銨態(tài)氮測(cè)量方法

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上銨態(tài)氮測(cè)量方法（2molL-1KCl浸提靛酚藍(lán)比色法）1）方法原理2molL-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來。土壤浸提液中的銨態(tài)氮在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，溶液的顏色很穩(wěn)定。在含氮0.050.5molL-1的范圍內(nèi)，吸光度與銨態(tài)氮含量成正比，可用比色法測(cè)定。2）試劑（1）2molL-1KCl溶液  稱取149.1g氯化鉀（KCl，化學(xué)純）溶于水中，稀釋至1L。（2）苯酚溶液  稱取苯酚（C6H5OH，化學(xué)純）10g和硝基鐵氰化鈉Na2Fe(CN)5NO2

2、H2O100mg稀釋至1L。此試劑不穩(wěn)定，須貯于棕色瓶中，在4冰箱中保存。（3）次氯酸鈉堿性溶液  稱取氫氧化鈉（化學(xué)純）10g、磷酸氫二鈉（Na2HPO47H2O, 化學(xué)純）7.06g、磷酸鈉（Na3PO412H2O, 化學(xué)純）31.8g和 52.5gL-1次氯酸鈉(NaOCl，化學(xué)純，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL溶于水中，稀釋至1L，貯于棕色瓶中，在4冰箱中保存。（4）掩蔽劑  將400gL-1的酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O64H2O, 化學(xué)純）與100gL-1的EDTA二鈉鹽溶液等體積混合。每100mL混合液中加入10 molL-1氫氧化鈉

3、0.5mL。（5）2.5µgmL 1銨態(tài)氮（NH4+N）標(biāo)準(zhǔn)溶液  稱取干燥的硫酸銨(NH4)2SO4，分析純0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制備成含銨態(tài)氮（N）100µgmL 1的貯存溶液；使用前將其加水稀釋40倍，即配制成含銨態(tài)氮（N）2.5µgmL 1的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。3）儀器與設(shè)備：往復(fù)式振蕩機(jī)、分光光度計(jì)。4）分析步驟（1）浸提  稱取相當(dāng)于10.00g干土的新鮮土樣（若是風(fēng)干土，過10號(hào)篩）準(zhǔn)確到0.01g，置于150mL三角瓶中，加入氯化鉀溶液100mL，塞緊塞子，在振蕩機(jī)上振蕩1h。取出靜置，待

4、土壤氯化鉀懸濁液澄清后，吸取一定量上層清液進(jìn)行分析。如果不能在24h內(nèi)進(jìn)行，用濾紙過濾懸濁液，將濾液儲(chǔ)存在冰箱中備用。（2）比色  吸取土壤浸出液5mL(含NH4+N2µg25µg)放入50mL容量瓶中，用氯化鉀溶液補(bǔ)充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸鈉堿性溶液5mL，搖勻。在20左右的室溫下放置1h后（注1），加掩蔽劑1mL以溶解可能產(chǎn)生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用1cm比色槽在625nm波長處（或紅色濾光片）進(jìn)行比色，讀取吸光度。（3）工作曲線 分別吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL NH4+N標(biāo)準(zhǔn)液于

5、50mL容量瓶中，各加10mL氯化鈉溶液，同（2）步驟進(jìn)行比色測(cè)定。5）結(jié)果計(jì)算土壤中NH4+（N）含量（mgkg-1）=  式中：顯色液銨態(tài)氮的質(zhì)量濃度(µgmL 1)；     V顯色液的體積(mL)；     ts分取倍數(shù)；     m樣品質(zhì)量（g）。6）注釋注1. 顯色后在20左右放置1h,再加入掩蔽劑.過早加入會(huì)使顯色反應(yīng)很慢,藍(lán)色偏弱;加入過晚,則生成的氫氧化物沉淀可能老化而不易溶解.硝態(tài)氮測(cè)定方法（雙波長紫外分光光度法）實(shí)驗(yàn)原理：利

6、用硝酸根離子在220 nm處有較強(qiáng)的紫外吸收這一特性,定量分析了土壤浸提液中的NO3 -. 溶解的有機(jī)物在210 nm和275 nm處均有吸收,而NO3 -在275 nm處沒有吸收,因此在275 nm波長處做另一測(cè)量,以校正硝酸鹽值. 最低檢出濃度0.004 mg/ kg ,測(cè)定上限為4.000 mg/ kg ,適合高濃度土樣浸提液的高倍稀釋.試劑：CaSO4 (分析純) , 量濃度為1 mol/ L的鹽酸(優(yōu)級(jí)純) 溶液, 質(zhì)量濃度為100g/ mL的硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液, 質(zhì)量濃度為25g/ mL的硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液.實(shí)驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別取硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用液0.0 ,0.5 ,1.0

7、 ,2.0 ,3.0 ,4.0g/ mL 置于50 mL 比色管中, 各管中加入1.0 mL 1 mol的鹽酸溶液,搖勻,用紫外分光光度計(jì)在210 nm和275 nm處,用1 cm石英比色皿測(cè)定吸光度. 以A= A210-kA275的計(jì)算方法求得校正吸光度. （系數(shù)k的確定方法分別準(zhǔn)確移取10g/ mL 硝酸鹽氮使用液2.00mL 、土壤浸提液2.00 mL 置于各自的50 mL 比色管中, 用二次蒸餾水定容, 搖勻, 用1 cm 的石英比色皿,以二次蒸餾水作參比, 在紫外- 可見分光光度計(jì)上測(cè)定吸光值。土壤樣品、硝酸鹽氮在210 nm 處有最大吸收, 在275 nm 處吸收較弱,選取210 nm、275 nm 為測(cè)量波長和參比波長測(cè)定土壤中硝態(tài)氮,根據(jù)A210 - KA275 =0 的公式進(jìn)行計(jì)算, 求得K的平均值。土壤樣品測(cè)定：稱取10.00 g新鮮土樣,分別置于150 mL具塞三角瓶,在三角瓶內(nèi)加0.2gCaSO4 ,加100 mL二次蒸餾水,于振蕩器上振蕩15 min ,放置30 min后,傾出上清液,用中速或慢速無氮定量濾紙過濾. 吸取濾液50.00 mL (視NO3 - N 的濃度而定) 置于50 mL比色管中, 用水準(zhǔn)確稀釋至刻度, 加1.0 mL 1 mol的鹽酸溶液, 測(cè)量吸光度. 結(jié)果計(jì)算:c =c0*V總*D*1000/M*103式中: c 為N