氣相色譜儀器故障排除方法

1、氣相色譜儀器故障排除方法（定量重復(fù)性差）引起定量不重復(fù)的原因是多方面的，一般可以歸結(jié)為兩大類(lèi)：一類(lèi)為單純性靈敏度變化型，即除了定量重復(fù)性不合格外，其它指標(biāo)未發(fā)現(xiàn)異常；另一類(lèi)為伴隨性靈敏度變化型，即除靈敏度變化之外還伴隨有其它異常現(xiàn)象出現(xiàn)，包括基線不穩(wěn)定性、峰保留時(shí)間變化及產(chǎn)生峰形畸變等異?，F(xiàn)象。屬于第一類(lèi)型故障的原因，主要是：進(jìn)樣技術(shù)不佳，注射器有堵漏，樣品制備不均勻，進(jìn)樣口污染物堆積以及氣路存在漏氣現(xiàn)象等。屬于第二類(lèi)型故障的原因，主要是：載氣流量變化，檢測(cè)器玷污、過(guò)載，柱溫變化以及檢測(cè)器操作條件（如氫氣、極化電壓、脈沖電壓等）發(fā)生變化。考慮到各種故障產(chǎn)生可能性的大小以及故障鑒別的方便性，制定

2、出下述檢測(cè)方案：（1）進(jìn)樣技術(shù)檢查：進(jìn)樣技術(shù)不佳是造成色譜峰不重復(fù)的最可能原因。它通常表現(xiàn)為峰高/峰面積忽大忽小，峰高/峰面積大小變化無(wú)規(guī)則。提高進(jìn)樣重復(fù)性的關(guān)鍵，在于始終保持進(jìn)樣操作各個(gè)步驟的重復(fù)性。這包括取樣操作，取樣到進(jìn)樣期間的空閑時(shí)間，進(jìn)針快慢及拔出注射器的早晚。通常操作人員在經(jīng)過(guò)較多地進(jìn)樣重復(fù)性訓(xùn)練之后，可以達(dá)到所需的要求。（2）注射器檢查：操作人員進(jìn)樣技術(shù)提高后，色譜峰靈敏度仍然無(wú)顯著改觀，需認(rèn)真檢查注射器本身是否有堵塞或泄漏現(xiàn)象。必要時(shí)更換一個(gè)好的注射器重新進(jìn)樣試驗(yàn)。（3）樣品均勻性檢查：制備的樣品在樣品瓶中混合不均勻或每次取樣時(shí)注射器對(duì)樣品產(chǎn)生玷污以及樣品揮發(fā)等都會(huì)影響出峰靈敏

3、度的重復(fù)性（不能漏過(guò)此項(xiàng)檢查）。定量不重復(fù)由上述三種原因引起的可能性很大，而且都和進(jìn)樣操作密切相關(guān)，因此可一起進(jìn)行檢查。只有在上述檢查后無(wú)異常發(fā)現(xiàn)時(shí)才轉(zhuǎn)入接下的檢查步驟。（4）伴隨現(xiàn)象觀察：在檢查靈敏度情況的同時(shí)注意是否有下述異?，F(xiàn)象發(fā)生，包括基線是否穩(wěn)定，出峰保留時(shí)間是否重復(fù)，峰形是否有畸變?nèi)N情況，如果出現(xiàn)其中一種，應(yīng)先按所出現(xiàn)的故障進(jìn)行排除，再重新進(jìn)行定量重復(fù)性測(cè)試。沒(méi)發(fā)現(xiàn)伴隨異常現(xiàn)象時(shí)，應(yīng)轉(zhuǎn)入下面的檢查步驟。（5）進(jìn)樣口污染及系統(tǒng)漏氣檢查：關(guān)斷橋電流（對(duì)TCD而言）后，取下進(jìn)樣口隔墊，觀察進(jìn)樣口內(nèi)是否有污染或堆積物，如果有，需進(jìn)行清除和清洗。清洗完畢裝上隔墊后需對(duì)氣路系統(tǒng)進(jìn)行試漏：堵住

4、檢測(cè)器出口，觀察轉(zhuǎn)子流量計(jì)中的轉(zhuǎn)子應(yīng)能下降為零，否則說(shuō)明氣路有泄漏。在確信進(jìn)樣口無(wú)嚴(yán)重污染及氣路無(wú)漏氣的情況下進(jìn)行（6）的檢查。（6）特種原因檢查：對(duì)有些檢測(cè)器而言，某些原因所伴隨的故障異常不太明顯，易被忽略掉，因此應(yīng)按照此項(xiàng)進(jìn)行檢查，以便不漏過(guò)可能發(fā)生故障的因素。a）對(duì)FID來(lái)說(shuō)，極化電壓較低及氫氣流量不穩(wěn)，有可能導(dǎo)致靈敏度變化而無(wú)其它明顯異常。對(duì)此可首先測(cè)試極化電壓大小以確定極化電壓是否太低，過(guò)低的極化電壓以及無(wú)極化電壓都屬于故障。正常時(shí)極化電壓為150300V。如極化電壓正常，則應(yīng)轉(zhuǎn)入放大器的靈敏檔觀察氫焰基始電流的變動(dòng)情況，在氫氣流不穩(wěn)定時(shí)基流應(yīng)能呈現(xiàn)出擺動(dòng)和漂移現(xiàn)象。b）對(duì)于任何檢測(cè)

5、器，樣品中的某些組分在檢測(cè)器中逐漸冷凝并累積，將會(huì)影響下一次進(jìn)樣后的靈敏度，情況嚴(yán)重時(shí)還會(huì)造成氣路堵塞。通常的解決方法也是適當(dāng)提高檢測(cè)器的溫度，以減少或消除樣品室的冷凝現(xiàn)象.來(lái)源：藥物分析網(wǎng)2、測(cè)試條件的如何確定氣相色譜儀使用氣體的純度和選擇原則操作氣相色譜儀如何選用不同氣體純度的氣源做載氣和輔助氣體，雖然是一個(gè)老的技術(shù)問(wèn)題，但是對(duì)于剛剛接觸氣相色譜儀的用戶，目前很難找到有關(guān)這方面的綜合資料，所以他們總是到處詢問(wèn)究竟選擇什么樣的氣體純度最好的這類(lèi)問(wèn)題。根據(jù)每一家用戶具體使用的那一類(lèi)（高，中，抵擋）儀器，選擇什么樣純度的氣體，確實(shí)是一個(gè)比較復(fù)雜的問(wèn)題。原則上講，選擇氣體純度時(shí)，主要取決于 分析對(duì)

6、象；色譜柱中填充物；檢測(cè)器.我們建議在滿足分析要求的前提下，盡可能選用純度較高的氣體。這樣不但會(huì)提高（保持）儀器的高靈敏度，而且會(huì)延長(zhǎng)色譜柱，整臺(tái)儀器（氣路控制部件，氣體過(guò)濾器）的壽命。實(shí)踐證明，作為中高檔儀器，長(zhǎng)期使用較低純度的氣體氣源，一旦要求分析低濃度的樣品時(shí)，要想恢復(fù)儀器的高靈敏度有時(shí)十分困難。對(duì)于低檔儀器，作常量或半微量分析，選用高純度的氣體，不但增加了運(yùn)行成本，有時(shí)還增加了氣路的復(fù)雜性，更容易出現(xiàn)漏氣或其他的問(wèn)題而影響儀器的正常操作。另外，為了某些特殊的分析目的要求特意在載氣中加入某些“不純物”，如：分析極性化合物添加適量的水蒸氣，操作火焰光度檢測(cè)器時(shí)，為了提高分析硫化物的靈敏度，

