有助于維持改善健康的血糖狀況功能評(píng)價(jià)方法

1、有助于維持/改善健康的血糖狀況功能試驗(yàn)項(xiàng)目、試驗(yàn)原則及結(jié)果判定1 試驗(yàn)項(xiàng)目1.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分為方案一（降低胰島損傷血糖升高風(fēng)險(xiǎn)模型）和方案二（降低胰島素抵抗血糖升高風(fēng)險(xiǎn)模型）兩種1.1.1 方案一（降低胰島損傷血糖升高風(fēng)險(xiǎn)模型）1.1.1.1 體重1.1.1.2 空腹血糖1.1.1.3 糖耐量1.1.2 方案二（降低胰島素抵抗血糖升高風(fēng)險(xiǎn)模型）1.1.2.1 體重1.1.2.2 空腹血糖1.1.2.3 糖耐量1.1.2.4 胰島素1.1.2.5 總膽固醇1.1.2.6 甘油三酯1.2 人體試食試驗(yàn)1.2.1 空腹血糖1.2.2 餐后2小時(shí)血糖1.2.3 1,5-脫水葡萄糖醇1.2.4糖化血清蛋

2、白（果糖胺）和/或糖化血紅蛋白1.2.5低密度脂蛋白膽固醇1.2.6 甘油三酯2 試驗(yàn)原則2.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和人體試食試驗(yàn)所列指標(biāo)均為必做項(xiàng)目。2.2 根據(jù)受試樣品作用原理不同，方案一和方案二動(dòng)物模型任選其一進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。2.3 除對(duì)血糖升高模型動(dòng)物進(jìn)行所列指標(biāo)的檢測外，應(yīng)進(jìn)行受試樣品對(duì)正常動(dòng)物空腹血糖影響的觀察。2.4 人體試食試驗(yàn)應(yīng)選擇糖調(diào)節(jié)受損血糖偏高的亞健康人群。2.5 在進(jìn)行人體試食試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)對(duì)受試樣品的食用安全性作進(jìn)一步的觀察。3 結(jié)果判定3.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)： 方案一：空腹血糖、糖耐量二項(xiàng)指標(biāo)中一項(xiàng)指標(biāo)陽性，且對(duì)正常動(dòng)物空腹血糖無影響，即可判定該受試樣品有助于降低血糖升高風(fēng)險(xiǎn)功能動(dòng)物實(shí)

3、驗(yàn)結(jié)果陽性。 方案二：空腹血糖、糖耐量二項(xiàng)指標(biāo)中一項(xiàng)指標(biāo)陽性，血脂（總膽固醇、甘油三酯）無明顯升高，且對(duì)正常動(dòng)物空腹血糖無影響，即可判定該受試樣品有助于降低血糖升高風(fēng)險(xiǎn)功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。3.2 人體試食試驗(yàn)：1,5-脫水葡萄糖醇無明顯下降，空腹血糖、餐后2小時(shí)血糖、糖化血清蛋白（果糖胺）和/或糖化血紅蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇指標(biāo)均無明顯升高，且餐后2小時(shí)血糖陽性，同時(shí)，1,5-脫水葡萄糖醇、糖化血清蛋白（果糖胺）和/或糖化血紅蛋白指標(biāo)中任一項(xiàng)陽性，對(duì)機(jī)體健康無影響，可判定該受試樣品具有降低血糖升高風(fēng)險(xiǎn)功能的作用。有助于維持/改善健康的血糖狀況功能評(píng)價(jià)方法 1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)

4、物選用成年動(dòng)物，選用小鼠（262g）或大鼠（18020g），單一性別，每組1015只。1.2材料1.2.1試劑四氧嘧啶（C4H2N2O4·H2O ,純度>98% ,分子量160.08）、地塞米松磷酸鈉注射液、葡萄糖或醫(yī)用淀粉、血糖測定試紙或試劑盒，胰島素、甘油三酯、總膽固醇測定試劑盒1.2.2 高熱能飼料豬油10% 、蔗糖15% 、蛋黃粉15% 、酪蛋白5% 、膽固醇1.2% 、膽酸鈉0.2% 、碳酸氫鈣0.6%、石粉0.4%、鼠維持料52.6% 1.2.3儀器血糖儀、全自動(dòng)生化儀、可見光分光光度計(jì)、酶標(biāo)儀、天平。1.3劑量分組及受試樣品給予時(shí)間實(shí)驗(yàn)設(shè)三個(gè)劑量組和一個(gè)模型對(duì)照組

