第3章碳水化合物的測(cè)定課件

1、l農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)產(chǎn)品中的碳水化合物碳水化合物通常包括通常包括糖分，淀粉糖分，淀粉，纖維素，半，纖維素，半纖維素以及果膠等。它們均為衡量農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)常須分析的纖維素以及果膠等。它們均為衡量農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)常須分析的重要項(xiàng)目。重要項(xiàng)目。l農(nóng)產(chǎn)品中的主要糖分有農(nóng)產(chǎn)品中的主要糖分有單糖單糖（葡萄糖和果糖）和（葡萄糖和果糖）和雙糖雙糖（蔗（蔗糖）。它們都溶于水也溶于酒精，通稱(chēng)水溶性糖或可溶性糖）。它們都溶于水也溶于酒精，通稱(chēng)水溶性糖或可溶性糖。糖。l單糖具有單糖具有還原還原的特性，稱(chēng)還原糖。的特性，稱(chēng)還原糖。l蔗糖不具還原性，稱(chēng)非還原糖。但蔗糖經(jīng)水解為單糖后又蔗糖不具還原性，稱(chēng)非還原糖。但蔗糖經(jīng)水解為單糖后又具有

2、還原性。具有還原性。l糖的還原性質(zhì)與測(cè)定方法有密切關(guān)系，糖的還原性質(zhì)與測(cè)定方法有密切關(guān)系，大多的測(cè)定方法是大多的測(cè)定方法是依據(jù)這一還原性質(zhì)來(lái)定量它的含量的依據(jù)這一還原性質(zhì)來(lái)定量它的含量的。 l植物體中的植物體中的糖分糖分含量依作物種類(lèi)，品種特性及生育時(shí)期變化含量依作物種類(lèi)，品種特性及生育時(shí)期變化很大。受環(huán)境條件：氣溫，光照，雨水，施肥等影響。很大。受環(huán)境條件：氣溫，光照，雨水，施肥等影響。l另外，作物在貯藏過(guò)程中，糖分不斷變化：開(kāi)始時(shí)由于多糖另外，作物在貯藏過(guò)程中，糖分不斷變化：開(kāi)始時(shí)由于多糖的水解而糖分含量增加，而后期又因呼吸作用的消耗使糖分的水解而糖分含量增加，而后期又因呼吸作用的消耗使糖

3、分減少。減少。l因此，分析意義可分為三種：因此，分析意義可分為三種：1. 植株中少量可溶性糖的測(cè)定，以研究植物不同生育時(shí)期體內(nèi)植株中少量可溶性糖的測(cè)定，以研究植物不同生育時(shí)期體內(nèi)碳、氮代謝的分配狀況，作物的生長(zhǎng)發(fā)育狀況；碳、氮代謝的分配狀況，作物的生長(zhǎng)發(fā)育狀況；2. 農(nóng)產(chǎn)品水果、蔬菜中的糖分含量測(cè)定，以了解其品質(zhì)并評(píng)價(jià)農(nóng)產(chǎn)品水果、蔬菜中的糖分含量測(cè)定，以了解其品質(zhì)并評(píng)價(jià)耕作栽培措施、貯藏條件的合理性；耕作栽培措施、貯藏條件的合理性；3. 糖的作用如甘蔗、甜菜中的糖分測(cè)定，為是否適合加工和評(píng)糖的作用如甘蔗、甜菜中的糖分測(cè)定，為是否適合加工和評(píng)價(jià)加工條件的優(yōu)劣提供參考數(shù)據(jù)。價(jià)加工條件的優(yōu)劣提供參考