7、而添加微量硫。操作氦離子化檢測(cè)器要氖的含量必須在525ppm，否則會(huì)在分析氫，氮和氬氣時(shí)產(chǎn)生負(fù)峰或“W”形峰等。本文就不在此做詳細(xì)討論了。 氣體純度低的不良影響根據(jù)分析對(duì)象，色譜柱的類(lèi)型，操作儀器的擋次和具體檢測(cè)器，若使用不合要求的低純度氣體，不良影響有以下幾種可能：1. 樣品失真或消失：如H2O氣使氯硅樣品水解；2. 色譜柱失效：H2O，CO2使分子篩柱失去活性，H2O氣使聚脂類(lèi)固定液分解，O2使PEG固定液斷鏈。3. 有時(shí)某些氣體雜質(zhì)和固定液相互作用而產(chǎn)生假峰；4. 對(duì)柱保留特性的影響：如：H2O對(duì)聚乙二醇等親水性固定液的保留指數(shù)會(huì)有所增加，載氣中氧含量過(guò)高時(shí)，無(wú)論是極性或是非極性固定液柱

8、的保留特性，都會(huì)產(chǎn)生變化，使用時(shí)間越長(zhǎng)影響越大；5. 檢測(cè)器：TCD：信噪比減小，無(wú)法調(diào)另，線性變窄，文獻(xiàn)中的校正因子不能使用，氧含量過(guò)大，使元件在高溫時(shí)加速老化，減少壽命；FID：特別是在Dt110/秒下操做時(shí)，CH4等有機(jī)雜質(zhì)，會(huì)使基流激增，噪聲加大不能進(jìn)行微量分析；ECD：載氣中的氧和水對(duì)檢測(cè)器的正常工作影響最大，在不同的供電工作方式中，脈沖供電比直流電壓供電影響大，固定基流脈沖調(diào)制式供電比脈沖供電影響大。這就是為什么目前諸多在操作固定基流脈沖調(diào)制式ECD時(shí)，在載氣純度低時(shí)必須把載氣純度選擇開(kāi)關(guān)從“標(biāo)準(zhǔn)氮”撥到“一般氮”位置的原因。大家會(huì)發(fā)現(xiàn)在此情況下操作，不但靈敏度變低，而且線性亦變窄

9、了。實(shí)踐證明：在操作ECD時(shí)載氣中的水含量低于0.02ppm,氧低于1ppm時(shí)可達(dá)到較理想的性能.值得指出的是,我們多次發(fā)現(xiàn)由于儀器的調(diào)節(jié)氣路系統(tǒng)被污染而造成的對(duì)載氣的二次污染至使ECD基頻大幅度增加使信燥比減小.FPD NPD等常用檢測(cè)器,由于他們屬于選擇性檢測(cè)器,操做時(shí)要根據(jù)分析要求,特別注意被測(cè)敏感物質(zhì)中雜質(zhì)的去除.6、在做程序升溫操作時(shí),載氣中的某些雜質(zhì),在低溫時(shí)保留在色譜柱中,當(dāng)柱溫升高時(shí)不但引起基線漂移,還可能在譜圖上出現(xiàn)比較寬的"假峰"。7、儀器影響a. 各類(lèi)過(guò)濾器加速失效;b. 調(diào)節(jié)閥(穩(wěn)壓閥,穩(wěn)流閥,針形閥)被污染,氣阻堵塞,調(diào)節(jié)精度降低或失靈；c. 氣路

10、系統(tǒng)被污染,若要恢復(fù)儀器在高靈敏度情況下操做,有時(shí)要吹洗很長(zhǎng)時(shí)間(可能一周以上)污染嚴(yán)重時(shí)有時(shí)再也無(wú)法恢復(fù)。d. 檢測(cè)器的壽命實(shí)踐表明,對(duì)ECD和TCD的壽命最明顯，這點(diǎn)應(yīng)引起用戶特別注意。對(duì)氣體純度選擇的一般原則1. 從分析角度講,微量分析比常量分析要求高,也就是說(shuō),氣體中的雜質(zhì)含量必須低于被分析組分的含量,如果用TCD分析10ppm的CO,則載氣中的雜質(zhì)總含量不得超過(guò)10ppm,因?yàn)?9.999%純度的氣體則含0.001%的雜質(zhì),相當(dāng)于10ppm所以對(duì)于10ppm的痕量分析,載氣的純度應(yīng)高于99.999%;對(duì)于FID使用氣體,碳?xì)浠衔锖勘仨毢艿?載氣中的大量氧雜質(zhì)只要不對(duì)色譜柱造成影響

11、,就不影響FID的性能,而操作ECD，載氣中的氧氣和水的含量必須很低等.2. 毛細(xì)管柱分析比填充柱分析要求高;3. 程序升溫分析比恒定溫度分析要求高;4. 濃度型檢測(cè)器比質(zhì)量型檢測(cè)器要求高;5. 配有甲烷裝置的FID比單FID操作的對(duì)載氣中的微量CO,CO2要求要高的多.6. 從儀器壽命和保持儀器的高靈敏度講,中高檔儀器比低當(dāng)儀器要求高。操作不同檢測(cè)器推薦使用的氣體純度我們推薦氣體純度的技術(shù)要求,通常用于常規(guī)分析,對(duì)于特殊高靈敏度的痕量分析應(yīng)采用高一級(jí)純度的氣體,如果不在意色譜柱和儀器的使用壽命,或分析樣品組分濃度很高時(shí),也可以不使用過(guò)高純度的氣體,由于各個(gè)制氣廠設(shè)置不同，其雜質(zhì)含量將有所不同

12、;為滿足不同的使用要求,選用不同廠家不同純度的氣源后,可以通過(guò)氣體凈化處理滿足分析要求,對(duì)于不同雜質(zhì)的氣體采用何種凈化方法和裝置有機(jī)會(huì)在加以討論.綜上所述,新氣相色譜儀接入氣源時(shí)一定要做到心中有數(shù),決不能隨意接入,否則會(huì)造成ECD,甲烷化裝置等的損壞,信噪比減小的無(wú)法使用,下表給出了用于常規(guī)分析時(shí),推薦使用的氣體純度氣象色譜時(shí),氣體純度的選擇:1.從分析角度講,微量分析比常量分析要求高,也就是說(shuō),氣體中的雜質(zhì)含量必須低于被分析組分的含量,如果用TCD分析10ppm的CO,則載氣中的雜質(zhì)總含量不得超過(guò)10ppm,因?yàn)?9.999%純度的氣體則含0.001%的雜質(zhì),相當(dāng)于10ppm所以對(duì)于10pp

