枸杞果柄對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響

1、枸杞果柄對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響         【摘要】   目的探討枸杞果柄水煎劑對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響。方法制備四氧嘧啶糖尿病小鼠模型，將其分為降糖靈 治療 組、低劑量枸杞果柄治療組、高劑量枸杞果柄治療組、模型對照組，另設(shè)正常對照組（非糖尿病小鼠）。前3組小鼠分別以25 mg·kg-1·d-1降糖靈水溶液、5.0 g·kg-1·d-1枸杞果柄水煎劑、7.5 g·kg-1·d-1枸杞果柄水煎劑灌胃，后2組小鼠均灌服等量的生理鹽水

2、。14 d后測定小鼠空腹血糖。結(jié)果給藥14 d后降糖靈治療組、低劑量枸杞果柄治療組小鼠血糖較治療前有極顯著下降(P0.01)，高劑量枸杞果柄治療組小鼠血糖較治療前有顯著下降(P0.05)；降糖靈治療組、不同劑量枸杞果柄治療組血糖降低平均值與模型對照組、正常對照組血糖變化平均值之間均存在極顯著差異(P0.01)。結(jié)論一定劑量的枸杞果柄水煎劑對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖有降低作用。 【關(guān)鍵詞】   枸杞果柄； 糖尿病小鼠；降血糖Abstract:ObjectiveTo investigate the effect of fruit pedicels of Lycium barbarum L.

3、 decoction on blood glucose in alloxan-induced diabetic mice.MethodsAlloxan-induced diabetes mellitus mice were fed with ther 25 mg·kg-1·d-1 Jiangtangling, a clinic medicine for diabetes, or different concentrations of decocta of fruit pedicels of Lycium barbarum L. (low dosage: 5.0 g·

4、;kg-1·d-1 or high dosage: 7.5 g·kg-1·d-1. For controls, both Alloxan-induced diabetic mice or normal mice were fed with equal amount of saline. The blood glucose level of all five group mice was measured 14 d after treatment. Mice were fasted before blood samples were obtained. Result

5、sBoth Jiangtangling and low dose of fruit pedicels of Lycium barbarum L. could significantly decrease mouse blood sugar compared to pretreatment (P0.01), so did high dose decota of fruit pedicels of Lycium barbarum L. (P0.05). Both Jiangtangling and different doses of fruit pedicels of Lycium barbar

6、um L. could significantly reduce blood glucose levels as compared to model group or normal group (P0.01). ConclusionThe decoction of fruit pedicels of Lycium barbarum L. can reduce blood glucose level in alloxan-induced diabetic mice.Key words:Fruit pedicels of Lycium barbarum L.;  Diabetic Mic

7、e;  Hypoglycemic寧夏枸杞Lycium barbarum L.是一種常用的補(bǔ)益類中藥。 研究證明，枸杞具有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、抗脂肪肝、降血脂、增強(qiáng)機(jī)體免疫作用等多種功能1。枸杞藥用部位主要包括枸杞果實（即枸杞子，通常簡稱枸杞）、枸杞根皮（地骨皮）、枸杞果柄（帶宿萼的果梗）、枸杞葉等部分。田麗梅等2研究報道，中藥枸杞能明顯降低糖尿病小鼠的血糖(P0.01)，對血清胰島素水平有提高的趨勢。王玲等3研究表明枸杞多糖（LBP-D）對糖尿病小鼠的胰島細(xì)胞可能有保護(hù)作用，并對四氧嘧啶糖尿病小鼠有治療效應(yīng)。地骨皮為常用中藥，具有涼血、除熱、清肺降火的功效。現(xiàn)代藥理研究表明，地骨

8、皮提取物有解熱、降壓、降血糖及抗微生物等作用。方志偉等4研究證實，地骨皮可顯著降低四氧嘧啶所致糖尿病大鼠血糖值，對正常大鼠的血糖也有一定的降低作用。地骨皮還可提高糖尿病大鼠的血清胰島素及肝臟糖元的含量，表明地骨皮具有改善胰島功能、促進(jìn)肝糖元合成的作用，對糖尿病及其并發(fā)癥防治有益。枸杞葉俗稱天精草,是一味重要的中藥材,具有補(bǔ)虛益精、清熱止渴、養(yǎng)肝明目之功效。有學(xué)者關(guān)于枸杞葉活性成分、營養(yǎng)成分和常微量元素的含量明顯優(yōu)于枸杞果實的報道5,一直未能引起人們的關(guān)注。枸杞果柄所含的營養(yǎng)成分和氨基酸含量與枸杞葉相當(dāng)，而枸杞果柄的相關(guān)研究則更少。有關(guān)枸杞葉降血糖的研究，國內(nèi)僅見的報道認(rèn)為枸杞葉蛋白具有降血糖作