4、數(shù)據(jù)。l淀粉作為植物的貯藏物質(zhì)淀粉作為植物的貯藏物質(zhì)，大量地存在于禾本科種子，大量地存在于禾本科種子和薯類(lèi)作物塊根塊莖中，例如禾本科種子中淀粉含量和薯類(lèi)作物塊根塊莖中，例如禾本科種子中淀粉含量可達(dá)干重的可達(dá)干重的50%-80%，塊根，塊莖中達(dá)鮮重的，塊根，塊莖中達(dá)鮮重的20%-30%。作物作物淀粉淀粉%作物作物淀粉淀粉%水稻水稻7580小麥小麥48.670.2玉米玉米58.2 68.3大麥大麥43.668.3大豆大豆2 9黑麥黑麥55.2 62.1豌豆豌豆20.0 48.0燕麥燕麥31.5 61.6馬鈴薯馬鈴薯10 23l 淀粉分析的意義淀粉分析的意義：1. 作為食品及家禽飼料的主要成分、食品

5、加工及輕作為食品及家禽飼料的主要成分、食品加工及輕工業(yè)的重要原料之一，其含量的高低決定了其的工業(yè)的重要原料之一，其含量的高低決定了其的加工可能和價(jià)值；加工可能和價(jià)值；2. 評(píng)價(jià)栽培管理和施肥的合理性與否；評(píng)價(jià)栽培管理和施肥的合理性與否；3. 為研究作物的代謝特點(diǎn)和品種特性提供參考。為研究作物的代謝特點(diǎn)和品種特性提供參考。l植物組織中水溶性糖包括單糖（葡萄糖，果糖）和雙糖（蔗植物組織中水溶性糖包括單糖（葡萄糖，果糖）和雙糖（蔗糖）。糖）。l測(cè)定首先須用水在測(cè)定首先須用水在80 浸提出來(lái)，也可以用酒精浸提（可避浸提出來(lái)，也可以用酒精浸提（可避免糖類(lèi)被酶水解）。免糖類(lèi)被酶水解）。l還原糖還原糖的測(cè)定

6、方法很多，有重量法，容量法，比色法及旋光的測(cè)定方法很多，有重量法，容量法，比色法及旋光法等。法等。l重量法重量法是以還原糖將斐林試劑還原產(chǎn)生的是以還原糖將斐林試劑還原產(chǎn)生的Cu2O稱(chēng)重為基礎(chǔ)稱(chēng)重為基礎(chǔ)的經(jīng)典法。的經(jīng)典法。容量法容量法按所用氧化劑不同又可分為銅還原法和鐵按所用氧化劑不同又可分為銅還原法和鐵氰化鉀還原法兩類(lèi)。前者常用斐林試劑為氧化劑，后者有鐵氰化鉀還原法兩類(lèi)。前者常用斐林試劑為氧化劑，后者有鐵氰化鉀的堿性溶液為氧化劑。氰化鉀的堿性溶液為氧化劑。l水：水果、蔬菜等采用。但這些樣品中含有有機(jī)酸，水：水果、蔬菜等采用。但這些樣品中含有有機(jī)酸，為了防止蔗糖等水解，為了防止蔗糖等水解，需要需

7、要保持提取液中性，可加入保持提取液中性，可加入粉狀粉狀CaCO3 。l乙醇水溶液：也是常用提取劑。當(dāng)乙醇濃度為乙醇水溶液：也是常用提取劑。當(dāng)乙醇濃度為750850 mL/L時(shí)，蛋白質(zhì)及大多數(shù)多糖都不能溶解，因此可避時(shí)，蛋白質(zhì)及大多數(shù)多糖都不能溶解，因此可避免糖類(lèi)被酶水解。免糖類(lèi)被酶水解。l作用作用：沉淀一些干擾物質(zhì)，避免影響糖類(lèi)的測(cè)：沉淀一些干擾物質(zhì)，避免影響糖類(lèi)的測(cè)定。定。l選擇原則選擇原則：不應(yīng)吸附糖類(lèi)，不改變糖類(lèi)的比旋：不應(yīng)吸附糖類(lèi)，不改變糖類(lèi)的比旋光度等理化性質(zhì)。光度等理化性質(zhì)。l種類(lèi)種類(lèi)：中性醋酸鉛中性醋酸鉛、堿性醋酸鉛、醋酸鋅和亞、堿性醋酸鉛、醋酸鋅和亞鐵氰化鉀溶液鐵氰化鉀溶液l中

