藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則

1、附錄 XIX A 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證的目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測(cè)要求 。 在建立藥品質(zhì) 量標(biāo)準(zhǔn)時(shí) ,分析方法需經(jīng)驗(yàn)證 ;在藥品生產(chǎn)工藝變更 、制劑的組分變更 、原分析方法進(jìn)行修訂 時(shí) 、則質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法也需進(jìn)行驗(yàn)證 。方法驗(yàn)證理由 、過程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 起草說(shuō)明或修訂說(shuō)明中 。需驗(yàn)證的分析項(xiàng)目有 : 鑒別試驗(yàn) , 雜質(zhì)定量或限度檢查 , 原料藥或制劑中有效成分含量測(cè) 定 ,以及制劑中其他成分( 如防腐劑等 的測(cè)定 。藥品溶出度 、釋放度等檢查中 ,其溶出量等 測(cè)試方法也應(yīng)作必要驗(yàn)證 。驗(yàn)證內(nèi)容有 : 準(zhǔn)確度 、 精密度 ( 包括重復(fù)

2、性 、 中間精 密度和重現(xiàn)性 、 專屬性 、 檢測(cè)限 、 定量限 、線性 、范圍和耐用性 。視具體方法擬訂驗(yàn)證的內(nèi)容 。附表中列出的分析項(xiàng)目和相應(yīng)的 驗(yàn)證內(nèi)容可供參考 。方法驗(yàn)證內(nèi)容如下 。一 、 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度 , 一般以回收率 ( % 表示 。 準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)建立 。1. 含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度原料藥可用已知純度的對(duì)照品或樣品進(jìn)行測(cè)定 , 或用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一方 法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較 。制劑可用含已知量被測(cè)物的各組分混合物進(jìn)行測(cè)定 。 如不能得到制劑的全部組分 , 可向制 劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定 ,或用本法所得結(jié)果與

3、已知準(zhǔn)確度的另一個(gè)方法測(cè)定結(jié)果進(jìn) 行比較 。如該分析方法已經(jīng)測(cè)試并求出了精密度 、 線性和專屬性 , 在準(zhǔn)確度也可推算出來(lái)的情況下 , 這一項(xiàng)不必再做 。2. 雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確度可向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)定 。 如果不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物 , 可用本法 測(cè)定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較 ,如藥典標(biāo)準(zhǔn)方法或經(jīng)過驗(yàn)證的方法 。如不能測(cè)得雜質(zhì)或 降解產(chǎn)物的響應(yīng)因子或不能測(cè)得對(duì)原料藥的相對(duì)響應(yīng)因子的 情況下 , 可用原料藥的響應(yīng)因子 。 應(yīng)明確表明單個(gè)雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重量比 ( % 或面積比 ( %。3. 數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi) , 至少用 9 次測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià) , 例如 ,

4、 設(shè)計(jì) 3 個(gè)不同濃度 , 每個(gè)濃度各分 別制備 3 份供試品溶液 , 進(jìn)行測(cè)定 。 應(yīng)報(bào)告已知加入量的回收率 ( %, 或測(cè)定結(jié)果平均值與 真實(shí)值之差及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差或可信限 。二 、 精密度精密度系指在規(guī)定的測(cè)試條件下 , 同一個(gè)均勻供試品 , 經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接 近程度 。 精密度一般用偏差 、 標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示 。在相同條件下 , 由同一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果 的精密度稱為重復(fù)性 ; 在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室 , 不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果的精密度 ,稱為中間精密度 ;在不同實(shí)驗(yàn)室由不 同分析人員測(cè)定結(jié)果的精密度 , 稱為重現(xiàn)性 。含量測(cè)定和雜質(zhì)定量測(cè)定應(yīng)考慮

5、方法的精密度 。1. 重復(fù)性在規(guī)定范圍內(nèi) , 至少用 9 個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià) , 例如 , 設(shè)計(jì) 3 個(gè)不同濃度 , 每個(gè)濃度各分 別制備 3 份供試品溶液 , 進(jìn)行測(cè)定 , 或?qū)⑾喈?dāng)于 100%濃度水平的供試品溶液 , 用至少測(cè)定 6次的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià) 。2. 中間精密度為考察隨機(jī)變動(dòng)因素對(duì)精密度的影響 , 應(yīng)設(shè)計(jì)方案進(jìn)行中間精密度試驗(yàn) 。 變動(dòng)因素為不同日期 、 不同 分析人員 、 不同設(shè)備 。3. 重現(xiàn)性法定標(biāo)準(zhǔn)采用的分析方法 , 應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn) 。 例如 , 建立藥典分析方法時(shí) , 通過協(xié)同檢驗(yàn)得出重現(xiàn)性結(jié)果 。協(xié)同檢驗(yàn)的目的 、過程和重現(xiàn)性結(jié)果應(yīng)記載在起草說(shuō)明中 。應(yīng)注意重現(xiàn)性試驗(yàn)用

6、的樣品本身的質(zhì)量均勻性和貯存運(yùn)輸中的環(huán)境影響因素 , 以免影響重現(xiàn)性結(jié)果 。4. 數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差 、 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限 。三 、 專屬性專屬性系指在其他成分 ( 如雜質(zhì) 、 降解產(chǎn)物 、 輔料等 可能存在下 , 采用的方法能正確測(cè)定出被測(cè)物的特性 。鑒別反應(yīng) 、雜質(zhì)檢查 、含量測(cè)定方法 ,均應(yīng)考察其專屬性 。如方法不夠?qū)?, 應(yīng)采用多個(gè)方法予以補(bǔ)充 。1. 鑒別反應(yīng)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分 。 不含被測(cè)成分的樣品 , 以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物 , 均應(yīng)呈負(fù)反應(yīng) 。2. 含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定色譜法和其他分離方法 ,應(yīng)附代表性圖譜 ,以說(shuō)明專屬性 。并應(yīng)標(biāo)明諸