13、m的痕量分析,載氣的純度應(yīng)高于99.999%;對(duì)于FID使用氣體,碳?xì)浠衔锖勘仨毢艿?載氣中的大量氧雜質(zhì)只要不對(duì)色譜柱造成影響,就不影響FID的性能,而操作ECD，載氣中的氧氣和水的含量必須很低等.2. 毛細(xì)管柱分析比填充柱分析要求高;3. 程序升溫分析比恒定溫度分析要求高;4. 濃度型檢測(cè)器比質(zhì)量型檢測(cè)器要求高;5. 配有甲烷裝置的FID比單FID操作的對(duì)載氣中的微量CO,CO2要求要高的多.6. 從儀器壽命和保持儀器的高靈敏度講,中高檔儀器比低當(dāng)儀器要求高。氣相色譜柱長(zhǎng),口徑的選擇:1.柱長(zhǎng)的選擇：由于分辨率與柱長(zhǎng)的平方根成正比。柱子長(zhǎng)，則提高分辨率。15m的短柱用于快速分離較簡(jiǎn)單的樣

14、品，也適于 快速成分掃描分析；30m的色譜柱是最常用的柱長(zhǎng)，大多數(shù)分析在此長(zhǎng)度的柱子上完成；50m、60m或更長(zhǎng)的色譜柱用于分離比較復(fù)雜的樣品。2.口徑的選擇：柱徑直接影響柱子的效率、保留特性和樣品容量。小口徑柱比大口徑柱有更高柱效，但柱容量更小。0.25mm：具有較高的柱效，柱容量較低。分離復(fù)雜樣品較好。0.32mm：柱效稍低于0.25mm的色譜柱，但柱容量約高60%。0.53mm：具有類(lèi)似于填充柱的柱容量，可用于分流進(jìn)樣，也可用于不分流進(jìn)樣，當(dāng)柱容量是主要考慮因素時(shí)（如痕量分析），選擇大口徑毛細(xì)管柱較為合適。 專家認(rèn)為，對(duì)于普通用戶，可選30米或50米長(zhǎng)的毛細(xì)管，口徑選0.32mm較為便利

15、。相色譜分離操作時(shí)載氣種類(lèi)及流速的選擇 1.對(duì)于確定的色譜柱和試樣，有一個(gè)最佳的載氣流速，此時(shí)柱效最高，根據(jù)公式：H AB/UC用在不同流速下測(cè)得的塔板高度H對(duì)流速u(mài)作圖，得H-u曲線圖。在曲線的最低點(diǎn)，塔板高度H最小（H最?。?。此時(shí)柱效最高。2.對(duì)于填充柱，N2的最佳實(shí)用線速為1012cm/s；H2為1520cm/s。通常載氣的流速習(xí)慣上用柱前的體積流速（mL/s）來(lái)表示，用轉(zhuǎn)子流量計(jì)測(cè)量；也可通過(guò)皂膜流量計(jì)在柱后進(jìn)行測(cè)定。若色譜柱內(nèi)徑為3mm,N2的流速一般為4060L/min，H2的流速為60-90mL/min。氣相色譜分離操作條件的選擇氣相色譜條件主要受載氣種類(lèi)、流速、柱溫、汽化溫度、

16、柱長(zhǎng)、柱內(nèi)徑、進(jìn)樣時(shí)間和進(jìn)樣量等因素影響。根據(jù)范第姆特方程，流速是影響塔板高度的重要因素，通常選擇稍高于最佳流速的載氣流速；載氣流速大時(shí)，應(yīng)選擇相對(duì)分子量小，擴(kuò)散系數(shù)大的H2，Ne等作載氣，反之選擇相對(duì)分子量大，擴(kuò)散系數(shù)小的N2，Ar等作載氣；提高柱溫可以提高傳質(zhì)速率，提高柱效，但柱溫過(guò)高又會(huì)使組分間分離度減小。采用較低的柱溫，減少固定相的用量和適當(dāng)增加載氣的流速，可在短時(shí)間內(nèi)獲得良好的分離效果；汽化溫度應(yīng)以能使試樣迅速汽化而不產(chǎn)生分解為準(zhǔn)，通常比柱溫高20-70，柱溫應(yīng)比試樣中各組分的平均沸點(diǎn)低20-30, 對(duì)于沸點(diǎn)范圍較寬的試樣，宜采用程序升溫；增加柱長(zhǎng)會(huì)提高分離度，但分析時(shí)間增長(zhǎng)，因此，

17、一般在滿足一定分離度的條件下盡可能用短柱子；進(jìn)樣應(yīng)在1秒以內(nèi)完成，以減小峰變寬；最大允許的進(jìn)樣量應(yīng)該控制在使峰面積或峰高與進(jìn)樣量呈線性關(guān)系的范圍內(nèi)。氣相色譜分離操作時(shí)柱溫的選擇 柱溫是一個(gè)重要的操作參數(shù)，直接影響分離效能和分析速度。首先要考慮到每種固定液都有一定的使用溫度。柱溫不能高于固定液的最高使用溫度，否則固定液揮發(fā)流失。柱溫對(duì)組分分離的影響較大，（1）提高柱溫使各組分的揮發(fā)靠攏，不利于分離， 所以，從分離的角度考慮，宜采用較低的柱溫。（2）柱溫太低，被測(cè)組分在兩相中的擴(kuò)散速率大為減少，分配不能迅速達(dá)到平衡，峰形變寬，柱效也會(huì)下降，并會(huì)延長(zhǎng)分析時(shí)間。柱溫的選擇原則是：應(yīng)使難分離的兩組分達(dá)到

18、預(yù)期的分離效果，峰形正常的前提下，盡可能采用較高的柱溫。一般柱溫應(yīng)比試樣中各組分的平均沸點(diǎn)低2030，具體的選擇可通過(guò)試驗(yàn)決定。3、具體物質(zhì)的分析方法氣相色譜定性與定量分析方法：各種色譜分析方法的定性與定量分析的基本方法都是一樣的。色譜定性分析1. 保留時(shí)間定性2. 利用不同檢測(cè)方法定性3. 保留指數(shù)定性4. 柱前或柱后化學(xué)反應(yīng)定性5. 與其他儀器聯(lián)用定性1. 保留時(shí)間定性在一定的色譜系統(tǒng)和操作條件下，每種物質(zhì)都有一定的保留時(shí)間，如果在相同色譜條件下，未知物的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相同，則可初步認(rèn)為它們?yōu)橥晃镔|(zhì)。為了提高定性分析的可靠性，還可進(jìn)一步改變色譜條件（分離柱、流動(dòng)相、柱溫等）或在樣品中

19、添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如果被測(cè)物的保留時(shí)間仍然與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一致，則可認(rèn)為它們?yōu)橥晃镔|(zhì)。2. 利用不同檢測(cè)方法定性同一樣品可以采用多種檢測(cè)方法檢測(cè)，如果待測(cè)組分和標(biāo)準(zhǔn)物在不同的檢測(cè)器上有相同的響應(yīng)行為，則可初步判斷兩者是同一種物質(zhì)。在液相色譜中，還可通過(guò)二極管陣列檢測(cè)器比較兩個(gè)峰的紫外或可見(jiàn)光譜圖。3. 保留指數(shù)定性在氣相色譜中，可以利用文獻(xiàn)中的保留指數(shù)數(shù)據(jù)定性。保留指數(shù)隨溫度的變化率還可用來(lái)判斷化合物的類(lèi)型，因?yàn)椴煌?lèi)型化合物的保留指數(shù)隨溫度的變化率不同。4. 柱前或柱后化學(xué)反應(yīng)定性在色譜柱后裝T型分流器，將分離后的組分導(dǎo)入官能團(tuán)試劑反應(yīng)管，利用官能團(tuán)的特征反應(yīng)定性。也可在進(jìn)樣前將被分離化合物與某些特