9、用6。枸杞果柄在內(nèi)蒙古自治區(qū)等地被作為糖尿病人的保健品使用，但未見相關(guān)研究報道。因此進(jìn)一步開展枸杞果柄降血糖作用及其有效成分的研究，對于寧夏枸杞傳統(tǒng)非藥用部位的開發(fā)利用具有重要的理論及意義。 1  材料與儀器 1.1  藥物與試劑四氧嘧啶（Alloxan，ALX），美國sigma公司產(chǎn)品。枸杞果柄，采自內(nèi)蒙古自治區(qū)烏拉特前旗白彥花鎮(zhèn)。將烘干的枸杞果柄50 g加水1 000 ml煎煮1h，過濾；藥渣再加水500 ml煎煮0.5 h，過濾。合并濾液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至100 ml，使枸杞果柄生藥濃度為0.5 g/ml。制得的枸杞果柄水煎劑置于冰箱中備用。苯乙雙胍（phenf

10、ormin），又名降糖靈，南通制藥廠出品，批號070107。將苯乙雙胍片研碎，以煮沸過的蒸餾水溶解，配制成5 mg/ml的水溶液置于冰箱中備用。1.2 動物昆明種雄性小鼠及飼料均由寧夏醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供，在實驗室暫養(yǎng)1周后開始實驗。小鼠初始體重為（22±5）g。1.3 儀器血糖儀及血糖試條，均為北京怡成生物 電子 技術(shù)有限公司產(chǎn)品。2 方法 2.1 四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的建立小鼠禁食（不禁水）12 h后，尾靜脈注射新配制的5四氧嘧啶溶液(80 mg/kg)，恢復(fù)進(jìn)食；于48 h后再禁食（不禁水）12 h，斷尾取血，用血糖儀測定血糖值。測定結(jié)果大于11.1 mmol/L的小鼠為合

11、格的四氧嘧啶糖尿病小鼠模型。動物出現(xiàn)明顯的多飲、多食、多尿癥狀為標(biāo)準(zhǔn)，確認(rèn)模型，未達(dá)標(biāo)動物不納入實驗。將糖尿病小鼠按空腹血糖水平高低進(jìn)行隨機(jī)分組，同時兼顧各組動物體重均值盡量接近。另設(shè)1組體重相近的非糖尿病小鼠，作為以上各組糖尿病小鼠的對照組（正常對照組），同時測定其血糖值。2.2 分組及處理方法選取合格的四氧嘧啶糖尿病小鼠分為4組，分別以生理鹽水、降糖靈水溶液25 mg/（kg·d)、枸杞果柄水煎劑5.0 g/(kg·d)和7.5 g/(kg·d)灌胃，正常對照組以等量生理鹽水灌胃。5組小鼠每日上午8點到10點灌胃1次。每天觀察小鼠進(jìn)食、飲水、活動行為等變化，并

12、記錄死亡情況，每周測量1次體重。連續(xù)灌胃14 d，在末次給藥后禁食12 h，斷尾取血，用血糖儀測定血糖。2.3 分析實驗數(shù)據(jù)用 ±s表示，給藥前后各組間血糖值比較采用t檢驗，P0.05為差異顯著，P0.01為差異極顯著。給藥后各組間血糖降低值采用多重比較用最小顯著差數(shù)法（LSD法）進(jìn)行方差分析，同一列數(shù)字右側(cè)小寫字母相同者表示差異不顯著(P0.05),不同者表示差異顯著(P0.05)；同一列數(shù)字右側(cè)大寫字母相同者表示差異達(dá)不到極顯著(P0.01),不同者表示差異極顯著(P0.01)。         3&

13、#160; 結(jié)果 3.1  實驗小鼠的行為變化小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶后，由于體內(nèi)代謝紊亂，致使部分小鼠死亡（見表1）。給藥后降糖靈 治療 組、枸杞果柄治療組小鼠死亡數(shù)低于模型對照組，說明降糖靈、枸杞果柄在降血糖的同時提高了動物的生存率。實驗期除正常對照組小鼠外，其余各組小鼠均出現(xiàn)明顯的多飲、多食、多尿、消瘦，即“三多一少”的癥狀，活動減少、精神萎靡等癥狀。到實驗?zāi)?，除模型對照組外，降糖靈治療組和兩個枸杞果柄治療組糖尿病小鼠癥狀明顯好轉(zhuǎn)，個別小鼠上述癥狀消失。表1   實驗小鼠死亡數(shù)與降糖率（略）3.2 枸杞果柄對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響由表2可知，給藥前各四氧

14、嘧啶糖尿病小鼠模型的血糖均大于11.1 mmol/L，為合格的糖尿病小鼠模型，給藥前各組糖尿病小鼠間的血糖差異不顯著，但與正常對照組相比差異極顯著(P0.01)。給藥后，低、高劑量枸杞果柄治療組除與降糖靈治療組血糖降低值之間無顯著差異外，與模型對照組、正常對照組血糖變化值之間達(dá)到極顯著差異。可見低、高劑量枸杞果柄均有降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的作用，且與降糖靈有相同的降糖效果。表2  枸杞果柄對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響（略）經(jīng)t檢驗，給藥前各組糖尿病小鼠間的血糖差異不顯著，但與正常對照組相比差異極顯著(P0.01)；“*”代表給藥前后的血糖達(dá)到顯著水平（P0.05），“*”代表給

