定性檢測體外診斷試劑盒產品的技術審評規(guī)范2012版

1、定性檢測體外診斷試劑（盒）產品技術審評規(guī)范（2012版）根據醫(yī)療器械注冊管理辦法（國家食品藥品監(jiān)督管理局令第16號）的要求并結合定性檢測體外診斷試劑（盒）產品的特點，為規(guī)范定性檢測體外診斷試劑（盒）（以下簡稱試劑（盒）產品的技術審評工作，特制定本規(guī)范。一、適用范圍本規(guī)范適用于依據體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）管理類別為n類的、在醫(yī)學實驗室進行定性檢測所使用的體外診斷試劑（盒），其中所述“定性”是指只給出陰性或陽性（有反應或無反應、是或非、有或無、正常或異常）兩種可能的結果。定量以及半定量檢測試劑（盒）不適用于本規(guī)范，已有中華人民共和國國家標準和行業(yè)標準的產品不適用于本規(guī)范。二、技術審查要點（

2、一）試劑（盒）命名的原則試劑（盒）名稱由三部分組成。第一部分：被分析物的名稱；第二部分：用途；如檢測試劑盒、檢測試紙；第三部分：方法或原理，如酶聯免疫吸附試驗法、膠體金免疫層析法等。例：肌鈣蛋白I檢測試紙（膠體金免疫層析法）、抗角蛋白抗體檢測試劑盒（間接免疫熒光法）。（二）試劑（盒）的組成試劑（盒）的組成形式：如單試劑，雙試劑，多試劑；試紙；微孔板等。（三）工作原理試劑（盒）通過各自不同的反應原理，最終通過儀器檢測或肉眼觀測，對被分析物做出是或不是、有或無、陽性或陰性、有反應或無反應、檢出或未檢出的結果判定。（四）產品適用的相關標準試劑（盒）適用以下相關標準：1 .GB/T191包裝儲運圖示標

3、志；2 .YY/T0316醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械的應用；3 .YY0466醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標簽、標記和提供信息的符號。注：以上標準適用最新版本。（五）產品的預期用途試劑（盒）的預期用途為對臨床樣本中被分析物的定性檢測。（六）產品的主要技術指標1 .外觀目測檢查，符合生產企業(yè)規(guī)定的正常外觀要求（一般要求試劑無雜質，外包裝完整無破損；標簽清晰可辨）。2 .凈含量（適用時）用通用量具測量，液體試劑的凈含量應不少于標示值。3 .膜條寬度（免疫層析法適用）隨機抽取一條試紙，使用游標卡尺測量其寬度，應不低于2.5mm。4 .液體移行速度（免疫層析法適用）按說明書進行操作，從試紙浸入樣本液開始用秒表

4、計時，直至液體達到圖1所示的C區(qū)和D區(qū)之間的交界線時停止計時，所用的時間記為t,用游標卡尺測量A+B+C區(qū)的長度，記為L,則L/t為移行速度，結果應不低于10mm/min。D區(qū)-手持區(qū)C區(qū)-硝酸纖維膜E區(qū)A區(qū)-侵入區(qū)一L測俄線C質控線圖1免疫層析試紙結構示意圖5 .臨界值a）對臨界值增加一定濃度的樣本檢測次數）20,結果的陽性率應）95%。b）對臨界值減少一定濃度的樣本檢測次數）20,結果的陰性率應）95%。注1:建議使用國家參考品，并提供相關證明文件。如果使用的樣本是企業(yè)自配，應明確原料的來源（包括生物學來源）、基質、配制方法及賦值方法。注2:臨界值應明確，且增加或減少的“一定濃度”原則上應

5、保持一致。注3:應考慮是否符合臨床實際診斷意義。6,特異性（適用時）應注明其交叉反應物，說明其特異性。即明確潛在的交叉反應物不引起干擾的最高濃度一一不測含有最高濃度/水平的干擾物質的陰性樣本3次，結果應滿足企業(yè)規(guī)定的要求（即干擾標準）。注1:建議使用國家參考品，應當是被金標準確定過的、和/或成熟方法檢測的，和/或經臨床確認的陰性樣本。如果使用的陰性樣本是企業(yè)自行配制的，那么應明確基質、配制方法及賦值方法。注2:交叉反應物及其濃度的選擇應當科學合理，并且其應當有可能存在于待測樣本中。交叉反應可接受的程度，主要取決于被測物和交叉反應物在人體內的相對含量。注3:如法規(guī)、標準或權威參考資料有明示的干擾

