大理大學(xué)病毒學(xué)檢驗(yàn)備考精華

1、大理大學(xué)病毒學(xué)檢驗(yàn)期末備考精華責(zé)任編輯總結(jié)：程家國第1章細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)一、名詞解釋.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(cellculturetechnology):是模擬體內(nèi)生理環(huán)境條件，一共細(xì)胞適宜的營養(yǎng)和溫度條件，在無菌操作的基礎(chǔ)上，使離體組織細(xì)胞生長增殖并進(jìn)行傳代的技術(shù)。1 .細(xì)胞系(celllines):原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代培養(yǎng)獲得的一群細(xì)胞。2 .原代細(xì)胞培養(yǎng)(primarycell):將動(dòng)物或人的胎兒組織經(jīng)剪碎、酶消化、稀釋計(jì)數(shù)、加營養(yǎng)液，37度培養(yǎng)12天后，形成單層細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的方法。3 .傳代細(xì)胞培養(yǎng)(continuouscell):原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中，在大多數(shù)細(xì)胞退化時(shí)，少數(shù)細(xì)胞又能長期傳下去，這種

2、能在培養(yǎng)容器內(nèi)連續(xù)多次傳代的細(xì)胞。4 .細(xì)胞株(cellstrain)：從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的遺傳、生化特性相同的細(xì)胞群。二、問答題1.簡(jiǎn)答空斑形成單位法的原理。答：將不同稀釋度的病毒懸液接種于單層細(xì)胞上，使病毒吸附于細(xì)胞，然后覆蓋一層營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。由于瓊脂的限制，病毒只能感染周圍的細(xì)胞，出現(xiàn)蝕斑現(xiàn)象。加入中性紅染料，由于死細(xì)胞不能攝入中性紅染料，會(huì)出現(xiàn)不染色的空斑。一個(gè)空斑理論上可認(rèn)為石油一個(gè)病毒粒子感染形成的，稱為一個(gè)空斑形成單位?？梢远繙y(cè)定病毒的感染力。2.50%終點(diǎn)法的原理和注意事項(xiàng)。答：1.原理：將病毒液經(jīng)系列稀釋后，接種單層細(xì)胞，觀察細(xì)胞病變，計(jì)算造成50%ffl胞發(fā)生最

3、終病變的病毒液濃度。2.注意事項(xiàng):3 .細(xì)胞的生命周期和一代生存周期各包括哪些階段？答：1.細(xì)胞生命周期：是單個(gè)細(xì)胞增殖分裂的過程，一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過前期的物質(zhì)準(zhǔn)備進(jìn)入分裂期而成為兩個(gè)新細(xì)胞，而兩次細(xì)胞分裂問間隔的時(shí)間為一個(gè)細(xì)胞周期，包括G1期（DNA合成前期）、S期（DNA合成期）、G2期（分裂前期）、M期（分裂期）。4 .培養(yǎng)一代細(xì)胞一般要經(jīng)過：遲緩期、對(duì)數(shù)期、平衡期和衰亡期。5 .體外細(xì)胞培養(yǎng)需要哪些理化條件？血清有何作用？6 答：1.體外培養(yǎng)需要的條件.常用的消化液有哪些？7 答：胰蛋白酶、EDTA胰酶-EDTA.細(xì)胞培養(yǎng)中預(yù)防微生物污染可用哪些抗生素？答：防止細(xì)菌污染用青霉素、鏈霉素和慶大

4、霉素；防止真菌增長用兩性霉素;防止支原體污染用卡那霉素和金霉素。8 .如何進(jìn)行雞胚原代細(xì)胞培養(yǎng)?8.單層細(xì)胞培養(yǎng)上病毒增殖如何檢測(cè)?9.病毒滴度測(cè)定有哪些方法?10.病毒純化有何原則?11.病毒保存的方法有哪些？各有何特點(diǎn)?12.常見病毒純化的方法有哪些?第2章雞胚和動(dòng)物接種技術(shù)1 一、名詞解釋1.近交系2.封閉群二、問答題.雞胚有哪些結(jié)構(gòu)？分別適合何種病毒的接種培養(yǎng)?答：結(jié)構(gòu)：2 .活胚的檢查有幾個(gè)方面?3 .實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如何分類？各有哪些種類？1 答：普通動(dòng)物、清潔級(jí)動(dòng)物、SPFGF第3章病毒核酸雜交技術(shù)一、名詞解釋.探針（probe）:已知堿基序列的核甘酸片段。2 .CDNA探針：指互補(bǔ)與m

