生理學(xué)實(shí)驗(yàn)作業(yè)1

1、家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)一、目的要求 1.學(xué)習(xí)直接測(cè)定家兔動(dòng)脈血壓的急性實(shí)驗(yàn)的方法。 2.觀察神經(jīng),體液因素對(duì)心血管活動(dòng)的影響。 二、基本原理 在正常人體內(nèi),任何高等動(dòng)物的動(dòng)脈血壓時(shí)相對(duì)穩(wěn)定的.這種相對(duì)穩(wěn)定是通過(guò)神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)來(lái)實(shí)現(xiàn)的,其中以靜動(dòng)脈竇-主動(dòng)脈弓壓力感受性反射最為重要.此反射即可使升高的血壓下降,又可使降低血壓升高,故有血壓緩沖反射之稱.家兔的主動(dòng)脈神經(jīng)在解剖上獨(dú)成一支,易于分離與觀察其作用。 本實(shí)驗(yàn)是應(yīng)用液導(dǎo)系統(tǒng)直接測(cè)定動(dòng)脈血壓,即由動(dòng)脈插管與壓力傳感器連通,其內(nèi)充滿抗凝液體,構(gòu)成液導(dǎo)系統(tǒng),將動(dòng)脈插管插入動(dòng)脈,動(dòng)脈內(nèi)的壓力及其變化,可通過(guò)封閉的液導(dǎo)系統(tǒng)傳導(dǎo)壓力感受器,由計(jì)算

2、機(jī)采集系統(tǒng)記錄下來(lái)。 三、材料與器材 家兔 ,手術(shù)臺(tái), 常用手術(shù)器械, 止血鉗,眼科剪,支架,雙凹管, 氣管插管,動(dòng)脈插管,三道管, 動(dòng)脈夾,計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng) ,壓力傳感器,保護(hù)電極,照明燈,紗布,棉球,絲線,注射器(1ml,5ml,20ml),生理鹽水,4%檸檬酸鈉,20%-25%氨基甲酸已酯,肝素(200U/ml),腎上腺素(1:5000)。四、方法與步驟 1.實(shí)驗(yàn)儀器的準(zhǔn)備 打開計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)，接通壓力傳感器。從顯示器的“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目”中找出“循環(huán)實(shí)驗(yàn)”的“家兔血壓的調(diào)節(jié)”條，使顯示器顯示壓力讀數(shù)。 2.連通液導(dǎo)系統(tǒng)并制壓 將壓力傳感器的下方支管，通過(guò)輸液管連接三通管，再連接動(dòng)脈插管。上側(cè)管供

3、制壓時(shí)排除管內(nèi)空氣使用。先用裝有20ml 4%檸檬酸鈉的注射器，通過(guò)三通管向連接動(dòng)脈插管的輸液管內(nèi)推注，使之充滿液體（不要使動(dòng)脈插管高過(guò)壓力傳感器的上方支管）后，再用止血鉗夾住動(dòng)脈插管端的輸液管。然后繼續(xù)向三通管內(nèi)推注，直至充滿壓力傳感器的上方支管，并用塞子塞?。ㄗ⒁猓阂簩?dǎo)系統(tǒng)內(nèi)不可有氣泡）。繼續(xù)向三通管內(nèi)推注，同時(shí)觀察顯示器上壓力變化。當(dāng)加壓到120mmHg時(shí)既可關(guān)閉三通管。觀察壓力是否變化，如果壓力下降，則需要檢查液導(dǎo)系統(tǒng)的漏液原因，并重新制壓。調(diào)節(jié)血壓顯示器的靈敏度，使30130mmHg的變化都能在顯示器上明顯的反映出來(lái)。將動(dòng)脈插管端的導(dǎo)管內(nèi)充滿肝素溶液。 3動(dòng)物的準(zhǔn)備 （1）按照實(shí)驗(yàn)4

