藥物分析知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)是中國(guó)藥典（縮寫Ch.P）和局頒標(biāo)準(zhǔn)。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：是藥品現(xiàn)代化生產(chǎn)和質(zhì)量管理的重要組成部分，是藥品生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、使用和行政、技術(shù)監(jiān)督管理各部門應(yīng)共同遵循的法定技術(shù)依據(jù)。藥典內(nèi)容分：凡例、正文、附錄、索引。藥品質(zhì)量管理規(guī)范（5個(gè)G）藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)定GLP藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范GMP藥品經(jīng)營(yíng)質(zhì)量管理規(guī)范GSP藥品臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范GCP中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范GAP。標(biāo)準(zhǔn)品：用于生物檢定、抗生素或生化藥品中含量或效價(jià)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按效價(jià)單位計(jì)，以國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行標(biāo)定。對(duì)照品除另有規(guī)定外，均按干燥品（或無(wú)水物質(zhì)）進(jìn)行計(jì)算后使用。藥品檢驗(yàn)工作的基本程序一般

2、為取樣、鑒別、檢查、含量測(cè)定、寫出檢驗(yàn)報(bào)告。雜質(zhì)兩個(gè)來(lái)源：一是由生產(chǎn)過(guò)程中引入，二是貯藏過(guò)程中引入。雜質(zhì)按照來(lái)源分：一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)；按毒性分：毒性雜質(zhì)和信號(hào)雜質(zhì)；按理化性質(zhì)分：有機(jī)雜質(zhì)、無(wú)機(jī)雜質(zhì)和殘留雜質(zhì)。雜質(zhì)限量：藥物中含雜質(zhì)的最大允許量。雜質(zhì)限量%=雜質(zhì)最大允許量/供試品量*100%雜質(zhì)限量%=標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度*標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積/供試品量*100%即L=CV/S*100%1.氯化物檢查，在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應(yīng)，生成氯化銀膠體微粒而顯白色渾濁，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下產(chǎn)生的氯化銀渾濁程度比較，濁度不得更大。加硝酸目的：避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀及氧化銀沉淀的干擾，且可加速

3、氯化銀沉淀的生產(chǎn)并產(chǎn)生較好的乳濁，酸度以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。2.硫酸鹽檢查，在稀鹽酸酸性條件下與氯化鋇反應(yīng)，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液在相同條件下產(chǎn)生的硫酸鋇渾濁程度比較。3.鐵鹽檢查，硫氰酸鹽法，鐵鹽在鹽酸酸性與硫氰酸鹽作用生產(chǎn)紅色可溶性硫氰酸鐵配離子4.重金屬檢查，硫代乙酰胺法適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物；熾灼后的硫代乙酰胺法適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及難溶于水、稀酸及乙醇的有機(jī)藥物；硫化鈉法適用于溶于堿性水溶液而難溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的藥物；微孔濾膜法適用于重金屬限量低的藥物。常用熱分析法有：熱重分析、差熱分析和差示掃描熱分析。中國(guó)藥典規(guī)定殘留溶劑檢查方法為GC（氣相

4、色譜法）特殊雜質(zhì)檢查一薄層色譜法1.雜質(zhì)對(duì)照品法 適用于已知雜質(zhì)并能制備得到雜質(zhì)對(duì)照品2供試品溶液自身稀釋對(duì)照法 適用雜質(zhì)接受不確定或無(wú)雜質(zhì)對(duì)照品二高效液相色譜法1.內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定法 適用于有對(duì)照品并能夠測(cè)定雜質(zhì)校正因子2.外標(biāo)法測(cè)定法 適用于有對(duì)照品且進(jìn)樣量能夠精確控制3.加校正因子的主成分自身對(duì)照測(cè)定法 適用不用雜質(zhì)對(duì)照品4.不加校正因子的主成分自身對(duì)照測(cè)定法 適用沒(méi)有雜質(zhì)對(duì)照品5.面積歸一化法 適用粗略測(cè)量供試品中雜質(zhì)含量。比旋度反映藥物純度，限定雜質(zhì)含量。不經(jīng)有機(jī)破壞的分析：直接測(cè)定法、經(jīng)水解測(cè)定法、經(jīng)還原分解測(cè)定法。經(jīng)有機(jī)破壞分析：濕法破壞、干法破壞。濕法破壞適用于含氮有機(jī)合成

