細胞生物學(xué)實驗

1、細胞生物學(xué)教案第五章物質(zhì)的跨膜運輸與信號傳遞.教學(xué)目標：1深刻理解被動運輸、主動運輸和內(nèi)吞外排的概念，以及物質(zhì)跨膜運輸?shù)闹匾饬x；2.理解細胞信號傳遞的主要特點，掌握番類激素信號通路、cAMP信號通路、磷脂酰肌醇信號通路和EGF受體信號通路的主要環(huán)節(jié)。.重點：跨膜運輸?shù)姆绞胶图毎ㄓ嵉男盘柾?難點：跨膜運輸?shù)臋C制4 .授課方式與教學(xué)方法：講授、討論、多媒體輔助教學(xué)。5 .教學(xué)內(nèi)容：細胞膜是細胞與細胞外環(huán)境之間的一種選擇性通透屏障，物質(zhì)的跨膜運輸對細胞的生存和生長至關(guān)重要。多細胞生物是一個繁忙而有序的細胞社會，這種社會性的維持不僅依賴于細胞的物質(zhì)代謝與能量代謝，還有賴于細胞通訊與信號傳遞，以協(xié)

2、調(diào)細胞的行為。第一節(jié)物質(zhì)的跨膜運輸一.被動運輸(passivetransport)定義：通過簡單擴散或協(xié)助擴散實現(xiàn)物質(zhì)由高濃度向低濃度方向的跨膜轉(zhuǎn)運。轉(zhuǎn)運的動力來自物質(zhì)的濃度梯度，不需要細胞提供能量。類型：簡單擴散(simplediffusion)、協(xié)助擴散(facilitateddiffusion)膜轉(zhuǎn)運蛋白：1 .載體蛋白(carrierproteins-通透酶(permease)性質(zhì)；介導(dǎo)被動運輸與主動運輸。2 .通道蛋白(channelproteins)具有離子選擇性，轉(zhuǎn)運速率高；離子通道是門控的；只介導(dǎo)被動運輸膜轉(zhuǎn)運蛋白通道蛋白(被動運輸)膜轉(zhuǎn)運蛋白j載體蛋白單運輸(兄動運輸+主動運

3、輸)Y共運輸、協(xié)同運輸T對向運輸細胞膜上的運輸?shù)鞍祝狠d體蛋白：通過構(gòu)象變化運輸物質(zhì)通道蛋白：形成通道、運輸物質(zhì)載體蛋白：膜上一類轉(zhuǎn)運蛋白，可特異的、可逆的與某物質(zhì)結(jié)合，通過構(gòu)象變化將物質(zhì)從膜的一側(cè)運到另一側(cè)。又稱通透酶，與運輸物質(zhì)的結(jié)合與酶的動力學(xué)相似。通道蛋白：形成親水的通道，允許一定大小和一定電荷的離子通過。因運轉(zhuǎn)的幾乎都是離子，又稱離子通道通道蛋白形成通道:持續(xù)開放（如水通道）間斷開放（閘門通道）配體閘門通道：配體與受體結(jié)合，通道開放。電壓閘門通道：膜電位變化，啟動通道開放。壓力激活通道：壓力變化，啟動通道開放。離子閘門通道：特定離子濃度變化，啟動通道。神經(jīng)-肌肉興奮，不到1秒鐘的時間內(nèi)

4、完成，這一過程包括四種通道順次例如：神經(jīng)-肌肉興奮，不到1秒鐘的時間內(nèi)完成，這一過程包括四種通道順次開放：A、刺激-神經(jīng)沖動-神經(jīng)末梢，膜去極化，電壓閘門通道鈣離子通道開放，鈣離子進入神經(jīng)末梢，刺激乙酰膽堿（ACH分泌到突觸間隙中；B、ACHT突觸后肌細胞膜上的受體結(jié)合，配體閘門鈉離子通道開放，鈉離子進入肌細胞，肌細胞膜去極化；C、肌細胞膜上電壓閘門鈉離子通道開放，更多的鈉離子進入肌細胞，肌細胞膜進一步去極化，產(chǎn)生動作電位，擴散到肌細胞膜；D、肌漿網(wǎng)上的離子閘門通道鈣離子通道開放，鈣離子進入細胞質(zhì)，引起肌肉收縮。二.主動運輸（activetransport）定義：是由載體蛋白所介導(dǎo)的物質(zhì)逆濃度

