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1、凡納濱對(duì)蝦的鹽度凡納濱對(duì)蝦的鹽度適應(yīng)性研究適應(yīng)性研究陳立僑陳立僑 李二超李二超華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院上海 200062研究背景研究背景海水品種淡化養(yǎng)殖已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖的一個(gè)重要發(fā)展方向:可減緩海水養(yǎng)殖對(duì)沿海環(huán)境的污染;促進(jìn)內(nèi)陸水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)因鹽度適應(yīng)范圍廣、生長(zhǎng)速度快、抗病力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)而成為最具發(fā)展?jié)摿Φ娜箴B(yǎng)殖蝦類之一。目前,正在美國(guó)、泰國(guó)、及厄瓜多爾等國(guó)家得到了迅速的發(fā)展。我國(guó)低鹽度對(duì)蝦養(yǎng)殖也在浙江、江蘇及上海等地廣泛開展。2004年,對(duì)蝦產(chǎn)量達(dá)到30萬(wàn)t以上,其中約有30 %為內(nèi)陸?zhàn)B殖。Cont-淡化養(yǎng)殖中,

2、不同鹽度下對(duì)蝦將表現(xiàn)出不同的適應(yīng)狀態(tài),鹽度是影響動(dòng)物生長(zhǎng)、生理反應(yīng)和生產(chǎn)效果的重要因子。研究鹽度對(duì)蝦的營(yíng)養(yǎng)需求、以及各種營(yíng)養(yǎng)素的特殊生理作研究鹽度對(duì)蝦的營(yíng)養(yǎng)需求、以及各種營(yíng)養(yǎng)素的特殊生理作用和對(duì)抗逆性能力的影響等用和對(duì)抗逆性能力的影響等闡明對(duì)蝦鹽度調(diào)節(jié)與營(yíng)養(yǎng)生理的關(guān)系,既可豐富甲殼動(dòng)物生理學(xué)和營(yíng)養(yǎng)學(xué)內(nèi)容,同時(shí)對(duì)健康生態(tài)養(yǎng)殖也有重要意義。 Cont-1.凡納濱對(duì)蝦的適宜生長(zhǎng)鹽度及鹽度對(duì)對(duì)蝦生長(zhǎng)、成活等的影響然而,有關(guān)下列問(wèn)題的研究頗為缺乏:然而,有關(guān)下列問(wèn)題的研究頗為缺乏:Bray et al. (1994) showed that 5 and 15 ppt salinity produced

3、a significantly greater growth rate than any other levels tested and that the hyper saline water (49 ppt) produced significantly less growth than the low salinity treatments. Huang et al. (1983) reported that L. vannamei grew best at about 20 ppt and poorest at 5 - 45ppt. Bartlett et al. (1990) conc

4、luded that growth was not reduced with the range of ambient salinity from 30 to 45 ppt, and similar results were reported by Jesus et al. (1997).Cont-1.凡納濱對(duì)蝦的最適生長(zhǎng)鹽度及鹽度對(duì)對(duì)蝦生長(zhǎng)、成活等的影響2.低鹽度下凡納濱對(duì)蝦的生理狀態(tài)然而,有關(guān)下列問(wèn)題的研究頗為缺乏:However, most previous studies on L. vannamei were in salinity above 15ppt. Therefore, i

5、t is necessary to conduct further investigation on the physiology of L. vannamei at low salinity for inland saline water farming. Cont-1. 凡納濱對(duì)蝦的最適生長(zhǎng)鹽度及鹽度對(duì)對(duì)蝦生長(zhǎng)、成活等的影響2. 低鹽度下凡納濱對(duì)蝦的生理狀態(tài)3. 鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝和生化成份組成、積累的影響然而,有關(guān)下列問(wèn)題的研究頗為缺乏:然而,有關(guān)下列問(wèn)題的研究頗為缺乏:So far, no research has studied the metabolism or bioc

6、hemical composition of white shrimp at different salinities. The physiological responses are believed to be essential to assess the animal performance at different environmental conditions (Allan et al., 2006; Denisse et al., 2006; Cheng et al., 2000; Cheng et al., 2003). Cont-1. 凡納濱對(duì)蝦的最適生長(zhǎng)鹽度及鹽度對(duì)對(duì)蝦生

7、長(zhǎng)、成活等的影響2. 低鹽度下凡納濱對(duì)蝦的生理狀態(tài)3. 鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝和生化成份組成、積累的影響4. 低鹽度下凡納濱對(duì)蝦的抗逆性然而,有關(guān)下列問(wèn)題的研究頗為缺乏:然而,有關(guān)下列問(wèn)題的研究頗為缺乏:Lin & Chen (2001, 2003) found that the level of ammonia concentration could significantly reduce the survival rate at salinity above 15 pptbut no attempt has been made to study the ammonia to