5、藥物分析前處理，在生物制品中用于氮、磷、硫柳汞即氯化鈉測(cè)定法的前處理凱氏定氮法。干法破壞分1.高溫?zé)胱品?.氧瓶燃燒法，含F(xiàn)藥物選用水做吸收液，用銀量法測(cè)含CL用水氫氧化鈉做吸收液，用銀量法測(cè)含Br用水氫氧化鈉做吸收液，測(cè)定含碘可用水氫氧化鈉二氧化硫做吸收液，含硫濃過(guò)氧化氫與水混合液做吸收液。容量分析應(yīng)用于化學(xué)原料藥的含量測(cè)定。滴定度：每1ml規(guī)定濃度的滴定液多相當(dāng)?shù)谋粶y(cè)藥物的質(zhì)量，mg，T(mg/ml)=m×a/b×M，m為滴定液的摩爾濃度（mol/L）a為被測(cè)藥物的摩爾數(shù)，b為滴定劑的摩爾數(shù)M為被測(cè)藥物的毫摩爾質(zhì)量（mg）。片劑的分析：1.容量分析法標(biāo)示量%=V*T*F

6、*D*平均片重/（W*標(biāo)示量）*100% F=實(shí)際摩爾濃度/規(guī)定摩爾濃度2.分光光度法 A=ECL 標(biāo)示量%=（A/EL）*（1/1000）*D*平均片重/（W*標(biāo)示量）*100%3.高效液相色譜法標(biāo)示量%=A樣*C對(duì)*D*平均片重/（A對(duì)*W*標(biāo)示量）*100%注射劑的分析：標(biāo)示量%=V*T*F*D/（Vs*標(biāo)示量）*100%分光光度法：1.百分吸光系數(shù)法 標(biāo)示量%=A*D/(Vs*E*100*標(biāo)示量)*100%2.對(duì)照品比較法 標(biāo)示量%=A樣*C對(duì)*D/（A對(duì)*Vs*標(biāo)示量）*100%色譜分析之高效液相色譜法，常用色譜柱填充劑有硅膠和十八烷基烷鍵鍵合硅膠，除另有規(guī)定外柱溫為室溫，檢測(cè)器為紫

7、外檢測(cè)器，檢測(cè)器不允許使用含不揮發(fā)鹽組分的流動(dòng)相，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，常用甲醇-水，間或加有乙腈、緩沖液、反離子物質(zhì)等為流動(dòng)相。色譜系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)通常包括理論板數(shù)、分離度（R1.5）、重復(fù)性（5次）、拖尾因子（0.95-1.05之間）四項(xiàng)指標(biāo)。藥品驗(yàn)證分析內(nèi)容八條：準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、檢測(cè)限、定量限、線性、范圍、耐用性。準(zhǔn)確度：用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般用回收率%表示。精密度：在規(guī)定測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。包括重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。生物樣品包括各種體液和組織，血樣包括血漿、血清和全血，將血液置含抗凝劑的試

8、管中，以25003000r/min離心5分鐘時(shí)血漿與血細(xì)胞分離，短期保存可4冷藏，長(zhǎng)期保存需-20或-80下冷凍貯藏。唾液以3000r/min離心10分鐘，在4一下保存。采集的尿是自然排尿，包括隨時(shí)尿、晨尿、白天尿、夜間尿和時(shí)間尿五種。去除蛋白質(zhì)常用方法：1.加入與水混溶的有機(jī)溶劑（常用水溶性溶劑：乙腈、甲醇、丙酮、四氫呋喃等，比例1:1-3高速10000r/min離心1-2分鐘可沉淀）2.加入中性鹽（常用中性鹽：飽和硫酸銨、硫酸鈉、鎂鹽、磷酸鹽、枸櫞酸鹽等，比例1:2,同上高速離心）3.加入強(qiáng)酸（PH低于蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，常用強(qiáng)酸：10%三氯醋酸、65%高氯酸、5%偏磷酸等，比例1:0.6同上）