5、梯度或電化學(xué)梯度由濃度低的一側(cè)向濃度高的一側(cè)進行跨膜轉(zhuǎn)運的方式。細胞耗能。由AT喧接提供能量和間接提供能量及光能驅(qū)動.被動與主動運輸?shù)谋容^主動運輸類型：三種基本類型由ATPt接提供能量的主動運輸鈉鉀泵鈣泵（C-ATP酶）質(zhì)子泵：P-型質(zhì)子泵、V-型質(zhì)子泵、H+-ATP酶協(xié)同運輸（cotransport）由Na+-K+泵（或H+-泵）與載體蛋白協(xié)同作用，靠間接消耗AT所完成的主動運輸方式物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運與膜電位進行主動運輸?shù)奈镔|(zhì)：各種離子（如鈉離子、鉀離子、氯離子、碳酸根離子、鈣離子等）。葡萄糖、氨基酸等帶電荷極性分子。進行主動運輸?shù)妮d體又稱“離子泵”2a鉀泵膜上運輸鈉和鉀離子的載體稱“鈉鉀泵”或

6、“鈉鉀ATP酶”。鈉一鉀泵的組成：大亞基（100000DN:外側(cè)：1、鉀結(jié)合位點；2、鳥苯昔結(jié)合位點內(nèi)側(cè)：1、鈉結(jié)合點；2、ATP結(jié)合點小亞基（45000DN：與大亞基結(jié)合，作用不明。“鈉鉀泵”的主動運輸機制即：3Na+結(jié)合到結(jié)合位點上？酶磷酸化？酶構(gòu)象變化？3Na+釋放到細胞外?2K+結(jié)合到位點上？酶去磷酸化？2K+釋放到細胞內(nèi)，酶構(gòu)象恢復(fù)原始狀態(tài)。Na+-K+泵的作用產(chǎn)生和維持膜電位；為葡萄糖、氨基酸的主動運輸創(chuàng)造條件；維持細胞的滲透壓，例如：當(dāng)腎小管細胞間隙鈉過高時會導(dǎo)致細胞內(nèi)水分外滲，細胞內(nèi)缺水，人會感到口渴而飲水多。鈣泵，又稱Ca2+-ATP酶位于質(zhì)膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的跨膜蛋白，將Ca2+

7、輸出細胞或泵入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中儲存，以維持細胞內(nèi)低濃度的游離Ca2+.鈣泵工作與ATP的水解相偶聯(lián)，每消耗一個ATP分子轉(zhuǎn)運兩個62+.鈣調(diào)蛋白是鈣泵的激活因子.鈣調(diào)蛋白（CaM）是62+應(yīng)答蛋白，由148個氨基酸殘基組成，含4個結(jié)構(gòu)域，每個結(jié)構(gòu)域可以與一個Ca2+.CaM本身無活性，Ca2+與CaM結(jié)合后形成Ca2+-CaM復(fù)合體,再與靶酶結(jié)合將其活化.質(zhì)子泵，又稱H+-ATP酶位于植物細胞、真菌和細菌質(zhì)膜上的跨膜蛋白，將H+泵出細胞建立跨膜的H+電化學(xué)梯度，驅(qū)動轉(zhuǎn)運溶質(zhì)進入細胞。P-型質(zhì)子泵：位于真核細胞的質(zhì)膜上，轉(zhuǎn)運H+過程中涉及磷酸化和去磷酸化。V-型質(zhì)子泵：位于動物細胞溶酶體膜和植物液泡膜

8、上，轉(zhuǎn)運H+過程中不涉及磷酸化的中間體。提高細胞質(zhì)中的pH和細胞器內(nèi)的酸度。H+-ATP酶:位于線粒體的內(nèi)膜，植物類囊體膜和細菌質(zhì)膜上，利用膜上H+梯度合成ATR協(xié)同運輸(cotransport)由Na+-K+泵(或H+-泵)與載體蛋白協(xié)同作用，靠間接消耗ATP所完成的主動運輸方式主動運輸?shù)哪芰坎皇怯葾TP直接提供，而是由儲存在膜上離子梯度中的能量來驅(qū)動的。這類運輸進行時，一種物質(zhì)的運輸必須依賴另一種物質(zhì)的同時運輸，故稱為協(xié)同運輸。協(xié)同運輸兩種物質(zhì)同時相向轉(zhuǎn)運，稱對向運輸(逆向協(xié)同運輸)。如Na+-K+;Na-H+Cl-HC13-兩種物質(zhì)同時同向轉(zhuǎn)運，稱共運輸(同向協(xié)同運輸)。如Na+-G;N

