核型多角體病毒的殺蟲作用及其田間應(yīng)用方法

1、核型多角體病毒的殺蟲作用及其田間應(yīng)用方法核型多角體病毒殺蟲劑具有特異性強(qiáng)、不易產(chǎn)生抗藥性、安全、無(wú)害、后效作用明顯等優(yōu)點(diǎn)，然而，在田間實(shí)際應(yīng)用中也存在殺蟲譜窄、殺蟲速度慢、受自然因素影響較大等限制因素。結(jié)合國(guó)內(nèi)、外已開展的核型多角體病毒生物特性和田間應(yīng)用研究情況，對(duì)核型多角體病毒殺蟲劑的殺蟲特點(diǎn)和應(yīng)用技術(shù)進(jìn)行了總結(jié)與闡述,并提出了田間應(yīng)用技術(shù)措施。核型多角體病毒(NPV,下稱)屬桿狀病毒科的一類病毒。其作為殺蟲劑，目前已廣泛用于以鱗翅目害蟲為主的農(nóng)林害蟲生物防治。與傳統(tǒng)化學(xué)藥劑相比，其具有特異性強(qiáng)、不易產(chǎn)生抗藥性、安全、無(wú)害等特點(diǎn)，同時(shí)還可以對(duì)整個(gè)害蟲種群起到一定的致弱作用，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)害蟲的可

2、持續(xù)控制。然而，NPV殺蟲劑在田間實(shí)際應(yīng)用中也存在殺蟲譜窄、殺蟲速度慢和受自然因素影響較大等問(wèn)題。因此，如何根據(jù)NPV殺蟲劑自身特點(diǎn)在田間合理使用，成為該項(xiàng)技術(shù)進(jìn)一步推廣應(yīng)用所面臨的緊迫課題之一。為此，筆者結(jié)合國(guó)內(nèi)、外已開展的NPV生物特性和田間應(yīng)用的研究情況，對(duì)NPV殺蟲劑的特點(diǎn)和應(yīng)用進(jìn)行了總結(jié)與闡述，并提出了田間應(yīng)用技術(shù)建議。1NPV種類NPV類能在昆蟲細(xì)胞核內(nèi)增殖的，具有蛋白質(zhì)包涵體的桿狀病毒。它的數(shù)量在已知的昆蟲病毒中居首位。在我國(guó)已報(bào)道的超過(guò)290種昆蟲病毒中，有212種為NPV。目前，國(guó)際上已有多種NPV殺蟲劑應(yīng)用于農(nóng)林害蟲的防治表1國(guó)外核型多角體病毒殺蟲劑使用情況(表1)。其中我

3、國(guó)正式登記的有8種(表2)。病是有稱防治對(duì)象應(yīng)用作物使用國(guó)家美洲棉鈴蟲核型多角體病(HelicoverpazeaNPV)毒美洲棉鈴蟲棉花、煙草、大豆、蔬菜美國(guó)甘藍(lán)夜蛾核型多角體病(MamestrabrassicaeNPV)毒多種鱗翅目昆蟲(主治甘盅夜蛾)蔬菜法國(guó)甜菜夜蛾核型多角體病(SpodopteraexiguaNPV)毒甜菜夜蛾蔬菜荷蘭、美國(guó)、泰國(guó)苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病(AutographacalifornicaNPV)毒多種鱗翅目昆蟲蔬菜危地馬拉、美國(guó)茶小卷葉蛾核型多角體病毒茶小卷葉蛾蔬菜德國(guó)(AdoxophyesoranaNPV)粉紋夜蛾核型多角體病毒(Inchoplusiani粉紋

