針灸對(duì)效應(yīng)靶器官細(xì)胞受體、G蛋白及離子通道影響的分析概況

1、針灸對(duì)效應(yīng)靶器官細(xì)胞受體、G蛋白及離子通道影響的分析概況      【關(guān)鍵詞】  針灸；靶器官；細(xì)胞受體；G蛋白；離子通道；綜述  信息傳遞是生命活動(dòng)的普遍規(guī)律,生物機(jī)體組織細(xì)胞之間的信息傳遞,通過化學(xué)傳遞和電興奮傳遞兩種方式進(jìn)行,以化學(xué)傳遞為主要方式?；瘜W(xué)信息傳遞的物質(zhì),又稱為“信號(hào)分子”,在神經(jīng)系統(tǒng)則稱為“遞質(zhì)”,而在內(nèi)分泌系統(tǒng)便稱為“激素”,藥理學(xué)又稱為“配體”,與配體關(guān)聯(lián)的具有識(shí)別配體并與之結(jié)合的特定結(jié)構(gòu)分子,則稱為“受體”。通過受體與配體的結(jié)合,可將配體攜帶的信息傳遞給細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)?！凹?xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)

2、”概念的提出,從分子水平上指出了細(xì)胞內(nèi)除了物質(zhì)和能量代謝的分子途徑和網(wǎng)絡(luò)外,還存在對(duì)其調(diào)節(jié)和控制作用的自成體系的信號(hào)傳遞分子途徑()。細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)已成為生命科學(xué)迅速發(fā)展的前沿領(lǐng)域。筆者將通過針刺對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)過程的影響,從配體(信號(hào)分子)與受體的結(jié)合到G蛋白的傳導(dǎo),再到第二信使的產(chǎn)生和作用、底物蛋白酶的生物效應(yīng)及信號(hào)整合的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)整個(gè)過程,剖析針灸通過多靶點(diǎn)、多途徑、多層次實(shí)現(xiàn)多效應(yīng)調(diào)整作用的內(nèi)涵,以期揭示針灸對(duì)靶器官細(xì)胞影響的信息調(diào)控機(jī)制及信號(hào)傳導(dǎo)通路,從分子水平解釋針灸作用的現(xiàn)代意義。A faithful friend is hard to find.  針灸對(duì)效應(yīng)靶細(xì)胞的影

3、響可從細(xì)胞外信號(hào)與膜受體結(jié)合開始,實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑影響,大致分為以下環(huán)節(jié)：針灸對(duì)信號(hào)分子(配體)與受體結(jié)合的調(diào)節(jié)作用；針灸對(duì)靶細(xì)胞G蛋白的傳導(dǎo)、效應(yīng)酶或離子通道的影響；針灸對(duì)靶細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)磷酸化及轉(zhuǎn)錄因子活性的影響。筆者收集了針灸影響跨膜信號(hào)傳導(dǎo)的相關(guān)研究報(bào)道,重點(diǎn)對(duì)效應(yīng)靶器官細(xì)胞受體、G蛋白及離子通道與針灸的關(guān)系進(jìn)行了整理分析,現(xiàn)綜述如下。1  針灸對(duì)信號(hào)分子(配體)與受體結(jié)合的影響針灸效應(yīng)的實(shí)現(xiàn)與細(xì)胞信息傳導(dǎo)有密切關(guān)系,針刺信號(hào)通過穴位經(jīng)外周神經(jīng)向各級(jí)中樞神經(jīng)傳遞過程中,可引發(fā)機(jī)體神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)功能的活動(dòng),導(dǎo)致某些生物活性物質(zhì)的釋放,激活了細(xì)胞信息傳導(dǎo)功能。在神