8、性醋酸鉛中性醋酸鉛：這是糖分析中：這是糖分析中最常用的一種澄清劑最常用的一種澄清劑。它能除。它能除去蛋白質(zhì)、丹寧、有機(jī)酸、果膠，還能凝聚其他膠體，它去蛋白質(zhì)、丹寧、有機(jī)酸、果膠，還能凝聚其他膠體，它的作用較可靠，不會(huì)使還原糖從溶液中沉淀出來(lái)，在室溫的作用較可靠，不會(huì)使還原糖從溶液中沉淀出來(lái)，在室溫下也不會(huì)形成可溶性的鉛糖。但它下也不會(huì)形成可溶性的鉛糖。但它脫色力差，不能用于深脫色力差，不能用于深色糖液的澄清色糖液的澄清。它適用于植物性樣品、淺色糖及糖漿制品、。它適用于植物性樣品、淺色糖及糖漿制品、果蔬等。果蔬等。 l堿性醋酸鉛堿性醋酸鉛：這種澄清劑能除去蛋白質(zhì)、色素、有機(jī)酸，：這種澄清劑能除去

9、蛋白質(zhì)、色素、有機(jī)酸，又能凝聚又能凝聚膠體膠體，但它可生成體積較大的沉淀，可帶走還原但它可生成體積較大的沉淀，可帶走還原糖，特別是果糖糖，特別是果糖。過(guò)量的堿性醋酸鉛可因其堿度及鉛糖的。過(guò)量的堿性醋酸鉛可因其堿度及鉛糖的形成而改變糖類(lèi)的旋光度。此澄清劑用以形成而改變糖類(lèi)的旋光度。此澄清劑用以處理深色的蔗糖處理深色的蔗糖溶液溶液，以供旋光儀測(cè)定之用。，以供旋光儀測(cè)定之用。 l醋酸鋅和亞鐵氰化鉀溶液醋酸鋅和亞鐵氰化鉀溶液：它的澄清效果良好，生：它的澄清效果良好，生成的亞鐵氰化鋅沉淀，可以?huà)蹲叩鞍踪|(zhì)，發(fā)生共沉成的亞鐵氰化鋅沉淀，可以?huà)蹲叩鞍踪|(zhì)，發(fā)生共沉淀作用，適用于淀作用，適用于色澤較淺、富含蛋白質(zhì)

10、色澤較淺、富含蛋白質(zhì)的提取液，的提取液，如如乳制品乳制品。l注意：避免使用過(guò)量澄清劑注意：避免使用過(guò)量澄清劑。若用鉛鹽澄清法。若用鉛鹽澄清法(或加或加鉛澄清法鉛澄清法)，過(guò)量試劑會(huì)使分析，過(guò)量試劑會(huì)使分析結(jié)果失真結(jié)果失真。甚至中性。甚至中性醋酸鉛之類(lèi)安全的澄清劑，用量也不能過(guò)大。醋酸鉛之類(lèi)安全的澄清劑，用量也不能過(guò)大。l將新鮮果蔬樣品洗凈擦干，切成小塊，混勻。稱(chēng)取將新鮮果蔬樣品洗凈擦干，切成小塊，混勻。稱(chēng)取25.00-50.00g置置高速組織搗碎機(jī)高速組織搗碎機(jī)中搗碎（或置研缽中加少量石英砂共中搗碎（或置研缽中加少量石英砂共同研磨），然后小心轉(zhuǎn)入同研磨），然后小心轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，加水量

