中藥預(yù)處理對動物模型HIRI的防護作用

1、中藥預(yù)處理對動物模型HIRI的防護作用     【關(guān)鍵詞】  缺血     肝臟的缺血再灌注損傷(Ischemia Reperfusion Injury，IRI）是導(dǎo)致肝葉切除、肝移植術(shù)后器官功能障礙和衰竭的重要因素1，為肝臟外科尚未完全解決的棘手問題。因此，如何在有效控制入肝血流、減少術(shù)中出血的同時，提高肝臟對缺血的耐受性，減輕肝臟的缺血再灌注損傷，是肝臟外科研究的中心內(nèi)容。目前，針對肝臟缺血再灌注損傷（Hepatic Ischemia Reperfusion Injury， HIRI）這一問題，可采取

2、缺血預(yù)處理、間歇血流阻斷和藥物預(yù)處理等措施加以防護，其中藥物預(yù)處理是利用某些活性物質(zhì)直接或間接的藥理作用來達(dá)到類似缺血預(yù)處理的保護作用2?，F(xiàn)就中藥預(yù)處理對動物模型HIRI的防護作用研究作一綜述。    1  缺血再灌注損傷的發(fā)生機制3    IRI是一個多因素參與的病理生理過程，發(fā)病機制主要與以下因素相關(guān)。    1. 1  代謝性酸中毒    肝缺血后， 肝臟細(xì)胞供氧不足，無氧糖酵解增加，導(dǎo)致代謝性酸中毒。再灌注后，代謝性酸中毒被迅速糾正，增強了pH依賴

3、性酶類，如磷脂酶、蛋白水解酶等的活性，促進(jìn)了細(xì)胞的死亡，這種現(xiàn)象稱為pH反常。    1. 2  氧自由基的產(chǎn)生    再灌注時主要通過黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)、吞噬細(xì)胞系統(tǒng)和線粒體呼吸鏈系統(tǒng)三條途徑激發(fā)氧自由基。氧自由基一方面可直接損傷肝細(xì)胞膜，導(dǎo)致細(xì)胞的破壞;同時又可損傷內(nèi)皮細(xì)胞，引起微循環(huán)完整性的喪失和血流的減少，是缺血再灌注損傷的主要原因。    1. 3  鈣超載    鈣超載引起肝損傷的機理是：細(xì)胞內(nèi)高濃度Ca2+可促使黃嘌呤脫氫酶向黃嘌呤氧化酶轉(zhuǎn)化，

4、從而為氧自由基的產(chǎn)生提供了催化劑；枯否細(xì)胞(Kupffer cell， KC)的鈣超載是其被激活的根本原因，激活的KC可通過釋放大量毒性介質(zhì)參與或介導(dǎo)肝臟損傷。此外內(nèi)皮細(xì)胞的鈣超載可導(dǎo)致肝內(nèi)微循環(huán)阻抗增大，使再灌注微循環(huán)血流量降低。    1. 4  無流現(xiàn)象    缺血再灌注可引起肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡、壞死， 從而導(dǎo)致許多肝臟微循環(huán)區(qū)域血流的完全停止。    2  中藥在HIRI防治方面的優(yōu)勢    隨著近年來生物化學(xué)、分子生物學(xué)的發(fā)展，肝臟缺血再灌注的生

5、化過程及分子機制逐漸明確，眾多學(xué)者針對缺血再灌注損傷的發(fā)病機制，提出諸多防止和減輕HIRI的方法和措施，譬如縮短熱缺血時間、缺血預(yù)處理、藥物預(yù)處理，在此只說藥物預(yù)處理。對HIRI具有預(yù)處理效果的藥物主要有鈣通道阻滯劑、自由基清除劑、抗細(xì)胞凋亡劑以及具有改善微循環(huán)或細(xì)胞能量代謝等藥物4。然而，其中許多藥物具有較大的毒副作用，因此，諸多中藥制劑成為熱點，其優(yōu)勢可用“廣、小、多”三個字概括即安全范圍廣、毒副作用小、作用靶點多。丹參能防止HIRI時肝細(xì)胞內(nèi)鈣超載，具有減輕氧自由基(oxygen free radicals，OFR)和脂質(zhì)過氧化損傷；阻斷FAS和穿孔素的交叉作用途徑；穩(wěn)定細(xì)胞膜、細(xì)胞器膜

