花椒籽仁油對實驗性高脂血癥大鼠的防治作用

1、花椒籽仁油對實驗性高脂血癥大鼠的防治作用                        作者：劉永英，王多寧，劉淵聲，楊穎，趙雁武，王增祿，楊繼慶【關(guān)鍵詞】  花椒籽仁油；高脂血癥；脂質(zhì)代謝；血液黏度；氧自由基Preventive and therapeutical effect of the kernel of zanthoxylum seed oil o

2、n experimental hyperlipidemia in rats【Abstract】 AIM: To investigate the effect of the kernel of zanthoxylum seed oil （KZSO） on experimental hyperlipidemia in rats and to probe into the mechanism of preventive and therapeutical effect of KZSO. METHODS: Thirty healthy SD rats were randomly divided int

3、o 3 groups, including control group, hyperlipidemia model group and KZSO group. Control group was fed ordinary forage; model group was fed highlipid forage; KZSO group was administrated intragastrically KZSO besides highlipid forage. Blood samples were obtained by cutting necks after 10week feeding.

4、 The levels of blood lipids and the hemorheological parameters were determined, and the activities of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), the content of malondialdehyde (MDA) and the restraining ability to hydroxyl free radical (RAHFR) in the liver tissues were measured. RESULTS: Compared

5、 with the model group, cholesterol, triglyceride, high blood viscosity，and low blood viscosity of the KZSO group were decreased (P<0.05, P<0.01), highdensity lipoprotein cholesterol was increased (P<0.05). The activities of SOD and CAT and the RAHFR in the liver tissues of KZSO group were i

6、ncreased (P<0.05， P<0.01) and the content of MDA was decreased (P<0.05) as compared with the model group. CONCLUSION: KZSO can modulate the blood lipid, improve the indexes in hemorheology and prevent lipid hyperoxidation. The mechanism may be related to its componential effects.【Keywords】

7、kernel of zanthoxylum seeds oil; hyperlipidemia; lipid metabolism; blood viscosity; oxygen free radical【摘要】 目的： 研究花椒籽仁油對實驗性高脂血癥大鼠脂質(zhì)代謝的影響，探討其對高脂血癥的防治作用機制. 方法：30只健康SD大鼠隨機分為3組：對照組、高脂模型組及花椒油組，對照組普通飼料喂養(yǎng)，其余兩組均高脂飼料喂養(yǎng)，花椒油組同時給予花椒籽仁油灌胃，10 wk后斷頸取血，進行血脂、流變學(xué)檢測，取肝組織測定SOD, CAT活性、MDA含量及抑制羥自由基能力. 結(jié)果：與模型組相比,花椒油組的CHOL

8、，TG，HBV，LBV降低(P<0.05，P<0.01)，HDLC增高(P<0.05)，而肝組織勻漿的SOD，CAT活性及抑制羥自由基能力均增強(P<0.05，P<0.01)，MDA含量降低（P<0.05）. 結(jié)論：花椒籽仁油具有調(diào)節(jié)血脂、改善血流變、防止脂質(zhì)過氧化的作用，其作用機制與其主要成分多不飽和脂肪酸的作用有關(guān).【關(guān)鍵詞】 花椒籽仁油；高脂血癥；脂質(zhì)代謝；血液黏度；氧自由基0引言動脈粥樣硬化（arteriosclerosis, AS）是臨床上最常見的疾病之一，高脂血癥是其重要致病因素，尤其是高膽固醇血癥，與冠心病有著直接關(guān)系. 隨著人們生活水平的提高

9、、飲食結(jié)構(gòu)的改變及人口老齡化的趨勢，這些疾病的發(fā)病率越來越高. 因此，研究開發(fā)新型的功能性食品及藥品，對防治冠心病具有十分重要的意義. 花椒籽仁油(kernel of zanthoxylum seeds oil， KZSO)是一類木本植物油，馬傳國等1對花椒籽皮油和仁油化學(xué)成分進行了分析，結(jié)果顯示，花椒籽皮油中的酸值和過氧化值較高，容易劣變，而仁油則比較穩(wěn)定，含不飽和脂肪酸高，主要是n3多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid, PUFA). n3PUFA可以通過降低血脂來實現(xiàn)對心血管的保護作用2-3，花椒仁油對小鼠高脂血癥有治療作用4. 本實驗我們進一步研究KZS