4、經(jīng)-體液因素作用下,將針刺信號(hào)的相應(yīng)信息傳遞到細(xì)胞,通過與靶細(xì)胞膜受體相互作用,激活胞內(nèi)信息傳導(dǎo)途徑,產(chǎn)生一系列的生物效應(yīng),最終實(shí)現(xiàn)了針刺對(duì)機(jī)體各系統(tǒng)功能的調(diào)整作用1。    目前已有研究表明,針灸誘導(dǎo)的不同神經(jīng)遞質(zhì)可影響多種靶細(xì)胞受體,如5-羥色胺(5-HT)受體、內(nèi)源性阿片肽受體(EOP)、-氨基丁酸(GABA)受體、雌激素受體、白介素受體、糖皮質(zhì)激素及受體、生長(zhǎng)因子受體、去甲腎上腺素受體等(醫(yī)藥學(xué)/臨床醫(yī)學(xué)論文 )。多數(shù)受體屬于G蛋白耦聯(lián)受體,產(chǎn)生的生物效應(yīng)也是多種多樣,如鎮(zhèn)痛效應(yīng)、調(diào)整內(nèi)分泌、對(duì)各系統(tǒng)靶器官的調(diào)整作用等。1.1 

5、0;通過神經(jīng)遞質(zhì)及其受體對(duì)鎮(zhèn)痛效應(yīng)的影響針刺鎮(zhèn)痛是研究最多的一種針灸效應(yīng)。研究表明,它的發(fā)生首先是針刺信號(hào)被穴位處的感覺神經(jīng)和感受器所感應(yīng),通過外周神經(jīng)纖維傳遞到脊髓及不同腦區(qū),除了導(dǎo)致脊髓及腦內(nèi)相關(guān)核團(tuán)神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生膜電位變化產(chǎn)生鎮(zhèn)痛效應(yīng)外,更重要的是各種神經(jīng)細(xì)胞分泌相應(yīng)的神經(jīng)遞質(zhì)參與鎮(zhèn)痛。如去甲腎上腺素、多巴胺、乙酰膽堿、GABA等,還有內(nèi)源性嗎啡樣物質(zhì)、P物質(zhì)、5-HT等,這些物質(zhì)又通過激活細(xì)胞受體而發(fā)揮作用。目前研究表明,中樞內(nèi)許多神經(jīng)遞質(zhì)及其受體參與神經(jīng)傳導(dǎo)通路不同環(huán)節(jié)的鎮(zhèn)痛作用,如位于大腦基底神經(jīng)節(jié)的尾核內(nèi)的非N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體參與電針對(duì)丘腦束旁核神經(jīng)元傷害性反

6、應(yīng)的抑制作用；皮層體感運(yùn)動(dòng)區(qū)對(duì)丘腦束旁核的下行調(diào)節(jié)中尾核的M2膽堿受體、阿片受體參與鎮(zhèn)痛作用。孤啡肽是新近發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)肽,它與經(jīng)典的阿片受體、有一定親和力,中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)(PAG)是痛覺調(diào)制系統(tǒng)中具有承上啟下作用的重要結(jié)構(gòu),在PAG觀察到孤啡肽對(duì)針刺鎮(zhèn)痛效應(yīng)的影響,是由于孤啡肽與其G蛋白耦聯(lián)受體結(jié)合后,抑制腺苷酸環(huán)化酶(AC)活力,使環(huán)磷腺苷酸(cAMP)降低、K+外流增多、Ca2+內(nèi)流減少,導(dǎo)致神經(jīng)元超極化即興奮性降低,由此針刺信號(hào)至PAG處,使該處神經(jīng)元興奮性降低,從而對(duì)抗針刺鎮(zhèn)痛作用2-4。朱氏等5通過腦內(nèi)注射GABA B受體的拮抗劑CGP 55845等實(shí)驗(yàn)表明,針

7、刺大鼠次髎所產(chǎn)生的鎮(zhèn)痛效應(yīng)中,主要與激活腦內(nèi)GABA B受體有關(guān),而脊髓水平的GABA B受體的激活在針刺鎮(zhèn)痛中作用不明顯。電針對(duì)慢性炎癥痛的鎮(zhèn)痛作用的外周機(jī)制也與受體介導(dǎo)有關(guān)。電針鎮(zhèn)痛時(shí)既可以促進(jìn)炎癥局部EOP的合成和釋放,又可以促進(jìn)、型3種阿片受體mRNA表達(dá)6。還有人證實(shí),電針抑制炎癥痛時(shí),可上調(diào)大鼠PAG部位白細(xì)胞介素-1受體基因(IL-1RI)mRNA表達(dá)7。  1.2  對(duì)內(nèi)分泌激素及其相應(yīng)受體的影響Throw away the apple because of the core.  針刺對(duì)下丘腦-垂體-卵巢軸調(diào)整作用與激

