的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)練習(xí)

1、選修1 DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)練習(xí)1、DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)（l）本實(shí)驗(yàn)材料選用雞血細(xì)胞液而不用雞的全血，主要原因是由于雞血細(xì)胞液中含有較高含量的 （2）圖A中加入蒸餾水的目的是 （3）通過(guò)圖B所示步驟取得濾液后，再向?yàn)V液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是 并在坐標(biāo)系內(nèi)畫(huà)出DNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的變化的圖象（4）圖C所示加入蒸餾水的目的是 （5）為鑒定實(shí)驗(yàn)所得絲狀物的主要成分是DNA，可用 試劑進(jìn)行檢驗(yàn)，顏色反應(yīng)為 色2、下面是某位同學(xué)以洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)步驟：a稱取30克已切碎的洋蔥，放入研缽中，加入少量石英砂，倒入10mL0.14mol/L的氯

2、化鈉溶液，充分研磨b研磨后，用漏斗和紗布過(guò)濾，得到濾液c沿?zé)诰従徬驗(yàn)V液中加入95%的酒精溶液20mL，并用玻璃棒快速攪拌，待纖維狀粘稠物析出，用玻璃棒可將其輕輕卷起d取兩支試管，編為1、2號(hào)，各加入2mol/L的氯化鈉溶液2mL，向1號(hào)試管中加入一些纖維狀粘稠物，振蕩使其溶解，然后向兩支試管中各加入2mL二苯胺試劑，觀察顏色變化請(qǐng)分析回答：（1）指出以上實(shí)驗(yàn)步驟中的三個(gè)錯(cuò)誤： 、 （2）在a步驟中，加入少量石英砂是為了 ，有時(shí)人們還在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑，原因是洗滌劑能 ，有利于DNA的釋放（3）c步驟中用玻璃棒輕輕卷起的纖維狀粘稠物是 色的（4）在所有操作均正確的情況下，d步驟中

3、1號(hào)、2號(hào)試管內(nèi)溶液顏色變化分別為 （5）DNA提取實(shí)驗(yàn)不宜用豬血作為實(shí)驗(yàn)材料，原因是 3、關(guān)于DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)材料的選擇，研究者經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)效果的比較，最終選擇雞血做實(shí)驗(yàn)材料請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題：（1）在實(shí)驗(yàn)中，兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是BA稀釋血液，沖洗樣品B使血細(xì)胞破裂、降低NaCl濃度使DNA析出C使血細(xì)胞破裂、增大DNA溶解量D使血細(xì)胞破裂、提取含雜質(zhì)較少的DNA（2）生活在牧區(qū)的人們，采集牛、羊和馬血比較方便，若它們按實(shí)驗(yàn)要求完成實(shí)驗(yàn)步驟后，結(jié)果是很難提取到DNA，原因是 （3）不同的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同，在NaCl溶液濃度是 時(shí)，DNA的溶解度最?。?）DNA的析出

4、和鑒定時(shí)，析出DNA時(shí)應(yīng)將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的 （寫(xiě)出體積分?jǐn)?shù)），靜置后溶液中將析出DNA鑒定時(shí)所用的試劑為 4、某生物興趣小組開(kāi)展DNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng)。具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的菜花、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后分成兩組，一組置于20C，另一組置于-20C條件下保存24 h。DNA粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中，各加入15 mL 研磨液，充分研磨。用紗布過(guò)濾，取濾液備用。第二步：將濾液放在6075 C的恒溫水浴箱中保溫1015 min，然后將溶液過(guò)濾。第三步：先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液，再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的

5、冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第四步：取6支試管，分別加入等量的2 mol/L NaCl 溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測(cè)：在上述試管中各加入4 mL 二苯胺試劑， 混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液顏色的深淺，結(jié)果如表：材料保存溫度菜花辣椒20 C+ + + +-20 C+ + + + + + +注：+越多表示藍(lán)色越深。分析上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程，回答下列問(wèn)題：(1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題的名稱是_。(2)第二步操作目的是_。(3)第三步中緩緩地?cái)嚢?，這是為了減少_。(4)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。結(jié)論1:與20 C相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在-20

6、C條件下保存，DNA的提取量較多。結(jié)論2:_。針對(duì)結(jié)論1，請(qǐng)?zhí)岢龊侠淼慕忉?_。(5)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對(duì)DNA影響極小。為了進(jìn)一歩提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性，在DNA粗提取第四步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是：_。然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。5、圖為雞血細(xì)胞中DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的部分操作示意圖，請(qǐng)據(jù)圖分析，回答下列問(wèn)題：（1）圖中正確的實(shí)驗(yàn)操作順序是 （用序號(hào)與箭頭表示）（2）步驟中加入蒸餾水的目的是 ；步驟中加入蒸餾水后DNA析出，該操作的原理是（3）步驟中所用酒精最佳是經(jīng)過(guò) 后再使用，該步驟的目的是 （4）DNA可用