5、、一個(gè)陰性對(duì)照組，以人體推薦量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠）為其中的一個(gè)劑量組，另設(shè)二個(gè)劑量組，高劑量一般不超過30倍，必要時(shí)設(shè)空白對(duì)照組。受試樣品給予時(shí)間30天，必要時(shí)可延長至45天。1.4實(shí)驗(yàn)方法1.4.1 正常動(dòng)物降糖試驗(yàn)選健康成年動(dòng)物按禁食35小時(shí)的血糖水平分組，隨機(jī)選1個(gè)對(duì)照組和1個(gè)劑量組。對(duì)照組給予溶劑，劑量組給予高劑量濃度受試樣品，連續(xù)30天，測空腹血糖值（禁食同實(shí)驗(yàn)前），比較兩組動(dòng)物血糖值。1.4.2降低血糖升高風(fēng)險(xiǎn)試驗(yàn)方案一1.4.2.1降低胰島損傷血糖升高風(fēng)險(xiǎn)1.4.2.1.1原理四氧嘧啶是一種細(xì)胞毒劑，可選擇性地?fù)p傷多種動(dòng)物的胰島細(xì)胞，造成胰島素分泌減少，血糖升高，引起實(shí)

6、驗(yàn)性糖尿病。1.4.2.1.2試驗(yàn)步驟購入成年動(dòng)物，適應(yīng)3-5天后，禁食4小時(shí)（自由飲水），測空腹血糖。按血糖水平、體重隨機(jī)分為1個(gè)陰性對(duì)照組、1個(gè)模型對(duì)照組和3個(gè)受試物劑量組，每組15只。劑量組給予不同濃度受試物，陰性對(duì)照組、模型對(duì)照組給予溶劑，連續(xù)30天。其中第28天，當(dāng)天給予受試物后，陰性對(duì)照組和各劑量組動(dòng)物禁食4小時(shí)（自由飲水），測空腹血糖值及糖耐量，比較劑量組與陰性對(duì)照組之間空腹血糖、糖耐量各時(shí)間點(diǎn)及曲線下面積變化。第30天，當(dāng)天給予受試物后，模型對(duì)照組和各劑量組動(dòng)物禁食24小時(shí)（自由飲水），腹腔注射四氧嘧啶（小鼠90-95mg/kgbw用前新鮮配制）造模，劑量組繼續(xù)給予受試物，5天

7、后各組動(dòng)物禁食4小時(shí)（自由飲水），測空腹血糖值及糖耐量，比較模型組對(duì)照組與陰性對(duì)照組之間空腹血糖、糖耐量各時(shí)間點(diǎn)及曲線下面積變化，空腹血糖、糖耐量差異均有顯著性（p<0.05），模型成立。在此基礎(chǔ)上，比較受試物各劑量組與模型對(duì)照組之間空腹血糖、糖耐量各時(shí)間點(diǎn)及曲線下面積變化，必要時(shí)，劑量組繼續(xù)給予受試物，10天后各組動(dòng)物禁食4小時(shí)（自由飲水），測空腹血糖值及糖耐量。1.4.2.1.3糖耐量試驗(yàn)試驗(yàn)當(dāng)天劑量組給予受試物、對(duì)照組給予同體積溶劑后，各組動(dòng)物禁食4小時(shí)（自由飲水），測定給葡萄糖或醫(yī)用淀粉前（即0小時(shí)）血糖值，經(jīng)口給予葡萄糖2.5g/kg BW或醫(yī)用淀粉35g/kg BW，測定給葡

