核酸分子雜交

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上一. 名詞解釋:1. 核酸分子雜交2. DNA復性3. Southern雜交4. Northern雜交5. 斑點印跡6. 原位雜交二. 單項選擇題:1. 在加熱或紫外線照射下，可導致兩條DNA鏈中間的氫鏈斷裂，而核酸分子中所有的共價鍵則不受影響的稱為（ ）。A. DNA變性 B. DNA復性 C. DNA重組 D. DNA雜交2.DNA變性的本質(zhì)是（ ）的斷裂。 A. 鹽鍵 B. 氫鍵 C. 離子鍵 D. 共價鍵3. 一般影響核酸變性的溫度可選在（ ）。A. 6070 B. 7080 C. 8090 D. 901004. 在核酸分子雜交時，一般對應溫度作圖得到的DNA

2、復性曲線所用的紫外吸收值是（ ）。A. A260吸收值 B. A280吸收值 C. A320吸收值 D. A360吸收值 5. 進行核酸分子雜交時，一般適宜的探針濃度是（ B ）。A. 0.1g B.0.10.5g C.0.5-1g D.1.01.5g6.雜交時如果使用單鏈核酸探針，隨著溶液中探針濃度的增加，雜交效率也會增加，所以探針長度控制在（ ）。A. 50300bp B. 20200bp C.300400bp D.2005007.進行核酸雜交時，一般適宜的復性溫度較Tm值低（ ）。A.10 B.15 C.20 D.258.寡核酸探針雜交反應一般在低于Tm值（ ）下進行。A.5 B.10

3、C.15 D. 259. 下列哪種試劑能降低核酸雜交的Tm值（ ）。A尿素 B. 甲酰胺 C.甲醛 D. 乙醇10. 在凝膠中核酸變性時，為了使DNA片段在合理的時間內(nèi)從凝膠中移動出來，必須將最長的DNA片段控制在大約（ ）。A. 1Kb B. 2 Kb C. 3 Kb D. 4 Kb11. 將RNA或DNA變性后直接點樣于硝酸纖維素膜上，用于基因組中特定基因及其表達的定性及定量研究，稱為（ ）。A. 原位雜交 B. 核酸酶保護實驗 C. 斑點印跡 D. 狹縫印跡12. 核酸保持在細胞或組織切片中經(jīng)適當方法處理細胞或組織后，將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交，稱為（ ）。A. 原位雜

4、交 B. 核酸酶保護實驗 C. 斑點印跡 D. 狹縫印跡13. 在將固定于膜上的DNA片段與探針進行雜交之前，必須將膜上所有能與DNA結(jié)合的位點全部封閉，稱為（ ）。A. 雜交 B. 預雜交 C. 雜交前處理 D. Nouthern印跡雜交14. 進行間期細胞內(nèi)染色體DNA的原位雜交時，關(guān)鍵是（ ）。A. 細胞的培養(yǎng) B. 加固定液 C. 載波片上的固定 D. 細胞染色體的制備15. 組織細胞雜交前的預處理的關(guān)鍵是（ ）。A. 降解細胞外蛋白 B. 降解細胞內(nèi)蛋白 C. 降解核酸表面蛋白 D. 降解核酸內(nèi)DNA16. 組織細胞雜交前預處理時，降解核酸表面的蛋白質(zhì)常用的蛋白酶是（ ）。A. 蛋白

5、酶C B. 蛋白酶K C. 蛋白酶A D. 蛋白酶I17. 在進行原位雜交時，RNA探針雜交的時間最好是（ ）。A. 24h B. 46h C. 68h D. 過夜18. 在核酸雜交中，目前應用最為廣泛的一種探針是 （ ）。A. 基因組DNA探針 B. 寡核苷酸探針 C. cDNA探針 D. RNA探針19. 在Southern印跡雜交中用來標記核酸探針最常用的核素是（ ）。A. 32P B. 3H C. 35S D. 125I20在下列非核素標記物中，既屬于半抗原，同時也屬于配體的是（ ）。A. 地高辛 B. 生物素 C. 親合素 D. 羅丹明21.一些標記物可與某種物質(zhì)反應產(chǎn)生化學發(fā)光現(xiàn)象

6、，通過化學發(fā)光可以象核素一樣直接使X線膠片上的乳膠顆粒感光。這些標記物稱為（ ）。A.半抗原 B.配體 C.熒光素 D.化學發(fā)光探針22. Sephadex G50 柱析法中，隨著流動相流出的是（ ）。A.小分子物質(zhì) B. dATP C.大分子探針 D. dGTP23. 下列DNA分子的組成中，哪種是核酸變性的最主要的因素（ ）。A. AT B. AG C. GC D. TC24. 在探針的純化時，無水乙醇可以沉淀（ ）。ADNA片段 B. 蛋白質(zhì)分子CRNA片段 D. 小分子物質(zhì)25. 待測DNA樣品的電泳分離中，作為分子量標準的DNA是用（ ）酶消化的。A. Hind B. BglI C.