11、約為容量瓶中，加水量約為150 mL。風(fēng)干已磨細(xì)的樣品則可稱(chēng)取。風(fēng)干已磨細(xì)的樣品則可稱(chēng)取0.500-5.00g，洗入容量瓶中，洗入容量瓶中，亦加水至約亦加水至約150 mL。l然后加入然后加入0.5-1.5 g粉狀粉狀CaCO3中和樣品中的酸度，搖動(dòng)約中和樣品中的酸度，搖動(dòng)約1 min，置置80水浴中保溫浸提水浴中保溫浸提30分鐘分鐘,其間搖動(dòng)數(shù)次以使糖分浸提完其間搖動(dòng)數(shù)次以使糖分浸提完全。全。l冷卻，滴加冷卻，滴加10%醋酸鉛醋酸鉛溶液至不再產(chǎn)生白色絮狀沉淀為止（約溶液至不再產(chǎn)生白色絮狀沉淀為止（約2-5mL）以沉淀蛋白質(zhì)，以沉淀蛋白質(zhì)，定容，用干濾器過(guò)濾，濾液中加入足定容，用干濾器過(guò)濾，濾

12、液中加入足量草酸鈉以除去醋酸鉛，多次加入、過(guò)濾，直到無(wú)鉛離子為止，量草酸鈉以除去醋酸鉛，多次加入、過(guò)濾，直到無(wú)鉛離子為止，得糖提取液。得糖提取液。l對(duì)含有對(duì)含有較多淀粉或菊糖較多淀粉或菊糖的樣品，用水提取會(huì)使部分糊精或菊的樣品，用水提取會(huì)使部分糊精或菊糖進(jìn)入溶液中，影響分析結(jié)果，同時(shí)過(guò)濾也困難，因而最好糖進(jìn)入溶液中，影響分析結(jié)果，同時(shí)過(guò)濾也困難，因而最好采用酒精提取法。采用酒精提取法。l方法一：將研磨成糊狀的樣品稱(chēng)量后，或是干樣稱(chēng)樣后，加方法一：將研磨成糊狀的樣品稱(chēng)量后，或是干樣稱(chēng)樣后，加80%酒精酒精100mL，在，在125 或或250mL三角瓶，并安裝上回流冷三角瓶，并安裝上回流冷凝管，在

13、凝管，在80 水浴中保溫提取三次，每次加水浴中保溫提取三次，每次加100 mL 80%酒酒精，第一次保溫提取精，第一次保溫提取30分鐘，后兩次各分鐘，后兩次各15分鐘。合并三次酒分鐘。合并三次酒精溶液于瓷蒸發(fā)皿中，放在精溶液于瓷蒸發(fā)皿中，放在85 水浴上蒸發(fā)除去酒精，一直水浴上蒸發(fā)除去酒精，一直到酒精提取余下只約到酒精提取余下只約3-5 mL后，用水將殘?jiān)慈牒螅盟畬堅(jiān)慈?50mL容量容量瓶中定容，即為糖的提取液（瓶中定容，即為糖的提取液（酒精提取液不必去蛋白質(zhì)，因酒精提取液不必去蛋白質(zhì)，因蛋白質(zhì)不會(huì)溶解出來(lái)蛋白質(zhì)不會(huì)溶解出來(lái)）。）。l方法二：教材方法二：教材P307 原理：原理： l還

14、原糖可使還原糖可使斐林（斐林（Fehling）試劑）試劑還原生成還原生成Cu2O沉淀沉淀,而本身被氧化和降解為糖酸。斐林試劑是由而本身被氧化和降解為糖酸。斐林試劑是由CuSO4溶溶液，液，NaOH和酒石酸鉀溶液組成。和酒石酸鉀溶液組成。l在堿性溶液中，酒石酸鹽可與銅鹽形成在堿性溶液中，酒石酸鹽可與銅鹽形成絡(luò)離子絡(luò)離子而不致而不致生成氫氧化銅沉淀。生成氫氧化銅沉淀。l在沸熱的條件下，用在沸熱的條件下，用還原糖待測(cè)液滴還原糖待測(cè)液滴定一定量斐林試定一定量斐林試劑時(shí)，劑時(shí)，銅的酒石酸絡(luò)鹽被還原糖還原銅的酒石酸絡(luò)鹽被還原糖還原，產(chǎn)生紅色，產(chǎn)生紅色Cu2O沉淀，還原糖則被氧化和降解。沉淀，還原糖則被氧化