4、-8方法，麻醉家兔并進(jìn)行頸部手術(shù)，插入氣管插管、分離主動(dòng)脈神經(jīng)。同時(shí)分離迷走神經(jīng)并穿線備用。再將止血鉗從頸總動(dòng)脈下方穿過(guò)，輕輕張開止血鉗，分離出23cm長(zhǎng)的頸總動(dòng)脈。分離出的頸總動(dòng)脈外壁應(yīng)該十分光潔，外面并無(wú)結(jié)締組織及脂肪等物。在動(dòng)脈上穿兩條備用棉線，分別打上活結(jié)。將兩線分別拉至分離出的動(dòng)脈兩端備用。同樣方法分離另一側(cè)血管與神經(jīng)（一側(cè)動(dòng)脈用于插管側(cè)壓，另側(cè)動(dòng)脈實(shí)驗(yàn)用）。由于家兔的品種不同，個(gè)體之間也有差異，常發(fā)現(xiàn)3條神經(jīng)的解剖位置有些變異。主動(dòng)脈神經(jīng)的最后確認(rèn)，蓄意對(duì)血壓的影響為準(zhǔn)。 （2）動(dòng)脈插管  首先用5ml注射器從耳緣靜脈注入肝素（200U/kg體重）以防凝血。然后在一側(cè)動(dòng)脈

5、行動(dòng)脈插管術(shù)以記錄血壓。其方法如下： 將動(dòng)脈頭端的備用線盡可能靠頭端結(jié)扎（務(wù)必扎緊，以防滲血），然后在另一備用線的向心側(cè)（盡可能近心端），用動(dòng)脈夾夾閉。輕輕提起動(dòng)脈頭端的結(jié)扎線，用銳利的眼科剪在靠近扎線的稍后方，沿向心方向斜向剪開動(dòng)脈上壁（注意：不可只剪開血管外膜，也切勿剪斷整個(gè)動(dòng)脈，剪口大小約為管徑的一半）。一手持彎頭眼科鑷，將其一個(gè)彎頭從剪口處插進(jìn)動(dòng)脈少許，輕輕挑起剪開的動(dòng)脈上壁，另一手將準(zhǔn)備好的動(dòng)脈插管由開口處插入動(dòng)脈管內(nèi)。如果插入較淺，可用一手輕輕捏住進(jìn)入插管的動(dòng)脈管壁，另一手拿住動(dòng)脈插管，順勢(shì)輕輕推進(jìn)至68mm左右（如果手感滯澀，說(shuō)明插管并未進(jìn)入動(dòng)脈，必須退出插管，重新剪口再插），用

6、備用線將動(dòng)脈連同進(jìn)入的插管扎緊（插管不可因扎線松動(dòng)而滑出，亦不可漏液），并將余線系在插管的固定側(cè)支上，以免滑脫。注意：插管應(yīng)與動(dòng)脈血管的方向一致，以防插管尖端扎破動(dòng)脈管壁。輕輕取下向心端動(dòng)脈夾，可見動(dòng)脈血與插管內(nèi)液體混合。再取下通向壓力傳感器的止血鉗，此時(shí)顯示器上出現(xiàn)血壓的波動(dòng)曲線。 4.實(shí)驗(yàn)觀察 （1）觀察正常血壓曲線：調(diào)節(jié)掃描速度與增益，可以明顯地觀察到心室射血與主動(dòng)脈回縮形成的壓力變化與收縮壓、舒張壓的讀數(shù)。有時(shí)可以觀察到血壓曲線隨呼吸變化，心搏為一級(jí)波，呼吸波為二級(jí)波。然后將掃描速度調(diào)慢，觀察正常血壓曲線。 （2）夾閉對(duì)側(cè)勁總動(dòng)脈：輕輕提起對(duì)側(cè)完好頸總動(dòng)脈上的備用線，用動(dòng)脈夾夾閉30s