9、4.加入含鋅鹽及銅鹽的沉淀劑（PH高于等電點(diǎn)，常用：CuSO4-NaWO4、ZnSO4-NaOH等，比例1:2同上）5.酶解法。液固粹取法LSE:一種柱色譜分離方法，將具有吸附、分配及離子交換性質(zhì)的、表面積大的擔(dān)體作為粹取劑填入小柱，以溶劑淋洗后，將生物樣品通過(guò)，使其藥物或內(nèi)源性干擾物保留在擔(dān)體上，用適當(dāng)溶劑洗去干擾物后，再用適當(dāng)溶劑將藥物洗脫下來(lái)。填充柱分兩類：1親水性硅藻土2疏水性活性炭、聚苯乙烯或C18化學(xué)鍵合硅膠。粹取5步驟：(1)用有機(jī)溶劑如甲醇，預(yù)先濕潤(rùn)微型柱，使增加填料與待測(cè)物相互作用的表面積，并可除去可能干擾的填料殘留物(2)用水或合適的緩沖液沖洗，除去殘余的甲醇(3)進(jìn)樣，通

10、過(guò)微型柱，廢液棄去(4)用水或合適的緩沖液沖洗，選擇性地除去將會(huì)干擾后面色譜分析的內(nèi)源性雜質(zhì)(5)用合適的溶劑如甲醇、乙腈等洗脫樣品，收集，洗脫液用于后面的分析測(cè)定或進(jìn)一步研究?！景捅韧最愃幬锘窘Y(jié)構(gòu)】分兩部分，一母核巴比妥酸的環(huán)狀丙二酰脲結(jié)構(gòu)，此結(jié)構(gòu)是巴比妥類藥物的共同部分，決定巴比妥類藥物共性;二取代基部分。微溶或極微溶水易溶于乙醇等有機(jī)溶劑，含1，3-二酰亞胺基團(tuán)顯弱酸性，能發(fā)生酮式-烯醇式互變異構(gòu)，在水中發(fā)生二級(jí)電離。含酰亞胺結(jié)構(gòu)，與堿液共沸水解放出氨氣使紅石蕊變藍(lán)。與重金屬離子反應(yīng)：1>與銀鹽反應(yīng)銀量法：在碳酸鈉堿性溶液中，生成鈉鹽溶解，再與硝酸銀溶液反應(yīng)，先生成可溶性一銀鹽，

11、加入過(guò)量硝酸銀則生成難溶性二銀鹽白色沉淀。2>與銅鹽反應(yīng)：與銅吡啶試液反應(yīng)形成穩(wěn)定配位化合物，巴比妥類藥物紫色沉淀，含硫巴比妥類藥物綠色。3>與鈷鹽反應(yīng)4>與香草醛反應(yīng)生成棕紅色物質(zhì)司可巴比妥專屬實(shí)驗(yàn)：與碘反應(yīng)顯棕黃色5分內(nèi)消失，溴量法司可巴比妥與溴僅應(yīng)使其褪色。巴比妥類與高錳酸鉀反應(yīng)在堿性中紫色還原為棕色二氧化錳。苯巴比妥專屬鑒別反應(yīng)：硝化反應(yīng)、硫酸-亞硝酸鈉反應(yīng)、甲醛-硫酸反應(yīng)。硫代巴比妥與鉛白色沉淀?！景捅韧缀繙y(cè)定】1.銀量法原理，先形成可溶性一銀鹽，過(guò)量滴加硝酸銀形成難溶性二銀鹽；注意事項(xiàng)一，無(wú)水碳酸鈉溶液要臨用新配，二硝酸銀滴定應(yīng)新配制，三銀電極在臨用前需用硝酸浸

12、洗。芳酸鑒別：水楊酸及鹽在中性或弱酸性與三氯化鐵缶成紫色配合物（反應(yīng)適宜PH為46）（五種直接用FeCl3檢測(cè)：雙水楊酯、水楊酸、對(duì)乙酰氨基酚、二氟尼柳、對(duì)氨基水楊酸鈉；兩種間接：阿司匹林、貝諾酯）。苯甲酸鹽中性或堿性與三氯化鐵毛成堿式苯甲酸鐵鹽的赭色沉淀【重氮化-偶合反應(yīng)】具潛在芳伯胺基加酸水解產(chǎn)生游離芳伯胺基結(jié)構(gòu)，在酸性與亞硝酸重氮化反應(yīng)（四種直接反應(yīng)：對(duì)氨基水楊酸鈉、鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺；三種間接：對(duì)乙氨基酚、醋氨苯砜、貝諾酯）。阿司匹林與碳酸鈉加熱水解，再加過(guò)量稀硫酸酸化生成白色水楊酸沉淀并有醋酸臭氣。阿司匹林特殊雜質(zhì)檢查：溶液澄清度、水楊酸（主要檢查雜質(zhì)）；對(duì)氨基水