15、和降解。l滴定時(shí)以滴定時(shí)以亞甲基藍(lán)亞甲基藍(lán)為氧化還原指示劑，稍過(guò)量的還原為氧化還原指示劑，稍過(guò)量的還原糖可使糖可使藍(lán)色的氧化型亞甲基藍(lán)還原為無(wú)色的還原型亞藍(lán)色的氧化型亞甲基藍(lán)還原為無(wú)色的還原型亞甲基藍(lán)甲基藍(lán)，即達(dá)滴定終點(diǎn)。，即達(dá)滴定終點(diǎn)。1斐林試劑斐林試劑A：稱(chēng)取：稱(chēng)取34.639g CuSO4（GR）溶于少量水后，洗）溶于少量水后，洗入入500ml 容量瓶，用水定容。容量瓶，用水定容。2斐林試劑斐林試劑B：稱(chēng)?。悍Q(chēng)取173g酒石酸鉀鈉（酒石酸鉀鈉（AR）和）和50g NaOH （AR）溶于少量水后，洗入溶于少量水后，洗入500ml 容量瓶，用水定容。容量瓶，用水定容。30.5%亞甲基藍(lán)指示劑

16、：稱(chēng)取亞甲基藍(lán)指示劑：稱(chēng)取0.5g亞甲基藍(lán)溶于亞甲基藍(lán)溶于100水中。水中。4葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱(chēng)取干燥的葡萄糖（葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱(chēng)取干燥的葡萄糖（GR）0.2000g用少量用少量水溶解后，洗入水溶解后，洗入100ml 容量瓶中，用水定容。此為容量瓶中，用水定容。此為2mg/ml葡葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液。萄糖標(biāo)準(zhǔn)液。510%中性醋酸鉛溶液：稱(chēng)取中性醋酸鉛溶液：稱(chēng)取100.0Pb(CH3COO) 23H2O（CP）溶于水中，過(guò)濾后加水至溶于水中，過(guò)濾后加水至1升。升。試劑試劑1.斐林試劑的標(biāo)定：斐林試劑的標(biāo)定： (1) 約測(cè)：吸取斐林試劑約測(cè)：吸取斐林試劑A，B各各5.00ml，混合于，混合于250ml三角

17、瓶三角瓶中，用裝有葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的滴定管放入中，用裝有葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液的滴定管放入10ml標(biāo)準(zhǔn)糖液，加標(biāo)準(zhǔn)糖液，加熱至沸，加亞甲基藍(lán)指示劑熱至沸，加亞甲基藍(lán)指示劑5滴，在沸騰的條件下繼續(xù)標(biāo)準(zhǔn)滴，在沸騰的條件下繼續(xù)標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，直至溶液中藍(lán)色消失為終點(diǎn)。此時(shí)還可見(jiàn)到溶溶液滴定，直至溶液中藍(lán)色消失為終點(diǎn)。此時(shí)還可見(jiàn)到溶液中液中Cu 2+已被糖還原生成的磚紅色已被糖還原生成的磚紅色Cu2O的沉淀。記錄下全的沉淀。記錄下全部標(biāo)準(zhǔn)糖溶液用量。部標(biāo)準(zhǔn)糖溶液用量。 (2) 準(zhǔn)確測(cè)定：同上準(zhǔn)確吸?。ɑ蛴玫味ü芗尤耄╈沉衷噭?zhǔn)確測(cè)定：同上準(zhǔn)確吸取（或用滴定管加入）斐林試劑A，B各各5.00ml放入三角瓶中，再由滴定管

