科華ST-360酶標儀操作規(guī)程

1、ST-360酶標分析儀標準操作規(guī)程1.目的通過對ST-360酶標儀的規(guī)范操作，以獲取準確的結果，使其處于良好的工作狀態(tài)，并保證操作人員的人身健康與安全。2范圍 適用于ST-360酶標儀的操作、維護及保養(yǎng)。3職責化驗員嚴格按照程序進行操作、維修、保養(yǎng)及記錄。 計量員負責其校驗。衛(wèi)檢科負責監(jiān)督。4.基本原理ST-360酶標供醫(yī)療機構用于酶聯(lián)免疫測定。酶免反應中的顯色反應是通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標本中待測抗體或抗原的濃度。酶標儀利用分光光度計的原理，讀取酶免實驗中反應物的吸光度值，進而進行分析。ST-360酶標儀適用于96孔平板式樣品盤，有六種測量方式和九種計算方式，形式多樣靈活，

2、最終結果可以打印，也可通過串行口輸出給計算機。ST-360酶標儀時一種通道垂直光路光密度檢測儀，可用來進行標準光密度測定與凝集反應檢測為了提高酶標儀光源能量的效率及確保光源的穩(wěn)定性，ST-360酶標儀具有電壓自動調(diào)節(jié)功能。5. 檢測原理ST-360酶標儀利用了垂直光密度檢測的概念，即光束經(jīng)過整個標本的垂直測光發(fā)，光的吸收與板孔中吸光物質(zhì)的多少呈正比。吸光值由以下公式表示：A = （a/s）×mA = 吸光度值；a = 物質(zhì)的克分子吸收率 ；m = 吸光物質(zhì)的質(zhì)量 ；s = 垂直于光路的橫切面積。6.操作規(guī)程6.1 開機將酶標儀后部的開關打開，儀器將顯示正在自檢，隨后顯示當前的測量方式

3、和計算方式及“準備就緒”。在自檢過程中，儀器對每一個已裝的濾光片選擇合適的光強度，等待1分鐘預熱。注：儀器顯示測量方式和計算方式是在兩個頁面，須按【】【】鍵查看，后續(xù)相同。6.2 將待測板放置于載物臺上6.3 按【】【】鍵以選擇待測項目的相應程序（每個通道存放的程序已由本室人員根據(jù)試劑盒的要求事先輸入）。6.4 按【開始】鍵進行掃描。6.5 儀器掃描后，正常情況下屏幕即顯示96孔測試結果。顯示結果為+、值時為一頁，顯示結果為濃度或吸光度值時分二頁，須用【】【】鍵翻閱查看。6.6 打開打印機電源，放上A4 紙，打印出測試結果。6.7 關閉酶標儀及打印機電源。7 鍵盤功能7.1 【打印】：打印屏幕

4、顯示結果。7.2 【功能】：選擇儀器功能。7.3 【測量方式】：選擇測量方式。7.4 【計算方式】：選擇計算方式。7.5 【開始】：開始檢測。7.6 【退出】：從設置功能項或樣品測試中退出。7.7 【清除】：在確認前更正數(shù)據(jù)。7.8 【確定】：對輸入模式和輸入?yún)?shù)確認。7.9 【】：向前查閱模式和參數(shù)。7.10 【】：向后查閱模式和參數(shù)。8編制測試程序8.1 測量方式8.1.1 按【測量方式】鍵，參照屏幕顯示按16中的任一數(shù)字鍵或按【】、【】鍵移動并按【確定】鍵，選擇所需的測量方式。8.1.2 當選擇了測試方式中的某一項后，有相應的參數(shù)需要設置。8.1.2.1 單波長檢測參數(shù)設置：波長值和空白

5、方式。當選擇單波長方式后，參照屏幕顯示可按AH中的任一字母鍵或按【】、【】并確認所需波長，按【確定】鍵，再按屏幕顯示可按14中的任一數(shù)字鍵或按【】、【】移動并確認，選擇空白方式。（1）當選擇多孔試劑空白時，參照屏幕顯示可設置A1H12的任一位置，按【確定】鍵后在相應位置上出現(xiàn)黑點。用戶可設置最多8空白位置，當設置完相應的空白位置后，按【確定】鍵退出。注：儀器始終保持前一次所選狀態(tài)，開始選擇后，儀器會自動重新刷新，按【清除】鍵可恢復上一次的空白設置。（2）當選擇列空白時，參照屏幕顯示可選擇112的任一數(shù)字鍵，按【確定】鍵后，則在相應列上出現(xiàn)一列黑點。列空白即為每行采用各自不同的空白。（3）當選擇

