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1、最近按丁香園的帖子進(jìn)行免疫鈿胞化學(xué)染色，結(jié)果 出來(lái)了?？偨Y(jié)如下：L上午做的爬片晾到下午開(kāi)始染色2. PBS浸冼爬片3遍,每遍5分鐘oc 滿加二抗jr 1$會(huì)M)承ifI3PBS沒(méi)洗3遍X5分鐘 14.取出爬片”將PBS甩掉，擦凈細(xì)胞周闔的PBS屆持爬片上少量液體但7不 能干片#擦一張爬片海一張爬片厲加試?yán)鸆,蜉育20分鐘15.PBS諛洗3遍X5分鐘16.逹光配制DAB顯色液上20,先加裁憎水,再加A液德勻后加B：液,C液屈勻，51/ 入F 117.取出爬片，將PBS甩掉，擦凈細(xì)胞周囲的PBS,保持爬片上少量液體但不能干片,擦一張爬片厲一張爬片，摘加DAB, 10 鐘左右顯色。18o水冼切片丿蘇

2、木素復(fù)染，固淀億透朗，封片口第十一節(jié)細(xì)胞免疫熒光1) 在六孔板中換附合適巒廢的細(xì)胞；2) 提詢將PBS放入4。冰箔預(yù)冷，用預(yù)冷的PBS請(qǐng)洗鈿胞，洗三次以去掉 戎翱的死細(xì)胞；t 3) 提it將無(wú)木甲醇放衣.-20。C冰箱里預(yù)冷,向空中加入預(yù)冷的無(wú)水屮醉以 穿邃固定細(xì)胞*展-20。C冰霜里放置loniin;4)用槍頭移去孔中的無(wú)水甲醉,用TBST沖冼細(xì)胞表面共洗3次，毎次lOmin;5)向夫孔板的每個(gè)孔中加入100訂的5%山羊血請(qǐng)對(duì)細(xì)於封閉p喳溫.放置Ih二6)封閉結(jié)束后,用TBST沖洗細(xì)胞表面卩每次lOmin;7)向六孔板的每個(gè)孔中加入80nl種釋好的一抗抗體，放入4C冰箔過(guò)夜孵8) 抗孵育結(jié)束后，用TBST沖洗細(xì)胞表面，共洗3次毎；k lOmin; C9%9) 向六孔板的毎個(gè)孔中加入80T 種科好的二抗抗體.用錫緘包住頭孔板瘦光孵育Ih;10) 二抗孵育結(jié)束后，用TBST沖洗細(xì)胞表面共冼3次，每次lOmin;11) 向空中摘加DAPI種釋液(1:1000種釋丿 室溫放置l-2min;12) 向孔中滿加TBST請(qǐng)冼細(xì)胞,5min;13

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