油鏡使用實(shí)訓(xùn)報告

1、實(shí)訓(xùn)一xx油鏡的使用和細(xì)菌的形態(tài)觀察一、實(shí)訓(xùn)目的1、了解顯微鏡油鏡工作原理，掌握油鏡的使用和保養(yǎng)方法。2、掌握細(xì)菌制片及簡單染色技術(shù)，觀察細(xì)菌形態(tài)。二、實(shí)訓(xùn)原理簡單染色原理細(xì)菌個體很小，而且多為透明或半透明，在水浸片中不容易觀察。為清晰地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、大小及排列情況，需采用各種染色方法，使菌體著色，以增加菌體的顯示力。簡單染色法是用一種染色液一次使菌體著色的方法，是微生物學(xué)中應(yīng)用最廣泛、操作最簡單的染色方法。細(xì)菌細(xì)胞含有很多核酸，所以一般多用結(jié)晶紫、番紅、美藍(lán)、堿性復(fù)紅、孔雀綠等堿性染料配成染色液進(jìn)行菌體染色。三、材料用具載玻片、斜面菌種、結(jié)晶紫染色液、石炭酸復(fù)紅染色液、香柏油、二甲苯、無

2、菌水、顯微鏡、接種環(huán)、吸水紙、擦鏡紙、酒精燈、火柴、洗瓶或小滴管。四、方法步驟（一）微生物的簡單染色1、涂片在潔凈無油脂的載玻片中央滴一小滴無菌水，按無菌操作法從斜面菌種刮取少量菌體，與水滴充分混勻成菌懸液，用接種環(huán)將菌懸液涂成均勻的薄層菌膜，涂片面積約1cm2左右。2、干燥將涂片于室溫自然干燥，或?qū)⑤d玻片置于火焰高處微熱烘干。注意勿在火焰上烘烤，以免菌體變形。3、固定手執(zhí)載片一端，使涂菌的一面向上，將其迅速通過微火2-3次進(jìn)行火焰固定。火焰固定時，用手擦涂片反面，以不燙手為宜。注意不能將載片在火上烤，否則易使菌體變形。固定的目的是將菌體殺死，使菌體附著在載玻片上，染色時不致脫落，同時改變菌體

3、對染色液的通透性，增加染色效果。4、染色滴加1-2滴染色液于涂菌處，并使染色液覆蓋整個菌膜，染色1分鐘左右。5、水洗傾去染色液，斜置載片，用洗瓶或自來水輕輕沖洗，注意不要直接沖在涂好的菌膜處，應(yīng)由菌膜上端流下，洗至從載片上流下的水中無染色液的顏色為止。6、干燥自然晾干或用吸水紙輕輕地吸干，注意不要擦掉菌體。然后即可鏡檢。（二）xx的使用方法1 、放置xx將顯微鏡置于實(shí)驗(yàn)臺上，鏡座距實(shí)驗(yàn)臺邊沿3-4厘米。2、調(diào)光將低倍物鏡轉(zhuǎn)到工作位置，調(diào)節(jié)光強(qiáng)度，觀察染色玻片時，光線宜強(qiáng)些；觀察未染色玻片時，光線宜弱些。3、低倍鏡觀察首先上升鏡筒或下降載物臺，將玻片或細(xì)菌涂片置于載物臺上，用標(biāo)本夾夾住，將觀察位

4、置移至物鏡正下方，物鏡降至距裝片0.5厘米處，用粗調(diào)節(jié)器使物鏡逐漸上升至出現(xiàn)物像時，改用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)至物像清楚為止。用推進(jìn)器移動裝片，將最適宜觀察部位移至視野中心。4、高倍鏡觀察轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器，將高倍鏡移至工作位置，用細(xì)調(diào)節(jié)器校正焦距使物鏡清晰，將最適宜觀察部位移至視野中心。5、油鏡觀察上升鏡筒或下降載物臺約2厘米，轉(zhuǎn)換油鏡，在鏡頭下方的涂片上滴一滴香柏油。用粗調(diào)節(jié)器慢慢降下鏡筒或上升載物臺，使油鏡侵入油中至油圈不擴(kuò)大為止，此時鏡頭幾乎與裝片接觸。注意操作人員要從側(cè)面仔細(xì)觀察浸油鏡頭的整個過程，油鏡頭不能接觸載玻片，以免壓碎載玻片，損壞鏡頭。用粗調(diào)節(jié)器徐徐上升鏡筒或下降載物臺，當(dāng)視野中有物像出

5、現(xiàn)時，再用細(xì)調(diào)節(jié)器校正焦距，直至物像清晰為止。若因鏡頭離開油面而未找到物像，必須再按前述過程重復(fù)操作，直至物像看清為止。觀察完一個標(biāo)本片后，必須先升鏡筒或降下載物臺后，在取下標(biāo)本片，決不可從油鏡下直接將制片抽出，以免損壞油鏡。若想再次觀察其他制片，也必須先升鏡筒或下降載物臺，換上其他制片，依次用低倍鏡、高倍鏡和油鏡觀察。重復(fù)觀察時可比第一次少加香柏油。（三）油鏡的保養(yǎng)1、清洗油鏡頭鏡檢完畢后，上升鏡筒或下降載物臺，取出玻片，必須及時清洗油鏡頭。清洗時，用轉(zhuǎn)換器將油鏡轉(zhuǎn)至一邊，用擦鏡紙輕輕擦去鏡頭上的大部分香柏油，再用擦鏡紙沾少許二甲苯擦掉殘留的香柏油，最后用干凈的擦鏡紙擦凈殘留在鏡頭上的二甲苯。注意擦鏡時勿用力在透鏡上來回摩擦，嚴(yán)禁