8、素-受體有關(guān)。陳氏等8研究表明,切除卵巢可導(dǎo)致血雌二醇(E2)水平降低,動(dòng)物腦內(nèi)雌激素受體(ER)蛋白和mRNA的表達(dá)增強(qiáng),電針穴位后,去卵巢大鼠的E2含量明顯增加；腦內(nèi)ER蛋白和mRNA的表達(dá)受到明顯抑制。提示電針可提高去卵巢大鼠體內(nèi)雌激素水平,使腦內(nèi)ER表達(dá)發(fā)生改變,這種作用似乎是針刺調(diào)整下丘腦-垂體-卵巢軸異常功能的作用機(jī)制。黎氏等9探討了針?biāo)幗Y(jié)合對(duì)去勢(shì)大鼠血清E2、卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)及外周血淋巴細(xì)胞內(nèi)ER水平的影響。發(fā)現(xiàn)針刺和更年號(hào)不僅能提高去勢(shì)大鼠血清E2水平,降低促性腺激素LH、FSH水平,而且可以上調(diào)免疫細(xì)胞ER的含量,而針?biāo)幗Y(jié)合組作用最為明顯。針刺除了對(duì)性

9、激素及其受體表達(dá)有影響外,還能夠增加類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)大鼠的糖皮質(zhì)激素(CS)及其受體GCR的含量10。1.3  激發(fā)調(diào)節(jié)肽對(duì)靶細(xì)胞受體的影響Deeds are fruits; words are but leaves.  有人采用基因芯片技術(shù),分析針刺預(yù)處理抗腦缺血再灌注損傷作用的分子機(jī)制,發(fā)現(xiàn)針刺腎俞、百會(huì)誘導(dǎo)的某些基因表達(dá)產(chǎn)物在針刺預(yù)處理抗腦缺血-再灌注損傷過程中發(fā)揮了重要作用；芯片檢測(cè)顯示,神經(jīng)元信號(hào)傳遞類涉及離子通道、遞質(zhì)、受體、第二信使等,如出現(xiàn)膽堿能M4受體mRNA及GABA B受體mRNA上調(diào)；5-HT2C受體下調(diào)11。采用阿片受體拮

10、抗劑naltrindole(NTI)和受體拮抗劑norbinaltorphimine(BNI)阻斷、受體的前提下,觀察重復(fù)電針對(duì)腦膜中動(dòng)脈梗死(MCAO)大鼠腦容積等指標(biāo)影響,發(fā)現(xiàn)NTI能夠阻斷電針預(yù)處理誘導(dǎo)的腦保護(hù)效應(yīng),而BNI不能。說明在重復(fù)電針刺激大鼠百會(huì)誘導(dǎo)的腦缺血耐受效應(yīng)中阿片受體發(fā)揮了主要作用12。采用放射配基結(jié)合實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠大腦皮層5-HT1受體最大結(jié)合率(Bmax)明顯降低,電針百會(huì)、足三里穴使之增加。抑郁模型大鼠大腦皮層5-HT2受體的Bmax和平衡解離常數(shù)(Kd)明顯高于正常組,電針可使其降低,說明電針百會(huì)、足三里穴具有調(diào)節(jié)5-HT受體功能不平衡作用13。

11、Throw away the apple because of the core.  First try, and then trust.  大鼠脊髓損傷后,針刺治療能通過促使大鼠脊髓表達(dá)神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)及其受體絡(luò)氨酸激酶受體A(TrKA)增多來促使受損神經(jīng)元修復(fù),從而促進(jìn)大鼠行為功能的恢復(fù)15。對(duì)后路漸進(jìn)性脊髓壓迫動(dòng)物模型進(jìn)行電針治療發(fā)現(xiàn),脊髓損傷后NGF及其受體TrkA在神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)增強(qiáng),經(jīng)過電針治療后,NGF和TrkA表達(dá)下降；體感誘發(fā)電位檢測(cè)和聯(lián)合行為評(píng)分(CBS)顯示,電針組明顯優(yōu)于減壓組,表明電針治療促進(jìn)脊髓損傷大鼠的行為功能恢復(fù)也與內(nèi)源性神經(jīng)生長(zhǎng)