6、物質，則應進行分析。注4:其他可能引起假陰性或假陽性的干擾因素也應一并考慮（詳見附件1）,如脂血、溶血、黃疸、類風濕因子等常見干擾物。7 .S/CO值重復性（適用時）檢測臨界值附近水平樣本20次，其重復性CV值應滿足企業(yè)聲明（CV應015%）o8 .HOOK效應（適用時）檢測臨床可見最高濃度的強陽樣本3次，結果應不出現陰性。9 .批間差抽取三個批次的試劑/試紙，每個批次至少40人份，按5.臨界值的檢驗方法檢測，各濃度反應結果應一致。10 .穩(wěn)定性10.1 試劑（盒）在規(guī)定的貯存條件下保存至有效期末，超過有效期一定時期內進行檢測，產品的性能應至少符合5、7、8的要求。10.2 開瓶穩(wěn)定性（如適用

7、）試劑（盒）開瓶之后，在規(guī)定的貯存條件下保存至開瓶有效期末，超過有效期一定時期內進行檢測，產品的性能應至少符合5、7、8的要求。11 .其他上述性能為產品的主要技術指標，適用時，企業(yè)可根據產品特點增加其他技術要求。（七）產品的臨床要求試劑（盒）按照體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）及體外診斷試劑臨床研究技術指導原則、北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗指導原則進行臨床試驗。執(zhí)行的基本原則至少包括以下幾個方面：.研究者應考慮臨床研究用樣本，如血液、羊水、胸水、腹水、組織液、胸積液、組織切片、骨髓等的獲得或研究結果對受試者的風險性，應提交臨床機構倫理委員會確認的文件及受試者的知情同意書。對于例外情況，如

8、客觀上不可能獲得受試者的知情同意或該臨床研究對受試者幾乎沒有風險，可不提交倫理委員會的審評意見及受試者的知情同意書，但臨床研究者應提供有關倫理事宜的說明。1 .在兩家省級醫(yī)療衛(wèi)生單位完成臨床研究，對于特殊使用目的的產品，可以在市級以上疾病控制中心、專科醫(yī)院或檢驗檢疫所、戒毒中心等單位開展臨床研究。2 .新診斷試劑（盒）應與該診斷疾病的金標準針對臨床樣本進行盲法同步比較；已有同種批準上市的試劑（盒）應與已批準上市產品針對臨床樣本進行比對試驗。3 .臨床樣本的要求：綜合不同地區(qū)人種、流行病學背景、病原微生物的特性等因素選擇研究單位，癥狀典型和非典型的，一般臨床研究的總樣本數至少為200例，新診斷試

9、劑（盒）1000例。4 .試劑（盒）變更申請中需進行臨床研究的方法：采用變更前試劑（盒）與變更后試劑（盒）進行比對試驗的方法，證明變更前后試劑（盒）達到變更前試劑（盒）的質量水平。5 .一致性的數據分析陽性、陰性和總符合率；適用時與金標準結果比對：敏感度、特異度等。參照北京市第二類體外診斷試劑臨床試驗指導原則進行。（八）試劑（盒）說明書、標簽、包裝標識試劑（盒）說明書試劑（盒）說明書應當符合體外診斷試劑說明書編寫指導原則的要求，審查要點為：1 .應有產品名稱，可包括通用名稱、商品名稱和英文名稱；2 .應說明試劑（盒）的包裝規(guī)格；3 .應詳細說明試劑（盒）的預期用途，如定性測定；4 .應說明檢驗