20、殊反應(yīng)試劑反應(yīng)生成新的衍生物，于是，該化合物在色譜圖上的出峰位置或峰的大小就會(huì)發(fā)生變化甚至不被檢測(cè)。由此得到被測(cè)化合物的結(jié)構(gòu)信息。5. 與其他儀器聯(lián)用定性將具有定性能力的分析儀器如質(zhì)譜（MS）、紅外（IR）、原子吸收光譜（AAS）、原子發(fā)射光譜（AES，ICP-AES）等儀器作為色譜儀的檢測(cè)器即可獲得比較準(zhǔn)確的定性信息。定量分析色譜定量分析的依據(jù)是被測(cè)物質(zhì)的量與它在色譜圖上的峰面積（或峰高）成正比。數(shù)據(jù)處理軟件（工作站）可以給出包括峰高和峰面積在內(nèi)的多種色譜數(shù)據(jù)。因?yàn)榉甯弑确迕娣e更容易受分析條件波動(dòng)的影響，且峰高標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍也較峰面積的窄，因此，通常情況是采用峰面積進(jìn)行定量分析。1. 校

21、正因子定量2. 歸一化法3. 外標(biāo)法4. 內(nèi)標(biāo)法5. 標(biāo)準(zhǔn)加入法1. 校正因子定量絕對(duì)校正因子 ：?jiǎn)挝环迕娣e所對(duì)應(yīng)的被測(cè)物質(zhì)的濃度（或質(zhì)量），即樣品組分的峰面積與相同條件下該組分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的校正因子相乘，即可得到被測(cè)組分的濃度。絕對(duì)校正因子受實(shí)驗(yàn)條件的影響，定量分析時(shí)必須與實(shí)際樣品在相同條件下測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的校正因子。相對(duì)校正因子 :某物質(zhì)i與一選擇的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)S的絕對(duì)校正因子之比。即相對(duì)校正因子只與檢測(cè)器類(lèi)型有關(guān)，而與色譜條件無(wú)關(guān)。2. 歸一化法歸一化法是將所有組分的峰面積 分別乘以它們的相對(duì)校正因子后求和，即所謂"歸一"，被測(cè)組分X的含量可以用下式求得：采用歸一化法進(jìn)行定量分

22、析的前提條件是樣品中所有成分都要能從色譜柱上洗脫下來(lái)，并能被檢測(cè)器檢測(cè)。歸一法主要在氣相色譜中應(yīng)用。3. 外標(biāo)法直接比較法： 將未知樣品中某一物質(zhì)的峰面積與該物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積直接比較進(jìn)行定量。通常要求標(biāo)準(zhǔn)品的濃度與被測(cè)組分濃度接近，以減小定量誤差。標(biāo)準(zhǔn)曲線法： 將被測(cè)組分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)色譜分析后制作一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，即物質(zhì)濃度與其峰面積（或峰高）的關(guān)系曲線。根據(jù)樣品中待測(cè)組分的色譜峰面積（或峰高），從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的濃度。標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率與物質(zhì)的性質(zhì)和檢測(cè)器的特性相關(guān)，相當(dāng)于待測(cè)組分的校正因子。 4. 內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法是將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（內(nèi)標(biāo)物）加入到未知樣品中去，然

23、后比較內(nèi)標(biāo)物和被測(cè)組分的峰面積，從而確定被測(cè)組分的濃度。由于內(nèi)標(biāo)物和被測(cè)組分處在同一基體中，因此可以消除基體帶來(lái)的干擾。而且當(dāng)儀器參數(shù)和洗脫條件發(fā)生非人為的變化時(shí)，內(nèi)標(biāo)物和樣品組分都會(huì)受到同樣影響，這樣消除了系統(tǒng)誤差。當(dāng)對(duì)樣品的情況不了解、樣品的基體很復(fù)雜或不需要測(cè)定樣品中所有組分時(shí)，采用這種方法比較合適。內(nèi)標(biāo)物應(yīng)滿足的要求： 在所給定的色譜條件下具有一定的化學(xué)穩(wěn)定性；在接近所測(cè)定物質(zhì)的保留時(shí)間內(nèi)洗脫下來(lái)； 與兩個(gè)相鄰峰達(dá)到基線分離； 物質(zhì)特有的校正因子應(yīng)為已知的或者可測(cè)定； 與待測(cè)組分有相近的濃度和類(lèi)似的保留行為； 具有較高的純度。為了進(jìn)行大批樣品的分析，有時(shí)需建立校正曲線。具體操作方法是用

24、待測(cè)組分的純物質(zhì)配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后在等體積的這些標(biāo)準(zhǔn)溶液中分別加入濃度相同的內(nèi)標(biāo)物,混合后進(jìn)行色譜分析。以待測(cè)組分的濃度為橫坐標(biāo)，待測(cè)組分與內(nèi)標(biāo)物峰面積（或峰高）的比率為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線（或線性方程）。在分析未知樣品時(shí)，分別加入與繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)同樣體積的樣品溶液和同樣濃度的內(nèi)標(biāo)物，用樣品與內(nèi)標(biāo)物峰面積（或峰高）的比值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出被測(cè)組分的濃度或用線形方程計(jì)算。 5. 標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法可以看作是內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法的結(jié)合。具體操作是取等量樣品若干份，加入不同濃度的待測(cè)組分的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行色譜分析，以加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制如圖7-24所示的工作曲線。樣品中

25、待測(cè)組分的濃度 即為工作曲線在橫坐標(biāo)延長(zhǎng)線上的交點(diǎn)到坐標(biāo)原點(diǎn)的距離。由于待測(cè)組分以及加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液處在相同的樣品基體中，因此，這種方法可以消除基體干擾。但是，由于對(duì)每一個(gè)樣品都要配制三個(gè)以上的、含樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液的混合溶液，因此，這種方法不適于大批樣品的分析。其他色譜相關(guān)HP-5890A氣相色譜儀操作規(guī)程一、開(kāi)機(jī)1、首先打開(kāi)氮?dú)怃撈靠傞y門(mén)、調(diào)節(jié)減壓閥壓力為0.50.6Mpa2、打開(kāi)HP5890A的電源開(kāi)關(guān)，當(dāng)屏幕上顯示出Passed Selftes后，即可設(shè)測(cè)試參數(shù)，設(shè)定柱溫時(shí)，一定要注意柱子的最高使用溫度。3、當(dāng)溫度達(dá)到設(shè)定溫度時(shí)，打開(kāi)空氣壓縮機(jī)開(kāi)關(guān)，氫氣鋼瓶閥門(mén)調(diào)節(jié)氫氣分壓表為0.30.