12、因子及其受體TrkA介導(dǎo)有關(guān)16。NGF具有加速神經(jīng)纖維的發(fā)芽、防治周圍感覺神經(jīng)變性疾病等作用,它對(duì)神經(jīng)損傷影響必須通過與效應(yīng)細(xì)胞NGF受體相結(jié)合而發(fā)揮其營(yíng)養(yǎng)作用。研究發(fā)現(xiàn),針刺療法可以延長(zhǎng)NGF及其受體的分泌時(shí)間及含量,從而有利于周圍神經(jīng)損傷的恢復(fù)17。Silence in times of suffering is the best.  研究表明,心肌缺血性損害可以引發(fā)心臟交感神經(jīng)過度興奮以及心臟對(duì)交感神經(jīng)興奮性調(diào)節(jié)的反應(yīng)性增強(qiáng),繼而引起2-腎上腺素能受體(2-AR)過度興奮,導(dǎo)致心肌細(xì)胞內(nèi)鈣超載,促使心肌損傷。1-AR信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)各個(gè)站點(diǎn)如1-AR、刺激型G蛋白亞型(Gs)、A

13、C、cAMP、蛋白激酶A(PKA)和L-型Ca2+通道都參與介導(dǎo)了心肌缺血誘導(dǎo)的心肌損害。高氏等18研究表明,電針預(yù)處理抗心肌缺血作用的機(jī)制可能是：電針預(yù)處理通過反復(fù)的興奮交感神經(jīng),繼而作用于1-AR信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)的各個(gè)站點(diǎn),引起1-AR的下調(diào)和“脫敏”效應(yīng),繼而使其相耦聯(lián)的Gs蛋白表達(dá)下降,導(dǎo)致AC活性的減低、cAMP含量的下降、PKA以及L-型Ca2+通道活性的減低等一系列變化,以及減輕心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+的超載等損害。因此,反復(fù)的電針預(yù)處理可賦予心肌對(duì)其以后較長(zhǎng)時(shí)間缺血性損傷的耐受,起到抗心肌缺血的保護(hù)作用。Make the night night, and the day day, and

14、 you will have a pleasant time of it.  有資料表明,針灸對(duì)胃運(yùn)動(dòng)及胃黏膜損傷保護(hù)作用與腦腸肽有關(guān),而腦腸肽對(duì)效應(yīng)細(xì)胞的影響也要通過其細(xì)胞膜受體所介導(dǎo)。易氏等19在發(fā)現(xiàn)針刺對(duì)胃、奧狄氏括約肌運(yùn)動(dòng)的影響與胃動(dòng)素及縮膽囊素等腦腸肽有關(guān)的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步比較了針刺足陽(yáng)明經(jīng)的四白、足三里及足少陽(yáng)經(jīng)的陽(yáng)陵泉對(duì)家兔胃竇平滑肌、奧狄氏括約肌組織縮膽囊素受體基因表達(dá)的影響,發(fā)現(xiàn)針刺足陽(yáng)明經(jīng)對(duì)胃竇平滑肌膽囊收縮素受體基因表達(dá)(CCKA-R-mRNA)上調(diào)作用強(qiáng)于足少陽(yáng)經(jīng)；而針刺足少陽(yáng)經(jīng)對(duì)奧狄氏括約肌CCKA-R-mRNA上調(diào)又強(qiáng)于足陽(yáng)明經(jīng),推測(cè)經(jīng)脈-臟腑相關(guān)的相對(duì)特異

15、性可能與相關(guān)腦腸肽受體基因表達(dá)差異有關(guān)；另外,急性胃潰瘍模型組的表皮生長(zhǎng)因子(EGF)降低、生長(zhǎng)抑素(SS)含量及其生長(zhǎng)抑素基因表達(dá)(SSR1 mRNA)表達(dá)顯著升高。針刺胃經(jīng)后EGF明顯升高、SS含量及SSR1 mRNA顯著降低。針刺胃經(jīng)組對(duì)家兔胃黏膜損傷保護(hù)作用與相關(guān)腦腸肽及生長(zhǎng)抑素受體基因表達(dá)有關(guān)20。電針足三里可使胃黏膜表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)陽(yáng)性表達(dá)率上調(diào)21。電針足陽(yáng)明、足少陽(yáng)經(jīng)對(duì)應(yīng)激大鼠胃黏膜的預(yù)防保護(hù)及治療作用均與EGFR/EGFR mRNA表達(dá)有關(guān)22。用賽庚啶阻斷中樞5-HT2受體后,電針對(duì)胃運(yùn)動(dòng)及胃電的抑制效應(yīng)大為減弱,而用樞復(fù)寧阻斷中樞