5、RNA勺DN吩子。3 .復(fù)性（）.變性（denaturation）：指核酸雙螺旋去的氫鍵斷裂，變成單鏈，并不涉及共價(jià)鍵的斷裂。.PCR聚合酶鏈反應(yīng)，根據(jù)DNA®螺旋結(jié)構(gòu)的半保留復(fù)制和在一定條件下可以變性和復(fù)性的特性設(shè)計(jì)的.Northernblot:Northern印跡，將RNA樣品通過瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離，再轉(zhuǎn)移到固相支持物上，用同位素或生物素標(biāo)記的核酸探針對(duì)固定于膜上的RNA進(jìn)行雜交。1 .Southernblot二、問答題.簡(jiǎn)答PCR勺原理與反應(yīng)體系組成。答：1.原理：根據(jù)DNA®螺旋結(jié)構(gòu)的半保留復(fù)制和在一定條件下可以變性和復(fù)性的特性設(shè)計(jì)的。2 .反應(yīng)體系：DNA模板

6、，引物，反應(yīng)緩沖液，Mg2+,Dntp,ddH2O,耐熱聚合酶。3 .簡(jiǎn)答熒光定量PCR勺用途。答：可用于測(cè)定DN用口RNAW貝數(shù)。第4章病毒抗原與抗體檢測(cè)技術(shù)一、名詞解釋.中和試驗(yàn)(neutralizationtest)：在體外適當(dāng)條件下孵育病毒與特異性抗體的混合物，使病毒與抗體相互反應(yīng)，再講混合物接種到敏感的宿主體內(nèi)，然后測(cè)定殘存病毒感染力的一種方法。1 .血凝試驗(yàn)HA某些病毒和病毒表面的血凝素能引起人或某些動(dòng)物的紅細(xì)胞發(fā)生凝集的現(xiàn)象。2 .血凝抑制試驗(yàn)HAI:血清中血凝素抗體能夠與病毒血凝素分子的抗原位點(diǎn)發(fā)生特異性結(jié)合，干擾病毒血凝素與紅細(xì)胞上受體結(jié)合的過程，從而抑制紅細(xì)胞的凝集。1 二

7、、問答題.何為中和試驗(yàn)？有何用途？答：1.中和試驗(yàn)：在體外適當(dāng)條件下孵育病毒與特異性抗體的混合物，使病毒與抗體相互反應(yīng)，再講混合物接種到敏感的宿主體內(nèi)，然后測(cè)定殘存病毒感染力的一種方法。2 .用途：鑒定病毒；分析病毒抗原的性質(zhì)；測(cè)定免疫血清抗體的效價(jià)和疫苗接種后的效果；測(cè)定患者血清中的抗體，用于診斷病毒性疾病。3 .中和試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)血清的抗體濃度是多少？4 .簡(jiǎn)答血凝試驗(yàn)與血凝抑制試驗(yàn)的原理、結(jié)果判斷和應(yīng)用。答：1.血凝試驗(yàn)原理：某些病毒和病毒表面的血凝素能引起人或某些動(dòng)物的紅細(xì)胞發(fā)生凝集的現(xiàn)象。.血凝試驗(yàn)的結(jié)果判斷：+旨紅細(xì)胞均勻鋪在管底；+旨紅細(xì)胞鋪在管底，面積稍小，邊緣不整齊；+時(shí)旨紅細(xì)胞

8、形成一個(gè)小團(tuán)，周圍有小凝塊；+指紅細(xì)胞形成一個(gè)小團(tuán)，但邊緣不整齊有小凝塊；-無凝集。以出現(xiàn)+的稀釋度的倒數(shù)為判定終點(diǎn)。2 .血凝抑制試驗(yàn)原理：血清中血凝素抗體能夠與病毒血凝素分子的抗原位點(diǎn)發(fā)生特異性結(jié)合，干擾病毒血凝素與紅細(xì)胞上受體結(jié)合的過程，從而抑制紅細(xì)胞的凝集。3 .血凝抑制試驗(yàn)的結(jié)果判斷：血凝抑制效價(jià)使完全抑制血凝出現(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)血清最高稀釋度的倒數(shù)。4 .用途：發(fā)現(xiàn)和鑒定病毒；用于臨床病原學(xué)診斷；病毒性活亞型的鑒定；免疫機(jī)體后抗體效價(jià)的測(cè)定；病毒抗原變異分析等。5 .4個(gè)血凝單位的含意是什么？用途是什么？答：1.含義：5.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)原理與結(jié)果判定？答：1.原理：抗原和抗體形成的復(fù)合物吸附并