8、xicity on L. vannamei juveniles in salinity below 5 ppt where most inland shrimps are farmed. It is not known if the impact of ammonia on shrimps is salinity dependent. 1.不同鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)和成活率的影響2.低鹽度下凡納濱對(duì)蝦的生理狀態(tài)3.鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝和生化成份組成、積累的影響4.低鹽度下凡納濱對(duì)蝦的抗逆性問(wèn)題的提出:?jiǎn)栴}的提出:研究結(jié)果(研究結(jié)果(1 1)Growth, Body composition

9、, respiration and ambient ammonia nitrogen tolerance of the juvenile white shrimp, Litopenaeus vannamei, at different salinities小結(jié)v對(duì)蝦生長(zhǎng)的適宜鹽度約為20 ppt。v低鹽度組蝦的耗氧量和呼吸商明顯升高,提示機(jī)體需消耗較多的能量以維持機(jī)體的滲透壓平衡,從而導(dǎo)致生長(zhǎng)率下降。v3組氨氮96小時(shí)的半致死濃度為9.33 (8.39-10.37) mg.l-1 ,遠(yuǎn)低于已有報(bào)道的24.39(15 )、35.40(25 )和39.54(35 ) mg.l-1。 研究結(jié)果(研究

10、結(jié)果(2)Comparison of digestive and antioxidant enzymes activities, haemolymph oxyhemocyanin contents and hepatopancreas histology of white shrimp, Litopenaeus vannamei, at various salinities氧合血藍(lán)蛋白氧合血藍(lán)蛋白肝組織結(jié)構(gòu)肝組織結(jié)構(gòu) B細(xì)胞細(xì)胞分泌與物質(zhì)合成分泌與物質(zhì)合成E細(xì)胞細(xì)胞胚胎細(xì)胞胚胎細(xì)胞F細(xì)胞細(xì)胞合成消化酶合成消化酶R細(xì)胞細(xì)胞儲(chǔ)存、合成功能儲(chǔ)存、合成功能小結(jié)v低鹽度組的胰蛋白酶明顯升高,提示機(jī)體分解

11、、利用蛋白質(zhì)的能力加強(qiáng),以獲得足夠的能量調(diào)節(jié)滲透壓。v氧合血藍(lán)蛋白含量升高,機(jī)體攜氧能力加強(qiáng),代謝率提高。vSOD、CAT含量顯著升高,增強(qiáng)了機(jī)體清除自由基的能力。v低鹽度下蝦肝胰腺的B細(xì)胞增多,與消化酶、抗氧化酶的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)能力加強(qiáng)有關(guān);R細(xì)胞的主要功能是儲(chǔ)存營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),低鹽度組R細(xì)胞的減少與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被消耗,用于滲透壓調(diào)節(jié)有關(guān)。研究結(jié)果(研究結(jié)果(3)鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦體組織蛋白質(zhì)積累、氨基酸組成和轉(zhuǎn)氨鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦體組織蛋白質(zhì)積累、氨基酸組成和轉(zhuǎn)氨酶活性的影響酶活性的影響小結(jié)v在低、高鹽度的慢性脅迫下,對(duì)蝦為了維持滲透壓穩(wěn)定和獲得較快的生長(zhǎng)速度,機(jī)體已經(jīng)產(chǎn)生了一定的適應(yīng)性生理、生化

12、變化。v機(jī)體肝胰腺和血淋巴作為蛋白質(zhì)儲(chǔ)存場(chǎng)所,表現(xiàn)出大量積累用于分解形成游離氨基酸的可溶性蛋白質(zhì)的趨勢(shì),并通過(guò)轉(zhuǎn)氨酶活力的升高,加速機(jī)體氨基轉(zhuǎn)運(yùn)速度,為機(jī)體在一定程度上提供了用于滲透調(diào)節(jié)供能的特定氨基酸。v目前已知可以起滲透調(diào)節(jié)作用的氨基酸主要有谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸和?;撬?Somero et al 1983;Lockwood 1968)。結(jié)合本試驗(yàn)結(jié)果,這些氨基酸中,脯氨酸和丙氨酸起著相對(duì)重要的作用。 分子生物學(xué)部分分子生物學(xué)部分1. 凡納濱對(duì)蝦肝胰腺凡納濱對(duì)蝦肝胰腺GOT酶基因的克隆和序列測(cè)定酶基因的克隆和序列測(cè)定2. 鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦肝胰腺鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦肝胰腺GOT酶基因表達(dá)的影響酶基因表達(dá)的影響3. 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)GOT酶基因表達(dá)的影響酶基因表達(dá)的影響4. 飼料維生素飼料維生素B6水平對(duì)水平對(duì)GOT酶基因表達(dá)的影響酶基因表達(dá)的影響引物

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