18、放入標(biāo)準(zhǔn)糖液比放入三角瓶中，再由滴定管放入標(biāo)準(zhǔn)糖液比“約約測(cè)測(cè)”少少0.5 1ml的量，然后加熱煮沸的量，然后加熱煮沸2分鐘，加入亞甲基藍(lán)分鐘，加入亞甲基藍(lán)指示劑指示劑5滴，繼續(xù)用標(biāo)準(zhǔn)糖液在沸騰條件下滴定至藍(lán)色消失滴，繼續(xù)用標(biāo)準(zhǔn)糖液在沸騰條件下滴定至藍(lán)色消失為終點(diǎn)，記錄消耗標(biāo)準(zhǔn)糖液體積為為終點(diǎn)，記錄消耗標(biāo)準(zhǔn)糖液體積為V0。操作步驟操作步驟2. 樣品測(cè)定樣品測(cè)定：l方法同上，樣品的糖浸提液也分方法同上，樣品的糖浸提液也分“約測(cè)約測(cè)”及及“準(zhǔn)確準(zhǔn)確測(cè)定測(cè)定”二步進(jìn)行。二步進(jìn)行。l準(zhǔn)確測(cè)定糖浸提液用量為準(zhǔn)確測(cè)定糖浸提液用量為V，其用量須在，其用量須在15 50 mL范圍內(nèi)，含糖約范圍內(nèi)，含糖約50

19、mg為度，即本法測(cè)定的糖液濃為度，即本法測(cè)定的糖液濃度應(yīng)在每毫升含糖度應(yīng)在每毫升含糖1 3 mg范圍內(nèi)。否則應(yīng)增減稱(chēng)范圍內(nèi)。否則應(yīng)增減稱(chēng)樣量，重新制備待測(cè)液測(cè)定之。樣量，重新制備待測(cè)液測(cè)定之。 操作步驟操作步驟l結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)糖濃度（2mg/mL）V0VmV1還原糖（%）=V0滴定滴定10mL菲林試劑所消耗標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液的量（菲林試劑所消耗標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液的量（mL）V1滴定滴定10mL菲林試劑所消耗待測(cè)液液的量（菲林試劑所消耗待測(cè)液液的量（mL）V待測(cè)液總體積（待測(cè)液總體積（mL）m樣品質(zhì)量（樣品質(zhì)量（mg）l原理原理 試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，其中還原糖試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，其中還原糖把銅鹽還原為

20、氧化亞銅，加硫酸鐵后，把銅鹽還原為氧化亞銅，加硫酸鐵后，氧化亞銅被氧化為銅鹽，以高錳酸鉀溶氧化亞銅被氧化為銅鹽，以高錳酸鉀溶液滴定氧化作用后生成的亞鐵鹽，根據(jù)液滴定氧化作用后生成的亞鐵鹽，根據(jù)高錳酸鉀高錳酸鉀消耗量，計(jì)算氧化亞銅含量，消耗量，計(jì)算氧化亞銅含量，再查表得還原糖量。再查表得還原糖量。 lP308l原理原理 還原糖與已知過(guò)量的鐵氰化鉀堿性溶液作用，生成還原糖與已知過(guò)量的鐵氰化鉀堿性溶液作用，生成亞鐵氰化鉀和糖酸，而過(guò)量的鐵氰化鉀在亞鐵氰化鉀和糖酸，而過(guò)量的鐵氰化鉀在HOAc存存在下與在下與KI作用，生成游離的作用，生成游離的I2 ，最后用標(biāo)準(zhǔn)，最后用標(biāo)準(zhǔn)Na2S2O3溶液滴定生成的溶