13、楊酸鈉毛要檢查雜質(zhì)是間氨基酚?！痉及奉悺浚ū阶艨ㄒ?、普魯卡因、丁卡因等）具有對(duì)氨基苯甲酸酯的母體?！捐b別反應(yīng)】重氮化偶合反應(yīng)：分子結(jié)構(gòu)具芳伯氨基或潛在芳伯氨基藥物都可發(fā)生，生成的重氮鹽可與堿性萘酚偶合成有色偶氮染料，苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普卡因、鹽酸：普魯卡因胺在鹽酸條件下可直接與亞硝酸鈉重氮反應(yīng)；對(duì)乙酰氨基酚、醋氨苯砜在鹽酸或硫酸中加熱水解后才可與亞硝酸鈉重氮反應(yīng)；丁卡因不具芳伯氨基，無(wú)重氮反應(yīng)，伹在酸性下與亞硝鈉反應(yīng)生成乳白色沉淀。對(duì)乙酰氨基酚與三氯化鐵反應(yīng)顯藍(lán)紫色。鹽酸利多卡因在NaCO3中與CuSO4反應(yīng)生成藍(lán)紫色配合物，溶入三氯甲烷顯黃色；苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普卡因

14、、鹽酸丁卡因無(wú)此反應(yīng)。鹽酸利多卡因在酸性下與氯化鈷生成亮綠色鈷鹽沉淀【鹽酸普魯卡因鑒別】溶解后加氫氧化鈉生成白色沉淀（普魯卡因）加熱變?yōu)橛蜖钗?，繼續(xù)加熱產(chǎn)生蒸氣使?jié)窦t石蕊變藍(lán)。鹽酸普魯胺加過(guò)氧化氫再加三氯化鐵顯紫紅色隨后變棕。苯佐卡因加氫氧化鈉加碘生成黃色沉淀放碘仿臭氣【對(duì)乙酰氨基酚特殊雜質(zhì)】檢查對(duì)氨基酚，鹽酸普魯卡因注射液中檢查對(duì)氨基苯甲酸。【芳胺類含量測(cè)定】亞硝酸鈉滴定法、非水溶液滴定法、分光光度法、高效液相色譜法。含量測(cè)定之【亞硝酸鈉滴定法原理】芳伯氨基或水解后生成放伯氨基的藥物在酸性溶液中與亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應(yīng)，生產(chǎn)重氮鹽，用永停滴定法指示終點(diǎn)，主要條件：1.加入適量溴化鉀加快反應(yīng)速

15、度2.溴化鉀與鹽酸作用產(chǎn)生溴化氫與亞硝酸鈉反應(yīng)生成NOBr（目的）3.加過(guò)量鹽酸加速反應(yīng)（加入過(guò)量鹽酸有利于：重氮化反應(yīng)速度加快、重氮鹽在酸性穩(wěn)定、防止生成偶氮氨基化合物影響測(cè)定）可在室溫（10-30）下進(jìn)行，其中15下結(jié)果較準(zhǔn)確。指示終點(diǎn)方法：電位法、永停滴定法、外指示劑法、內(nèi)指示劑法。中國(guó)藥典芳胺類藥物亞硝酸鈉滴定法采用永停滴定法指示終點(diǎn)。【芳胺類苯乙胺類鑒別試驗(yàn)】三氯化鐵、甲醛-硫酸、氧化、亞硝基鐵氰化鈉（脂肪族伯胺專屬反應(yīng)）。特殊雜質(zhì)檢查：腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素、鹽酸甲氧明檢查酮體?！倦s環(huán)吡啶類藥物弱堿性】尼可剎米分子除吡啶環(huán)上N原子外，吡啶