7、（于夾閉前記錄動(dòng)脈通暢時(shí)的血壓曲線），觀察并記錄血壓變化。出現(xiàn)變化后即取下動(dòng)脈夾，記錄血壓的恢復(fù)過(guò)程。 （3）按壓頸動(dòng)脈竇：記錄對(duì)照血壓曲線后，用手指按壓頸動(dòng)脈竇（下頜下方內(nèi)側(cè)），觀察并記錄血壓變化。當(dāng)血壓明顯下降時(shí)，則停止按壓，待血壓恢復(fù)（如果血壓反而升高，說(shuō)明按壓的是血管，需重新尋找按壓位置）。 （4）刺激主動(dòng)脈神經(jīng)：  使刺激輸出端連接保護(hù)電極，輕輕提起主動(dòng)脈神經(jīng)上的備用線，小心地將神經(jīng)置于保護(hù)電極之上。記錄對(duì)照血壓曲線后，再用中等強(qiáng)度的連續(xù)電脈沖信號(hào)，通過(guò)保護(hù)電極，刺激神經(jīng)1020s。血壓出現(xiàn)明顯下降后即可停止刺激，并待血壓恢復(fù)。如果血壓并不下降，可調(diào)整刺激強(qiáng)度或刺激頻率再行

8、刺激。任何刺激都無(wú)效時(shí)，則表示此神經(jīng)并非主動(dòng)脈神經(jīng)。需要重新辨認(rèn)神經(jīng)后再行實(shí)驗(yàn)。 （5）分別刺激主動(dòng)脈神經(jīng)中樞端和外周端：  雙結(jié)扎主動(dòng)脈神經(jīng)后（務(wù)必結(jié)扎），從兩扎線結(jié)之間剪斷神經(jīng)。記錄對(duì)照血壓后，同法分別刺激神經(jīng)的中樞端和外周端，觀察并記錄血壓變化。 （6）刺激迷走神經(jīng)：  記錄對(duì)照血壓后，用同樣的方法刺激迷走神經(jīng)，觀察血壓下降曲線與（4）有何不同（如果血壓下降很快、很低，應(yīng)立即停止刺激）。（7）刺激迷走神經(jīng)外周端  分別刺激兩側(cè)迷走神經(jīng)外周端，觀察并記錄血壓變化有何不同。 （8）腎上腺素對(duì)血壓的影響：  記錄對(duì)照血壓曲線后，用1ml注射器，從耳緣靜脈

9、注入0.10.3ml腎上腺素溶液，觀察并記錄血壓變化及恢復(fù)曲線。 （9）乙酰膽堿對(duì)血壓的影響：  同法注入0.10.2ml乙酰膽堿溶液，觀察并記錄注射前后血壓變化。 （10）失血對(duì)血壓的影響：  從另一側(cè)動(dòng)脈插管后慢慢放血，觀察放血量對(duì)血壓的影響。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察血壓變化曲線：夾閉一側(cè)勁總動(dòng)脈圖1：夾閉另一側(cè)總動(dòng)脈時(shí)的曲線變化圖由圖1看出夾閉家兔對(duì)側(cè)頸總動(dòng)脈時(shí)的血壓變化曲線，.夾閉一側(cè)頸總動(dòng)脈后，可以觀察到兔動(dòng)脈血壓升高的現(xiàn)象。雙手按壓勁動(dòng)脈竇圖2：雙手按壓勁動(dòng)脈竇的曲線變化圖由圖2看出用手指按壓頸動(dòng)脈竇，血壓出現(xiàn)一定程度的下降，之后稍微上升并逐漸恢復(fù)正常。刺激迷走神經(jīng)圖3

10、：迷走 頻率30HZ 振幅1V 脈沖持續(xù)時(shí)間 1.00ms 延時(shí) 0.0ms 脈沖數(shù)200時(shí)的曲線變化圖由圖3看出刺激迷走神經(jīng)后觀察到，刺激迷走神經(jīng)和迷走神經(jīng)外周端都能引起明顯的減壓反應(yīng)。刺激減壓神經(jīng)圖4：減壓 頻率30HZ 振幅1V 脈沖持續(xù)時(shí)間 1.00ms 延時(shí) 0.0ms 脈沖數(shù)200的曲線變化圖由圖4看出刺激完整減壓神經(jīng)及其中樞端均可引起血壓下降。 腎上腺素圖5：腎上腺素在作用時(shí)的曲線變化圖由圖5看出加入腎上腺素后，觀察到平均動(dòng)脈壓抬高。六、分析討論（1） 由圖1觀察到兔動(dòng)脈血壓升高的現(xiàn)象。這是由于頸動(dòng)脈竇管壁的外膜下分布有豐富的感覺神經(jīng)末梢，是動(dòng)脈張力感受器，位于兔頸總動(dòng)脈的遠(yuǎn)心端