7、 ApaI D. BamHI三. 多項選擇題:1. 導致DNA變性的常用方法有（ ）。A. 熱變性 B. 堿變性 C. 酸變性 D. 化學試劑變性2. 影響核酸雜交的因素有（ ）。A. 核酸分子的濃度和長度 B. 溫度 C. 離子濃度 D. 核酸分子的復雜性3. 核酸分子處于何種情況下，核酸的雙鏈可以完全打開成為單鏈（ ）。A. PH3 B. 3PH5 C. 5PH10 D. PH104. 在雜交液中加入甲酰胺，其目的是（ ）。A. 在低溫下探針更穩(wěn)定 B. 使雜交液為中性 C. 能更好的保留非共價結(jié)合的核酸D. 減少核酸雜交的副反應5. 為減少非特異性雜交反應，在雜交前將非特異性雜交位點進行

8、封閉，常用的封閉物有（ ）。B. 復性的非特異性RNA C. 變性的非特異性DNA D. 高分子化合物 E. 低分子化合物6. 下列哪些步驟屬于Southern印跡雜交（ ）。A. 待測核酸樣品的制備B. 待測DNA樣品的電泳分離C. 凝膠中核酸的變性D. Southern轉(zhuǎn)膜7. Southern轉(zhuǎn)膜時常用的膜是（ ）。A. 化學活化膜 B. 尼龍膜 C. 硝酸纖維素膜 D. 濾紙8. 常用的Southern轉(zhuǎn)膜方法有哪幾種（ ）。A. 硝酸纖維素膜法 B. 毛細管虹吸印跡法 C. 電轉(zhuǎn)印法 D. 真空轉(zhuǎn)移法9. 用于Southern印跡雜交的探針可以是（ ）。A. 純化的DNA片段 B.

9、純化的RNA片段 C. 多核苷酸 D. 寡核苷酸片段10. 原位雜交可以用來檢測（ ）。A. DNA B. RNA C. cDNA D. RNA和DNA11. 原位雜交所用的探針可以是（ ）。A. mRNA B. DNA C. RNA D. cDNA12. Northern印跡雜交中轉(zhuǎn)膜時可采用的方法有（ ）。A. 毛細管虹吸印跡法 B. 電轉(zhuǎn)印法 C. 真空轉(zhuǎn)移法 D. 凝膠分離法13. 核酸原位雜交包括（ ）。A. 組織細胞的固定 B. 預雜交 C. 雜交 D. 沖洗14. 下列哪些屬于核酸原位雜交的常用固定液（ ）。A. 10%甲醛 B. 4%多聚甲醛 C. 乙醇：冰醋酸（3：1） D.

10、 戊二醛15. RNA酶保護分析法可用于（ ）。A. mRNA定量 B. mRNA定性 C. mRNA末端定位 D. 確定內(nèi)含子在相應基因中16. 核酸酶S1能降解（ ）。A. DNA 單鏈 B. DNA雙鏈 C. RNA單鏈 D. DNA/RNA雜交雙鏈17. 根據(jù)檢測方法的不同，非核素標記物可分為以下幾類（ ）。A. 半抗原 B. 配體 C. 熒光素 D. 化學發(fā)光探針18. 下列物質(zhì)屬于半抗原的是（ ）。A. 親和素 B. 羅丹明 C. 生物素 D. 地高幸19. 核酸分子雜交所用探針采用體外標記法的優(yōu)點是（ ）。 A.安全系數(shù)高 B.需要活體生物或細胞培養(yǎng)系統(tǒng)C.探針，核酸分離和純化及

11、儲存很方便D.體外標記一般比體內(nèi)標記的比放射活性高20. 化學法體外標記核酸探針最常用的是（ ）。A. 125I B. 光敏生物素 C. 3H D. 32P21. DNA探針的酶促標記法包括（ ）。A. 缺口平移法 B. 隨機引物法 C. PCR標記法 D. 末端標記法22. 探針的純化包括（ ）。 A乙醇沉淀法 B. SephadexG-50 C. 甲醇沉淀法 D. 絲柱離心法23 DNA變性后的理化性質(zhì)的變化有（ ）。A. 粘度降低 B. 密度增加 C. 紫外吸收值增加 D. 熔點減小24. Southern雜交結(jié)果檢測包括（ ）。A放射自顯影 B. 比色或化學發(fā)光檢測C. 酶切圖譜分析

12、D. 凝膠電泳分離25. Southern雜交在醫(yī)學中的應用包括（ ）。 A. 酶切圖譜分析 B. 特定基因定性和定量 C. 基因突變分析 D. 限制性片段長度多態(tài)性的分析四. 填空題:1. 核酸分子雜交中，雜交的雙方分別稱為 與 。2. 核酸分子雜交中已知的核酸序列稱為 。3. 適當?shù)碾娪揪彌_液中，DNA在電場作用下，由負極向正極泳動，分子越大，泳動速度 。4. 當促使變性的因素解除后，兩條DNA又通過堿基互補配對結(jié)合形成DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)，稱為 。5. 在DNA的堿基組成中，AT之間是 氫鍵，GC之間是 氫鍵。 6. 鑒別DNA靶分子的雜交稱為 ，鑒別RNA靶分子的雜交稱為 。7. 根據(jù)檢測對象的不同，可將原位雜交分為 和 。8. 常用的液相雜交有 和 。9RNA酶保護分析法（RPA）的基本程序包括： 、 、 、 、 。10. 液相雜交的核酸酶S1保護分析法可用于 、 、和 。11. 核酸探針包括： 、 、 和 。12. 在用核酸標記的探針，大多數(shù)標記方法需要的是-32P，末端標記必須使用 。13.核酸的體外標記法分為 和 。14.核酸的體外標記法中的酶法最常用的是 和 標記。五、簡答題1、DNA變性的常用方法有哪幾種？2、簡述DNA的復性過程。3、一個良好固相支持物應具備哪些特性？4、試比較硝酸纖維素膜、尼龍膜和化學活化