10、原理；.應說明主要組成成份：對于產品中包含的試劑組份應有名稱、數量、每一組份中的主要成分在反應體系中的比例或濃度，如果對于正確的操作很重要、應提供其生物學來源、活性及其他特性；對于產品中不包含、但對該實驗必須的試劑組份，生產企業(yè)應列出此類試劑的名稱、純度，提供稀釋或混合方法及其他相關信息；對于試劑盒中含有陰性或陽性對照品的，說明主要組成成份、基質及其生物學來源。5 .應說明貯存條件及有效期，以及開瓶穩(wěn)定性（如適用）；6 .應說明可適用儀器（如適用）；7 .應說明對樣本的要求，包括樣本采集過程中的注意事項，為保證樣本各組分穩(wěn)定所必需的抗凝劑或保護劑，已知的干擾物、能夠保證樣本穩(wěn)定的貯存、處理和運

11、輸的方法；8 .應說明檢驗方法，至少包括試劑配制、試驗條件、操作程序、試驗結果的判定；9 .應有檢驗結果的解釋，說明可能對試驗結果產生影響的因素；10 .參考范圍（臨界值和/或檢出限）11 .應說明檢驗方法的局限性12 .應說明產品性能指標，如重復性、方法學比較、特異性、抗干擾能力等，應符合注冊產品標準的要求，以及分析性能評估、穩(wěn)定性研究的結論；13 .應說明必要的注意事項，如本品僅用于體外診斷等，若該產品含有人源或動物源材料，應給出具有潛在感染性的警告；14 .注明引用的參考文獻，參考文獻的書寫應清楚、易查詢且格式統(tǒng)一；15 .注明生產企業(yè)，包括企業(yè)名稱、地址（注冊地址和生產地址不同的應分別

12、列出）、郵政編碼、電話和傳真號碼、網址；16 .注明醫(yī)療器械生產企業(yè)許可證編號；17 .注明醫(yī)療器械注冊證書編號；18 .注明廣品標準編號；19 .注明說明書批準日期及修訂日期。外包裝標簽外包裝標簽上應有如下信息：1 .生產企業(yè)名稱和地址。2 .試劑（盒）名稱。3 .批號。如試劑（盒）包含不同批號的組件，外包裝的批號應能保證每個組件的批號可從生產企業(yè)的生產記錄中溯源。4 .規(guī)格。應包含體積或復溶后的體積。5 .預期用途。如試劑（盒）名稱不能反映試劑（盒）的預期用途，應提供簡要的預期用途說明。6 .體外診斷用途。應說明試劑的體外診斷用途。7 .儲存和處置條件。應提供在未開封狀態(tài)下可保證試劑（盒）

13、的穩(wěn)定狀態(tài)的必要儲存條件；應規(guī)定影響穩(wěn)定性的其他條件（如適用）；應規(guī)定產品處置時所采取的所有其他特殊措施（如適用）。8 .失效期。應明示在規(guī)定儲存條件下的失效期；失效期應以年、月，適當時以日表示；如僅給出年月，失效期應為指定月的最后一天；外包裝標簽上明示的失效期應為最早到期組件的失效期。9 .警告和預防措施。如體外診斷試劑（盒）被認為有危險性（例如：化學，放射性或生物危害性），外包裝應標有適當的警示危險的文字或符號，YY/T0316的要求適用；對于化學危害，如試劑（盒）沒有隨帶含有適當的危險和安全性說明的使用說明，則應在外包裝的標簽上進行說明。初始包裝標簽如初始包裝同時也是外包裝，則外包裝標簽

14、的要求也適用。初始包裝標簽上應提供如下信息：1 .生產企業(yè)名稱或等同的商標或標志。2 .產品名稱。產品名稱應確保使用者能正確識別產品。3 .批號。4 .規(guī)格。例如：質量，體積，復溶后的體積。5 .體外診斷用途。6,儲存和處置條件。應提供未開封狀態(tài)下保證產品的穩(wěn)定狀態(tài)必需的儲存條件；如與外包裝提供的條件不同，還應提供產品處置所采取的所有其他特殊措施。7 .失效期。應明示規(guī)定儲存條件下的失效期，表示方式見外包裝標簽。8 .警告和預防措施。如體外診斷試劑（盒）被認為有危險性（例如：化學，放射性或生物危害性），外包裝應標有適當的警示危險的文字或符號，YY/T0316的要求適用；對于化學危害，如試劑（盒