11、，頸內(nèi)動(dòng)脈與頸外動(dòng)脈的分叉交界處。夾閉頸動(dòng)脈后，遠(yuǎn)心端的頸動(dòng)脈竇張力感受器感受到血壓下降，傳出神經(jīng)沖動(dòng)的頻率減慢。信息沿竇神經(jīng)上傳至延髓孤束核心血管中樞。使心迷走緊張減弱，心交感和心縮血管緊張加強(qiáng)，作用于心臟，使心率加快，心輸出量增加，血管收縮，血管外周阻力增加。從而血壓恢復(fù)性升高。 （2）由圖2看出用手指按壓頸動(dòng)脈竇，血壓出現(xiàn)一定程度的下降，之后稍微上升并逐漸恢復(fù)正常。這是由于頸動(dòng)脈竇管壁的外膜下是動(dòng)脈張力感受器，位于兔頸總動(dòng)脈的遠(yuǎn)心端，手指按壓頸動(dòng)脈竇后，動(dòng)脈竇的容量變小，血流通過(guò)時(shí)產(chǎn)生較大的壓力，遠(yuǎn)心端的頸動(dòng)脈竇張力感受器感受到血壓升高，傳出神經(jīng)沖動(dòng)的頻率加快。信息沿竇神經(jīng)上傳

12、至延髓孤束核心血管中樞。使心迷走緊張?jiān)鰪?qiáng)，心交感和心縮血管緊張減弱，作用于心臟，使心率減慢，心輸出量減少，血管舒張，血管外周阻力減小。從而血壓恢復(fù)性降低。之后遠(yuǎn)心端的頸動(dòng)脈竇張力感受器感受到血壓下降，傳出神經(jīng)沖動(dòng)的頻率減慢。信息沿竇神經(jīng)上傳至延髓孤束核心血管中樞。使心迷走緊張減弱，心交感和心縮血管緊張加強(qiáng)，作用于心臟，使心率加快，心輸出量增加，血管收縮，血管外周阻力增加。從而血壓恢復(fù)性升高。（3）由圖3看出刺激迷走神經(jīng)后觀察到，刺激迷走神經(jīng)和迷走神經(jīng)外周端都能引起明顯的減壓反應(yīng)。這是由于迷走神經(jīng)中含從延髓下行的傳出纖維，通向心臟。節(jié)前纖維末端釋放Ach,節(jié)后纖維末端釋放Ach,屬于副交感神經(jīng)纖維，能使cAMP濃度降低，心率減慢，心房收縮力減弱，傳導(dǎo)性減弱。從而使心輸出量變小，平均動(dòng)脈壓降低。此外，還有主動(dòng)脈體化學(xué)感受器的上行纖維在迷走神經(jīng)中并行，化學(xué)感受器受刺激的效應(yīng)是血壓升高。所以，刺激迷走中樞不能引起減壓反應(yīng)，卻可以使血壓輕微抬高。此外，若切斷兩側(cè)迷走神經(jīng)，迷走緊張消失，迷走吸氣興奮反射通路也斷了，動(dòng)物的吸氣變深，周期變長(zhǎng)，二級(jí)曲線周期性變得不明顯。（4）由圖4看出刺激完整減壓神經(jīng)及其中樞端均可引起血壓下降。這是由于兔減壓神經(jīng)是傳入神經(jīng)，其作用是將主動(dòng)脈弓感受器發(fā)出的沖動(dòng)傳入延