8、萄糖后各組0.5、2小時(shí)的血糖值或給醫(yī)用淀粉后1、2小時(shí)的血糖值，觀察模型對(duì)照組與受試物劑量組空腹血糖值和給葡萄糖或醫(yī)用淀粉后各時(shí)間點(diǎn)（0.5或1、2小時(shí)）血糖值及血糖曲線下面積的變化。（0小時(shí)血糖0.5小時(shí)血糖）×0.5 （2小時(shí)血糖0.5小時(shí)血糖）×1.5 血糖曲線下面積 + 2 2方案二1.4.2.2降低胰島素抵抗血糖升高風(fēng)險(xiǎn)(任選其一)1.4.2.2.1地塞米松誘導(dǎo)胰島素抵抗糖脂代謝紊亂模型1.4.2.2.1.1原理糖皮質(zhì)激素具有拮抗胰島素生物效應(yīng)的作用，可抑制靶組織對(duì)葡萄糖的攝取和利用，促進(jìn)蛋白質(zhì)和脂肪的分解及糖異生作用，導(dǎo)致糖、脂代謝紊亂，胰島素抵抗，誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性

9、糖尿病。1.4.2.2.1.2試驗(yàn)方法購入健康雄性大鼠（15020g），普通維持料適應(yīng)飼養(yǎng)35天，禁食34小時(shí)，取尾血，測定空腹即給葡萄糖前（0小時(shí)）血糖值，給2.5g/kgBW葡萄糖后測定0.5、2小時(shí)血糖值，作為該批次動(dòng)物基礎(chǔ)值。以0、0.5小時(shí)血糖水平分5個(gè)組，即1個(gè)空白對(duì)照組、1個(gè)模型對(duì)照組和3個(gè)劑量組，每組15只?？瞻讓?duì)照組不做處理，3個(gè)劑量組灌胃給予不同濃度受試樣品，模型對(duì)照組給予同體積溶劑，連續(xù)35天。各組給予維持料飼養(yǎng)，1周后模型對(duì)照組和3個(gè)劑量組更換高熱能飼料，喂飼2周后，模型對(duì)照組和3個(gè)劑量組在高熱能飼料基礎(chǔ)上分別給予地塞米松0.8mg/kgBW腹腔注射（0.008%地塞米

10、松注射量1ml/100g體重），每日1次，連續(xù)1012天。此后繼續(xù)灌胃至試驗(yàn)結(jié)束，各組動(dòng)物禁食34小時(shí)，檢測空腹血糖、糖耐量、血清胰島素及膽固醇、甘油三脂水平。1.4.2.2.1.3 觀察指標(biāo)1.4.2.2.1.3.1 空腹血糖、糖耐量試驗(yàn)當(dāng)天劑量組給予受試物、對(duì)照組給予同體積溶劑后，各組動(dòng)物禁食4小時(shí)（自由飲水），測定空腹血糖即給葡萄糖前（0小時(shí)）血糖值，經(jīng)口給予葡萄糖2.5g/kg BW，測定給葡萄糖后各組0.5、2小時(shí)的血糖值，若模型對(duì)照組0.5小時(shí)血糖值10mmol/L，或模型對(duì)照組0.5小時(shí)、2小時(shí)任一時(shí)間點(diǎn)血糖升高或血糖曲線下面積升高，與空白對(duì)照組比較，差異有顯著性，判定模型糖代謝

11、紊亂成立，在此基礎(chǔ)上，觀察模型對(duì)照組與受試樣品組空腹血糖、給葡萄糖后（0.5、2小時(shí)）血糖及0、0.5、2小時(shí)血糖曲線下面積的變化。（0小時(shí)血糖0.5小時(shí)血糖）×0.5 （2小時(shí)血糖0.5小時(shí)血糖）×1.5 血糖曲線下面積 + 2 21.4.2.2.1.3.2 膽固醇、甘油三脂各組動(dòng)物禁食34小時(shí)，檢測血清膽固醇、甘油三脂，若模型對(duì)照組血清膽固醇或甘油三酯明顯升高，與空白對(duì)照組比較，差異有顯著性，判定模型脂代謝紊亂成立，在此基礎(chǔ)上，觀察模型對(duì)照組與受試樣品組血脂變化。1.4.2.2.1.3.3 胰島素各組動(dòng)物禁食34小時(shí)，檢測血清胰島素，模型對(duì)照組與空白對(duì)照組比較胰島素抵抗