15、）沒有隨帶含有適當的危險和安全性的說明的使用說明，則應在外包裝的標簽上進行說明；適用時，應明示試劑預期為一次性使用。（九）注冊單元劃分的原則試劑（盒）的注冊單元應為單一試劑（盒），一個注冊單元可以包括不同的包裝規(guī)格。（十）出廠檢驗原則每批試劑（盒）出廠檢驗至少進行以下幾項內容：外觀、裝量、臨界值、S/CO值重復性。附件1:定義1 .臨界值即重復測定處于這一水平的被分析物時，得到50%陽性和50%陰性的結果。小增幅增加被分析物濃度/水平，對樣本進行多次檢測，預期將得到相對較大的陽性結果和較小比例的陰性結果。同樣地，小幅減少被分析物濃度/水平，預期會得到相對較大的陰性結果和較小比例的陽性結果。在定

16、性試驗中進行臨界值的確定有許多種方法。如以陰性對照均值加上兩倍或三倍標準偏差作為臨界值、以百分位數法單側95%或99%來確定臨界值、使用ROC曲線（receiveroperatingcharacteristic）設定臨界值等。臨界值的驗證可以通過制備在臨界值上下20%左右濃度的樣本進行。一般來說，臨界值上下20%左右為95%區(qū)間?？梢赃M行重復檢測，看檢測結果是否滿足95%的陰性和95%的陽性，從而判斷臨界值的確定是否合適。2 .干擾物質干擾物質可能是內源性或外源性的：a.病理學條件產生的代謝產物，如糖尿病、多發(fā)性骨髓瘤、淤膽型肝炎等。b.患者治療中引入的化合物，如藥物、靜脈營養(yǎng)、血漿擴容劑、抗

17、凝血劑等。c.患者攝入的物質，如酒精、濫用藥、營養(yǎng)補充劑、各種食品及飲料等。d.樣品制備過程中添加的物質，如抗凝劑、防腐劑、穩(wěn)定劑等。e.樣品處理過程中不慎引入的污染物，如源自手霜、有粉手套、血清分離器、收集管塞等。f.樣品基質本身，如化學和物理性質與理想的新鮮樣品不同。干擾物質可以從多方面影響分析過程，如化學效應、物理效應、基質效應、非特異性、交叉反應性等，使得在分析時產生干擾。3 .S/CO用于表示檢測樣本（sample）與臨界值（cutoff）的吸光度比值，通常S/CO>1判為陽性，<1為陰性。4 .HOOK效應亦稱鉤狀效應?？乖贵w反應時，抗原抗體須在一定比例范圍內才能出現

18、最大凝集，抗原過量或抗體過量都會導致兩者交聯度降低，從而導致凝集程度與實際濃度不符的現象，在凝集曲線上表現為類似拋物線的形狀。所以強陽性樣本可能會出現假陰性結果。附件2:當產品成份中含有人源或動物源性材料時適用，應將此部分內容體現在標準附錄中和/或注冊的技術資料中，如綜述資料和/或原材料研究。生物安全性生物安全性應滿足企業(yè)規(guī)定的要求，如，包括但不限于HBs抗原、HIV-1/2抗體、HCV抗體及梅毒抗體檢測為陰性。適用時，還需滿足相關文件中涉及的要求，如，包括但不限于國食藥監(jiān)械2006407號文件。定性檢測體外診斷試劑（盒）產品技術審評規(guī)范編制說明一、任務來源及背景2007年體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）、體外診斷試劑臨床研究技術指導原則、體外診斷試劑說明書編寫指導原則均已發(fā)布，為了指導和規(guī)范定性檢測體外診斷試劑（盒）產品技術審評工作，幫助審評人員理解和掌握該類產品的性能、預期用途等內容，把握技術審評工作基本要求和尺度，對產品安全性、有效性作出系統(tǒng)評價；同時也為了指導生產企業(yè)的產品注冊工作。本規(guī)范主要依據醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例、體外診斷試劑注冊管理辦法（試行）、體外診斷試劑臨床研究技術指導原則、體外診斷試劑說明書編寫指導原則。在規(guī)范的制訂過程中我們