16、環(huán)位被酰基取代，遇堿水解后釋放堿性二乙胺【還原性】異煙肼分子中吡啶環(huán)位被酰肼取代，可被氧化也可與含羰基的縮合【雜環(huán)吡啶類鑒別試驗(yàn)】一、吡啶環(huán)開環(huán)反應(yīng)適用于吡啶環(huán)的或被羧基衍生物取代的尼可剎米和異煙肼1.戊稀二醛反應(yīng)（與苯胺縮合黃色至黃棕色，與異煙肼需顯用高錳酸鉀或溴水氧化為異煙酸再反應(yīng)）2.二硝基氯苯反應(yīng)（無(wú)水條件下與2,4-二硝基氯苯）。二、異煙肼與氨制硝酸銀反應(yīng)產(chǎn)生銀鏡，異煙肼的酰肼基與芳醛縮合成腙有固定熔點(diǎn)可鑒定。三、尼可剎米與硫酸銅及硫氰酸銨生成草綠色配合物沉淀，異煙肼、尼可剎米與氯化汞生成白色沉淀。四、尼可剎米與氫氧化鈉加熱有二乙胺臭味逸出，是濕紅石蕊變藍(lán)。異煙肼檢查游離肼（在供試品

17、主斑點(diǎn)前方與硫酸肼斑點(diǎn)不得顯黃色斑點(diǎn)）尼可剎米檢查N-乙基煙酰胺【雜環(huán)喹啉堿性】季銨堿脂肪胺芳胺、N-芳雜環(huán)酰胺。硫酸奎寧為左旋體，硫酸奎尼丁為右旋體，兩者在稀硫酸中顯藍(lán)色熒光【綠奎寧反應(yīng)】奎寧和奎尼丁經(jīng)氯水氧化氯化再氨水處理成綠色二醌基亞胺銨鹽，顯翠綠色【Vitaili反應(yīng)】雜環(huán)托烷類生物堿鑒別顯深紫色【吩噻類】專屬與鈀離子配合顯紅色，其氧化產(chǎn)物砜和亞砜無(wú)此反應(yīng)。苯并二氮雜卓類在硫酸下顯不同熒光：地西泮為黃綠色，氯氮卓為黃色?！倦s環(huán)含量測(cè)定之非水溶液滴定法】非水溶劑四種（酸性溶劑、堿性、兩性、惰性如甲苯三氯甲烷丙酮）當(dāng)雜環(huán)類藥物pKb為810時(shí)適用冰醋酸為溶劑，堿性更弱pKb為1012時(shí)逘用

18、冰醋酸與醋酐混合液，pKb>12用醋酐。消除氫鹵酸干擾是加入過(guò)量醋酸汞冰醋酸溶液，使生成在醋酸中難解離的鹵化汞，再用高氯酸滴定。硫酸鹽類在冰醋酸中只能滴定至硫酸氫鹽可用高氯酸直接滴定。非水溶液滴定法常用電位滴定法（用玻璃電極為指示電極，飽和甘汞電極）和指示劑法（結(jié)晶紫酸式為黃色，堿式為紫色）。消除干擾：改用中性溶劑、電位法指示終點(diǎn)、加抗壞血酸。硝酸鹽用電位法指示終點(diǎn)。磷酸與有機(jī)酸在冰醋酸中可直接滴定。雜環(huán)含量測(cè)定之氧倫還原滴定法：鈰量法、溴酸鉀法、碘量法、溴量法。鈰量法（二氫吡啶類、吩噻嗪類）硫酸鈰滴定先失去一電子形成紅色自由基，達(dá)終點(diǎn)吩噻嗪失兩電子紅色消褪。溴酸鉀法專屬異煙肼【雜環(huán)含量

19、測(cè)定之分光光度法】鈀離子比色法-吩噻嗪在pH2緩沖液與鈀離子Pd2+形成紅色配合物在500nm波長(zhǎng)最大吸收?！揪S生素A】溶解于三氯甲烷、乙醚、環(huán)己烷、異丙醇?！揪S生素A鑒別】三氯化銻反應(yīng)原理：維生素A在飽和無(wú)水三氯化銻的無(wú)醇三氯甲烷溶液中顯藍(lán)色，漸變成紫紅色，機(jī)制為維生素A和三氯化銻中的親電試劑綠化高銻作用形成不穩(wěn)定的藍(lán)色碳正離子?！揪S生素A含量測(cè)定】紫外分光光度法（三點(diǎn)校正法）：第一法（等波長(zhǎng)差法）入1=328nm入2=316nm入3=340nm入=12nm，第二法（等吸收比法）入1=325nm入2=310nm入3=334nm。第一法（直接測(cè)定法，適用于純度高等維生素A醋酸酯）在300、31