12、指數(shù)無明顯下降，且動(dòng)物糖/脂代謝紊亂成立，判定胰島素抵抗糖脂代謝紊亂模型成功。觀察模型對(duì)照組與受試樣品組胰島素抵抗情況。 血糖×胰島素胰島素抵抗指數(shù) = 胰島素/22.5e-血糖 22.51.4.2.2.2四氧嘧啶誘導(dǎo)胰島素抵抗糖脂代謝紊亂模型1.4.2.2.2.1原理高熱能飼料喂飼基礎(chǔ)上，輔以小劑量四氧嘧啶（C4H2N2O4·H2O,分子量160.08），造成糖/脂代謝紊亂，胰島素抵抗，誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性糖尿病。1.4.2.2.2.2造模方法購入健康雄性大鼠（15020g），普通維持料適應(yīng)飼養(yǎng)35天，禁食34小時(shí)，取尾血，測定給葡萄糖前（即0小時(shí)）血糖值，給2.5g/kgBW葡萄

13、糖后0.5、2小時(shí)血糖值，作為該批次動(dòng)物基礎(chǔ)值。以0、0.5小時(shí)血糖水平分5個(gè)組，即1個(gè)空白對(duì)照組、1個(gè)模型對(duì)照組和3個(gè)劑量組，每組15只。空白對(duì)照組不做處理，3個(gè)劑量組灌胃給予不同濃度受試樣品，模型對(duì)照組給予同體積溶劑，連續(xù)33天。各組給予維持料飼養(yǎng)，1周后模型對(duì)照組和3個(gè)劑量組更換高熱能飼料，喂飼3周后，模型對(duì)照組和3個(gè)劑量禁食24小時(shí)（不禁水），給予四氧嘧啶103105mg/kgBW腹腔注射，注射量1ml/100g體重。注射后繼續(xù)給予高熱能飼料喂飼35天。試驗(yàn)結(jié)束，各組動(dòng)物禁食34小時(shí)，檢測空腹血糖、糖耐量、血清胰島素及膽固醇、甘油三脂水平。1.4.2.2.2.3 觀察指標(biāo)1.4.2.2

14、.2.3.1空腹血糖、糖耐量試驗(yàn)當(dāng)天劑量組給予受試物、對(duì)照組給予同體積溶劑后，各組動(dòng)物禁食4小時(shí)（自由飲水），測定空腹血糖即給葡萄糖前（0小時(shí)）血糖值，經(jīng)口給予葡萄糖2.5g/kg BW，測定給葡萄糖后各組0.5、2小時(shí)的血糖值，若模型對(duì)照組0.5小時(shí)血糖值10mmol/L，或模型對(duì)照組0.5小時(shí)、2小時(shí)任一時(shí)間點(diǎn)血糖升高或血糖曲線下面積升高，與空白對(duì)照組比較，差異有顯著性，判定模型糖代謝紊亂成立，在此基礎(chǔ)上，觀察模型對(duì)照組與受試樣品組空腹血糖、給葡萄糖后（0.5、2小時(shí)）血糖及0、0.5、2小時(shí)血糖曲線下面積的變化。（0小時(shí)血糖0.5小時(shí)血糖）×0.5 （2小時(shí)血糖0.5小時(shí)血糖）

15、×1.5 血糖曲線下面積 + 2 21.4.2.2.2.3.2 膽固醇、甘油三脂各組動(dòng)物禁食34小時(shí)，檢測血清膽固醇、甘油三脂，若模型對(duì)照組血清膽固醇或甘油三酯明顯升高，與空白對(duì)照組比較，差異有顯著性，判定模型脂代謝紊亂成立，在此基礎(chǔ)上，觀察模型對(duì)照組與受試樣品組血脂變化。1.4.2.2.2.3.3 胰島素各組動(dòng)物禁食34小時(shí)，檢測血清胰島素，模型對(duì)照組與空白對(duì)照組比較胰島素抵抗指數(shù)無明顯下降，且動(dòng)物糖/脂代謝紊亂成立，判定胰島素抵抗糖脂代謝紊亂模型成功。觀察模型對(duì)照組與受試樣品組胰島素抵抗情況。 血糖×胰島素胰島素抵抗指數(shù) = 胰島素/22.5e-血糖 22.51.5數(shù)據(jù)