9、激活補(bǔ)體。包才S3個(gè)系統(tǒng)即反應(yīng)系統(tǒng)，補(bǔ)體系統(tǒng)和指示系統(tǒng)（綿陽紅細(xì)胞與相應(yīng)溶血素形成的致敏紅細(xì)胞）。2.結(jié)果判定：出現(xiàn)溶血現(xiàn)象時(shí)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)陰性，反之則為陽性。第8章皮膚和粘膜感染病毒及其檢驗(yàn)1 .皰疹病毒生物學(xué)特性怎樣？答：基因組為線性雙鏈DNA有包膜，包膜上有包膜蛋白，有內(nèi)膜和衣殼。2 .單純皰疹病毒臨床表現(xiàn)有哪些？一般潛伏于哪些部位？答：1.HSV-1常引起口唇部的皰疹，一般潛伏于三叉神經(jīng)節(jié)和頸上神經(jīng)節(jié)，并在神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)終身潛伏。2 .HSV-2:主要引起生殖器皰疹，潛伏在腰鼾神經(jīng)節(jié)和脊髓內(nèi)。3 .EBV所致疾病有哪些？如何做實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)？實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)有哪些?4 .水痘-帶狀皰疹病毒有何感染

10、特點(diǎn)？怎樣傳播?5 .人巨細(xì)胞病毒感染類型有哪些？如何做實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)?6.乳頭瘤病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)?7.怎樣進(jìn)行HPV勺實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)?8.宮頸癌普查常用的方法是什么?第9章眼及心血管感染病毒及其檢驗(yàn)1 RhabdoviridaeandItsDiagnosis一、名詞解釋1.Negribody二、問答題.簡(jiǎn)述狂犬病毒的形態(tài)特征和核酸類型。2 .狂犬病主要的診斷方法有哪些?3 .如何預(yù)防與治療狂犬病?1. 一、名詞解釋大球形顆粒HBsA酢口抗-HBsHBsAgW帶者HBcA刑抗-HBcHBeA球口抗-HBe丁型肝炎病毒(HepatitisDvirus,HDV)1 重疊感染二、問答題.小RNAW毒有無

11、包膜？基因組的類型是什么？2 .小RNAW毒科中包括哪些對(duì)人致病的病毒？3 .HAVffi脊髓灰質(zhì)炎病毒各分幾個(gè)血清型？4 .HAVffi脊髓灰質(zhì)炎病毒的主要流行病學(xué)特征有哪些？5 .如何預(yù)防和治療脊髓灰質(zhì)炎和甲型肝炎？6 .HBV有哪三種形態(tài)不同的顆粒？7 .簡(jiǎn)述Dane的形態(tài)結(jié)構(gòu)。8 .HBV基因組有何特殊結(jié)構(gòu)？有哪些編碼區(qū)？各編碼哪些蛋白?9 .HBV可以分為哪四個(gè)主要的亞型？10 .簡(jiǎn)述HBV的地區(qū)分布特點(diǎn)和傳播途徑。11 .簡(jiǎn)述HBV抗原抗體檢測(cè)的意義。12 .簡(jiǎn)述HBV實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的主要方面。13 .HCV感染的傳播途徑主要有哪些？1 第11章出血熱病毒及其檢驗(yàn)一、問答題.漢坦病毒所

12、引起的疾病主要有哪幾種？2 .布尼亞病毒主要的形態(tài)特征是什么？有無包膜？3 .腎綜合癥出血熱病毒的主要傳播途徑有哪些？1 第12章蟲媒病毒及其檢驗(yàn)一、問答題.黃病毒的共同特性有哪些？2 .乙型腦炎病毒的主要流行病學(xué)特征是什么？3 .乙型腦炎的檢測(cè)包括哪三個(gè)方面？4 .登革病毒的傳播途徑和所致疾病是什么？1. 第13章逆轉(zhuǎn)錄病毒及其檢驗(yàn)一、名詞解釋“窗口期”(windowperiod):在感染兩周后從血清和腦脊液液中可檢測(cè)到HIV抗原P24,并持續(xù)數(shù)周至數(shù)月,但HIV抗體可能還未轉(zhuǎn)陽的這段時(shí)間，平均約45天。1 gp120和gp41HIV二、問答題.簡(jiǎn)述HIV的形態(tài)結(jié)構(gòu)。2. HIV基因組的特點(diǎn)是什么？有哪些結(jié)構(gòu)基因和調(diào)控基因。答：1.基因組有兩條相同單股正鏈RN創(chuàng)成；2.結(jié)構(gòu)基因：gag編碼多聚蛋白、pol編碼逆轉(zhuǎn)錄酶、env編碼gp120和gp41；3.調(diào)控基因：tat、rev、nef、vif、vpu、vpr。3. WHO!薦的HIV滅活方法是什么？HIV保存的最好方法是什么?4. 簡(jiǎn)述艾滋病的主要流行病學(xué)特征及其傳播途徑。5. HIV“窗口期”感染者能否檢出