9、a+-aa濃度差+電位差一電化學(xué)梯度動物細胞中，Na+的電化學(xué)梯度通常是驅(qū)動另一禾分子主運輸?shù)哪芰浚鏝a+梯度驅(qū)動Gaa的主動運輸、胞吞作用(endocytosis)與胞吐作用(exocytosis)作用：完成大分子與顆粒性物質(zhì)的跨膜運輸，又稱膜泡運輸或批量運輸(bulktransport)。屬于主動運輸。胞吞作用胞吐作用胞吞作用胞飲作用(pinocytosis)與吞噬作用(phagocytosis)。胞飲作用與吞噬作用主要有三點區(qū)別特征內(nèi)吞泡的大小轉(zhuǎn)運方式內(nèi)吞泡形成機制胞飲作用小于150nm連續(xù)發(fā)生的過程需要籠形蛋白形成包被及接合素蛋白連接吞噬作用大于250nm需受體介導(dǎo)的信號觸發(fā)過程需要

10、微絲及結(jié)合蛋白的參與受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用及包被的組裝胞內(nèi)體：是動物細胞內(nèi)由膜包圍的細胞器，其作用是傳輸由胞吞作用新攝入的物質(zhì)到溶酶體被降解。胞內(nèi)體上有質(zhì)子泵。胞吐作用胞吐作用：是將細胞內(nèi)的分泌泡或其他某些膜泡中的物質(zhì)通過細胞膜運出細胞的過程。組成型的外排途徑(constitutiveexocytosispathway)所有真核細胞連續(xù)分泌過程用于質(zhì)膜更新(膜脂、膜蛋白、胞外基質(zhì)組分、營養(yǎng)或信號分子)defaultpathway:除某些有特殊標志的融留蛋白和調(diào)節(jié)型分泌泡外，其余蛋白的轉(zhuǎn)運途徑：粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體分泌泡f細胞表面調(diào)節(jié)型外排途徑(regulatedexocytosispathway)特

11、化的分泌細胞儲存一一刺激一一釋放產(chǎn)生的分泌物(如激素、粘液或消化酶)具有共同的分選機制，分選信號存在于蛋白本身，分選主要由高爾基體TGNE的受體類蛋白來決定膜流：動態(tài)過程對質(zhì)膜更新和維持細胞的生存與生長是必要的囊泡與靶膜的識別與融合胞吞作用途徑膜上糖蛋白或糖咆識別與膜接觸膜內(nèi)陷包圍物質(zhì)膜融合去封口THfe進入細胞胞內(nèi)體：是動物細胞內(nèi)由膜包圍的細胞器，其作用是傳輸由胞吞作用新攝入的物質(zhì)到溶酶體被降解。胞內(nèi)體上有質(zhì)子泵。第二節(jié)細胞通訊與信號傳遞一、細胞通訊與細胞識別（）細胞通訊（cellcommunication）一個細胞發(fā)出的信息通過介質(zhì)傳遞到另一個細胞產(chǎn)生相應(yīng)的反應(yīng)。細胞間的通訊對于多細胞生物

12、體的發(fā)生和組火的杓他協(xié)就州加的L淮,闞出III鳳的生氏、分裂，分化川科廠.是外觀的、細胞通訊方式：分泌化學(xué)信號進行通訊內(nèi)分泌（endocrine）激素分泌后作用較遠的靶細胞，其傳遞介質(zhì)為血液。旁分泌（paracrine）激素分泌釋放后作用于鄰近的靶細胞，其傳遞介質(zhì)為細胞間液。自分泌（autocrine）激素分泌釋放后仍作用于自身細胞，其傳遞介質(zhì)為胞液；化學(xué)突觸（chemicalsynapse）接觸性依賴的通訊細胞間直接接觸，信號分子與受體都是細胞的跨膜蛋白間隙連接實現(xiàn)代謝偶聯(lián)或電偶聯(lián)（二）細胞識別（cellrecognition）概念：細胞通過其表面的受體與胞外信號物質(zhì)分子（配體）選擇性地相互

