人感染h7n9禽流感標(biāo)本采集要求課件

1、 人感染人感染H7N9禽流感病毒的病原學(xué)禽流感病毒的病原學(xué) 人感染人感染H7N9禽流感監(jiān)測病例定義禽流感監(jiān)測病例定義 標(biāo)本采集種類標(biāo)本采集種類 標(biāo)本采集主要器材和試劑標(biāo)本采集主要器材和試劑 標(biāo)本采集方法標(biāo)本采集方法 標(biāo)本的保存、運送標(biāo)本的保存、運送 標(biāo)本采集要求標(biāo)本采集要求 禽流感病毒屬正粘病毒科甲型流感病毒屬。禽甲型流感病毒顆粒呈多形性，其中球形直徑80120nm，有囊膜。基因組為分節(jié)段單股負(fù)鏈RNA。 依據(jù)其外膜血凝素（H）和神經(jīng)氨酸酶（N）蛋白抗原性不同，目前可分為16個H亞型（H1H16）和9個N亞型（N1N9）。 禽甲型流感病毒除感染禽外，還可感染人、豬、馬、水貂和海洋哺乳動物。可感

2、染人的禽流感病毒亞型為H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3。 此次報道的為全球首次發(fā)現(xiàn)人感染H7N9禽流感病毒。該病毒為H7N9和H9N2重配的新型病毒，其內(nèi)部基因來自于H9N2禽流感病毒，基因序列分析表明為禽源病毒。 同時具備以下4項條件1、發(fā)熱(腋下體溫38)；2、具有肺炎的影像學(xué)特征；3、發(fā)病早期白細(xì)胞總數(shù)降低或正常,或淋巴細(xì)胞分類計數(shù)減少；4、不能從臨床或?qū)嶒炇医嵌仍\斷為常見病原所致肺炎。 除第除第4條不同于不明原因肺炎病例定義，以上三條均相符。條不同于不明原因肺炎病例定義，以上三條均相符。不不明原因肺炎第明原因肺炎第4 條為：經(jīng)規(guī)范抗菌藥物治療條為：經(jīng)規(guī)范抗菌藥物治療35

3、天，病情無天，病情無明顯改善或呈進(jìn)行性加重。明顯改善或呈進(jìn)行性加重。 醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)及時采集病例相關(guān)臨床樣本。1、上呼吸道標(biāo)本上呼吸道標(biāo)本（包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液）；2、下呼吸道標(biāo)本下呼吸道標(biāo)本（如氣管吸取物、肺洗液、肺組織標(biāo)本）3、血清標(biāo)本血清標(biāo)本（發(fā)病7天內(nèi)急性期血清以及間隔2-4周的恢復(fù)期血清）；4、尸檢標(biāo)本尸檢標(biāo)本（如病人死亡，應(yīng)當(dāng)盡可能說服家屬同意尸檢，及時進(jìn)行尸體解剖，采集肺組織、氣管、支氣管等組織標(biāo)本）；5、應(yīng)當(dāng)盡量采集病例發(fā)病早期發(fā)病早期的呼吸道標(biāo)本（尤其是下呼吸道標(biāo)本）?！卑l(fā)燒72小時標(biāo)本” 1、拭子：WHO及美國CDC規(guī)定，鼻煙拭子采集只能用塑料桿的滌

4、綸或人造棉拭子（如常用的聚酯纖維拭子），不能用藻酸鈣拭子或木桿拭子，因可能使某些病毒失活或抑制PCR；脫脂棉含有熒光物質(zhì)，影響實時應(yīng)熒光定量PCR結(jié)果。 2、壓舌板 3、3ml Hanks液螺口采樣管 4、封口袋 5、冷藏運輸包 6、油性標(biāo)記筆或標(biāo)簽紙 7、樣品登記表 8、真空采血管 9、個人防護(hù)裝備 鼻咽拭子采樣是流感病原學(xué)監(jiān)測中的一個重要環(huán)節(jié),操作簡單,但在流感監(jiān)測工作中卻極為重要。標(biāo)本采集的時間、位置及質(zhì)量對能否分離到病毒或提取到有活性的RNA至關(guān)重要，而標(biāo)本保存與運輸不當(dāng)，也會影響病毒的分離。為提高病毒的分離率，在用于病毒分離樣品的采集數(shù)量、類型和地點方面，實驗室技術(shù)人員應(yīng)與流行病學(xué)人

