酶標(biāo)儀軟件操作步驟參考模板_第1頁
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酶標(biāo)儀軟件操作步驟參考模板_第3頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、酶標(biāo)儀軟件操作步驟一、 軟件運(yùn)行前的連接酶標(biāo)儀插上電源,和電腦連接好后,打開電腦和酶標(biāo)儀開關(guān),酶標(biāo)儀至少穩(wěn)定15min后開始讀數(shù),效果比較好。注意,當(dāng)酶標(biāo)儀處于power on 的狀態(tài)時(shí),不要手動(dòng)打開酶標(biāo)板室和比色皿室的門,以免紫外輻射的傷害或者儀器的損傷。二、軟件的運(yùn)行1.打開桌面快捷方式SkanIt RE for MSS 2.4.2運(yùn)行軟件,出現(xiàn)Log on To SkanIt software的界面。2.use name默認(rèn)為“admin”, password為空3.點(diǎn)OK進(jìn)入SkanIt software 2.4.2界面,New session-新建任務(wù)程序,Open session-

2、打開已有程序。4.在界面上方的setting中選擇Instrument,出現(xiàn)Instrument setting的界面,在Instrument中選中Multiskan spectrum on COM,Themo Electron。點(diǎn)擊右側(cè)的setup,在serial number中輸入1500-850,然后點(diǎn)擊OK。再點(diǎn)擊Default instrument右邊的connect,即可設(shè)定好連接。然后點(diǎn)擊close關(guān)閉窗口。三New session操作1新建任務(wù)程序:點(diǎn)擊new session進(jìn)入protocol options界面,在session name中輸入新的程序名稱點(diǎn)擊next進(jìn)入p

3、late layout options界面,在select plate template中選擇所需模板類型(一般96孔板選擇use default,比色皿選擇cuvette,其他的可以選擇相應(yīng)的類型)輸入plate layout name(系統(tǒng)默認(rèn)的與session name相同)點(diǎn)擊next進(jìn)入Definition done界面,在select location中選擇任務(wù)程序所要保存的目的文件夾(該界面可進(jìn)行新建,重命名及刪除文件夾操作)點(diǎn)擊finish完成新建,進(jìn)入SkanIt software 2.4.2程序操作主界面(主要有三大塊: platelayout用于模板區(qū)域選擇,protoc

4、ol用于程序編輯,results用于數(shù)據(jù)處理)。1 / 42.plate layout對(duì)模板區(qū)域進(jìn)行選取點(diǎn)擊wizard進(jìn)入選取模板區(qū)域操作界面fill wizard(任務(wù)類型type有: blank空白,calibrator標(biāo)準(zhǔn)蛋白,control對(duì)照,empty空白,unkown一般為樣品)。 在右邊模板中選取開始點(diǎn)位置,即紅圓點(diǎn)所在位置。選取方向,在Filling order中可通過箭頭設(shè)定。對(duì)于blank,在No.of replicates中填寫好重復(fù)數(shù),選擇好開始位點(diǎn)和方向,點(diǎn)擊Add可完成。對(duì)于calibrator,在No.of calibrators 中填寫標(biāo)準(zhǔn)蛋白的個(gè)數(shù),在No

5、.of replicates中填寫好重復(fù)數(shù),選擇好開始位點(diǎn)和方向。如有濃度梯度,可選擇Generate series進(jìn)行設(shè)置。例如,取7個(gè)濃度蛋白做標(biāo)準(zhǔn)曲線,稀釋倍數(shù)分別為20,40,80,160,320,640,1320,每個(gè)濃度重復(fù)兩次,則在No.of calibrators 中填寫7,在No.of replicates中填寫2,選擇好開始位點(diǎn)和方向。然后選中Generate series,出現(xiàn)conventions的界面,在Initial value中填寫20,在operators中選擇Multiply,step by中填寫2,點(diǎn)擊ok。對(duì)于control,操作基本和calibrator

6、s相似。對(duì)于Empty操作基本和blank相似。對(duì)于unknown,填寫好No.of replicates,No.of unknowns并選擇好開始位點(diǎn)和方向,點(diǎn)擊Add即可完成。第一塊板填滿后,有時(shí)會(huì)自動(dòng)進(jìn)入第二塊板的編輯,注意看Fill wizard的模板下方的current plate,如果顯示為2/2,則可以直接關(guān)掉窗口,模板區(qū)域即可編好。標(biāo)注:對(duì)于單一型任務(wù)可先選取全模板【即在No.of unkown選項(xiàng)中設(shè)為模板最大孔數(shù)】,然后對(duì)不要的區(qū)域進(jìn)行刪除。對(duì)于非blank和empty型任務(wù),若有濃度差,可勾選generate series,然后進(jìn)行設(shè)定:series為有規(guī)則的濃度差,mu