21、液滴定生成的I2 ，根據(jù)，根據(jù)空白滴定和樣品滴定所消空白滴定和樣品滴定所消耗鐵氰化鉀結(jié)果的差值耗鐵氰化鉀結(jié)果的差值，進(jìn)一步換算成樣品消耗的，進(jìn)一步換算成樣品消耗的準(zhǔn)確的準(zhǔn)確的0.0500mol/L K3Fe(CN)6的的mL數(shù)，再?gòu)谋頂?shù)，再?gòu)谋?15-3)查出相應(yīng)的萄萄糖查出相應(yīng)的萄萄糖mg數(shù)。數(shù)。 教材P311l原理原理：還原糖與夏費(fèi)：還原糖與夏費(fèi)索姆吉試劑（與索姆吉試劑（與斐林試劑斐林試劑相似，但同時(shí)含有相似，但同時(shí)含有KI和和KIO3）反應(yīng)生成）反應(yīng)生成Cu2O沉沉淀（其原理與銅還原法相同）。然后用淀（其原理與銅還原法相同）。然后用H2SO4酸酸化，化，Cu2O溶解成溶解成Cu+，同時(shí)，

22、同時(shí)KIO3與與KI在酸性條在酸性條件下生成件下生成I2： IO3 - + 5I -+ 6H+ 3I2 + 3H2Ol生成的生成的I2與與Cu+產(chǎn)生氧化還原作用，消耗部分產(chǎn)生氧化還原作用，消耗部分I2。 2Cu+ + I2 2Cu2+ + 2I -l溶液溶液中剩余的溶液溶液中剩余的I2用標(biāo)準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)Na2S2O3滴定。滴定。 I2 + 2S2O32- S4O62- +2I-l同時(shí)做空白標(biāo)定。由空白標(biāo)定實(shí)驗(yàn)滴定時(shí)所用毫升同時(shí)做空白標(biāo)定。由空白標(biāo)定實(shí)驗(yàn)滴定時(shí)所用毫升數(shù)數(shù)(V0)，減去糖液作用后所用，減去糖液作用后所用 Na2S2O3液毫升數(shù)液毫升數(shù)(V1)，即為與（糖液相當(dāng)?shù)模┘礊榕c（糖液相當(dāng)?shù)模〤

23、u2O作用的作用的I2量；查表可得量；查表可得糖液中還原糖的毫克數(shù)。糖液中還原糖的毫克數(shù)。l本法適用于含糖少的植株樣品，如蔬菜、牧草等。本法適用于含糖少的植株樣品，如蔬菜、牧草等。l方法原理方法原理 植物水溶性糖浸出液中包括葡萄糖，果糖和植物水溶性糖浸出液中包括葡萄糖，果糖和蔗糖，蔗糖，蔗糖蔗糖須經(jīng)水解生成轉(zhuǎn)化糖（等量的葡萄糖和果糖）須經(jīng)水解生成轉(zhuǎn)化糖（等量的葡萄糖和果糖）后，與原有的還原糖一起測(cè)定，即為后，與原有的還原糖一起測(cè)定，即為水溶性總糖水溶性總糖。l吸取水溶性糖浸出液吸取水溶性糖浸出液50ml，于，于100ml容量瓶中，逐滴加容量瓶中，逐滴加入入6mol/L HCl 5ml，置，置9

24、0水浴鍋中加熱水浴鍋中加熱10分鐘。冷卻分鐘。冷卻后，加酚酞指示劑后，加酚酞指示劑23滴，以滴，以6mol/L NaOH中和至顯黃中和至顯黃色或剛顯微紅色，加水定容后測(cè)定。色或剛顯微紅色，加水定容后測(cè)定。l淀粉是由淀粉是由葡萄糖葡萄糖聚合合成的高分子化合物。聚合合成的高分子化合物。淀粉淀粉在酶或酸的作用下又水解成葡萄糖在酶或酸的作用下又水解成葡萄糖，這是淀粉經(jīng)，這是淀粉經(jīng)酶或酸水解后測(cè)定還原糖計(jì)算淀粉含量的理論基酶或酸水解后測(cè)定還原糖計(jì)算淀粉含量的理論基礎(chǔ)。礎(chǔ)。l另外，淀粉經(jīng)分散和酸解后具有一定的旋光性，另外，淀粉經(jīng)分散和酸解后具有一定的旋光性，可用旋光法測(cè)定淀粉含量。可用旋光法測(cè)定淀粉含量。