26、4Mpa。再打開(kāi)儀器面板上空氣、氫氣開(kāi)關(guān)，用點(diǎn)火器點(diǎn)火，穩(wěn)定大約30min后，待HP-5890面板上Not-Ready燈熄滅后，即可測(cè)定。4、數(shù)據(jù)處理機(jī)HP-3392內(nèi)容的設(shè)定，最小峰面積一般200。去掉倒信號(hào)：InT01 8 Time 0 紙速：一般設(shè)CHT SP 0.20.3二、測(cè)試條件的設(shè)定：色譜條件的設(shè)定要根據(jù)不同化合物的不同性質(zhì)選擇柱子，一般情況極性化合物選則極性柱。非極性化合物選擇非極性柱。色譜柱柱溫的確定主要由樣品的復(fù)雜程度決定。對(duì)于混合物一般采用程序升溫法。柱溫的設(shè)定要同時(shí)兼顧高低沸點(diǎn)或溶點(diǎn)化合物。以下提供幾種方法，僅供參考。1、柱溫 6080 恒溫5min 升溫速率1015/

27、min 最終溫度 200進(jìn)口溫度 200 檢測(cè)溫度 2202、柱溫 100160 速率不變 最終溫度230進(jìn)樣口溫度 250 檢測(cè)器溫度 2503、對(duì)于高沸點(diǎn)(高溶點(diǎn))的化合物可采用 柱溫200升至240 進(jìn)樣口溫度 250 檢測(cè)溫度260以上條件可根據(jù)不同的化合物任意改動(dòng)，其目的要達(dá)到在最短的時(shí)間里，使每個(gè)化合物的組份完全分離。一般測(cè)試化合物有兩種測(cè)試方法：毛細(xì)管柱分流法：樣品被直接進(jìn)入色譜柱，不需稀釋進(jìn)樣量要少于0.1l。若為固體化合物，則盡可能用少量溶劑稀釋，進(jìn)樣量為0.20.4l大口徑毛細(xì)管法不分流：無(wú)論固體或液體，一定要稀釋后，方可進(jìn)樣進(jìn)樣量為0.20.4l(1ml/mg)我組目前備

28、有30米HP-1毛細(xì)管柱 5米 HP-1、10米HP-1、30米 HP-5、10米 HP-17每個(gè)測(cè)試者可根據(jù)自己化合物的性質(zhì)選擇合適的柱子，需要說(shuō)明的交若需管理員換柱子，所用時(shí)間均計(jì)為使用機(jī)時(shí)。三、注意事項(xiàng)：1、檢測(cè)器溫度不能低于進(jìn)樣口溫度，否則會(huì)污染檢測(cè)器 進(jìn)樣口溫度應(yīng)高于柱溫的最高值，同時(shí)化合物在此溫度下不分解。2、含酸、堿、鹽、水、金屬離子的化合物不能分析,要經(jīng)過(guò)處理方可進(jìn)行。3、進(jìn)樣器所取樣品要避免帶有氣泡以保證進(jìn)樣重現(xiàn)性。4、取樣前用溶劑反復(fù)洗針，再用要分析的樣品至少洗2-5次以避免樣品間的相互干攏。5、需直接進(jìn)樣品，要將注射器洗凈后，將針筒抽干避免外來(lái)雜質(zhì)的干攏。氣相色譜儀器故障

29、排除方法（定量重復(fù)性差）引起定量不重復(fù)的原因是多方面的，一般可以歸結(jié)為兩大類(lèi)：一類(lèi)為單純性靈敏度變化型，即除了定量重復(fù)性不合格外，其它指標(biāo)未發(fā)現(xiàn)異常；另一類(lèi)為伴隨性靈敏度變化型，即除靈敏度變化之外還伴隨有其它異常現(xiàn)象出現(xiàn)，包括基線不穩(wěn)定性、峰保留時(shí)間變化及產(chǎn)生峰形畸變等異?，F(xiàn)象。屬于第一類(lèi)型故障的原因，主要是：進(jìn)樣技術(shù)不佳，注射器有堵漏，樣品制備不均勻，進(jìn)樣口污染物堆積以及氣路存在漏氣現(xiàn)象等。屬于第二類(lèi)型故障的原因，主要是：載氣流量變化，檢測(cè)器玷污、過(guò)載，柱溫變化以及檢測(cè)器操作條件（如氫氣、極化電壓、脈沖電壓等）發(fā)生變化?？紤]到各種故障產(chǎn)生可能性的大小以及故障鑒別的方便性，制定出下述檢測(cè)方案：

30、（1）進(jìn)樣技術(shù)檢查：進(jìn)樣技術(shù)不佳是造成色譜峰不重復(fù)的最可能原因。它通常表現(xiàn)為峰高/峰面積忽大忽小，峰高/峰面積大小變化無(wú)規(guī)則。提高進(jìn)樣重復(fù)性的關(guān)鍵，在于始終保持進(jìn)樣操作各個(gè)步驟的重復(fù)性。這包括取樣操作，取樣到進(jìn)樣期間的空閑時(shí)間，進(jìn)針快慢及拔出注射器的早晚。通常操作人員在經(jīng)過(guò)較多地進(jìn)樣重復(fù)性訓(xùn)練之后，可以達(dá)到所需的要求。（2）注射器檢查：操作人員進(jìn)樣技術(shù)提高后，色譜峰靈敏度仍然無(wú)顯著改觀，需認(rèn)真檢查注射器本身是否有堵塞或泄漏現(xiàn)象。必要時(shí)更換一個(gè)好的注射器重新進(jìn)樣試驗(yàn)。（3）樣品均勻性檢查：制備的樣品在樣品瓶中混合不均勻或每次取樣時(shí)注射器對(duì)樣品產(chǎn)生玷污以及樣品揮發(fā)等都會(huì)影響出峰靈敏度的重復(fù)性（不能

31、漏過(guò)此項(xiàng)檢查）。定量不重復(fù)由上述三種原因引起的可能性很大，而且都和進(jìn)樣操作密切相關(guān)，因此可一起進(jìn)行檢查。只有在上述檢查后無(wú)異常發(fā)現(xiàn)時(shí)才轉(zhuǎn)入接下的檢查步驟。（4）伴隨現(xiàn)象觀察：在檢查靈敏度情況的同時(shí)注意是否有下述異?，F(xiàn)象發(fā)生，包括基線是否穩(wěn)定，出峰保留時(shí)間是否重復(fù)，峰形是否有畸變?nèi)N情況，如果出現(xiàn)其中一種，應(yīng)先按所出現(xiàn)的故障進(jìn)行排除，再重新進(jìn)行定量重復(fù)性測(cè)試。沒(méi)發(fā)現(xiàn)伴隨異?，F(xiàn)象時(shí)，應(yīng)轉(zhuǎn)入下面的檢查步驟。（5）進(jìn)樣口污染及系統(tǒng)漏氣檢查：關(guān)斷橋電流（對(duì)TCD而言）后，取下進(jìn)樣口隔墊，觀察進(jìn)樣口內(nèi)是否有污染或堆積物，如果有，需進(jìn)行清除和清洗。清洗完畢裝上隔墊后需對(duì)氣路系統(tǒng)進(jìn)行試漏：堵住檢測(cè)器出口，觀察