6、行空白時，參照屏幕顯示可選擇任一字母鍵，按【確定】鍵后，可在相應行上出現(xiàn)一行黑點。行空白即為每行采用各自不同的空白。8.1.2.2 雙波長檢測參數(shù)設置：第一波長值和第二波長值、空白方式。選擇雙波長時，參照屏幕顯示可選擇AH中的任一字母鍵或按【】、【】鍵選擇第一/第二波長后，按【確定】鍵，再進行空白方式選擇。其空白方式同單波長空白方式設置。8.1.2.3 雙時法檢測參數(shù)設置：波長、空白方式、間歇時間，其中波長及空白方式設置同上。當設置完空白方式，參照屏幕顯示可按相應數(shù)字鍵依次輸入時、分、秒。注：最短間歇時間為5秒。8.1.2.4 動力學法檢測參數(shù)設置：波長、空白方式、間歇時間、延遲時間、全部時間

7、，其參數(shù)設置同上。注：最短間歇時間為5秒，全部時間必須大于間歇時間與延遲時間之和。8.1.2.5 多波長檢測相應參數(shù)為第一列波長、第十二列波長及空白選擇，設置方法同上。8.2 計算方式儀器的計算方式有九種，當選擇了計算方式中的某一項后，有相應的參數(shù)需要選擇和設置。8.2.1 吸光度法：結果以吸光度形式輸出，無需參數(shù)設置。8.2.2 因子計算法：測出的吸光度值和用戶給出的因子相乘得出濃度，濃度單位由因子單位確定。濃度根據(jù)以下公式計算：濃度 = 因子×吸光度參數(shù)設置：因子。8.2.3 標準濃度法：用戶輸入標準品濃度，酶標儀通過這些標準品，用所選公式擬合成曲線，通過標準曲線，可將測量得出的

8、吸光度換算成濃度。參數(shù)設置：擬合公式及相應系數(shù)和標準品的序號、位置、濃度。8.2.4 標準曲線法：用戶輸入所選擬合曲線的A、B、C、D值來確定標準曲線，酶標儀用該曲線方程來計算濃度。參數(shù)設置：擬合曲線及相應擬合曲線系數(shù)。8.2.5 單限檢測法：儀器測出的吸光度與用戶定義的或按公式計算出的一個極限值比較，如果低于極限值，會出現(xiàn)負號“”。相反，會出現(xiàn)正號“”。如果極限值為負，出現(xiàn)結果相反。參數(shù)設置：極限值、系數(shù)A、B、C及陰陽性。8.2.6 雙限檢測法：儀器測出的吸光度與用戶定義的兩個限值比較。如結果低于兩個限值，會出現(xiàn)負號“”；如結果在兩個限值之間，出現(xiàn)“0”；如結果高于兩個限值，會出現(xiàn)正號“”

9、。參數(shù)設置：低極限值、高極限值。注：低限值必須小于高限值。8.2.7 等級檢測法：用戶定義的數(shù)值被分成10個部分，10個部分編號為09。測出的吸光度值根據(jù)它所在的部分以09中的編號反映出來。參數(shù)設置：等級范圍值。8.2.8 列減法：第二列結果減去第一列結果，第四列結果減去第三列結果，或反之。參數(shù)設置：列減方法。8.2.9 兩點法：用戶輸入標準品濃度，儀器通過標準品計算出點到點的標準曲線。通過這一曲線，將測得的吸光度值轉(zhuǎn)換成濃度。參數(shù)設置：標準品的序號、位置及濃度，設置方法與標準濃度法相同，只是擬合時點到點之間為一條直線。8.3 功能設置8.3.1 樣品盤運動方式用戶可按AD中任一字母鍵或按【】

10、、【】鍵選擇樣品盤運動方式并按【確定】鍵確認。8.3.2 結果輸出處理屏幕中，A、B為對應項，C、D為對應項，E、F為對應項，用戶只能選擇對應項中的某一項。8.3.3 每盤標準處理用戶可按A、B選擇或按【】、【】鍵選擇每盤標準處理方式，并按【確定】鍵確認。注：只對計算方式3、9有效。8.3.4 存儲當前內(nèi)容用戶可按A、B選擇存儲程序還是結果，按150選擇存儲的號碼。儀器共可存儲50個程序設置和50次測量結果。8.3.5 調(diào)用已存內(nèi)容可按A、B及150調(diào)出上面一步（存儲當前內(nèi)容）中存儲的內(nèi)容。8.3.6 打印已存內(nèi)容8.3.7 濾光片設置輸入要更改的位置和波長。建議：用戶不可隨意修改該項設置。8

