人參蛋白抗輻射損傷作用研究

1、人參蛋白抗輻射損傷作用研究         11-04-26 13:43:00     編輯：studa20                作者：李紅艷，趙雨，孫曉迪，白雪媛，趙大慶 【摘要】  目的研究人參蛋白的抗輻射損傷作用。方法以60Co-射線一次性照射小鼠全身，觀察人參蛋白對照射小鼠外周血白細胞數(shù)，骨

2、髓細胞微核數(shù)，紅細胞超氧化物歧化酶（SOD）活性，肝臟丙二醛（MDA）含量以及胸腺、脾臟指數(shù)的影響。結果人參蛋白能增加輻射后小鼠外周血白細胞數(shù)，減少骨髓細胞微核數(shù)，增加紅細胞SOD活性，抑制肝臟MDA含量升高，提高胸腺及脾臟臟體指數(shù)。結論人參蛋白對射線所致小鼠輻射損傷有較好的保護作用。 【關鍵詞】  人參蛋白； 小鼠； 輻射損傷Abstract：ObjectiveTo observe the protective effect of ginseng protein against radiation injury in miceMethodsThe model was made in

3、 mice by 60Co- radiation. The quantity of peripheral white blood cells (WBC) and bone marrow cells micronucleus were counted, respectively. The activity of SOD in red blood cell, the content of MDA in hepar, and the weight of thymus and spleen were determined, respectively.ResultsGinseng protein cou

4、ld increase the quantity of WBC,the activity of SOD and index of spleen and thymus organ, reduce the quantity of bone marrow cells micronucleus and the content of MDA. ConclusionGinseng protein is effective in protecting the -radiation injury in mice.Key words：Ginseng;   Mice;  

5、Radiation injury人參為五加科植物人參Panax ginseng C. A. Meyer的干燥根。大量研究顯示，人參單味藥及復方藥均具有明顯的抗輻射作用1，但目前研究大多針對人參皂苷及多糖類，認為皂苷與多糖是人參抗輻射作用的主要成分26，對于蛋白類成分抗輻射研究未見報道。本實驗通過觀察人參蛋白對輻射小鼠損傷的保護作用，為進一步研究人參蛋白的抗輻射作用奠定基礎。1   材料與儀器1.1  藥物5年生人參購自吉林靖宇縣，為五加科植物人參(Panax giseng C.A. Mey.的干燥根。人參蛋白樣品為本實驗室制備，經(jīng)Bradford蛋白含量試劑盒法測

6、定蛋白含量為80%。1.2   動物由吉林大學實驗動物中心提供的ICR小鼠，雄性，體質量1822 g。動物質量合格證號：10-1023。1.3   儀器與試劑貝克曼-庫爾特5分類血球計數(shù)儀，Backman公司；XS-212-201雙目光學顯微鏡，Jnoec公司；UV mini-1240型紫外可見分光光度計，Shimadzu公司；SOD試劑盒、MDA試劑盒，南京建成生物研究所。2  方法2.1  動物分組取40只小鼠，隨機分為4組，即正常對照組，輻射對照組，人參蛋白高劑量組（1 mg/g）及人參蛋白低劑量組（0.5 mg/g）。各組均為

7、灌胃給藥，1 ml/次，對照組灌服等體積蒸餾水。連續(xù)給藥7 d后，除正常對照組外，其余3組均實施一次性60Co-射線全身照射，照射劑量為2 Gy。2.2  外周血白細胞計數(shù)照射后24 h尾靜脈采血20 l，加入到0.38 ml 2%HAc溶液中，充分混勻，加入血球計數(shù)板中，在顯微鏡下讀取白細胞(WBC)個數(shù)。2.3  骨髓細胞微核計數(shù)照射后24 h小鼠頸椎脫臼處死，取胸骨，用止血鉗擠出骨髓液與玻片一端的小牛血清混勻，常規(guī)涂片。涂片自然干燥后放入甲醇中固定510 min。將固定好的涂片放入Giemsa應用液中，染色1015 min。立即用蒸餾水沖洗，晾干，鏡檢。選擇細胞完整、

8、分散均勻、著色適當?shù)膮^(qū)域，在油鏡下觀察。以有核細胞形態(tài)完好作為判斷制片優(yōu)劣的標準。2.4  紅細胞SOD活性及肝臟MDA含量測定小鼠頸椎脫臼處死后，立即眼球取血并剝取肝臟。全血經(jīng)生理鹽水沖洗，冷雙蒸水混合、95乙醇振蕩、三氯甲烷抽提制備SOD抽提液，按照試劑盒說明書測定SOD活力。肝組織經(jīng)生理鹽水沖洗，磷酸鹽緩沖液勻漿制成5組織勻漿液，取上清按照試劑盒說明測定MDA含量。2.5  臟體指數(shù)計算照射24 h后，分別對各受試小鼠進行稱重。小鼠處死后分別取出胸腺和脾臟稱量，計算胸腺、脾臟的臟體指數(shù)比。2.6  數(shù)據(jù)處理與分析數(shù)據(jù)以±s表示，組間差異按Poisson分布進行t檢驗。3  結果3.1  人參蛋白對輻射小鼠血液白細胞數(shù)及骨髓細胞微核數(shù)的影響顯微鏡下讀取計數(shù)板中白細胞個數(shù)，計算計數(shù)池中4個大方格中白細胞總數(shù)：白細胞數(shù)（109/L）=4個大方格中白細胞總數(shù)/4 ×稀釋倍數(shù)×107；每只動物計數(shù)1 000個嗜多染紅細胞，計算骨髓細胞微核率，以千分率表示。結果見表1。表1  人參蛋白對白細胞數(shù)及骨髓微核數(shù)的影響（略）由表1可見，輻射對照組與正常對照組比較，WBC數(shù)明顯降低，微核率明顯升高，說明造模成功。人參蛋白組較輻射對照組小鼠WBC數(shù)明顯增多，微核率明顯降低