25、l原理原理 樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類(lèi)后，其中淀粉用樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類(lèi)后，其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖淀粉酶水解成雙糖，再用，再用鹽酸將雙糖水解成單鹽酸將雙糖水解成單糖糖，最后按，最后按還原糖測(cè)定還原糖測(cè)定，并折算成淀粉。，并折算成淀粉。l參照參照GBT 5009.9-2008 食品中淀粉的測(cè)定食品中淀粉的測(cè)定GBT 5009.9-2008l稱(chēng)取稱(chēng)取2.0-5.0 g磨碎過(guò)磨碎過(guò)40目篩的樣品，置于放有目篩的樣品，置于放有慢速濾紙的漏斗中，用慢速濾紙的漏斗中，用30 mL乙醚分三次洗去乙醚分三次洗去樣品中的脂肪，棄去乙醚。再用樣品中的脂肪，棄去乙醚。再用150 mL85乙醇溶液分?jǐn)?shù)次洗滌

26、殘?jiān)タ扇苄蕴穷?lèi)乙醇溶液分?jǐn)?shù)次洗滌殘?jiān)?，除去可溶性糖?lèi)物質(zhì)。物質(zhì)。 l原理原理 樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類(lèi)后，其中淀粉用樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類(lèi)后，其中淀粉用酸水解成具有還原性的單糖酸水解成具有還原性的單糖，然后按，然后按還原糖測(cè)還原糖測(cè)定定，并折算成淀粉。，并折算成淀粉。l參照參照GBT 5009.9-2008 食品中淀粉的測(cè)定食品中淀粉的測(cè)定GBT 5009.9-2008試試 樣樣糖糖 化化 酶酶 法法直接酸水直接酸水解法以淀解法以淀粉計(jì)粉計(jì)(%)濾液濾液(淀粉淀粉%)濾渣濾渣(半纖維半纖維素素)以淀粉計(jì)以淀粉計(jì)(%)濾液濾液+液渣液渣以淀粉計(jì)以淀粉計(jì)(%)麩麩 皮皮21.0629.

27、0750.1350.12小米殼小米殼12.3210.9723.2923.08玉玉 米米74.105.8179.9180.45甘甘 薯薯78.211.9580.1679.90 原因：直接酸水解法中淀粉與半纖維素均被原因：直接酸水解法中淀粉與半纖維素均被水解為還原糖，而酶水解法僅能糖化淀粉，水解為還原糖，而酶水解法僅能糖化淀粉，半纖維素則不起作用，因此半纖維素留于濾半纖維素則不起作用，因此半纖維素留于濾渣中，將處理后的濾液與濾渣分別水解后滴渣中，將處理后的濾液與濾渣分別水解后滴定糖，二者結(jié)果之和與直接水解法滴定糖的定糖，二者結(jié)果之和與直接水解法滴定糖的結(jié)果相接近。結(jié)果相接近。l酸水解法不僅是淀粉水解，而且也能分解半纖維素，結(jié)果產(chǎn)生了具有還原力的木糖、阿拉伯糖等單糖，使淀粉測(cè)定所得的結(jié)果較實(shí)際含量偏高。l以麩皮、小米殼、玉米及甘薯等試樣用糖化酶法及直接酸水解法測(cè)定淀粉含量，結(jié)果糖化酶法均較直接酸水解法為低。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)CaCl2-HOAcl原理：淀粉用原理：淀粉用CaCl2-HOAc為分散和液化劑，在為分散和液化劑，在一定的酸度和加熱條件下，使淀粉溶解并部分酸一定的酸度和加熱條件下，使淀粉溶解并部分酸解，生成