7、成分在圖中的位置 ,色譜法中的分離度應(yīng)符合要求 。在雜質(zhì)可獲得的情況下 , 對(duì)于含量測(cè)定 , 試樣中可加入雜質(zhì)或輔料 , 考察測(cè)定結(jié)果是否受干擾 ,并可與未加雜質(zhì)或輔料的試樣比較測(cè)定結(jié)果 。對(duì)于雜質(zhì)測(cè)定 ,也可向試樣中加入一定量的雜質(zhì) , 考察雜質(zhì)能否得到分離 。在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下 , 可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進(jìn)行測(cè)定 , 與另一個(gè)經(jīng)驗(yàn)證了的方法或藥典方法比較結(jié)果 。用強(qiáng)光照射 ,高溫 ,高濕 ,酸( 堿 水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞 ,以研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑 。含量測(cè)定方法應(yīng)比對(duì)二法的結(jié)果 ,雜質(zhì)檢查應(yīng)比對(duì)檢出的雜質(zhì)個(gè)數(shù) , 必要時(shí)可采用光二極管陣列檢測(cè)和質(zhì)譜檢測(cè)

8、, 進(jìn)行峰純度檢查 。四 、 檢測(cè)限檢測(cè)限系指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量 。 藥品的鑒別試驗(yàn)和雜質(zhì)檢查方法 , 均應(yīng)通過測(cè)試確定方法的檢測(cè)限 。 常用的方法如下 。1. 非儀器分析目視法用已知濃度的被測(cè)物 , 試驗(yàn) 出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量 。2. 信噪比法用于能顯示基線噪音的分析方法 , 即把已知低濃度試樣測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)行比較 ,算出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量 。一般以信噪比為 3:1 或 2:1 時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測(cè)限 。3. 數(shù)據(jù)要求應(yīng)附測(cè)試圖譜 , 說(shuō)明測(cè)試過程和檢測(cè)限結(jié)果 。五 、 定量限定量限系指試樣中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量 , 其

9、測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度 。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測(cè)定方法研究時(shí) , 應(yīng)確定定量限 。常用信噪比法確定定量限 。 一般以信噪比為 10:1 時(shí)相應(yīng)的濃度或 注入儀器的量確定定量限 。六 、 線性線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi) , 測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度 。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系 。 可用一貯備液經(jīng)精密稀釋 , 或分別精密稱樣 , 制備一系 列供試樣品的方法進(jìn)行測(cè)定 ,至少制備 5 份供試樣品 。以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函 數(shù)作圖 , 觀察是否呈線性 , 再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸 。 必要時(shí) , 響應(yīng)信號(hào)可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換 , 再進(jìn)行線性回歸計(jì)算 。數(shù)據(jù)要求 : 應(yīng)

10、列出回歸方程 、 相關(guān)系數(shù)和線性圖 。七 、 范圍范圍系指能達(dá)到一定精密度 、 準(zhǔn)確度和線性 , 測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的 區(qū)間 。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性 、 準(zhǔn)確度 、 精密度結(jié)果和要求確定 。 原料藥和制劑 含量測(cè)定 ,范圍應(yīng)為測(cè)試濃度的 80% 120%;制劑含量均勻度檢查 ,范圍應(yīng)為測(cè)試濃度的 70% 130%,根據(jù)劑型特點(diǎn) ,如氣霧劑 、噴霧劑 ,范圍可適當(dāng)放寬 ,溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定 , 范圍應(yīng)為限度的 ±20%; 如規(guī)定限度范圍 , 則應(yīng)為下限的 -20%至上限的 +20%; 雜質(zhì)測(cè)定 , 研究 時(shí) , 范圍應(yīng)根據(jù)初步實(shí)測(cè) , 擬訂出規(guī)定限度的

11、 ±20%。 如果含量測(cè)定與雜質(zhì)檢查同時(shí)測(cè)定 , 用 百分歸一化法 , 則線性范圍應(yīng)為雜質(zhì)規(guī)定限度的 -20%至含量限度 ( 或上限 的 +20%。八 、 耐用性耐用性系指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí) , 測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度 , 為使方法可用于提 供常規(guī)檢查依據(jù) 。開始研究分析方法時(shí) ,就應(yīng)考慮其耐用性 。如果測(cè)試條件要求苛刻 ,則應(yīng)在 方法中寫明 。典型的變動(dòng) 因素有 :被測(cè)溶液的穩(wěn)定性 、樣品提取次數(shù) 、時(shí)間等 。液相色譜法 中典型的變動(dòng)因素有 : 流動(dòng)相的組成和 pH 值 , 不同廠牌或不同批號(hào)的同類型色譜柱 , 柱溫 , 流速等 。氣相色譜法變動(dòng)因素有 :不同廠牌或批號(hào)的色譜柱 、固定相 ,不同類型的擔(dān)體 、柱溫 , 進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度等 。經(jīng)試驗(yàn) , 應(yīng)說(shuō)明小的變動(dòng)能否通過設(shè)計(jì)的系統(tǒng)適用 性試驗(yàn) , 以確保方法有效 。附表 檢驗(yàn)項(xiàng)目和驗(yàn)證內(nèi)容鑒別