【實驗室】中藥材中農(nóng)藥多殘留檢測操作規(guī)程

1、.中藥材中農(nóng)藥多殘留檢測操作規(guī)程一、 有機氯類農(nóng)藥殘留量測定方法1 簡述有機氯類農(nóng)藥是農(nóng)藥史中使用量最大，使用歷史最長的一類農(nóng)藥，其化學性質(zhì)穩(wěn)定，脂溶性強，殘效期長，容易在脂肪組織中蓄積，造成慢性中毒，嚴重危害人體健康。本方法通過提取、凈化等步驟制備供試品溶液，采用氣相色譜法，電子捕獲檢測器測定。2 儀器與試劑2.1 氣相色譜儀，電子捕獲檢測器，載氣為高純氮，超聲波處理器，快速溶劑萃取儀，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，高速離心機，氮吹儀，CP Sil 5CB毛細管柱(30.0m 250m 0.25m )2.2 試劑和標準品五氯硝基苯、P,P-DDD、P,P-DDE、P,P-DDT、O,P-DDT、甲體六六六、乙

2、體六六六、丙體六六六、丁體六六六以上標準品均由中國計量科學研究院研制，丙酮（分析純）、正己烷（色譜級）、石油醚（分析純）、氯化鈉（分析純）、濃硫酸（分析純）、助濾劑Celite 545、超純水。3 色譜條件程序升溫：初始100，每分鐘10升至220，每分鐘8升至250，保持10分鐘，進樣口溫度230；檢測器溫度300，載氣為高純N2，流速1.0ml/min，尾吹：30ml/min，采用不分流進樣，進樣體積1.0L。4 操作方法4.1對照品儲備液的配制 對照品儲備液制備 精密稱取六六六 (BHC)-BHC，-BHC，-BHC，-BHC),滴滴涕 (DDT) PP-DDE，PP-DDD，OP-DD

3、T，PP-DDT及五氯硝基苯 (PCNB)農(nóng)藥對照品適量，用正己烷分別制成每 1ml約含45g的溶液，即得。 混合對照品儲備液的制備 精密量取上述各對照品儲備液0.5ml置10ml量瓶中,用正己烷稀釋至刻度，即得。 混合對照品溶液的制備 精密量取上述混合對照品儲備液，用正己烷制成每 1L含0g、1g、5g、10g、50g、100g、250g的溶液，即得。4.2供試品溶液制備4.2.1 樣品的提取采用快速溶劑萃取儀進行萃取，萃取池底部先放置抗溶劑隔片，稱量2g制備好的樣品與2g無水硫酸鈉，混合均勻后裝入30ml萃取池中，加助濾劑Celite 545補足。出口處放置抗溶劑隔片，之后擰緊池蓋。用正己

4、烷進行提取，選擇系統(tǒng)壓力為1200psi，溫度為105，預(yù)熱5分鐘，靜態(tài)提取5分鐘，循環(huán)兩次，萃取結(jié)束后用氮氣吹掃，壓力為120psi，時間為1分鐘，提取液收集到收集瓶中備用。4.2.2 樣品的凈化將上述提取液轉(zhuǎn)移到100毫升分液漏斗，加2毫升濃硫酸磺化3次，去除磺化層，加40毫升4%硫酸鈉水溶液洗正己烷層3次，去除硫酸鈉水溶液層，正己烷層過5克無水硫酸鈉脫水，轉(zhuǎn)移置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，濃縮到適量體積定容待測。4.3測定法按上述色譜條件操作，分別精密吸取供試品溶液和混合對照品溶液各1.0L，分別連續(xù)進樣3次，取平均值，按外標法計算供試品中9種有機氯類農(nóng)藥殘留量。二、 有機磷類農(nóng)藥殘留量測定方法1 簡述

5、有機磷農(nóng)藥是繼有機氯農(nóng)藥之后在我國大量使用的一類農(nóng)藥，在我國農(nóng)藥產(chǎn)量中占有十分重要的地位，農(nóng)藥殘留的分析研究近年來發(fā)展迅速，因此開展這類農(nóng)藥在中藥中進行分析研究很有必要。本方法通過提取、凈化等步驟制備供試品溶液，采用氣相色譜法，脈沖火焰檢測器測定。2 儀器和試劑2.1儀器：美國VARIAN GC-450氣相色譜儀，帶PFPD檢測器，CP Sil 8CB毛細管柱(30.0m530m0.32m )，BUCHI-R210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，KQ-3200超聲波清洗器，高速離心機，氮吹儀，快速溶劑萃取儀，玻璃層析柱，其他常用的實驗室裝置和器皿。2.2 試劑和標準品試劑：二氯甲烷（分析純）、丙酮（分析純）、乙酸

6、乙酯（分析純）經(jīng)全玻璃儀器重蒸；無水硫酸鈉（分析純，650灼燒4小時后備用）助濾劑Celite 545；活性炭；超純水；農(nóng)藥標準品：敵敵畏、甲胺磷、馬拉硫磷、速滅磷、甲基嘧啶磷、乙硫磷、倍硫磷、殺撲磷、二嗪農(nóng)，以上標準品由中國計量科學研究院和國家標準物質(zhì)研究中心提供。3 色譜條件程序升溫：初始120，每分鐘10升至220，每分鐘5升至240，保持2分鐘，每分鐘20升至270，保持1.0分鐘，進樣口溫度240；PFPD檢測器溫度300，氮氣流速2ml/min，氫氣14ml/min，空氣117ml/min，空氣210ml/min；光電倍增管壓500mv，門電壓300mv,不分流進樣，進樣體積1.0