13、作用，進而導(dǎo)致胞內(nèi)一系列生理生化變化，最終表現(xiàn)為細胞整體的生物學(xué)效應(yīng)的過程。信號通路（signalingpathway）細胞識別是通過各種不同的信號通路實現(xiàn)的。細胞接受外界信號，通過一整套特定的機制，將胞外信號轉(zhuǎn)導(dǎo)為胞內(nèi)信號，最終調(diào)節(jié)特定基因的表達，引起細胞的應(yīng)答反應(yīng)，這種反應(yīng)系列稱之為細胞信號通路。（三）細胞的信號分子與受體信號分子（signalmolecule）親脂性信號分子（）親水性信號分子氣體性信號分子（NO）受體（receptor）受體是細胞膜或細胞內(nèi)的功能性糖蛋白，可特異地識別配體并與之結(jié)合，引起相應(yīng)的生物效應(yīng)。多為糖蛋白細胞內(nèi)受體：為胞外親脂性信號分子所激活激素激活的基因調(diào)控蛋白

14、（胞內(nèi)受體超家族）此型受體主要包括類固醇激素受體，如糖皮質(zhì)激素受體（GR、雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、雄激素受體（AR）、鹽皮質(zhì)激素受體（MR等；維生素D3受體（VDR以及甲狀腺激素受體（TR）O這些激素進入細胞以后，能與特異性受體結(jié)合形成活性復(fù)合物，然后作用于染色體DNA調(diào)節(jié)基因表達，從而影響細胞的物質(zhì)代謝和生理活動。細胞表面受體：為胞外親水性信號分子所激活細胞表面受體分屬三大家族：離子通道偶聯(lián)的受體(ion-channel-linkedreceptor)G-蛋白偶聯(lián)的受體(G-protein-linkedreceptor)酶偶連的受體(enzyme-linkedreceptor

15、)受體的功能：介導(dǎo)物質(zhì)跨膜運輸(受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)：受體的激活(activation)(級聯(lián)反應(yīng))；受體失敏(desensitization)關(guān)閉反應(yīng)、減量調(diào)節(jié)(down-regulation)降低反應(yīng)。第二信使(secondmessenger)cAMPcGMR三磷酸肌醇(IP3),二酰基甘油(DG分子開關(guān)(molecularswitches)細胞內(nèi)信號傳遞中起舉足輕重作用的一類蛋白質(zhì)，通過磷酸化或結(jié)合GTPW活化，開啟信號通路，通過去磷酸化或結(jié)合GD而失活，關(guān)閉信號通過。二、通過細胞內(nèi)受體介導(dǎo)的信號傳遞親脂性的小分子通過與細胞內(nèi)受體結(jié)合傳遞信號。細胞內(nèi)受體本質(zhì)是激素激活的基因調(diào)控蛋

16、白，構(gòu)成細胞內(nèi)受體家族。爸類激素介導(dǎo)的信號通路兩步反應(yīng)階段：初級反應(yīng)階段：直接活化少數(shù)特殊基因轉(zhuǎn)錄的，發(fā)生迅速；次級反應(yīng)：初級反應(yīng)產(chǎn)物再活化其它基因產(chǎn)生延遲的放大作用。一氧化氮介導(dǎo)的信號通路三、通過細胞表面受體介導(dǎo)的信號跨膜傳遞親水性的化學(xué)信號分子一般不能直接進入細胞，而是通過與細胞表面特異受體的結(jié)合，進行信號傳導(dǎo)，進而對靶細胞產(chǎn)生效應(yīng)。根據(jù)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制和受體蛋白類型的不同，細胞表面受體分為三大家族：(一)離子通道偶聯(lián)的受體介導(dǎo)的信號跨膜傳遞受體自身為離子通道，信號(神經(jīng)遞質(zhì))與受體識別結(jié)合，開閉通道，離子流動，改變細胞膜的興奮性。特點：受體/離子通道復(fù)合體，四次/六次跨膜蛋白跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)無需