32、轉(zhuǎn)子流量計(jì)中的轉(zhuǎn)子應(yīng)能下降為零，否則說(shuō)明氣路有泄漏。在確信進(jìn)樣口無(wú)嚴(yán)重污染及氣路無(wú)漏氣的情況下進(jìn)行（6）的檢查。（6）特種原因檢查：對(duì)有些檢測(cè)器而言，某些原因所伴隨的故障異常不太明顯，易被忽略掉，因此應(yīng)按照此項(xiàng)進(jìn)行檢查，以便不漏過(guò)可能發(fā)生故障的因素。a）對(duì)FID來(lái)說(shuō)，極化電壓較低及氫氣流量不穩(wěn)，有可能導(dǎo)致靈敏度變化而無(wú)其它明顯異常。對(duì)此可首先測(cè)試極化電壓大小以確定極化電壓是否太低，過(guò)低的極化電壓以及無(wú)極化電壓都屬于故障。正常時(shí)極化電壓為150300V。如極化電壓正常，則應(yīng)轉(zhuǎn)入放大器的靈敏檔觀察氫焰基始電流的變動(dòng)情況，在氫氣流不穩(wěn)定時(shí)基流應(yīng)能呈現(xiàn)出擺動(dòng)和漂移現(xiàn)象。b）對(duì)于任何檢測(cè)器，樣品中的某些

33、組分在檢測(cè)器中逐漸冷凝并累積，將會(huì)影響下一次進(jìn)樣后的靈敏度，情況嚴(yán)重時(shí)還會(huì)造成氣路堵塞。通常的解決方法也是適當(dāng)提高檢測(cè)器的溫度，以減少或消除樣品室的冷凝現(xiàn)象.來(lái)源：藥物分析網(wǎng)2、測(cè)試條件的如何確定氣相色譜儀使用氣體的純度和選擇原則操作氣相色譜儀如何選用不同氣體純度的氣源做載氣和輔助氣體，雖然是一個(gè)老的技術(shù)問(wèn)題，但是對(duì)于剛剛接觸氣相色譜儀的用戶，目前很難找到有關(guān)這方面的綜合資料，所以他們總是到處詢問(wèn)究竟選擇什么樣的氣體純度最好的這類(lèi)問(wèn)題。根據(jù)每一家用戶具體使用的那一類(lèi)（高，中，抵擋）儀器，選擇什么樣純度的氣體，確實(shí)是一個(gè)比較復(fù)雜的問(wèn)題。原則上講，選擇氣體純度時(shí)，主要取決于 分析對(duì)象；色譜柱中填充

34、物；檢測(cè)器.我們建議在滿足分析要求的前提下，盡可能選用純度較高的氣體。這樣不但會(huì)提高（保持）儀器的高靈敏度，而且會(huì)延長(zhǎng)色譜柱，整臺(tái)儀器（氣路控制部件，氣體過(guò)濾器）的壽命。實(shí)踐證明，作為中高檔儀器，長(zhǎng)期使用較低純度的氣體氣源，一旦要求分析低濃度的樣品時(shí)，要想恢復(fù)儀器的高靈敏度有時(shí)十分困難。對(duì)于低檔儀器，作常量或半微量分析，選用高純度的氣體，不但增加了運(yùn)行成本，有時(shí)還增加了氣路的復(fù)雜性，更容易出現(xiàn)漏氣或其他的問(wèn)題而影響儀器的正常操作。另外，為了某些特殊的分析目的要求特意在載氣中加入某些“不純物”，如：分析極性化合物添加適量的水蒸氣，操作火焰光度檢測(cè)器時(shí)，為了提高分析硫化物的靈敏度，而添加微量硫。操

35、作氦離子化檢測(cè)器要氖的含量必須在525ppm，否則會(huì)在分析氫，氮和氬氣時(shí)產(chǎn)生負(fù)峰或“W”形峰等。本文就不在此做詳細(xì)討論了。 氣體純度低的不良影響根據(jù)分析對(duì)象，色譜柱的類(lèi)型，操作儀器的擋次和具體檢測(cè)器，若使用不合要求的低純度氣體，不良影響有以下幾種可能：1. 樣品失真或消失：如H2O氣使氯硅樣品水解；2. 色譜柱失效：H2O，CO2使分子篩柱失去活性，H2O氣使聚脂類(lèi)固定液分解，O2使PEG固定液斷鏈。3. 有時(shí)某些氣體雜質(zhì)和固定液相互作用而產(chǎn)生假峰；4. 對(duì)柱保留特性的影響：如：H2O對(duì)聚乙二醇等親水性固定液的保留指數(shù)會(huì)有所增加，載氣中氧含量過(guò)高時(shí)，無(wú)論是極性或是非極性固定液柱的保留特性，都會(huì)

36、產(chǎn)生變化，使用時(shí)間越長(zhǎng)影響越大；5. 檢測(cè)器：TCD：信噪比減小，無(wú)法調(diào)另，線性變窄，文獻(xiàn)中的校正因子不能使用，氧含量過(guò)大，使元件在高溫時(shí)加速老化，減少壽命；FID：特別是在Dt110/秒下操做時(shí)，CH4等有機(jī)雜質(zhì)，會(huì)使基流激增，噪聲加大不能進(jìn)行微量分析；ECD：載氣中的氧和水對(duì)檢測(cè)器的正常工作影響最大，在不同的供電工作方式中，脈沖供電比直流電壓供電影響大，固定基流脈沖調(diào)制式供電比脈沖供電影響大。這就是為什么目前諸多在操作固定基流脈沖調(diào)制式ECD時(shí)，在載氣純度低時(shí)必須把載氣純度選擇開(kāi)關(guān)從“標(biāo)準(zhǔn)氮”撥到“一般氮”位置的原因。大家會(huì)發(fā)現(xiàn)在此情況下操作，不但靈敏度變低，而且線性亦變窄了。實(shí)踐證明：在

37、操作ECD時(shí)載氣中的水含量低于0.02ppm,氧低于1ppm時(shí)可達(dá)到較理想的性能.值得指出的是,我們多次發(fā)現(xiàn)由于儀器的調(diào)節(jié)氣路系統(tǒng)被污染而造成的對(duì)載氣的二次污染至使ECD基頻大幅度增加使信燥比減小.FPD NPD等常用檢測(cè)器,由于他們屬于選擇性檢測(cè)器,操做時(shí)要根據(jù)分析要求,特別注意被測(cè)敏感物質(zhì)中雜質(zhì)的去除.6、在做程序升溫操作時(shí),載氣中的某些雜質(zhì),在低溫時(shí)保留在色譜柱中,當(dāng)柱溫升高時(shí)不但引起基線漂移,還可能在譜圖上出現(xiàn)比較寬的"假峰"。7、儀器影響a. 各類(lèi)過(guò)濾器加速失效;b. 調(diào)節(jié)閥(穩(wěn)壓閥,穩(wěn)流閥,針形閥)被污染,氣阻堵塞,調(diào)節(jié)精度降低或失靈；c. 氣路系統(tǒng)被污染,若要

