比色法測(cè)定亞硝酸鹽含量

1、比色法測(cè)定物質(zhì)的含量比色法測(cè)定物質(zhì)的含量原理：在相同條件下，配制標(biāo)原理：在相同條件下，配制標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)樣品溶液的有色準(zhǔn)溶液和待測(cè)樣品溶液的有色溶液，將兩者的顏色進(jìn)行比較，溶液，將兩者的顏色進(jìn)行比較，用目測(cè)法求出待測(cè)樣品溶液的用目測(cè)法求出待測(cè)樣品溶液的濃度。濃度。案例案例1 1 食品中食品中NONO3 3- -和和NONO2 2- -含量的測(cè)定含量的測(cè)定原理：原理：對(duì)氨基苯磺酸對(duì)氨基苯磺酸 + 2H+ 2H+ + + NO + NO2 2- - 重氮化合物重氮化合物 + 2H+ 2H2 2O O- -萘胺萘胺 + + 重氮化合物重氮化合物 對(duì)對(duì)- -苯磺酸苯磺酸- -偶氮偶氮- - -萘胺（紫

2、萘胺（紫紅色化合物）紅色化合物）反應(yīng)條件：反應(yīng)條件：酸性條件下，磺胺與酸性條件下，磺胺與NONO2 2- -作用形成重氮作用形成重氮化合物，酸度大，重氮化作用速度加快?；衔?，酸度大，重氮化作用速度加快。實(shí)驗(yàn)中所有的反應(yīng)需要在相同的外界條實(shí)驗(yàn)中所有的反應(yīng)需要在相同的外界條件下進(jìn)行件下進(jìn)行反應(yīng)特點(diǎn)：非常靈敏，可測(cè)定反應(yīng)特點(diǎn)：非常靈敏，可測(cè)定0.5 0.5 g/mLg/mL濃度的濃度的NONO2 2- -實(shí)驗(yàn)過程：實(shí)驗(yàn)過程：1 1標(biāo)準(zhǔn)濃度的標(biāo)準(zhǔn)濃度的NaNONaNO2 2配制配制（1 1）0.1 g0.1 g溶解于蒸餾水中，定容至溶解于蒸餾水中，定容至500mL500mL，NaNONaNO2 2濃

3、度為濃度為200mg/L200mg/L（NaNONaNO2 2濃度濃度=200g/mL=200g/mL）（2 2）?。ǎ┤。? 1）溶液）溶液5mL5mL用水稀釋，定容至用水稀釋，定容至200mL200mL（即稀釋了（即稀釋了4040倍），此時(shí)倍），此時(shí)NaNONaNO2 2濃度為濃度為5 5 mg/Lmg/L（NaNONaNO2 2濃度濃度=5 g/mL=5 g/mL）2 2反應(yīng)試劑的配制反應(yīng)試劑的配制（1 1）HClHCl：?。喝?0 mL20 mL濃鹽酸用蒸餾水水稀釋成濃鹽酸用蒸餾水水稀釋成100mL100mL；（2 2）對(duì)氨基苯磺酸：）對(duì)氨基苯磺酸：4mg/mL4mg/mL，稱取，稱取

4、0.4g0.4g對(duì)氨基苯磺酸溶于（對(duì)氨基苯磺酸溶于（1 1）中。）中。（3 3）- -萘胺：萘胺：2mg/mL2mg/mL，0.2g0.2g溶解于溶解于100mL100mL（1 1）中。）中。注意：注意：HClHCl在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中的作用是制造一種酸性環(huán)境，上面的濃度在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中的作用是制造一種酸性環(huán)境，上面的濃度足夠了。作為反應(yīng)物質(zhì)的對(duì)氨基苯磺酸和足夠了。作為反應(yīng)物質(zhì)的對(duì)氨基苯磺酸和- -萘胺也是過量的。實(shí)萘胺也是過量的。實(shí)驗(yàn)過程中，只要每次重復(fù)時(shí)這些藥品的濃度穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果就會(huì)比驗(yàn)過程中，只要每次重復(fù)時(shí)這些藥品的濃度穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果就會(huì)比較一致。因此，如果要采用這個(gè)實(shí)驗(yàn)做一些探究性活動(dòng)，需要大量