16、5-HT3受體后,對(duì)電針的抑制效應(yīng)無明顯影響。說明電針在對(duì)胃運(yùn)動(dòng)及胃電的抑制效應(yīng)中,中樞5-HT遞質(zhì)可能主要通過5-HT2受體發(fā)揮作用,而與5-HT3受體關(guān)系不明顯23。針灸治療還能下調(diào)克羅恩病模型大鼠結(jié)腸黏膜中P物質(zhì)(SP)、神經(jīng)激肽-1受體(NK-1R)的表達(dá),消除腸道炎癥,改善組織損傷,發(fā)揮治療作用24。2  針灸對(duì)靶細(xì)胞G蛋白傳導(dǎo)、效應(yīng)酶或離子通道的影響2.1  對(duì)G蛋白傳導(dǎo)及效應(yīng)酶的影響I know no such thing as genius, it is nothing but labour and diligence.  G蛋

17、白,又稱鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白(guanine nucleotide binding protein,G-protein),是由、亞基形成的一類重要的信號(hào)傳導(dǎo)分子,可以通過直接調(diào)制離子通道、激活第二信使等方式參與到細(xì)胞信號(hào)的傳導(dǎo)過程中,影響細(xì)胞基因表達(dá)。激素、神經(jīng)遞質(zhì)、藥物等第一信使對(duì)細(xì)胞反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用大都是通過與其膜受體結(jié)合后,經(jīng)相耦聯(lián)的G蛋白將信號(hào)傳遞到細(xì)胞內(nèi)的第二信使等效應(yīng)器而發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)的。cAMP是公認(rèn)的第二信使,可以把各種調(diào)節(jié)信息帶到細(xì)胞內(nèi)的特定部位,從而對(duì)酶的活性、膜通透性、基因表達(dá)、細(xì)胞增殖與分化發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。周氏等25研究表明,高血壓性腦出血模

18、型大鼠其海馬區(qū)出現(xiàn)Go蛋白、Gi蛋白及其mRNA降低第二信使cAMP升高和SS降低,說明跨膜傳導(dǎo)系統(tǒng)中G蛋白參與了高血壓性腦出血的病理過程。電針?biāo)疁?、?nèi)關(guān)、足三里等穴不僅能控制高血壓性腦出血大鼠的血壓,改善其神經(jīng)行為體征,還使海馬區(qū)Gi蛋白及其mRNA的含量/表達(dá)升高、cAMP的水平降低、SS及其mRNA的表達(dá)增強(qiáng)。提示電針作用可從第一信使、跨膜傳導(dǎo)G蛋白、第二信使等方面多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)地糾正腦出血時(shí)腦組織存在的信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制的紊亂,從而促進(jìn)高血壓性腦出血的臨床癥狀和體征的恢復(fù)。急性缺血時(shí)G蛋白含量或活性的改變與受體后信號(hào)傳導(dǎo)異常和AC失活有關(guān)。吳氏等26采用基因芯片技術(shù)篩選心肌缺血時(shí)心肌細(xì)胞G蛋

19、白及其相關(guān)基因表達(dá),發(fā)現(xiàn)15種G蛋白參與了心肌缺血反應(yīng),而電針神門對(duì)缺血心肌細(xì)胞的保護(hù)主要調(diào)節(jié)G蛋白亞型,通過cAMP影響下游蛋白激酶A2調(diào)節(jié)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄,發(fā)揮電針抗心肌缺血的保護(hù)作用。鄭氏等27發(fā)現(xiàn)針刺內(nèi)關(guān)可以改變?cè)炷：笮募〗M織內(nèi)Gs mRNA的表達(dá)量,使心律及心率向正常水平恢復(fù),提示心律失?？赡芎虶蛋白信號(hào)傳導(dǎo)障礙有關(guān),提示G蛋白在針刺內(nèi)關(guān)穴對(duì)心律失常的調(diào)節(jié)中有重要作用。2.2  對(duì)靶細(xì)胞離子通道的影響It is a small flock that has not a black.  馬氏等28的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大鼠腦缺血后,缺血區(qū)細(xì)胞外K+濃度迅速升高