10、O對實驗性高脂血癥大鼠脂質(zhì)代謝的影響，探討其對高脂血癥的防治作用及機制.1材料和方法1.1材料健康SD大鼠30只，清潔級，雌雄各半，體質(zhì)量150200 g，由第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供合格證書：SCXK(軍)2002006. 應(yīng)用高脂飼料(配方5：2%膽固醇、0.3%去氧膽酸鈉、7.5%豬油、5%蛋黃粉、85.2%基礎(chǔ)飼料)喂養(yǎng)SD大鼠建立高脂血癥模型. 選用SD大鼠30只，雌雄各半，適應(yīng)性喂養(yǎng)1 wk后，隨機分為3組：正常對照組(下稱對照組)、高脂血癥模型組(下稱模型組)、花椒油組，每組10只. 對照組普通飼料喂養(yǎng)，其余兩組高脂飼料喂養(yǎng)，均自由攝食、飲水. 對照組及模型組另給予等容積蒸餾水

11、灌胃2.5 mL/(kgd)，花椒油組另給花椒籽仁油（韓城市花椒油脂藥料有限責任公司生產(chǎn)） 2.5 mL/(kgOH能力檢測斷頸處死大鼠后立即取肝組織，在冰生理鹽水中漂洗，濾紙吸干，用冷生理鹽水采用FM200實驗室型分散乳化機（上海弗魯克機電設(shè)備有限公司）制備100 g/L肝勻漿，用TDL5低速離心機（上海安亭科學(xué)儀器廠）離心15 min，留上清液. 取10 g/L肝勻漿上清液，采用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)測定試劑盒、過氧化氫酶(catalase, CAT)測定試劑盒、羥自由基(hydroxyl free radical，OH)測定試劑盒(南京建成生

12、物工程有限公司)，DG5031型酶聯(lián)檢測儀（南京華東電子集團公司）、721型分光光度計(上海第三分析儀器廠) 檢測，計算肝組織SOD，CAT及抑制OH能力；用硫代巴比妥鈉（TBA）熒光比色法測定肝組織丙二醛（malondialdehyde，MDA）的含量，考馬斯亮藍測定蛋白含量6.統(tǒng)計學(xué)處理：數(shù)據(jù)以x±s表示，使用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，組間比較用方差分析及多重比較進行， P0.05認為差異有統(tǒng)計學(xué)意義.2結(jié)果2.1花椒籽仁油對高脂大鼠血清CHOL，TG及HDLC的影響模型組血清CHOL較對照組升高（P<0.05），HDLC較對照組降低（P<0.05），

13、TG變化無統(tǒng)計學(xué)意義；與模型組相比，花椒油組可降低CHOL及TG（P<0.05），升高HDLC（P<0.05，表1）.表1花椒籽仁油對高脂血癥大鼠血脂的影響(略)2.2花椒籽仁油對高脂大鼠血液流變學(xué)參數(shù)的影響模型組HBV及LBV均較對照組升高（P<0.05）；與模型組相比，花椒油組可降低HBV及LBV（P<0.05， P<0.01）. 三組HCT差異無統(tǒng)計學(xué)意義（表2）.表2花椒籽仁油對高脂大鼠血液流變學(xué)參數(shù)的影響(略)2.3花椒籽仁油對高脂大鼠SOD，CAT，MDA及抑制OH能力的影響模型組MDA含量及抑制OH能力均較對照組顯著升高（P<0.01），SOD

14、及CAT活性變化無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）. 與模型組相比，花椒油組可升高SOD，CAT及抑制OH能力（P<0.05，P<0.01），降低MDA含量（P<0.05，表3）.百事通 3討論動物喂飼飽和脂肪酸飼料形成的高膽固醇血癥為內(nèi)源性膽固醇血癥，而喂飼膽固醇飼料形成的則為外源性膽固醇血癥7. 本實驗我們所采用的高脂飼料配方中含有的7.5%豬油主要含飽和脂肪酸，膽固醇含量一般為850 mg/kg，另有2%膽固醇直接加入配方，故認為造成的高膽固醇血癥為內(nèi)源性和外源性混合，以內(nèi)源性為主. 另外，由于血清TG與膳食中單糖和脂肪關(guān)系較大，受膽固醇影響較少8. 故本實驗喂飼高脂飼