17、中間步驟主要存在于神經(jīng)細胞或其他可興奮細胞間的突觸信號傳遞有選擇性：配體的特異性選擇和運輸離子的選擇性G蛋白偶聯(lián)的受體介導(dǎo)的信號跨膜傳遞由G蛋白介導(dǎo)，將信息傳遞給第二信使，引起一系列胞內(nèi)生物效應(yīng)。G蛋白：鳥甘酸結(jié)合蛋白的總稱，其共同特征是：由gba三個亞單位組成；位于細胞膜受體與效應(yīng)器之間的轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白；?具有結(jié)合GD瞅GTP的能力,有GTP酶活性；可激活效應(yīng)蛋白，實現(xiàn)信息轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。CAMP言號通路磷脂酰肌醇信號G-蛋白偶聯(lián)受體又稱蛇型受體。此型受體通常由單一的多肽鏈或均一的亞基組成，其肽鏈可分為細胞外區(qū)、跨膜區(qū)、細胞內(nèi)區(qū)三個區(qū)。跨膜區(qū)由7個口螺旋結(jié)構(gòu)組成；多肽鏈的N-端位于細胞外區(qū)，而C-端位于

18、細胞內(nèi)區(qū)；在第五及第六跨膜口螺旋結(jié)構(gòu)之間的細胞內(nèi)環(huán)部分（第三內(nèi)環(huán)區(qū)），是與G蛋白偶聯(lián)的區(qū)域。大多數(shù)常見的神經(jīng)遞質(zhì)受體和激素受體是屬于G蛋白偶聯(lián)型受體。細胞表面其它與酶偶聯(lián)的受體自身是酶，具有TP聒性，主要是一些生長因子的受體，與配體結(jié)合即活化，使靶蛋白的酪氨酸殘基磷酸化，引起細胞反應(yīng)。通常與酶連接的細胞表面受體又稱催化性受體，目前已知的這類受體都是跨膜蛋白，當(dāng)胞外配基與受體結(jié)合即激活受體胞內(nèi)段的酶活性。至少包括5類：受體酪氨酸激酶受體蛋白酪氨酸殘基自磷酸化。受體絲氨酸/蘇氨酸激酶如TGF勺作用受體酪氨酸磷酸酯酶受體蛋白酪氨酸殘基去磷酸化受體鳥昔酸環(huán)化酶（ANPs-signals）合成cGMP酪

19、氨酸蛋白激酶聯(lián)系的受體cAMP信號通路反應(yīng)鏈：激素-G-蛋白偶聯(lián)受體-G-蛋白-腺昔酸環(huán)化酶-cAMP>CAM腺賴的蛋白激酶A-基因調(diào)控蛋白f基因轉(zhuǎn)錄組分及其分析G-蛋白偶聯(lián)受體G-蛋白活化與調(diào)節(jié)G蛋白的效應(yīng)蛋白（酶）主要有腺普酸環(huán)化酶（AQ和磷脂酶C（PLC）。前者可催化第二信使CAMP的產(chǎn)生，后者可催化第二信使DG和IP3的產(chǎn)生，從而將配體的信號傳遞到細胞內(nèi)。1、CAMP信號途徑信號與受體結(jié)合，受體活化，構(gòu)象改變，暴露與G蛋白的結(jié)合部位。配體受體復(fù)合物與G蛋白結(jié)合，G活化，Gsa構(gòu)象改變，結(jié)合GTPGsa-GTP復(fù)合物與0丫分離，暴露與AC的結(jié)合部位。Gsa-GTP與AC結(jié)合，AC活

20、化，分解ATP為CAMPGsa分解GTP為GDP,構(gòu)型改變，與AC分離，AC失活，Gsa與0丫結(jié)合，恢復(fù)靜息狀態(tài)。GPLR的失敏：例：p腎上腺素受體被激活后，10-15秒CAM鰥增，然后在不到1min內(nèi)反應(yīng)速降，以至消失。受體活性快速喪失（速發(fā)相）一失敏（desensitization）;機制：受體磷酸化受體與GsM偶聯(lián)，CAM我應(yīng)停止并被PDE翁解。兩種Ser/Thr磷酸化激酶：PKA和P腎上腺素受體激酶（PARK）,負責(zé)受體磷酸化；胞內(nèi)協(xié)作因子庫卜獲蛋白（Parrestin）-結(jié)合磷酸化的受體，抑制其功能活性（Parrestin已克隆、定位11q13）。反應(yīng)減弱（遲發(fā)相）一減量調(diào)節(jié)（dow