11、.3.8 時鐘設置按A、B、C、D、E鍵選擇進行相應設置。8.3.9 恢復默認值9校正程序9.1 濾光片波長精度檢查將不同波長的濾光片從酶標儀上卸下，用UV-2201型紫外-可見分光光度計（波長精度±0.3nm）于可見光區(qū)對每個濾光片進行掃描，其檢測值與標定值之差為濾光片波長精度。一般酶標儀無585nm濾光片，可選用550nm或630nm濾光片。450nm 濾光片的檢定選用普魯蘭溶液（校正波長為630nm）。9.2 通道差與孔間差檢測通道差檢測是取一只酶標板小孔杯（杯底須光滑，透明，無污染以酶標板架作載體，將其（內(nèi)含200ul甲基橙溶液吸光度調(diào)至0.500A左右）置于8個通道的相應位

12、置，蒸溜水調(diào)零，于490nm處連續(xù)測三次,觀察其不同通道的檢測器測量結果的一致性，可用極差值來表示?？组g差的測量是選擇同一廠家，同一批號酶標2板條（8條共96孔）分別加入200ul甲基橙溶液（吸光度調(diào)至0.100A左右）先后置于同一通道，蒸溜水調(diào)零,于490nm處檢測，其誤差大小用±1.96s衡量。9.3 零點飄移（穩(wěn)定性觀察）取8只小孔杯分別置于8個通道的相應位置，均加入200ul蒸餾水并調(diào)零，于490nm處每隔30分鐘測一次，觀察各個通道4小時內(nèi)吸光度的變化。9.4 精密度評價每個通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同濃度的甲基橙溶解，蒸餾水調(diào)零，于490nm作雙份平行測定

13、，每日測二次（上下午各一次），連續(xù)測定20天。分別計算其批內(nèi)精密度，日內(nèi)批精密度,日間精密度和總精密度及相應的CV值。9.5 線性測定用電子天平精確稱取甲基橙配制5個系列的溶液，于490nm平行測8次，取其均值。計算其回歸方程，相關系數(shù)及標準估計誤差s，并用±1.96s表示樣品測量的誤差范圍.雙波長測定評價：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶血液（測定波長為490nm，校正波長為585nm），先后于8個通道檢測，每個通道測3次，比較各組之間是否具有統(tǒng)計學差異，以考察雙波長消除干擾組分的效果。10自校規(guī)范10.1 測定原理：根據(jù)樣品OD值計算樣品中抗原或抗體的濃度。10.2 校

14、準條件：儀器正常工作需要以下環(huán)境：溫度1825，濕度4585%RH，電壓220V。10.3 質(zhì)控品：選擇衛(wèi)生部質(zhì)控血清或公認質(zhì)量好的質(zhì)控品嚴格按照操作說明進行質(zhì)量控制。10.4 校準方法：每日測定HBsAg質(zhì)控品，月底計算CV值。10.5 校準步驟10.5.1 按照操作說明進行校準測定。10.5.2 RCV值的測定，在日常工作條件下規(guī)范操作，每一個質(zhì)控項目連續(xù)測定20天。10.5.3 對檢測結果進行統(tǒng)計學處理，計算出靶值、標準差(SD)、變異系數(shù)(CV)。10.5.4 用RCV的測定結果建立室內(nèi)質(zhì)控，判斷標準以臨床檢驗管理與技術規(guī)程為準。11維護保養(yǎng)程序11.1 保養(yǎng)11.1.1 為保證儀器持

15、續(xù)的穩(wěn)定性和準確性，應干擾光學系統(tǒng)的任何部件。光路的調(diào)校錯誤會影響測量結果。11.1.2 保持光學系統(tǒng)的清潔，以確保正常功能和結果的準確，應避免任何液體流入儀器內(nèi)部，并防塵、防止其它外源性物質(zhì)，不要用手指摸透鏡表面、濾光鏡、光電檢測器。11.2 儀器常規(guī)清潔11.2.1 關掉儀器，并拔掉電源插頭。11.2.2 使用一次性手套，用一次性擦布沾水或溫和去污劑，清潔儀器外部、導軌和板架。11.3 清潔光學系統(tǒng)：詳見儀器使用說明書。11.4 消毒方法：在使用危險性的傳染性物質(zhì)后，用以下方法消毒儀器11.4.1 關掉儀器，并拉掉電源插頭。11.4.2 使用一次性手套，用一次性擦布沾70%乙醇，清潔儀器外部、軌道和板架。11.4.3 儀器內(nèi)部消毒，詳見儀器使用說明書。12配套中文電腦操作12.1 打開電腦主機及顯示器。12.2 雙擊進入酶免疫管理系統(tǒng)。12.3 在“病人資料”菜單確認今日值班。12.4 在“病人資料”菜單中輸入當日化驗單的病人資料。12.5 在“檢驗報告單”菜單中檢查，修改及打印報告單。12.6 在“酶免疫管理