15、料后，只致血清膽固醇水平升高，而血清三酰甘油并沒升高.表3花椒籽仁油對高脂大鼠SOD，CAT，MDA及抑制OH能力的影響(略)血脂代謝異?？梢鹧毫髯儗W(xué)改變和自由基代謝紊亂. 高血脂作用可使全血黏度增加，紅細胞變形能力下降，從而導(dǎo)致機體缺血缺氧及代謝紊亂. 同時，當血脂升高時，過多脂質(zhì)沉積于血管內(nèi)皮，使內(nèi)皮產(chǎn)生的抗氧化酶含量下降，機體清除自由基的能力下降. 其結(jié)果必然是產(chǎn)生過多的O2-，H2O2，OH等自由基，能直接氧化細胞膜蛋白、膜脂質(zhì)等，損傷血管內(nèi)皮，產(chǎn)生大量脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA，修飾低密度脂蛋白（LDL），形成的MDALDL復(fù)合物. 該復(fù)合物被單核細胞吞噬后，使細胞內(nèi)膽固醇代謝障礙、膽

16、固醇堆積，形成泡沫細胞，滯留在血管壁內(nèi)，促進AS的形成9. 同時，氧自由基亦可使紅細胞膜上的脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)，膜中層的骨架蛋白交聯(lián)和氧化，膜的流動性和黏彈性下降，紅細胞變形能力降低，全血黏度增高；自由基還可使膜酶異常，膜表面負電荷減少，導(dǎo)致紅細胞聚集性增加，全血黏度增高，從而導(dǎo)致動脈血栓形成10.因此，調(diào)節(jié)血脂、抗氧化、清除自由基、降低血黏度是預(yù)防和治療AS的重要途徑. 對KZSO進行成分分析表明1，KZSO中不飽和酸含量高達90%以上，主要是油酸、亞油酸和亞麻酸，其中人體必需的亞油酸和亞麻酸含量在70%以上. 最近，有研究者從花椒籽仁油中提取高純度亞麻酸（alphalinolenic ac

17、id, ALA）技術(shù)獲重大突破，經(jīng)檢測認定含量達98%. ALA屬于n3PUFA，在體內(nèi)可轉(zhuǎn)變?yōu)樨ヌ嘉逑┧?eicosapentaenoic acid,EPA)和廿二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)發(fā)揮作用. 人們在研究PUFA的作用時發(fā)現(xiàn)11，DHA主要是降低血漿中總的膽固醇含量，而EPA則主要是降低三酰甘油. 當膳食中PUFA缺乏或飽和脂肪酸攝入過多時，飽和脂肪酸可刺激膽汁分泌，促進飲食中膽固醇吸收，導(dǎo)致血液中膽固醇含量過高；當膳食中PUFA充裕時，PUFA與肝細胞分泌的載脂蛋白結(jié)合成為HDL，HDL作為膽固醇的受體與膽固醇進行結(jié)合形成HDLC，而后通過血液循環(huán)

18、送入肝細胞中，形成膽酸從腸道排出，從而降低血脂. PUFA并可降低纖維蛋白原含量，降低血液黏滯度，改善血液流變性，防止血小板凝集和血栓形成. 此外，PUFA可降低LDL對氧化作用的敏感性，減少MDALDL復(fù)合物的形成，起到抗氧化作用，防止動脈壁的損傷.本實驗結(jié)果顯示，花椒籽仁油能夠降低模型大鼠血脂及血液黏度，使其肝組織均漿的SOD，CAT活性及抑制OH能力增高，脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量下降. 這說明花椒籽仁油可降低血脂，改善血液流變性，增強體內(nèi)抗氧化酶活性，調(diào)節(jié)體內(nèi)自由基代謝，抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng).【參考文獻】1 馬傳國，畢艷蘭，林敏剛,等. 花椒籽皮油和仁油化學(xué)成分分析J. 鄭州工程學(xué)院學(xué)報，

19、2002，23（1）：39-42.2 Kinsella JE. Effects of polyunsaturated fatty acids on factors related to cardiovascular diseaseJ. Am J Cardiol, 1987, 60(12): 23-32.3 Scislowski V, Bauchart D, Gruffat D, et al. Effect of dietary n6 and n3 polyunsaturated fatty acids on peroxidizability of lipoproteins in steersJ. Lipids, 2005,40(12):1245-1246.4 衡亮，李晨，賈敏, 等. 花椒仁油對實驗性高脂血癥小鼠的治療作用J.解放軍醫(yī)學(xué)雜志，2005,11(30)：1012-1013.5 陳志強，丁奇峰，尹智煒, 等.脂可平對實驗性早期動脈粥樣硬化大鼠主動脈ICAM1表達的影響J.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2006,18：394-