5、員達(dá)成共識。一般來說，用于病毒分離的樣品應(yīng)與血樣同時采集，以便進(jìn)行血清學(xué)診斷。 1 鼻拭子 采集標(biāo)本時，囑咐病人頭部盡量保持不動，將聚酯纖維頭拭子輕輕轉(zhuǎn)動緩緩插入病人鼻孔至顎部(注意：不可太用力，但要盡量深，通常5cm以上)，停留數(shù)秒吸取分泌物，輕輕旋轉(zhuǎn)取出拭子，置采樣管折斷手接觸部位的塑料柄，使拭子浸泡至采樣液中，旋緊管蓋。 2 咽拭子 囑咐病人放松，發(fā)“啊”聲， 立即用壓舌板壓住病人舌前23，聚酯纖維頭拭子適度用力多次抹擦懸雍垂（腭垂或小舌，見圖）后部咽后壁及雙側(cè)扁桃體，避免觸及舌部，取出后置采樣管，折斷手接觸部位的塑料柄，使拭子浸泡至采樣液中，旋緊管蓋。 3、切記：、切記：咽拭子與鼻拭子

6、采到一個咽拭子與鼻拭子采到一個Hanks管（管（23ml ）。如商品化采樣管液）。如商品化采樣管液體過多，采樣前倒掉一部分，以提高病毒體過多，采樣前倒掉一部分，以提高病毒濃度及陽性率。聚丙烯拭子采樣前不需用濃度及陽性率。聚丙烯拭子采樣前不需用生理鹽水濕潤，以吸收更多的分泌物。生理鹽水濕潤，以吸收更多的分泌物。 4、漱口液標(biāo)本：在病人發(fā)熱72小時內(nèi)盡早采集。先讓病人咳嗽幾聲，將5-10ml無菌生理鹽水（不含青霉素）倒入病人口中，讓病人頭向后傾并發(fā)出“噢”的聲音，反復(fù)幾次。將漱口液吐入50ml帶墊圈的螺口塑料離心管中，旋緊管蓋。 5、尸檢組織標(biāo)本：病人死亡后應(yīng)盡早進(jìn)行解剖，采集肺、氣管、腎、脾、肝

7、、心臟、腦、血凝塊等組織和淋巴結(jié)等重要器官標(biāo)本。每一采集部位分別使用不同消毒器械；每種組織應(yīng)多部位取材，每部位應(yīng)取2050g，淋巴結(jié)2個，分別置于50ml帶墊圈的無菌螺口塑料管中，立即置于-70以下保存或冷藏（48）送至有關(guān)實驗室。尸檢組織標(biāo)本對于病原學(xué)研究非常重要，應(yīng)盡量多采集。 標(biāo)識標(biāo)識：油性記號筆或標(biāo)簽紙在采樣管上標(biāo)記標(biāo)本名稱、姓名、編號等； 包裝包裝：符合符合“生物安全相關(guān)規(guī)定生物安全相關(guān)規(guī)定” 所采集的標(biāo)本首先用封口袋密封，周圍最好包裹吸水緩沖材料，用第二個封口袋再次密封，放入帶冰排的標(biāo)本運輸箱； 填寫填寫“不明原因肺炎病例/聚集性病例標(biāo)本送檢表”，送檢表用另一個封口袋密封，不要與標(biāo)本放到一起； 于24 小時內(nèi)送當(dāng)?shù)貒伊鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室檢測，最遲不超過48小時，如果有-70冰箱，可長期保存。 無菌操作：采樣人員須以無菌操作采集各類標(biāo)本。采集標(biāo)本所使用的容器、采樣液等均應(yīng)無菌。 標(biāo)識：每份標(biāo)本必須標(biāo)明標(biāo)本編號、標(biāo)本種類及采集日期。采集單位應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)標(biāo)本信息的登記、收集和管理，詳細(xì)記錄信息，并認(rèn)真填寫“不明原因肺炎病例/聚集性病例標(biāo)本送檢表”。不明原因肺炎病例標(biāo)本送檢表.doc 所有標(biāo)本的收集、運輸和保藏都應(yīng)裝在有螺旋蓋的塑料管中，以防止開、關(guān)標(biāo)