4、夜蛾蔬菜美國(guó)NPV)芹菜夜蛾核型多角體病(AnagraphafalciferaNPV)毒棉鈴蟲、甜菜夜蛾、芹菜夜蛾棉花、蔬菜美國(guó)灰翅夜蛾核型多角體病毒灰翅夜蛾棉花法國(guó)(SpodopteralittoralisNPV)大豆夜蛾核型多角體病毒大豆夜蛾大豆巴西(AnticarsiagemmatalisNPV)黃杉毒蛾核型多角體病(OrgyiapseudotsugataNPV)毒黃杉、冷杉毒蛾森林美國(guó)、加拿大舞毒蛾核型多角體病毒舞毒蛾森林美國(guó)、加拿大、(LymantriadisparNPV)俄羅斯松黃葉蜂核型多角體病毒松黃葉蜂森林美國(guó)、英國(guó)、(NeodiprionsertiferNPV)法國(guó)棉鈴蟲核型

5、多角體病毒棉鈴蟲棉花、蔬菜俄羅斯(HelicoverpaarmigeraNPV)馬鈴薯麥蛾核型多角體病毒馬鈴薯麥蛾茄科蔬菜、煙秘魯、埃及、(PhthorimaeaoperculellaNPV)草突尼斯美國(guó)白蛾核型多角體病毒美國(guó)白蛾森林俄羅斯(HyphantriacuneaNPV)表2中國(guó)已登記的核型多角體病毒殺蟲劑使用情況病是有稱登記作物防治對(duì)象棉鈴蟲核型多角體病毒(HelicoverpaarmigeraNPV)棉花、煙草棉鈴蟲、煙青蟲斜紋夜蛾核型多角體病毒(SpodopteralituraNPV)十字花科蔬菜斜紋夜蛾甜采伐蛾核型多角體病毒(SpodopteraexiguaNPV)十字花科蔬菜

6、甜菜夜蛾苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒(AutographacalifornicaNPV)十字花科蔬菜甜菜夜蛾油桐尺蟆核型多角體病毒(BuzurasuppressariaNPV)茶樹尺蟆余尺蟆核型多角體病毒(EctropisobliqueNPV)茶樹茶尺蟆黏蟲核型多角體病毒(LeucaniaseparataNPV)小麥黏蟲早原毛蟲核多角體病毒(Gynaephorasp.NPV)草原草原毛蟲2NPV殺蟲劑的殺蟲特點(diǎn)1)特異性強(qiáng)，殺蟲譜窄，對(duì)天敵安全。NPV殺劑特異性強(qiáng)，只對(duì)特定種或同屬的幾種靶標(biāo)昆蟲起作用，對(duì)非靶標(biāo)昆蟲和魚類、鳥類、哺乳動(dòng)物都無(wú)侵染性，對(duì)天敵昆蟲也很安全。如蔣杰賢等(2004)研究發(fā)

7、現(xiàn)，斜紋夜蛾幼蟲被斜紋夜蛾側(cè)溝繭蜂寄生后再感染NPV,病毒對(duì)寄主體內(nèi)的寄生蜂發(fā)育歷期無(wú)明顯影響。羅開理(2005)通過(guò)對(duì)甜菜夜蛾NPV和擬澳洲赤眼蜂的研究，發(fā)現(xiàn)該病毒對(duì)擬澳洲赤眼蜂成蜂的繁殖能力無(wú)影響，子代寄生蜂的發(fā)育也不受影響。2)殺蟲速度緩慢，持效期長(zhǎng)。由于NPV是通過(guò)在蟲體內(nèi)多次侵染從而引起昆蟲死亡，因此,與化學(xué)農(nóng)藥相上匕，NPV殺蟲具有速效性較差，持效性強(qiáng)的特點(diǎn)。毛建萍等(2005)通過(guò)對(duì)斜紋夜蛾NPV田間流行動(dòng)態(tài)的研究，發(fā)現(xiàn)在試驗(yàn)病毒濃度范圍(3.1X113.1X10p|B/ml)內(nèi),幼蟲大多在噴施病毒后4d才開始發(fā)病，57d為發(fā)病高峰，56d開始病死，68d為病死高峰?？锸痰?2