20、、Na+濃度迅速下降,手十二井穴刺絡(luò)放血可使缺血區(qū)K+濃度上升的幅度減小,Na+濃度下降的幅度減小。李氏等29研究表明,腦缺血-再灌注3 h后,腦組織中Ca2+、Na+含量升高,電針可明顯降低腦組織Ca2+含量,也有降低Na+含量的趨勢(shì),而對(duì)K+含量影響不明顯。徐氏等30實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,針刺百會(huì)、人中和環(huán)跳、昆侖兩組穴位對(duì)腦缺血-再灌注損傷大鼠腦組織中異常升高的Ca2+、Na+含量均有不同程度的降低作用。Death when it comes will have no denial.  近期研究發(fā)現(xiàn),神經(jīng)細(xì)胞的許多生理活動(dòng),如神經(jīng)遞質(zhì)的釋放、膜內(nèi)外信息傳遞、膜興奮的控制、酶活

21、性的調(diào)節(jié)以及基因的表達(dá)等都依賴于Ca2+的參加,細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度(Ca2+i)的升降對(duì)調(diào)節(jié)細(xì)胞活動(dòng)起決定性作用。腦缺血-再灌注損傷后,一方面,細(xì)胞外Ca2+通過細(xì)胞膜上的電壓門控鈣通道和受體門控鈣通道大量涌入胞內(nèi)；另一方面,胞內(nèi)鈣庫(kù),如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體上的鈣庫(kù)向胞內(nèi)釋放Ca2+導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈣超載,從而引起一系列的病理?yè)p害。姜氏等31采用醒腦開竅針法使腦缺血-再灌注損傷大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞Ca2+i降低,推測(cè)針刺可以促進(jìn)質(zhì)膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的鈣泵以及線粒體對(duì)Ca2+的重新攝取,抑制三磷酸肌醇受體(IP3R)敏感鈣庫(kù)和敏感鈣庫(kù)對(duì)Ca2+的過度釋放,從而抑制鈣超載對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損害。胡氏等32-33曾在針刺鎮(zhèn)痛實(shí)

22、驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),腦細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度發(fā)生明顯變化；后又觀察到電針治療家兔實(shí)驗(yàn)性高血壓,心肌細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+i及游離鎂離子濃度(Mg2+i)發(fā)生變化,說明針刺可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外的各種離子濃度,改變膜電位,從而產(chǎn)生對(duì)血壓的調(diào)節(jié)作用。脊髓缺血后也可致細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量增高。雷氏等34實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),脊髓缺血再灌注組大鼠脊髓細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量明顯高于假手術(shù)組,并于再灌注后繼續(xù)升高,4 h后達(dá)到其峰值。電針預(yù)處理組缺血期及再灌注期Ca2+含量均顯著低于對(duì)照組,顯示了電針重復(fù)預(yù)處理具有良好的抗Ca2+超載的作用。推測(cè)電針預(yù)處理抗Ca2+超載的可能機(jī)制為：電針激活K+-ATP通道,抑制膜去極化作用,減少C

23、a2+內(nèi)流,抑制Ca2+超載。糖尿病性神經(jīng)病變的發(fā)生發(fā)展與神經(jīng)組織Na+-K+/ATPase活性下降有密切關(guān)系。電針糖尿病大鼠三陰交和脾俞、足三里等穴,對(duì)神經(jīng)傳導(dǎo)速度有良好的防治作用,其機(jī)理與改善Na+-K+/ATPase活性有關(guān)35。Money is the root of all evil.  心肌缺血再灌注導(dǎo)致心肌發(fā)生嚴(yán)重的功能紊亂也與細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載有關(guān)。心肌細(xì)胞膜的鈉泵和肌漿網(wǎng)的鈣泵在調(diào)節(jié)胞漿Ca2+水平方面發(fā)揮著極其重要的作用。田氏等36發(fā)現(xiàn),針刺對(duì)缺血再灌注損傷大鼠心肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)三磷酸腺苷酶(SR Ca2+-ATPase)活性及其基因(SERCA-)表達(dá)具有

