這些反應(yīng)(形成復(fù)合物、發(fā)色、發(fā)光等)轉(zhuǎn)換成 可以輸出檢測的信號(電壓、頻率等)n特點：選擇性及抗干擾能力強、響應(yīng)快實時監(jiān)測到表面的抗原、抗體反應(yīng)n將捕獲配基密集點陣于某一介質(zhì)載體上即形成所謂的探針, 利用配基與待檢測樣品中目標分子的

10、特異性結(jié)合, 再通過 各種檢測設(shè)備對實驗結(jié)果進行定性或定量分析。n主要應(yīng)用：食品中真菌毒素的檢測食品中抗生素殘留的檢測食品中農(nóng)藥殘留的檢測食品中病原微生物的檢測4免疫分析檢測技術(shù)免疫分析檢測技術(shù)應(yīng)用：農(nóng)藥：有機磷、擬除蟲菊酯類、有機氯類、氨基甲酸酯類獸藥類生物毒素致病菌。5分子生物學檢測技術(shù)分子生物學檢測技術(shù)n5.1 PCR檢測方法檢測方法n定義定義：PCR即聚合酶連反應(yīng)的簡稱，是在體外模擬DNA復(fù)制的過程，在體外合適的條件下以單鏈DNA為模板，以人工設(shè)計和合成的寡核苷酸為引物，利用熱穩(wěn)定的DNA聚合酶延53方向摻入單核苷酸來特異性地擴增DNA片段的技術(shù)nPCR種類：種類：多重PCR，免疫PC

11、R，PCR-SSCP分析技術(shù)，實時熒光定量PCR，反轉(zhuǎn)錄PCR，不對稱PCR,反向PCR等。nPCR檢測在食品中應(yīng)用檢測在食品中應(yīng)用n檢測產(chǎn)單核細胞李斯特菌n檢測金黃色葡萄球菌n檢測沙門氏菌n檢測出致瀉性大腸桿菌5.1 PCR檢測方法檢測方法5.2基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)n基因芯片的分析步驟基因芯片的分析步驟：n樣品活化、靶DNA選擇、PCR擴增、玻片活化、芯片制備、雜交、洗滌、掃描玻片和數(shù)據(jù)處理。5.2基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)n在食品檢測中的應(yīng)用在食品檢測中的應(yīng)用：n用于食源性致病微生物的檢測、n用于轉(zhuǎn)基因食品的檢測n用于食品營養(yǎng)成分的檢測5.3生物傳感器生物傳感器n生物傳感器一般由兩個主要成分組成：生物傳感器一般由兩個主要成分組成：一是一是生物分子識別元件（感受器），生物分子識別元件（感受器），是具有分子識別能力的是具有分子識別能力的生活活性物質(zhì)（如酶、抗體、組織切片、細胞、細胞器、生活活性物質(zhì)（如酶、抗體、組織切片、細胞、細胞器、細胞膜、核酸、有機分子等）細胞膜、核酸、有機分子等）二是二是信號轉(zhuǎn)換器