8、004)通過(guò)斜紋夜蛾NPV田間防治試驗(yàn)表明，斜紋夜蛾NPV的防治效果一般在施藥后13d較差，第7d時(shí)與對(duì)照化學(xué)殺蟲劑基本相同，第14d時(shí)則明顯優(yōu)于對(duì)照化學(xué)殺蟲劑，表現(xiàn)出較好的持效性。3)可在靶標(biāo)害蟲種群內(nèi)流行傳播。靶標(biāo)害蟲在感染NPV后，其體內(nèi)組織會(huì)液化，體壁脆弱易破，并且有些害蟲在感染NPV后還有向植物上部轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)。這樣死亡蟲體內(nèi)增殖的病毒就很容易隨昆蟲體液附著在植物外表或土壤表層，在各種媒介的作用下又可作為下1代害蟲的傳染源。因此，NPV在使用1次后就能夠在環(huán)境中積累，引起害蟲群體病毒疾病的流行傳播，從而在相當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)自然控制害蟲消長(zhǎng)。4)對(duì)靶標(biāo)害蟲具有亞致死作用。NPV不僅對(duì)靶標(biāo)害蟲有

9、直接的致死作用，而且還可以使幸存的靶標(biāo)害蟲在取食量、發(fā)育時(shí)間、蛹重、產(chǎn)卵量、孵化率、成蟲壽命、雌雄性比、對(duì)其他致病因子的敏感性等方面發(fā)生變化，即病毒的亞致死作用。亞致死作用會(huì)使靶標(biāo)害蟲繁殖潛勢(shì)下降，從而對(duì)害蟲種群產(chǎn)生致弱作用。這種作用的效果甚至可以延續(xù)多代。這種亞致死作用在除去其致死作用外，還可使靶標(biāo)害蟲種群數(shù)量再降低20%。3外部因素對(duì)NPV殺蟲效果的影響NPV殺蟲劑在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中受外部因素影響較大。這些因素會(huì)對(duì)其殺蟲效果產(chǎn)生很大影響，甚至使其失效，直接影響此類殺蟲劑的防治效果和推廣應(yīng)用。其中，影響其殺蟲效果的主要因素有靶標(biāo)害蟲蟲齡、溫度、酸堿度、紫外線強(qiáng)度等。3.1 蟲齡和其他殺蟲劑一樣

10、，靶標(biāo)害蟲的蟲齡對(duì)NPV殺蟲劑的病死率和病死速率有很大的影響。劉勁軍等（2004）通過(guò)對(duì)不同蟲齡甜菜夜蛾幼蟲對(duì)NPV的敏感性研究發(fā)現(xiàn)，甜菜夜蛾幼蟲對(duì)病毒的敏感性隨蟲齡的降低而增大，蟲齡愈低，病死率愈高，所需使用的病毒量愈小。王絳輝（2008）通過(guò)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)給斜紋夜蛾幼蟲飼喂NPV發(fā)現(xiàn)，隨著幼蟲齡期的增加，LC50值不斷增大。其中2齡幼蟲的LC50值為1齡白2.8倍，3齡與2齡間差別很小，4齡幼蟲的LC50值為3齡白16.4倍，6齡幼蟲的LC50值為3齡白350倍。因此，靶標(biāo)害蟲蟲齡越低，NPV殺蟲劑的防治效果越好。3.2 溫度NPV是在寄主昆蟲細(xì)胞中獲得擴(kuò)增的，有利昆蟲細(xì)胞生長(zhǎng)的溫度條件也適于