24、干預(yù)作用。針刺大鼠心包經(jīng)內(nèi)關(guān)或郄門,使心肌組織Ca2+-ATPase活性及其蛋白基因的表達(dá)率顯著提高。說明針刺手厥陰經(jīng)穴可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+泵活性改善心臟功能。3  問題與展望以上研究表明,針灸對(duì)效應(yīng)靶細(xì)胞跨膜信號(hào)傳導(dǎo)通路G蛋白耦聯(lián)及離子通道的影響已日益引起人們的重視,針灸對(duì)內(nèi)臟器官保護(hù)作用和對(duì)信號(hào)分子的調(diào)控作用顯示出多層面、多途徑、多靶點(diǎn)干預(yù)特點(diǎn),對(duì)其深入研究可為進(jìn)一步揭示針灸治療疾病的分子機(jī)制。Know thyself.  但細(xì)胞跨膜信號(hào)傳導(dǎo)通路是一個(gè)復(fù)雜的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),外界刺激通過信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的整合作用,能專一地產(chǎn)生某種生物效應(yīng)及調(diào)節(jié)特定基因表達(dá)。不同的細(xì)胞外信

25、號(hào)有復(fù)雜多樣的細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)方式,各種方式之間又有多種形式的交叉作用,形成信號(hào)傳導(dǎo)的網(wǎng)絡(luò),且信號(hào)傳遞具有級(jí)聯(lián)放大作用。針灸誘導(dǎo)的活性物質(zhì)群可能對(duì)一種或多種信號(hào)分子包括合成、釋放、代謝等環(huán)節(jié)起增強(qiáng)或抑制作用；可能對(duì)信號(hào)接受系統(tǒng)的一種或多種受體起作用,可激活不同細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑,產(chǎn)生多種生物效應(yīng)；而同一受體上可能存在多個(gè)與信號(hào)分子結(jié)合的活性位點(diǎn),與不同信號(hào)分子結(jié)合可因?yàn)槭荏w變構(gòu)而產(chǎn)生受體數(shù)量、親和力及相互作用的多方面調(diào)節(jié)；還可能對(duì)受體后一個(gè)或多個(gè)效應(yīng)酶起激活、增強(qiáng)或抑制作用。故細(xì)胞內(nèi)存在的信號(hào)傳導(dǎo)通路并不是各自獨(dú)立的,不同途徑之間存在多種交互聯(lián)系,各條通路之間既相互協(xié)同、又相互制約,互相交織成網(wǎng)；此外

26、,信號(hào)傳導(dǎo)路徑還受到細(xì)胞代謝及其他生化反應(yīng)的影響。這種復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)給信號(hào)傳導(dǎo)的研究帶來了許多困難。因此,今后的研究有必要從整體臨床確證療效入手,結(jié)合離體及細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),多層次、齊頭并進(jìn)、有機(jī)結(jié)合,沿著細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑的脈絡(luò),確定關(guān)鍵作用靶點(diǎn)；進(jìn)一步利用受體結(jié)合分析方法、酶聯(lián)免疫方法、放射性免疫方法、電生理實(shí)驗(yàn)技術(shù)等,系統(tǒng)全面地揭示針灸調(diào)整作用的復(fù)雜作用機(jī)制,才能深化針灸調(diào)控細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑的特異性機(jī)制的研究。【參考文獻(xiàn)】  1 王少錦.針灸效應(yīng)與細(xì)胞信息傳導(dǎo)關(guān)系的初步探討J.中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2004,10(11)：3133.2 陳正秋

27、,石 宏,徐 維,等.尾核中NMDA和非NMDA受體參與皮層Sm對(duì)丘腦束旁核傷害性反應(yīng)的下行性調(diào)節(jié)J.針刺研究,1999,24(3)：165168.3 吳國(guó)冀.尾核阿片受體參與皮層Sm區(qū)對(duì)丘腦束旁核傷害性反應(yīng)的下行調(diào)節(jié)J.生理學(xué)報(bào),1999,51(1)：4951.4 王 紅,朱崇斌,曹小定,等.大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)微量注射孤啡肽對(duì)痛和針刺鎮(zhèn)痛的影響J.生理學(xué)報(bào),1998,50(3)：263267.5 朱麗霞,葉燕燕,莫孝榮,等.激活GABAB受體在針刺鎮(zhèn)痛中的作用J.針刺研究,2002,27(2)：8587.6 盛佑祥.電