16、處理及結(jié)果判定一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值< F0.05，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；F值F0.05，P0.05，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。1.5.1指標(biāo)判定1.5.1.1 正常動(dòng)物降糖試驗(yàn)血糖指標(biāo)：空腹血糖受試樣品劑量組與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，判定對(duì)正常動(dòng)物血糖無影響。1.5.1.2降低血糖升高風(fēng)險(xiǎn)試驗(yàn)空腹血糖指標(biāo)：模型成立的前提下，受試樣品劑量組與

17、模型對(duì)照組比較，空腹血糖升高減緩有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，判定該受試樣品空腹血糖指標(biāo)結(jié)果陽性。糖耐量指標(biāo)：模型成立的前提下，受試樣品劑量組與模型對(duì)照組比較，在給葡萄糖或醫(yī)用淀粉后0.5、2小時(shí)任一時(shí)間點(diǎn)血糖升高減緩有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，或0、0.5、2小時(shí)血糖曲線下面積降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，判定該受試樣品糖耐量指標(biāo)結(jié)果陽性。血脂指標(biāo)：模型成立的前提下，受試樣品劑量組與模型對(duì)照組比較，血清膽固醇或甘油三酯下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可判定該受試樣品降血脂指標(biāo)陽性。1.5.2 結(jié)果判定方案一：空腹血糖、糖耐量0.5小時(shí)、2小時(shí)及曲線下面積四項(xiàng)指標(biāo)中一項(xiàng)指標(biāo)陽性，且對(duì)正常動(dòng)物空腹血糖無影響，即可判定該受試樣品有助于降低血糖升高風(fēng)險(xiǎn)功

18、能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。 方案二：空腹血糖、糖耐量0.5小時(shí)、2小時(shí)及曲線下面積四項(xiàng)指標(biāo)中一項(xiàng)指標(biāo)陽性，血脂（總膽固醇、甘油三酯）無明顯升高，且對(duì)正常動(dòng)物空腹血糖無影響，即可判定該受試樣品有助于降低血糖升高風(fēng)險(xiǎn)功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。1.6 注意事項(xiàng)1.6.1 為了使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物糖代謝功能狀態(tài)盡量保持一致，也為了準(zhǔn)確地按體重計(jì)算受試樣品的用量，實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物應(yīng)嚴(yán)格禁食（不禁水），實(shí)驗(yàn)前后禁食條件應(yīng)一致，鼠類在禁食的同時(shí)應(yīng)更換襯墊物。1.6.2 如用血清樣品進(jìn)行測定，應(yīng)于取血后30分鐘內(nèi)分離血清，分離后血清的含糖量在6小時(shí)內(nèi)不變。用血清制備的無蛋白血濾液可保存48小時(shí)以上。1.6.3 高濃度的還原性物質(zhì)如Vi

19、t C亦能與色素原競爭游離氧，干擾反應(yīng)，使結(jié)果偏低。血紅蛋白能使過氧化氫過早分解，亦干擾反應(yīng)，致使測得血糖值偏低。故對(duì)已溶血的全血或血清必須制備無蛋白濾液后，再進(jìn)行測定。1.7 血糖測定方法用試紙或試劑盒，按說明書操作。2人體試食試驗(yàn)2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)采用隨機(jī)分組，組間和自身兩種對(duì)照設(shè)計(jì)。2.2 受試樣品受試樣品必須是具有定型包裝、標(biāo)明服用方法和服用量的定型產(chǎn)品；安慰劑除功效成分外，在劑型、口感、外觀和包裝上與受試樣品保持一致。2.3 受試者選擇2.3.1納入標(biāo)準(zhǔn)選擇空腹血糖小于7mmol/L（126mg/dl）和餐后2小時(shí)血糖7.8-11.1 mmol/L(140-200mg/dl)的糖調(diào)