20、6、328、340、360五個(gè)波長(zhǎng)點(diǎn)出測(cè)定吸光度，確定最大吸收波長(zhǎng)應(yīng)為328nm。第二法（皂化法，適用于維生素A醇）在300、310、325、334nm四個(gè)波長(zhǎng)點(diǎn)測(cè)定吸光度，去頂最大吸收波長(zhǎng)為325nm?！揪S生素B鑒別】維生素B1在堿性溶液中被鐵氰化鉀氧化生成硫色素溶于正丁醇中顯藍(lán)色熒光，地西泮顯黃綠色熒光，加酸熒光消失，加堿又有熒光。與生物堿沉淀試劑反應(yīng)生成恒定沉淀。【維生素B含量測(cè)定】【非水滴定】原理：維生素B1分子中含兩個(gè)堿性成鹽等伯胺和季銨基團(tuán)，中非水溶液中（醋酸汞存在下）可于高氯酸作用，根據(jù)高氯酸量可計(jì)算維生素B1含量。有機(jī)堿等氫鹵酸鹽中用高氯酸滴定前需加入醋酸汞?！咀贤夥止夤舛确ā?/p>

21、原理：維生素B1分子中具有共軛雙鍵結(jié)構(gòu)，中紫外區(qū)有吸收，根據(jù)其最大吸收波長(zhǎng)處吸光度可計(jì)算含量。維生素C一般表現(xiàn)為一元酸，有4個(gè)光學(xué)異構(gòu)體，其中L（+）-抗壞血酸活性最強(qiáng)，右旋【維生素C鑒別】與【2，6-二氯靛酚反應(yīng)】原理：氧化性在酸性介質(zhì)中為玫瑰紅，在堿性介質(zhì)中為藍(lán)色，與維生素C作用后生成還原型無(wú)色酚亞胺【維生素C含量】碘量法、2，6-二氯靛酚滴定法?！揪S生素E鑒別】【硝酸反應(yīng)】原理：維生素E中硝酸酸性條件下水解生成生育酚，生育酚被硝酸氧化為鄰醌結(jié)構(gòu)等生育紅而顯橙紅色【維生素E雜志檢查】酸度、未酯化的生育酚（鈰量法，吩噻嗪類、二氫吡啶類，指示劑為二苯胺，亮黃-灰紫，還原-氧化）【維生素E含量】

22、【氣相色譜法】測(cè)定時(shí)采用內(nèi)標(biāo)法。內(nèi)標(biāo)物為正三十二烷。系統(tǒng)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)：理論板數(shù)（n）按維生素E峰計(jì)算不應(yīng)低于500（填充柱）或5000（毛細(xì)管柱），維生素E峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰等分離度R2?！剧摅w結(jié)構(gòu)性質(zhì)】腎上腺激素21C（12）雄性19C(13)孕21C(14)雌18C(567)，（1）4-3-酮，紫外吸收、與羰基試劑反應(yīng)(2)C1-醇酮基，還原性（3）C17-羥基，可成酯（4）C17-甲酮基，與亞硝基鐵氫化鈉反應(yīng)，專屬性（5）C17-羥基，可成酯（6）C17-乙炔基，與硝酸銀反應(yīng)（7）A環(huán)為3-OH苯環(huán)，紫外吸收、與重氮苯磺酸鹽反應(yīng)?！剧摅w鑒別】（一）與強(qiáng)酸呈色反應(yīng)（二）官能團(tuán)反應(yīng)，皮質(zhì)激素類，松之類如氫化可的松C17-醇酮基的四氮唑比色法【甾體特殊雜志檢查】（一）有關(guān)物質(zhì)檢查，薄層色譜法用自身稀釋對(duì)照法，高效液相色譜法用主成分自身對(duì)照法（二）硒的檢查，用二氨基萘比色法（三）殘留溶劑檢查，甲醇和丙酮，氣相色譜法用內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定（四）游離磷酸鹽的檢查【甾體含量】【四氮唑比色法】用于皮質(zhì)激素藥物含量測(cè)定，C17-醇酮基還原性，還原四氮唑鹽味有色甲贊。氯化三苯四氮唑TTC、紅四氮唑RT、藍(lán)四氮唑BT。反應(yīng)條件：無(wú)水乙醇溶解，干燥具塞試管、氫氧化四甲基銨試液、暗處放置。測(cè)定影響因素：集團(tuán)、溶劑和水分、堿種類及加入順