7、 試劑鑒定，沸水浴后的顏色反應(yīng)為 （5）由于雞血較難找到，某學(xué)生試圖用人血代替，結(jié)果沒(méi)有成功，其原因最可能是 6、請(qǐng)回答下列有關(guān)DNA粗提取及鑒定的相關(guān)問(wèn)題（1）在提取DNA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中用到兩種濃度的NaCl溶液，其作用分別是：2mol/L NaCl溶液： ；0.14mol/L NaCl溶液： （2）用雞血提取DNA的整個(gè)操作過(guò)程中，每100mL血液中加入3g檸檬酸鈉的作用是： （3）鑒定DNA所用的試劑： 7、下圖表示以雞血為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定的操作程序，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：(1)步驟一中，向雞血細(xì)胞液中加入_并攪拌，可使雞血細(xì)胞破裂。(2)步驟二中，過(guò)濾后收集含有DNA的_。(

8、3)步驟三、四的操作原理是_；步驟四中，通過(guò)向溶液中加入_調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度至_mol/L時(shí)，DNA將會(huì)析出，過(guò)濾去除溶液中的雜質(zhì)。(4)步驟七：向步驟六過(guò)濾后的_中加入等體積的冷卻的_，靜置23 min，溶液中會(huì)出現(xiàn)_色絲狀物，這就是粗提取的DNA。(5)步驟七：DNA遇_試劑，沸水浴5 min，冷卻后，溶液呈_色。選修1 DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)練習(xí)參考答案1、解：（1）DNA存在于雞血細(xì)胞中，因此DNA提取實(shí)驗(yàn)的材料用雞血細(xì)胞液而不用雞的全血（2）分析題圖可知，圖A的操作是向雞血細(xì)胞中加入蒸餾水，目的是使血細(xì)胞吸水脹破，釋放出核物質(zhì)DNA（3）圖B所示步驟是向含有DNA的濾

9、液中加入2mol/L的NaCl溶液，目的是使DNA溶解于NaCl溶液中；DNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的變化曲線如下圖：（4）分析題圖可知，C步驟是向溶解有DNA的高濃度NaCI溶液中加入蒸餾水，目的是稀釋NaCL溶液的濃度，使DNA析出（5）在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，因此可以用二苯胺鑒定DNA故答案為：（1）DNA（2）使血細(xì)胞吸水脹破，釋放出核物質(zhì)DNA（3）使DNA溶解于NaCl溶液中（4）使DNA的溶解度下降而沉淀析出（5）二苯胺 藍(lán)色2、解：（1）以上實(shí)驗(yàn)步驟中的三個(gè)錯(cuò)誤為：a步驟中“倒入的氯化鈉溶液濃度為0.14mol/L”；b步驟中“用玻璃棒快速攪拌；d步驟中

10、沒(méi)有沸水浴加熱（2）洗滌劑能溶解細(xì)胞膜，有利于DNA的釋放（3）c步驟中用玻璃棒輕輕卷起的纖維狀粘稠物是白色的（4）1號(hào)試管中含有DNA，加入二苯胺后沸水浴加熱顏色變藍(lán)；2號(hào)試管中不含DNA，加入二苯胺后沸水浴加熱顏色不變藍(lán)（5）DNA提取實(shí)驗(yàn)不宜用豬血作為實(shí)驗(yàn)材料，原因是豬的成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核（或無(wú)DNA）故答案為：（1）a步驟中“倒入的氯化鈉溶液濃度為0.14mol/Lb步驟中“用玻璃棒快速攪拌”d步驟中沒(méi)有沸水浴加熱（意思正確即可）（2）研磨充分溶解細(xì)胞膜（3）白（4）變藍(lán)、不變藍(lán)（5）豬的成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核（或無(wú)DNA）3、解：（1）實(shí)驗(yàn)中兩次使用蒸餾水，第一次的目的是使成熟的雞血細(xì)胞

11、漲破釋放出DNA，第二次日的是稀釋 NaCl溶液，使DNA從溶液中析出，故選B（2）牛羊馬為哺乳動(dòng)物，其成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核，因此若它們按實(shí)驗(yàn)要求完成實(shí)驗(yàn)步驟后，結(jié)果是很難提取到DNA（3）不同的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同，在NaCl溶液濃度是0.14mol/l時(shí)，DNA的溶解度最小（4）DNA的析出和鑒定時(shí)，析出DNA時(shí)應(yīng)將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的95%的酒精，靜置后溶液中將析出DNA鑒定時(shí)所用的試劑為二苯胺故答案為：（1）B（2）牛羊馬為哺乳動(dòng)物，其成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核（3）0.14mol/l（4）95%的酒精二苯胺4、(1)探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響(2)去除濾液中的雜質(zhì)(3)DNA斷裂(4)等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃中提取的DNA 量最多 低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA降解速度慢(5)將第四步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，吸取上清液5、（1）（2）加速血細(xì)胞的破裂 DNA在NaCl溶液中的溶解度，隨NaCl溶液濃度的降低而減?。?）充分預(yù)冷 提取含雜質(zhì)較少（或較純凈）