20、節(jié)受損人群。2.3.2排除標(biāo)準(zhǔn)2.3.2.1糖尿病患者。2.3.2.2年齡在18歲以下或75歲以上，妊娠或哺乳期婦女，對(duì)受試樣品過敏者。2.3.2.3有心、肝、腎等主要臟器并發(fā)癥，或合并有其它嚴(yán)重疾病，精神病患者。2.3.2.4 服用控制血糖藥物或糖皮質(zhì)激素者。2.3.2.5 不能配合飲食控制而影響觀察結(jié)果者。2.3.2.6 短期內(nèi)服用與受試功能有關(guān)的物品，影響到對(duì)結(jié)果的判斷者。2.3.2.8凡不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，未按規(guī)定服用受試樣品，或資料不全影響觀察結(jié)果者。2.4 受試者分組采用自身和組間兩種對(duì)照設(shè)計(jì)。根據(jù)隨機(jī)盲法的要求進(jìn)行分組。按受試者餐后2小時(shí)血糖及1,5-脫水葡萄糖醇水平隨機(jī)分為試食組和

21、對(duì)照組，盡可能平衡影響結(jié)果的主要因素如空腹血糖、糖化血清蛋白和/或糖化血紅蛋白、年齡、體質(zhì)指數(shù)（BMI）、腰臀比（WHR）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)，以保證組間的可比性。每組受試者不少于50例。2.5 試驗(yàn)方法試驗(yàn)前對(duì)每一位受試者按性別、年齡、不同勞動(dòng)強(qiáng)度、運(yùn)動(dòng)鍛煉、理想體重參照原來生活習(xí)慣規(guī)定相應(yīng)的飲食，試食期間堅(jiān)持飲食控制、運(yùn)動(dòng)鍛煉。試食組按推薦服用方法服用量每日服用受試樣品，對(duì)照組服用安慰劑或采用空白對(duì)照。受試樣品給予時(shí)間2個(gè)月，必要時(shí)可延長至4個(gè)月。2.6 觀察指標(biāo)2.6.1安全性指標(biāo)2.6.1.1 一般狀況體征包括精神、睡眠、飲食、大小便、

22、血壓等2.6.1.2 血、尿、便常規(guī)檢查2.6.1.3 肝、腎功能檢查2.6.1.4 胸透、心電圖、腹部B超檢查（僅試驗(yàn)前檢查一次）2.6.2功效指標(biāo)2.6.2.1體重指數(shù)（BMI）體重指數(shù)（BMI）=體重（kg）/身高（m）2 2.6.2.2腰臀比（WHR）腰臀比（WHR）=腰圍（cm）/臀圍（cm）腰圍測量方法：被測者站立，雙腳分開25至30厘米，體重均勻分配。測量位置在水平位髂前上嵴和第12肋下線的中點(diǎn)（約臍上2-3cm）。將測量尺緊貼軟組織，但不能壓迫，測量值精確到0.1厘米。臀圍測量方法：兩腿并攏直立，兩臂自然下垂，皮尺水平放在前面的恥骨聯(lián)合和背后臀大肌最凸處。將測量尺緊貼

23、軟組織，但不能壓迫，測量值精確到0.1厘米。2.6.2.3空腹血糖觀察試食前后空腹血糖值、空腹血糖下降百分率。2.6.2.4餐后2小時(shí)血糖觀察試食前后食用100g精粉饅頭后2小時(shí)血糖值、餐后2小時(shí)血糖下降百分率。2.6.2.5 1,5-脫水葡萄糖醇（1,5-AG）觀察試食前后1,5-脫水葡萄糖醇、1,5-脫水葡萄糖醇升高百分率。2.6.2.6糖化血清蛋白（果糖胺GSP）觀察試食前后糖化血清蛋白（果糖胺）、糖化血清蛋白（果糖胺）下降百分率2.6.2.7糖化血紅蛋白（HbA1c）觀察試食前后糖化血紅蛋白、糖化血紅蛋白下降百分率。2.6.2.8甘油三酯觀察試食前后血清血清甘油三酯變化。2.6.2.9