5、較一致。因此，如果要采用這個(gè)實(shí)驗(yàn)做一些探究性活動(dòng)，需要大量使用、實(shí)驗(yàn)需要重復(fù)多次的、在短時(shí)期就可以完成的，可將這幾種使用、實(shí)驗(yàn)需要重復(fù)多次的、在短時(shí)期就可以完成的，可將這幾種藥品多配制一些，放入冰箱，以免多次配制導(dǎo)致結(jié)果不穩(wěn)定。藥品多配制一些，放入冰箱，以免多次配制導(dǎo)致結(jié)果不穩(wěn)定?；前酚袕?qiáng)烈的氧化作用，其溶液不要與鐵制品接觸，最好采用玻璃磺胺有強(qiáng)烈的氧化作用，其溶液不要與鐵制品接觸，最好采用玻璃制品；溶解時(shí)需加熱。閉光保存。制品；溶解時(shí)需加熱。閉光保存。- -萘胺有毒，溶解時(shí)需要加熱。閉光保存。萘胺有毒，溶解時(shí)需要加熱。閉光保存。3 3標(biāo)準(zhǔn)色階的制備標(biāo)準(zhǔn)色階的制備表表1 NaNO21 NaNO

6、2含量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)色階的制備表含量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)色階的制備表編編號(hào)號(hào)蒸餾水蒸餾水（mL）NaNO2（mL）對(duì)氨基苯對(duì)氨基苯磺酸（磺酸（mL）-萘胺萘胺（mL）NaNO2的最終的最終含量（含量（g）17.00.0210.026.90.1210.536.80.2211.046.60.4212.056.40.6213.066.20.8214.076.01.0215.085.81.2216.095.61.4217.0105.41.6218.0115.21.8219.0制備標(biāo)準(zhǔn)色階時(shí)，各反應(yīng)溶液的總量一定要制備標(biāo)準(zhǔn)色階時(shí)，各反應(yīng)溶液的總量一定要保持一致，反應(yīng)各部分要準(zhǔn)確加入。如果顏保持一致，反應(yīng)各部分要準(zhǔn)確加

7、入。如果顏色太深，各色階間沒有差別，無法比較，可色太深，各色階間沒有差別，無法比較，可等反應(yīng)穩(wěn)定后，加水稀釋后再進(jìn)行比較。但等反應(yīng)穩(wěn)定后，加水稀釋后再進(jìn)行比較。但是一定要記錄稀釋的倍數(shù)，以便后面的計(jì)算。是一定要記錄稀釋的倍數(shù)，以便后面的計(jì)算。4材料中材料中NaNO2的提取的提取提取劑：稱取提取劑：稱取50g氯化鎘和氯化鎘和50g氯化鋇溶于氯化鋇溶于1000ml的蒸餾水中，用濃鹽酸調(diào)節(jié)的蒸餾水中，用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH至至1。提取劑的作。提取劑的作用為提取泡菜汁中的雜質(zhì)，以利比色；用為提取泡菜汁中的雜質(zhì)，以利比色；氫氧化鋁乳液：進(jìn)一步吸附泡菜汁中的雜質(zhì)；方法：氫氧化鋁乳液：進(jìn)一步吸附泡菜汁中的雜質(zhì)；方

8、法：稱取稱取125g硫酸鋁鉀硫酸鋁鉀KAl(SO4)2.12H2O或硫酸鋁銨或硫酸鋁銨NH4Al(SO4)2.12H2O溶于溶于1000mL純水中。加熱純水中。加熱至至60oc，緩緩加入，緩緩加入55mL氨水氨水(20=0.88g/mL)。使。使氫氧化鋁沉淀完全。充分?jǐn)嚢韬箪o置，棄取上清液。氫氧化鋁沉淀完全。充分?jǐn)嚢韬箪o置，棄取上清液。用純水反復(fù)洗滌沉淀，至傾出上清液中不含氯離子用純水反復(fù)洗滌沉淀，至傾出上清液中不含氯離子（用硝酸銀溶液試驗(yàn)）。然后加入（用硝酸銀溶液試驗(yàn)）。然后加入300mL純水成懸純水成懸浮液，適應(yīng)前振搖均勻。浮液，適應(yīng)前振搖均勻。2.5mol/L的氫氧化鈉溶液：使其與泡菜汁