38、恢復(fù)儀器在高靈敏度情況下操做,有時(shí)要吹洗很長(zhǎng)時(shí)間(可能一周以上)污染嚴(yán)重時(shí)有時(shí)再也無(wú)法恢復(fù)。d. 檢測(cè)器的壽命實(shí)踐表明,對(duì)ECD和TCD的壽命最明顯，這點(diǎn)應(yīng)引起用戶特別注意。對(duì)氣體純度選擇的一般原則1. 從分析角度講,微量分析比常量分析要求高,也就是說(shuō),氣體中的雜質(zhì)含量必須低于被分析組分的含量,如果用TCD分析10ppm的CO,則載氣中的雜質(zhì)總含量不得超過(guò)10ppm,因?yàn)?9.999%純度的氣體則含0.001%的雜質(zhì),相當(dāng)于10ppm所以對(duì)于10ppm的痕量分析,載氣的純度應(yīng)高于99.999%;對(duì)于FID使用氣體,碳?xì)浠衔锖勘仨毢艿?載氣中的大量氧雜質(zhì)只要不對(duì)色譜柱造成影響,就不影響FID

39、的性能,而操作ECD，載氣中的氧氣和水的含量必須很低等.2. 毛細(xì)管柱分析比填充柱分析要求高;3. 程序升溫分析比恒定溫度分析要求高;4. 濃度型檢測(cè)器比質(zhì)量型檢測(cè)器要求高;5. 配有甲烷裝置的FID比單FID操作的對(duì)載氣中的微量CO,CO2要求要高的多.6. 從儀器壽命和保持儀器的高靈敏度講,中高檔儀器比低當(dāng)儀器要求高。操作不同檢測(cè)器推薦使用的氣體純度我們推薦氣體純度的技術(shù)要求,通常用于常規(guī)分析,對(duì)于特殊高靈敏度的痕量分析應(yīng)采用高一級(jí)純度的氣體,如果不在意色譜柱和儀器的使用壽命,或分析樣品組分濃度很高時(shí),也可以不使用過(guò)高純度的氣體,由于各個(gè)制氣廠設(shè)置不同，其雜質(zhì)含量將有所不同;為滿足不同的使

40、用要求,選用不同廠家不同純度的氣源后,可以通過(guò)氣體凈化處理滿足分析要求,對(duì)于不同雜質(zhì)的氣體采用何種凈化方法和裝置有機(jī)會(huì)在加以討論.綜上所述,新氣相色譜儀接入氣源時(shí)一定要做到心中有數(shù),決不能隨意接入,否則會(huì)造成ECD,甲烷化裝置等的損壞,信噪比減小的無(wú)法使用,下表給出了用于常規(guī)分析時(shí),推薦使用的氣體純度氣象色譜時(shí),氣體純度的選擇:1.從分析角度講,微量分析比常量分析要求高,也就是說(shuō),氣體中的雜質(zhì)含量必須低于被分析組分的含量,如果用TCD分析10ppm的CO,則載氣中的雜質(zhì)總含量不得超過(guò)10ppm,因?yàn)?9.999%純度的氣體則含0.001%的雜質(zhì),相當(dāng)于10ppm所以對(duì)于10ppm的痕量分析,載

41、氣的純度應(yīng)高于99.999%;對(duì)于FID使用氣體,碳?xì)浠衔锖勘仨毢艿?載氣中的大量氧雜質(zhì)只要不對(duì)色譜柱造成影響,就不影響FID的性能,而操作ECD，載氣中的氧氣和水的含量必須很低等.2. 毛細(xì)管柱分析比填充柱分析要求高;3. 程序升溫分析比恒定溫度分析要求高;4. 濃度型檢測(cè)器比質(zhì)量型檢測(cè)器要求高;5. 配有甲烷裝置的FID比單FID操作的對(duì)載氣中的微量CO,CO2要求要高的多.6. 從儀器壽命和保持儀器的高靈敏度講,中高檔儀器比低當(dāng)儀器要求高。氣相色譜柱長(zhǎng),口徑的選擇:1.柱長(zhǎng)的選擇：由于分辨率與柱長(zhǎng)的平方根成正比。柱子長(zhǎng)，則提高分辨率。15m的短柱用于快速分離較簡(jiǎn)單的樣品，也適于 快速

42、成分掃描分析；30m的色譜柱是最常用的柱長(zhǎng)，大多數(shù)分析在此長(zhǎng)度的柱子上完成；50m、60m或更長(zhǎng)的色譜柱用于分離比較復(fù)雜的樣品。2.口徑的選擇：柱徑直接影響柱子的效率、保留特性和樣品容量。小口徑柱比大口徑柱有更高柱效，但柱容量更小。0.25mm：具有較高的柱效，柱容量較低。分離復(fù)雜樣品較好。0.32mm：柱效稍低于0.25mm的色譜柱，但柱容量約高60%。0.53mm：具有類(lèi)似于填充柱的柱容量，可用于分流進(jìn)樣，也可用于不分流進(jìn)樣，當(dāng)柱容量是主要考慮因素時(shí)（如痕量分析），選擇大口徑毛細(xì)管柱較為合適。 專家認(rèn)為，對(duì)于普通用戶，可選30米或50米長(zhǎng)的毛細(xì)管，口徑選0.32mm較為便利。相色譜分離操作

43、時(shí)載氣種類(lèi)及流速的選擇 1.對(duì)于確定的色譜柱和試樣，有一個(gè)最佳的載氣流速，此時(shí)柱效最高，根據(jù)公式：H AB/UC用在不同流速下測(cè)得的塔板高度H對(duì)流速u(mài)作圖，得H-u曲線圖。在曲線的最低點(diǎn)，塔板高度H最?。℉最小）。此時(shí)柱效最高。2.對(duì)于填充柱，N2的最佳實(shí)用線速為1012cm/s；H2為1520cm/s。通常載氣的流速習(xí)慣上用柱前的體積流速（mL/s）來(lái)表示，用轉(zhuǎn)子流量計(jì)測(cè)量；也可通過(guò)皂膜流量計(jì)在柱后進(jìn)行測(cè)定。若色譜柱內(nèi)徑為3mm,N2的流速一般為4060L/min，H2的流速為60-90mL/min。氣相色譜分離操作條件的選擇氣相色譜條件主要受載氣種類(lèi)、流速、柱溫、汽化溫度、柱長(zhǎng)、柱內(nèi)徑、進(jìn)

44、樣時(shí)間和進(jìn)樣量等因素影響。根據(jù)范第姆特方程，流速是影響塔板高度的重要因素，通常選擇稍高于最佳流速的載氣流速；載氣流速大時(shí)，應(yīng)選擇相對(duì)分子量小，擴(kuò)散系數(shù)大的H2，Ne等作載氣，反之選擇相對(duì)分子量大，擴(kuò)散系數(shù)小的N2，Ar等作載氣；提高柱溫可以提高傳質(zhì)速率，提高柱效，但柱溫過(guò)高又會(huì)使組分間分離度減小。采用較低的柱溫，減少固定相的用量和適當(dāng)增加載氣的流速，可在短時(shí)間內(nèi)獲得良好的分離效果；汽化溫度應(yīng)以能使試樣迅速汽化而不產(chǎn)生分解為準(zhǔn)，通常比柱溫高20-70，柱溫應(yīng)比試樣中各組分的平均沸點(diǎn)低20-30, 對(duì)于沸點(diǎn)范圍較寬的試樣，宜采用程序升溫；增加柱長(zhǎng)會(huì)提高分離度，但分析時(shí)間增長(zhǎng)，因此，一般在滿足一定分