28、針對(duì)炎癥痛大鼠炎癥局部阿片受體的影響D.暨南大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合臨床專業(yè)碩士學(xué)位論文,2005.510.7 姬廣臣,俞 瑾,董志強(qiáng),等.電針鎮(zhèn)痛時(shí)炎癥痛大鼠PAG部位型白細(xì)胞介素-1受體mRNA表達(dá)的變化J.針刺研究,2003,28(2)：111114.8 陳伯英,程立海,高 慧,等.電針對(duì)大鼠腦內(nèi)雌激素受體蛋白及其mRNA表達(dá)的影響J.生理學(xué)報(bào),1998,50(5)：495500.9 黎烈榮,譚異倫,張 英,等.針?biāo)幗Y(jié)合對(duì)去勢(shì)大鼠血中性激素及其受體作用的實(shí)驗(yàn)研究J.中醫(yī)雜志,2003,44(4)：264266.10 余曙光,唐&

29、#160;勇,劉雨星.電針對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠糖皮質(zhì)激素及受體的影響J.針刺研究,2002,27(3)：205206.11 陳澤斌,王 華.針刺對(duì)大鼠腦組織神經(jīng)生物學(xué)基因表達(dá)的研究J.中國(guó)針灸,2005,25(8)：573575.12 楊 靜,熊利澤,王 強(qiáng),等.阿片受體在電針預(yù)處理誘導(dǎo)大鼠腦缺血耐受效應(yīng)中的作用J.中華老年多器官疾病雜志,2006,5(3)：5962.13 孫 華,張有志,韓 毳,等.電針對(duì)慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠大腦皮層5-HT1和5-HT2受體數(shù)量和結(jié)合活性的影響J.中國(guó)針灸,2003,23(9)：

30、553557.14 于 濤,于建春,陸明霞,等.針刺對(duì)快速老化小鼠生長(zhǎng)因子及受體基因表達(dá)的影響J.中國(guó)臨床康復(fù),2004,8(22)：45284529.15 陳育春,齊偉力,孔抗美.電針干預(yù)急性脊髓損傷大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子及其受體的表達(dá)變化J.中國(guó)臨床康復(fù),2006,10(11)：129131.16 王新家,孔抗美,葉衛(wèi)蓮,等.針刺影響慢性脊髓損傷大鼠脊髓組織神經(jīng)生長(zhǎng)因子及其受體的表達(dá)J.中醫(yī)正骨,2005,17(3)：68.17 佟 帥,王 勝,孫忠人,等.內(nèi)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子及其受體對(duì)針刺的反應(yīng)J.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù),

31、2007,11(23)：45834586.18 高俊虹,付衛(wèi)星,晉志高,等.2-腎上腺素受體后信號(hào)傳導(dǎo)通路介導(dǎo)電針預(yù)治療抗缺血性心律失常的作用J.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,2006,26(6)：431435.19 易受鄉(xiāng),張 泓,嚴(yán) 潔,等.電針足陽(yáng)明足少陽(yáng)經(jīng)對(duì)胃竇及奧狄氏括約肌縮膽囊素受體基因表達(dá)的影響J.中國(guó)臨床康復(fù),2004,8(12)：22922293.20 易受鄉(xiāng),陽(yáng)仁達(dá),嚴(yán) 潔,等.針刺足三陽(yáng)經(jīng)穴對(duì)胃黏膜損傷家兔生長(zhǎng)抑素受體基因表達(dá)影響的比較J.中國(guó)針灸,2004,24(11)：785789.21 趙保民 張 偉.電針對(duì)大鼠胃黏膜胃泌素和EGFR表達(dá)及AgNOR的影響J.第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2001,22(9)：782785.22 黎喜平,嚴(yán) 潔,常小榮,等.電針足陽(yáng)明足少陽(yáng)經(jīng)對(duì)應(yīng)激大鼠胃黏膜EGFR表達(dá)的影響J.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2006,1(2)：103106.23 劉志敏,陳寶忠,王東巖.中樞5-HT受體在電針對(duì)胃運(yùn)動(dòng)、胃電影響中的