7、ltiple values為不規(guī)則的濃度差。有規(guī)則的可通過運(yùn)算公式,系統(tǒng)直接算出,無規(guī)則的通過鍵盤輸入,點(diǎn)擊add進(jìn)行添加。3.編輯程序選好所用模板區(qū)域后,點(diǎn)擊protocol進(jìn)入程序編輯界面。在protocol properties所屬框內(nèi)的execution order選項(xiàng)中選中數(shù)據(jù)讀取路徑(共有四種,第一種一般為常用路徑,一次讀四個(gè)孔)。在Settle delay選項(xiàng)中設(shè)定讀數(shù)時(shí)間間隔。一般比色皿不需要讀書時(shí)間間隔,設(shè)置為零即可,對(duì)于測(cè)量板而言,由于板在移動(dòng)過程中液體表面共振波的影響,需要穩(wěn)定一段時(shí)間,一般設(shè)置為5s in a 6-well plate,300ms in a 96-wel

8、l plate,<20ms in a 384-well plate。在steps所屬框內(nèi)空白處或選中程序單擊鼠標(biāo)右鍵得到應(yīng)用程序子菜單。在子菜單中選取你所要運(yùn)行的程序(如常用的程序有photometric,photometric-scanning,Incubate和shake等),并在該程序的選項(xiàng)中設(shè)定你所需的參數(shù)。一般測(cè)蛋白含量選擇photometric,在wavelength中設(shè)置好波長(zhǎng)即可。所有程序編寫好后,在session中點(diǎn)擊save保存好模板程序,不保存將無法運(yùn)行上面所設(shè)的模板程序。4測(cè)讀數(shù)據(jù)在Execution所屬框內(nèi)點(diǎn)擊connect鏈接機(jī)器,鏈接過程中會(huì)出現(xiàn)機(jī)器狀態(tài)列表

9、窗口,無異常后點(diǎn)Close關(guān)閉。在Execution所屬框內(nèi)點(diǎn)擊run plate out彈出酶標(biāo)板載板,把酶標(biāo)板底部擦干后放上去后,確保平穩(wěn)后點(diǎn)擊run plate in,等酶標(biāo)板進(jìn)去。在Execution所屬框內(nèi)點(diǎn)擊Execute session按鈕運(yùn)行所設(shè)程序,彈出Run name窗口,點(diǎn)擊Ok確認(rèn)運(yùn)行。接著會(huì)出現(xiàn)讀數(shù)窗口,不要關(guān)閉讀數(shù)窗口,讀數(shù)完畢后窗口會(huì)自動(dòng)消失,并彈出酶標(biāo)板載板。注:以前,無法進(jìn)行人工讀板,這是因?yàn)闄C(jī)器序列號(hào)的設(shè)置不對(duì),要仔細(xì)查看機(jī)器上的機(jī)器序列號(hào),將正確的序列號(hào)填入操作軟件中的設(shè)置中。5數(shù)據(jù)分析及保存儀器讀數(shù)完畢后,系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入Results操作界面,在Resul

10、t界面所屬框中,可對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。在Result所屬框中,單擊要分析數(shù)據(jù)的程序,如測(cè)蛋白一般選擇的photometric,點(diǎn)鼠標(biāo)右鍵得到數(shù)據(jù)分析方法主菜單。選擇要分析的方法,測(cè)蛋白選擇Quantitative Curve Fit,出現(xiàn)Parameters,Graph,Table,List可以點(diǎn)擊查看結(jié)果。如果需要標(biāo)準(zhǔn)曲線,則在Graph的曲線圖中單擊右鍵選擇Toolbar,圖標(biāo)上方會(huì)出現(xiàn)一系列圖標(biāo),點(diǎn)擊Copy to clipboard選擇As a Bitmap,將其粘貼在新建word文檔中并保存。點(diǎn)擊Result左側(cè)圖標(biāo)框中選擇Export,在Parameters中的select ite

11、ms to report中選擇要保存的內(nèi)容,一般選擇layout,Photometric, Quantitative Curve Fit,然后點(diǎn)擊Add,在;右邊的Report items中出現(xiàn)所選擇的內(nèi)容。在After execution中選中Save to file,通過右下方的Browse選擇要保存的文件。注意此次操作可能沒有保存到目的文件夾。必須進(jìn)行以下步驟。點(diǎn)擊上方的Report可看見結(jié)果,點(diǎn)擊Save選擇所要保存到的目的文件夾。并檢查是否所有要保存的數(shù)據(jù)都已經(jīng)保存到相應(yīng)文件夾中。四、Open session操作 若要運(yùn)行或查看已有的程序,在登錄界面點(diǎn)擊Open session,打開程序所在文件夾,單擊所要運(yùn)行或查看的程序(提示:

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