11、病毒的擴(kuò)增，反之亦然。因而，溫度對(duì)NPV在靶標(biāo)昆蟲中的流行有很大的影響，主要影響病死速率和病死率。溫度高幼蟲發(fā)病死亡的潛伏期縮短，而溫度偏低時(shí)幼蟲病死時(shí)間則明顯延長(zhǎng)。據(jù)一些調(diào)查研究顯示，溫度能明顯影響NPV在蟲體內(nèi)的增殖。在適宜溫度范圍內(nèi)，增殖速率隨溫度上升而增大。但當(dāng)溫度高過(guò)該病毒的熱抑制溫度時(shí)，溫度的升高對(duì)病毒又會(huì)產(chǎn)生一定的抑制作用，害蟲的病死速率明顯下降。其中，感染NPV的甜菜夜蛾幼蟲在1829c溫度范圍內(nèi)飼育，死亡率隨溫度上升而增加，高于29c時(shí)死亡率又開始下降。而茶尺蟆NPV、棉鈴蟲NPV的熱抑制溫度分別為34c和40Co另外，溫度對(duì)染病靶標(biāo)害蟲的取食量、生長(zhǎng)發(fā)育也會(huì)產(chǎn)生影響。張文軍

12、等（1996）通過(guò)對(duì)斜紋夜蛾幼蟲飼喂病毒發(fā)現(xiàn)，16齡染病幼蟲的取食最適溫度都在2530c之間，在1530c范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，單位時(shí)間內(nèi)取食量增大，單位時(shí)間內(nèi)病毒的攝入量也增多。3.3 酸堿度NPV是由多角體蛋白與包含在其中的病毒粒子組成。多角體蛋白相對(duì)穩(wěn)定，不溶于水和有機(jī)溶劑，對(duì)蛋白酶和細(xì)菌有很強(qiáng)的抗性，但在強(qiáng)酸或堿性的環(huán)境下容易溶解，從而釋放出其中的病毒粒子，而病毒粒子在環(huán)境中不穩(wěn)定，容易失去活性。在自然條件下，土壤和作物葉片的pH對(duì)許多昆蟲病毒活性具有一定的影響。殷坤山等（2004）通過(guò)室內(nèi)試驗(yàn)證明，一般pH6.08.0的病毒液感染害蟲時(shí)具有較高的穩(wěn)定性，在較強(qiáng)的酸性或較強(qiáng)的堿性條件

13、下，保存時(shí)間越長(zhǎng)，活性喪失越大。3.4 紫外線陽(yáng)光中的紫外線能使病毒變性失活，從而影響NPV的致病力。殷坤山等（2004）在室內(nèi)對(duì)茶尺蟆NPV進(jìn)行照射試驗(yàn)表明，無(wú)論是陽(yáng)光直射，還是紫外光照射，茶尺蟆NPV的活力與照射時(shí)間呈負(fù)相關(guān)。照射的時(shí)間越長(zhǎng)，病毒的活性越低。經(jīng)陽(yáng)光直射24h后，病毒幾乎完全喪失活性，用其飼喂的害蟲幼蟲死亡率僅為6.7%。4NPV殺蟲劑田間應(yīng)用方法1）掌握防治適期。在使用NPV殺蟲劑時(shí)要嚴(yán)格把握防治適期。由于大多數(shù)害蟲幼蟲具有孵化后咬食卵殼的習(xí)性，而初孵幼蟲對(duì)病毒的敏感性最強(qiáng)，其取食卵殼上少量的病毒就可能導(dǎo)致死亡。因此，在靶標(biāo)害蟲卵盛孵期或1、2齡時(shí)施藥，能更好地發(fā)揮病毒的作用，達(dá)到事半功倍的防治效果。2）選擇施藥時(shí)間。由于高溫、長(zhǎng)時(shí)間的陽(yáng)光照射會(huì)影響病毒的活性，因此，在使用NPV殺蟲劑時(shí)，最好選擇陰天或者下午太陽(yáng)落山后施藥。這樣可避免陽(yáng)光直射，減輕紫外線和持續(xù)高溫對(duì)多角體病毒的殺傷力，從而提高防治效果。同時(shí)，如果有可能，應(yīng)盡量將藥液噴灑在作物葉片的背面。對(duì)某些在夜間為害的害蟲，應(yīng)于傍晚施藥，以縮短當(dāng)天施藥后至害蟲取食的時(shí)間，提高防治效果。3）確保均勻施藥。由于NPV是通過(guò)被害蟲取食進(jìn)入體內(nèi)而