9、中的部分的氫氧化鈉溶液：使其與泡菜汁中的部分物質(zhì)形成沉淀。物質(zhì)形成沉淀。材料粉碎材料粉碎0.2 kg0.2 kg，注意要精確，注意要精確過過 濾濾也可離心，收集全部濾液氯化鎘、氯化鋇提取也可離心，收集全部濾液氯化鎘、氯化鋇提取加入加入2 2倍的蒸餾水，倍的蒸餾水，1 1倍的提取液，振蕩，提取倍的提取液，振蕩，提取1h1h。如果沒有搖。如果沒有搖床，可人工代替，經(jīng)常用玻璃棒攪動(dòng)。加堿沉淀氯化鎘、氯化床，可人工代替，經(jīng)常用玻璃棒攪動(dòng)。加堿沉淀氯化鎘、氯化鋇鋇也需要攪動(dòng)。定容到也需要攪動(dòng)。定容到500mL500mL一定要精確取一定要精確取50mL50mL濾液，加濾液，加Al(OH)32mLAl(OH

10、)32mL除去有機(jī)雜質(zhì)，定容到除去有機(jī)雜質(zhì)，定容到100mL100mL需要攪動(dòng)。需要攪動(dòng)。過濾過濾也可離心也可離心過濾過濾離心也可離心也可5材料中材料中NaNO2含量的測(cè)定含量的測(cè)定取上面獲得的無色透明液體取上面獲得的無色透明液體5mL于試管，加水于試管，加水2mL，加對(duì)氨基苯磺酸，加對(duì)氨基苯磺酸2mL，-萘胺萘胺1mL，反，反應(yīng)應(yīng)15min后，與上面的標(biāo)準(zhǔn)色階顏色進(jìn)行對(duì)比，后，與上面的標(biāo)準(zhǔn)色階顏色進(jìn)行對(duì)比，從色階表中找出相應(yīng)的樣品從色階表中找出相應(yīng)的樣品NaNO2的含量，根據(jù)的含量，根據(jù)公式計(jì)算樣品溶液中公式計(jì)算樣品溶液中NaNO2的含量的含量6 6采用比色法測(cè)定物質(zhì)含量的要注意的地方采用比

11、色法測(cè)定物質(zhì)含量的要注意的地方（1 1）稱取的物質(zhì)量要準(zhǔn)確，）稱取的物質(zhì)量要準(zhǔn)確，（2 2）研磨過程要充分，并充分溶解在水中）研磨過程要充分，并充分溶解在水中（3 3）每次定容要準(zhǔn)確）每次定容要準(zhǔn)確（4 4）反應(yīng)時(shí)，加入的溶液量要準(zhǔn)確）反應(yīng)時(shí)，加入的溶液量要準(zhǔn)確（5 5）所有的反應(yīng)過程要保持條件一致。）所有的反應(yīng)過程要保持條件一致。結(jié)果：泡菜中亞硝酸鹽含量在發(fā)酵剛剛開始的結(jié)果：泡菜中亞硝酸鹽含量在發(fā)酵剛剛開始的時(shí)候都處于上升趨勢(shì)，在時(shí)候都處于上升趨勢(shì)，在5 d5 d或者或者7 d7 d的時(shí)候會(huì)達(dá)的時(shí)候會(huì)達(dá)到一個(gè)最高值，之后就會(huì)慢慢下降，在發(fā)酵時(shí)間到一個(gè)最高值，之后就會(huì)慢慢下降，在發(fā)酵時(shí)間達(dá)到達(dá)

12、到13 d13 d左右的時(shí)候下降到一個(gè)相對(duì)比較穩(wěn)定的左右的時(shí)候下降到一個(gè)相對(duì)比較穩(wěn)定的數(shù)值，達(dá)到平穩(wěn)狀態(tài)。數(shù)值，達(dá)到平穩(wěn)狀態(tài)。原因分析：發(fā)酵初期，泡菜中的微生物生長很快，原因分析：發(fā)酵初期，泡菜中的微生物生長很快，微生物將蔬菜中的硝酸鹽還原成亞硝酸鹽，如此微生物將蔬菜中的硝酸鹽還原成亞硝酸鹽，如此同時(shí)，蔬菜中的酚類物質(zhì)和維生素同時(shí)，蔬菜中的酚類物質(zhì)和維生素C C等物質(zhì)也會(huì)等物質(zhì)也會(huì)將亞硝酸鹽氧化，但總體來說，生成的亞硝酸鹽將亞硝酸鹽氧化，但總體來說，生成的亞硝酸鹽大于被氧化的亞硝酸鹽，因此，隨著發(fā)酵時(shí)間的大于被氧化的亞硝酸鹽，因此，隨著發(fā)酵時(shí)間的進(jìn)行，亞硝酸鹽的含量會(huì)逐步上升。隨著微生物進(jìn)行，亞硝酸鹽的含量會(huì)逐步上升。隨著微