15、藥前后的血糖達(dá)到極顯著水平(P0.01) 4 討論 本實驗結(jié)果來看，低劑量枸杞果柄治療組和降糖靈治療組小鼠給藥前后血糖值有極顯著差異（P0.01），高劑量枸杞果柄治療組給藥前后有顯著差(P0.05)。血糖降低率分別為55.5%，53.32%，45.77%,可見一定劑量枸杞果柄水煎劑有明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的作用。而兩組枸杞果柄治療組與降糖靈治療組小鼠血糖降低值比較無顯著差異（P0.05），說明一定劑量枸杞果柄水煎劑降低血糖作用與降糖靈的降糖效果相似。目前發(fā)現(xiàn)的植物天然降血糖成分主要包括黃酮、生物堿、皂苷、鞣質(zhì)、多糖、萜、蛋白質(zhì)與氨基酸、不飽和脂肪酸、硫鍵化合物、苯丙素酚和其它化合物等十

16、一大類7，但這些成分在不同植物體內(nèi)有著不同的種類。現(xiàn)有較多的研究已經(jīng)認(rèn)為枸杞子、地骨皮可以降血糖，枸杞子降血糖的有效成分主要有枸杞多糖等2。周晶等8研究表明地骨皮降低實驗性小鼠血糖的有效部位是水溶性小分子。李康等9以實驗為基礎(chǔ)，認(rèn)為地骨皮降血糖的有效組分是酸性組分。楊涓等10，11測定了枸杞子、地骨皮均含有?；撬?，已有大量研究證明?；撬峥梢越笛?2，但牛磺酸是不是枸杞子、地骨皮降血糖的有效成分之一至今未見報道。本實驗結(jié)果表明枸杞果柄水煎劑的降糖效果已經(jīng)達(dá)到了目前治療糖尿病所使用的降糖西藥降糖靈的降糖效果。就枸杞果柄中已有測定成分來看6，有生物堿、類脂及香豆精、酚類、有機(jī)酸、黃酮、蛋白質(zhì)及氨基

17、酸等，可見枸杞果柄并不含有已知的枸杞降血糖的有效成分。枸杞果柄作為枸杞葉和根向果實輸送營養(yǎng)物質(zhì)以及果實中合成的物質(zhì)向植物體運(yùn)輸?shù)耐ǖ?，推測枸杞果柄中可能也含有?；撬?，那么?；撬峋涂赡苁氰坭焦笛浅煞种弧｜S酮類主要影響胰島細(xì)胞功能，作用緩慢而持久。有報道從芥菜中分離得到黃酮類化合物異鼠李素二葡萄糖苷，其降血糖機(jī)制與異鼠李素二葡萄糖苷的體內(nèi)抗氧化活性有關(guān)13。 蕎麥種子14 、廣西藤茶15、桑葉16中的總黃酮都對高血糖小鼠也有明顯的降血糖作用。寧夏枸杞葉黃酮類化合物含量高于其果實17，推測黃酮類化合物可能是枸杞葉、果柄降血糖的有效成分之一。對幾乎作為廢棄物的枸杞果柄資源的開發(fā)研究具有深刻的意

18、義。本實驗僅證實一定劑量枸杞果柄具有降血糖的作用，但枸杞果柄降血糖作用的最佳濃度范圍、降血糖的有效成分及其作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究?！?參考 文獻(xiàn) 】 1田麗梅.近年來中藥枸杞子的研究進(jìn)展J.中華醫(yī)藥雜志,2004,4(7):645.2田麗梅,王旻,陳衛(wèi).枸杞多糖對-葡萄糖苷酶抑制作用的系列研究J.中藥藥理與臨床，2005,21(3)：23.3王玲,張才軍,李維波,等.枸杞多糖-D對四氧嘧啶糖尿病小鼠高血糖的防治作用J.河北中醫(yī),2000,22(2):159.4方志偉,劉 非,付井成,等.地骨皮降血糖作用實驗研究J.中醫(yī)藥學(xué)報,2004,32(4):47.5齊宗韶,李淑芳,吳繼平.枸杞子和枸杞葉化學(xué)成分的研究-第1報 枸杞子和枸杞葉的營養(yǎng)成分J. 中國 中藥雜志,1986,11(3):41.6白壽寧.寧夏枸杞研究M.銀川:寧夏人民出版社,1999:424.7王秋霞,賈美艷,唐榮平,等.天然藥物中降血糖成分的研究進(jìn)展J.中國民族民間醫(yī)藥雜志,2005,4：190.8周晶,孟 麟,黃建安,等.地骨皮對四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用J.中成藥,2001,23（6）：424.9李康,畢開順,