45、離度的條件下盡可能用短柱子；進(jìn)樣應(yīng)在1秒以內(nèi)完成，以減小峰變寬；最大允許的進(jìn)樣量應(yīng)該控制在使峰面積或峰高與進(jìn)樣量呈線性關(guān)系的范圍內(nèi)。氣相色譜分離操作時(shí)柱溫的選擇 柱溫是一個(gè)重要的操作參數(shù)，直接影響分離效能和分析速度。首先要考慮到每種固定液都有一定的使用溫度。柱溫不能高于固定液的最高使用溫度，否則固定液揮發(fā)流失。柱溫對(duì)組分分離的影響較大，（1）提高柱溫使各組分的揮發(fā)靠攏，不利于分離， 所以，從分離的角度考慮，宜采用較低的柱溫。（2）柱溫太低，被測(cè)組分在兩相中的擴(kuò)散速率大為減少，分配不能迅速達(dá)到平衡，峰形變寬，柱效也會(huì)下降，并會(huì)延長(zhǎng)分析時(shí)間。柱溫的選擇原則是：應(yīng)使難分離的兩組分達(dá)到預(yù)期的分離效果，

46、峰形正常的前提下，盡可能采用較高的柱溫。一般柱溫應(yīng)比試樣中各組分的平均沸點(diǎn)低2030，具體的選擇可通過(guò)試驗(yàn)決定。3、具體物質(zhì)的分析方法氣相色譜定性與定量分析方法：各種色譜分析方法的定性與定量分析的基本方法都是一樣的。色譜定性分析1. 保留時(shí)間定性2. 利用不同檢測(cè)方法定性3. 保留指數(shù)定性4. 柱前或柱后化學(xué)反應(yīng)定性5. 與其他儀器聯(lián)用定性1. 保留時(shí)間定性在一定的色譜系統(tǒng)和操作條件下，每種物質(zhì)都有一定的保留時(shí)間，如果在相同色譜條件下，未知物的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相同，則可初步認(rèn)為它們?yōu)橥晃镔|(zhì)。為了提高定性分析的可靠性，還可進(jìn)一步改變色譜條件（分離柱、流動(dòng)相、柱溫等）或在樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如

47、果被測(cè)物的保留時(shí)間仍然與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一致，則可認(rèn)為它們?yōu)橥晃镔|(zhì)。2. 利用不同檢測(cè)方法定性同一樣品可以采用多種檢測(cè)方法檢測(cè)，如果待測(cè)組分和標(biāo)準(zhǔn)物在不同的檢測(cè)器上有相同的響應(yīng)行為，則可初步判斷兩者是同一種物質(zhì)。在液相色譜中，還可通過(guò)二極管陣列檢測(cè)器比較兩個(gè)峰的紫外或可見(jiàn)光譜圖。3. 保留指數(shù)定性在氣相色譜中，可以利用文獻(xiàn)中的保留指數(shù)數(shù)據(jù)定性。保留指數(shù)隨溫度的變化率還可用來(lái)判斷化合物的類(lèi)型，因?yàn)椴煌?lèi)型化合物的保留指數(shù)隨溫度的變化率不同。4. 柱前或柱后化學(xué)反應(yīng)定性在色譜柱后裝T型分流器，將分離后的組分導(dǎo)入官能團(tuán)試劑反應(yīng)管，利用官能團(tuán)的特征反應(yīng)定性。也可在進(jìn)樣前將被分離化合物與某些特殊反應(yīng)試劑反應(yīng)生

48、成新的衍生物，于是，該化合物在色譜圖上的出峰位置或峰的大小就會(huì)發(fā)生變化甚至不被檢測(cè)。由此得到被測(cè)化合物的結(jié)構(gòu)信息。5. 與其他儀器聯(lián)用定性將具有定性能力的分析儀器如質(zhì)譜（MS）、紅外（IR）、原子吸收光譜（AAS）、原子發(fā)射光譜（AES，ICP-AES）等儀器作為色譜儀的檢測(cè)器即可獲得比較準(zhǔn)確的定性信息。定量分析色譜定量分析的依據(jù)是被測(cè)物質(zhì)的量與它在色譜圖上的峰面積（或峰高）成正比。數(shù)據(jù)處理軟件（工作站）可以給出包括峰高和峰面積在內(nèi)的多種色譜數(shù)據(jù)。因?yàn)榉甯弑确迕娣e更容易受分析條件波動(dòng)的影響，且峰高標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍也較峰面積的窄，因此，通常情況是采用峰面積進(jìn)行定量分析。1. 校正因子定量2.

49、歸一化法3. 外標(biāo)法4. 內(nèi)標(biāo)法5. 標(biāo)準(zhǔn)加入法1. 校正因子定量絕對(duì)校正因子 ：?jiǎn)挝环迕娣e所對(duì)應(yīng)的被測(cè)物質(zhì)的濃度（或質(zhì)量），即樣品組分的峰面積與相同條件下該組分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的校正因子相乘，即可得到被測(cè)組分的濃度。絕對(duì)校正因子受實(shí)驗(yàn)條件的影響，定量分析時(shí)必須與實(shí)際樣品在相同條件下測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的校正因子。相對(duì)校正因子 :某物質(zhì)i與一選擇的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)S的絕對(duì)校正因子之比。即相對(duì)校正因子只與檢測(cè)器類(lèi)型有關(guān)，而與色譜條件無(wú)關(guān)。2. 歸一化法歸一化法是將所有組分的峰面積 分別乘以它們的相對(duì)校正因子后求和，即所謂"歸一"，被測(cè)組分X的含量可以用下式求得：采用歸一化法進(jìn)行定量分析的前提條件是樣

50、品中所有成分都要能從色譜柱上洗脫下來(lái)，并能被檢測(cè)器檢測(cè)。歸一法主要在氣相色譜中應(yīng)用。3. 外標(biāo)法直接比較法： 將未知樣品中某一物質(zhì)的峰面積與該物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積直接比較進(jìn)行定量。通常要求標(biāo)準(zhǔn)品的濃度與被測(cè)組分濃度接近，以減小定量誤差。標(biāo)準(zhǔn)曲線法： 將被測(cè)組分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)色譜分析后制作一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，即物質(zhì)濃度與其峰面積（或峰高）的關(guān)系曲線。根據(jù)樣品中待測(cè)組分的色譜峰面積（或峰高），從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的濃度。標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率與物質(zhì)的性質(zhì)和檢測(cè)器的特性相關(guān)，相當(dāng)于待測(cè)組分的校正因子。 4. 內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法是將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（內(nèi)標(biāo)物）加入到未知樣品中去，然后比較內(nèi)標(biāo)物和被測(cè)組分的峰面積，從而確定被測(cè)組分的濃度。由于內(nèi)標(biāo)物和被測(cè)組分處在同一基體中，因此可以消除基體帶來(lái)的干擾。而且當(dāng)儀器參數(shù)和洗脫條件發(fā)生非人為的變化時(shí)，內(nèi)標(biāo)物和樣品組分都會(huì)受到同樣影響，這樣消除了系統(tǒng)誤差。當(dāng)對(duì)樣品的