21、n-regulation）機制：受體-配體復(fù)合物內(nèi)吞，導(dǎo)致表面受體數(shù)量減少，發(fā)現(xiàn)Parrestin可直接與Clathrin結(jié)合，在內(nèi)吞中起adeptors作用；受體減量調(diào)節(jié)與內(nèi)吞后受體的分選有關(guān)。磷脂酰肌醇信號通路“雙信使系統(tǒng)”反應(yīng)鏈：胞外信號分子一G-蛋白偶聯(lián)受體一激活細胞質(zhì)膜上的-IP3-胞內(nèi)Ca2+濃度升高-Ca2+結(jié)合蛋白（CaM）-細胞反應(yīng)磷脂酶C(PLC)-使細胞質(zhì)膜上的PIP2水解、了DG>激活PK8蛋白磷酸化或促Na+/H+交換使胞內(nèi)pH高PIP2:4,5-二磷酸磷脂酰肌醇PKC蛋白激酶CIP3:1,4,5-三磷酸肌醇DG二酰基甘油受體酪氨酸激酶及RTK-Ra演白信號通路

22、受體酪氨酸激酶(receptortyrosinekinases,RTKsS包括6個亞族信號轉(zhuǎn)導(dǎo)：配體-受體-受體二聚化-受體的自磷酸化-激活RTQ胞內(nèi)信號蛋白一啟動信號傳導(dǎo)RTK-Ras信號通路：配體-RTQadaptorGRF>RasfRaf(MAPKKKfMAPKKMAPG進入細胞核-其它激酶或基因調(diào)控蛋白(轉(zhuǎn)錄因子)的磷酸化修鈾。G蛋白偶聯(lián)受體介導(dǎo)的MAPK勺激活RTKs勺失敏(desensitization)G蛋白偶聯(lián)受體介導(dǎo)的MAP的激活MAPK(Mitogen-activatedproteinkinase)又稱ERK(extracelularsignal-regulatedk

23、inase)-真核細胞廣泛存在的Ser/Thr蛋白激酶。MAP的底物：膜蛋白(受體、酶)、胞漿蛋白、核骨架蛋白、及多種核內(nèi)或胞漿內(nèi)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子-在細胞增殖和分化中具有重要調(diào)控作用。PT微感性G1白(Gi,GO的防£基依賴于Rasa活MAPK具體機制還有待深入研究；PKCPLdG蛋白偶聯(lián)受體介導(dǎo)的MAP檄活PKCPLC參與G蛋白偶聯(lián)受體激活MAPK:G蛋白偶聯(lián)受體激活G蛋白；G蛋白堿基或貿(mào)亞基?活PLC,促進膜磷脂代謝；磷脂代謝產(chǎn)物(DAG+IP3)激活PKQPKC通過Ras或Raf激活MAPK;由于PKC寸鈣的依賴性不同，所以G蛋白偶聯(lián)受體-MAP隧徑對鈣要求不同；PKA寸Gg白偶

24、聯(lián)受體-MAP儂徑的負調(diào)控迄今未發(fā)現(xiàn)和制備出MAPK1成型突變(dominantnegativemutant),提示細胞難于忍受MAP的持續(xù)激活(MAPK的去活是細胞維持正常生長代謝所必須)。主要機制：特異性的Tyr/Thr磷脂酶可選擇性地使MAP底磷酸化，關(guān)閉MAP借號。cAMP,MAPK;cAMPt接激活cAMF賴的PKAPKM能通過RT域通過抑制Raf-Ras相互作用起負調(diào)控作用。RTKs勺失敏：催化性受體的效應(yīng)器位于受體本身，因此失敏即酶活性速發(fā)抑制。機制：受體的磷酸化修飾。EG受體Thr654的磷酸化導(dǎo)致RT循性的抑制，如果該位點產(chǎn)生Ala突變，則阻止活性抑制，后又發(fā)現(xiàn)淵的Ser1046/7也是磷酸化位點。磷酸化位點所在的C端恰好是SH2g白的結(jié)合部位。引起受體磷酸化的激酶：PKC一作用于Thr654;CaMK2(C3¥DCa順賴的激酶2)-作用于Ser1046/7還發(fā)現(xiàn)：EG改體是CDK勺靶蛋白，提示和周期調(diào)控有關(guān)。RT隔體結(jié)構(gòu)研究表明，RTK激活后形成穩(wěn)定的非抑制性構(gòu)象；磷酸化修飾后，形成抑制性構(gòu)象，引起失敏。RT伏敏對細胞正常功能所必須，RTK勺持續(xù)激活將導(dǎo)致細胞生長失控。四、由細胞表面整合蛋白介導(dǎo)的信號傳遞整合蛋白與粘著斑導(dǎo)致粘著斑裝配的信號