7、L。4 操作方法4.1對照品儲備液的配制對照品儲備液制備 精密稱取敵敵畏、甲胺磷、馬拉硫磷、速滅磷、甲基嘧啶磷、乙硫磷、倍硫磷、殺撲磷、二嗪農(nóng)農(nóng)藥對照品適量，用乙酸乙酯分別制成每1ml約含100ug的溶液，即得。 混合對照品儲備液的制備 精密量取上述各對照品儲備液1ml，置20ml棕色量瓶中,加乙酸乙酯稀釋至刻度，即得。 混合對照品溶液的制備 精密量取上述混合對照品儲備液，用乙酸乙酯制成每 1mL含0.1g、0.5g、1g、2g、5g的溶液，即得。4.2 樣品的制備4.2.1 樣品的提取采用快速溶劑萃取儀進行萃取，萃取池底部先放置抗溶劑隔片，稱量2g制備好的樣品與2g無水硫酸鈉，混合均勻后裝入

8、萃取池中，加助濾劑Celite 545補足。出口處放置抗溶劑隔片，之后擰緊池蓋。用乙酸乙酯進行提取，選擇系統(tǒng)壓力為1500psi，溫度為80，預(yù)熱5分鐘，靜態(tài)提取5分鐘，循環(huán)兩次，萃取結(jié)束后用氮氣吹掃，壓力為120psi，時間為1分鐘，提取液收集到收集瓶中備用。4.2.2 樣品的凈化取玻璃層析柱(25cm1.5cm，柱底部自帶玻璃砂芯，帶活塞，)，自下而上依次裝填lcm厚無水硫酸鈉，5g活性碳+celite545助濾劑(1：3)， 2cm厚無水硫酸鈉，裝填各部分均輕輕敲打，使填充均勻。用20mL乙酸乙酯預(yù)洗，待液面下降至上層硫酸鈉層時，將上述濃縮液轉(zhuǎn)移至層析柱上，并用正己烷-乙酸乙酯（1：1）

9、混合液50m1洗脫，收集淋洗液，置氮吹儀上濃縮至近干，精密加入乙酸乙酯1ml使溶解，即得待測。4.3測定法按上述色譜條件操作，分別精密吸取供試品溶液和混合對照品溶液各1.0L，分別連續(xù)進樣3次，取平均值，按外標法計算供試品中9種有機磷類農(nóng)藥殘留量。三、 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量測定方法1 簡述擬除蟲菊酯雖具有高效、廣譜、低毒、低殘留等優(yōu)點，但也存在著大部分品種對魚具有毒性大、殺傷天敵、無內(nèi)吸作用及對瞞類藥效不高等缺點。本方法通過提取、凈化等步驟制備供試品溶液，采用氣相色譜法，電子捕獲檢測器測定。2 儀器與試劑2.1 氣相色譜儀，電子捕獲檢測器，載氣為高純氮，超聲波處理器，快速溶劑萃取儀，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)

10、儀，高速離心機，氮吹儀，CP Sil 5CB毛細管柱(30.0m 250m 0.25m )2.2 試劑和標準品試劑：丙酮（分析純）、正己烷（色譜級）、石油醚（分析純）、乙酸乙酯（色譜級）、氯化鈉（分析純）、氟羅里硅土、無水硫酸鈉（分析純）、助濾劑Celite 545、超純水。農(nóng)藥標準品：氟胺氰菊酯、順式氯菊酯、氯氟氰菊酯、S-氰戊菊酯、溴螨酯，以上標準品由中國計量科學研究院和國家標準物質(zhì)研究中心提供。3 色譜條件程序升溫：初始160， 保持1分鐘，每分鐘10升至270，保持0.5分鐘，每分鐘1升至290，保持5分鐘，進樣口溫度260，檢測器溫度300載氣為高純N2，流速1.0ml/min，尾吹

11、：30ml/min，分流比20：1，進樣體積1.0L。4 操作方法4.1標準儲備液的配制 分別精密稱取順式氯菊酯、氯氟氰菊酯、S-氰戊菊酯適量，用石油醚配制成1.00mg/ml的溶液，備用，準確量取以上溶液及氟胺氰菊酯、溴螨酯100L置100ml容量瓶中，用石油醚稀釋至刻度，配制成1.0g/mL的混合農(nóng)藥標準儲備液，于冰箱中保存，使用時根據(jù)實際需要配制成不同濃度的標準使用液。4.2 樣品的制備4.2.1 樣品的提?。翰捎每焖偃軇┹腿x進行萃取，萃取池底部先放置抗溶劑隔片，稱量2g制備好的樣品與2g無水硫酸鈉，混合均勻后裝入30ml萃取池中，加助濾劑Celite 545補足。出口處放置抗溶劑隔片，之后擰緊池蓋。用石油醚進行提取，選擇系統(tǒng)壓力為1200psi，溫度為95，預(yù)熱5分鐘，靜態(tài)提取5分鐘，循環(huán)兩次，萃取結(jié)束后用氮氣吹掃，壓力為120psi，時間為1分鐘，提取液收集到收集瓶中備用。4.2.2 樣品的凈化： 選用lcm厚無水硫酸鈉+l.0g弗羅里硅土+O.5g中性氧化鋁(加