24、低密度脂蛋白膽固醇觀察試食前后血清低密度脂蛋白膽固醇變化。2.7注意血清中的葡萄糖能與白蛋白及其他血清蛋白分子末端的氨基上發(fā)生非酶促糖化反應(yīng)而形成高分子酮胺結(jié)構(gòu)。此酮胺結(jié)構(gòu)能在堿性環(huán)境中與硝基四氮唑蘭(NBT)發(fā)生還原反應(yīng)生成藍(lán)紫色物質(zhì)，以1- 脫氧-1- 嗎啡啉果糖(DMF)作標(biāo)準(zhǔn)參照物在540 nm 波長處(530 nm550 nm)進(jìn)行比色測定，求得樣本中果糖胺的濃度。參考值為1.7 mmol/L2.5 mmol/L。由于血清中白蛋白的半衰期約21 d，所以糖化血清蛋白測定可反映受試者過去23 周平均血糖水平。高血糖人群的糖化血清蛋白的增加比糖化血紅蛋白迅速，當(dāng)血糖得到較好控制時(shí)，糖化血

25、清蛋白的下降也比糖化血紅蛋白迅速，因此能較早地提供血糖控制信息。糖化血清蛋白更能靈敏地反映近期血糖升高者血糖的波動(dòng)情況。它的敏感度高，特異強(qiáng)。并不受年齡，飲食，藥物，妊娠等因素的影響，對(duì)血糖濃度的臨時(shí)波動(dòng)反應(yīng)不敏感，是監(jiān)測較長時(shí)間血糖控制水平研究的良好指標(biāo)。標(biāo)本溶血對(duì)糖化血清蛋白的測定結(jié)果有較大影響，血清中1 g/L 的血紅蛋白可導(dǎo)致果糖胺（GSP）測定結(jié)果增高0.6 mmol/L 左右。1,5-AG是呋喃葡萄糖的C1-脫氧形式，主要來源于食物，存在于人體的血液、腦脊液中，不參與能量代謝，健康狀態(tài)下，體內(nèi)各組織間1,5-AG水平濃度相對(duì)穩(wěn)定。體內(nèi)99.9%的1,5-AG通過腎重吸收，但重吸收過

26、程可以被葡萄糖競爭性抑制。當(dāng)血糖水平超過腎糖閾時(shí)，1,5-AG的重吸收減少，導(dǎo)致1,5-AG從尿液中排出，此時(shí)血清1,5-AG水平明顯減少。1,5AG 水平不受年齡、病程、飲食和運(yùn)動(dòng)等因素的影響，相較于空腹血糖、餐后2 h 血糖檢測穩(wěn)定、準(zhǔn)確，相較于糖化血紅蛋白（HbA1c）其能檢測出近期內(nèi)（1-2周）的血糖波動(dòng)情況和超過腎糖閾的高血糖狀況，靈敏度和特異性高于血糖、HbA1c 及糖化血清白蛋白。2.8數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定凡自身對(duì)照資料可以采用配對(duì)t檢驗(yàn)，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗(yàn)，后者需進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)；

27、若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)；方差齊，但變異系數(shù)太大（如CV>50）的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。2.8.1血糖下降幅度試驗(yàn)前空腹血糖試驗(yàn)后空腹血糖空腹血糖下降百分率 = ×100%試驗(yàn)前空腹血糖試驗(yàn)前餐后2小時(shí)血糖試驗(yàn)后餐后2小時(shí)血糖餐后2小時(shí)血糖下降百分率 = ×100%試驗(yàn)前餐后2小時(shí)血糖2.8.2 1,5-脫水葡萄糖醇上升幅度試驗(yàn)前1,5-脫水葡萄糖醇試驗(yàn)后1,5-脫水葡萄糖醇1,5-脫水葡萄糖醇上升百分率=-×100% 試驗(yàn)前1,5-脫水葡萄糖醇2.8.3糖化血清蛋白（果糖胺）下降幅度試驗(yàn)前糖化血清蛋白試驗(yàn)后糖化血清蛋白糖化血清蛋白下降百分率 = ×100%試驗(yàn)前糖化血清蛋白2.8.4糖化血紅蛋白下降幅度試驗(yàn)前糖化血紅蛋白試驗(yàn)后糖化血紅蛋白糖化血紅蛋白下降百分率=-×100% 試驗(yàn)前糖化血紅蛋白2.8.5指標(biāo)判定2.8.5.1 空腹血糖：試驗(yàn)前后自身比較，空腹血糖下降差異有顯著性；試驗(yàn)后試食組空腹血糖值下降或空腹血糖