6、的完整性等功能，這些功能能明顯減輕對再灌注后肝細(xì)胞的損害，充分體現(xiàn)其多靶點的優(yōu)勢。    3  相關(guān)中藥對HIRI的防護作用    3.1  活血化瘀藥    現(xiàn)醫(yī)學(xué)研究表明，丹參具有改善微循環(huán)、抗OFR等作用。盧綺平等5研究發(fā)現(xiàn)， 3種不同濃度的丹參均有阻止跨膜內(nèi)流作用，且在低濃度組即可體現(xiàn)， 并較“異博停”作用顯著。因此認(rèn)為丹參可能是作為一種選擇性作用“受體操縱性Ca2+通道”藥物在HIRI中發(fā)揮重要作用?？梢姡⒆鳛殁}通道調(diào)節(jié)劑和OFR清除劑對HIRI能起到保護作用。 

7、;   王茂林等6通過大鼠模型觀察肝組織中丙二醛（malondialdehyde ，MDA）含量和血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine amiotransferase，ALT，舊稱谷-丙轉(zhuǎn)氨酶即GPT）的變化以及兩者變化的相關(guān)關(guān)系。結(jié)果顯示， 肝缺血再灌注時肝組織中MDA的含量及血清中ALT含量均顯著增高，且兩者成正相關(guān)，丹參能顯著降低肝組織MDA的含量及血清中的ALT、總膽紅素(total bilirubin， TB)含量，表明OFR參與了HIRI。    張文海等7研究了復(fù)方丹參對大鼠肝細(xì)胞線粒體再灌注損傷的影響，結(jié)果顯示應(yīng)用復(fù)方丹參使

8、復(fù)流后26h肝細(xì)胞和復(fù)流6h肝細(xì)胞線粒體的MDA的濃度顯著降低。通過分析可知，丹參作為復(fù)方丹參的主要成分，其能作為自由基清除劑增加內(nèi)源性超氧化物歧化酶（Super Oxide Dismutase，SOD）的活性，可有效抑制肝細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，阻滯血鈣的胞內(nèi)轉(zhuǎn)移8，且能有效改善肝臟的微循環(huán)。該實驗結(jié)果還提示復(fù)方丹參通過抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)保護線粒體的結(jié)構(gòu)和功能，維持肝細(xì)胞的能量代謝，從而在一定程度上減輕肝臟的再灌注損傷。    川芎嗪是中藥川芎中分離提純的一種生物堿單體四甲基吡嗪。文獻(xiàn) 9，10采用大鼠模型， 觀察發(fā)現(xiàn)川芎嗪可顯著減少血清轉(zhuǎn)氨酶（AST和ALT）、

9、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase ，LDH）的溢出，減輕HIRI后肝細(xì)胞病理性損傷；明顯降低肝組織脂質(zhì)過氧化物、血栓素B2（TXB2），維持缺血及再灌注期SOD活性，提示TXB2、PGI2（前列環(huán)素）使微循環(huán)調(diào)節(jié)因子的代謝失衡是參與HIRI發(fā)生的重要因素之一， 川芎嗪可對抗TXB2的合成與活性， 從而減輕對肝臟的IRI。林麗娜等11用家兔HIRI模型， 同樣觀察到川芎嗪對HIRI時LDH活性的異常改變有明顯的保護作用。    王萬鐵等12利用家兔急性肝缺血模型觀察了3組家兔存活率和肝血流在阻斷前及開放后各時相點的血清GPT、GOT門冬氨酸氨基

10、轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase， AST）的舊稱和MDA的水平變化，結(jié)果顯示，川芎組家兔存活率顯著高于對照組和鹽水組，后兩組無顯著差異，而血GPT、GOT在阻斷及再開放后雖顯著增高，但均明顯低于對照組，川芎組MDA水平明顯低于對照組，且肝細(xì)胞諸多病理損害程度較對照組均明顯減輕。這些結(jié)果有力證明了川芎嗪有保護肝細(xì)胞功能的作用。早有研究表明，川芎嗪不僅是OFR清除劑，而且也是一種見效快、療效好的鈣通道阻滯劑。由此我們可以初步認(rèn)識到，川芎嗪對急性缺血性肝損害的治療作用機制可能是，通過抑制脂質(zhì)過氧化物的形成和Ca2+大量內(nèi)流而打破OFR介導(dǎo)的細(xì)胞損害之惡性循環(huán)，從而保護了

11、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性，延緩急性缺血性肝損傷的發(fā)生。    另一實驗證實，川芎嗪能提高機體內(nèi)源性SOD活性，同時可清除OFR，進(jìn)而降低組織脂質(zhì)過氧化程度，并且在肝臟缺血再灌注一定時間后加用川芎嗪后，能使本已降低的三磷酸腺苷(ATP)、總腺苷量（TAN）和肝臟的細(xì)胞能荷（EC）均明顯高于模型組，肝細(xì)胞形態(tài)學(xué)異常也明顯減輕，表明川芎嗪可通過增加肝細(xì)胞能量而減輕HIRI。    王萬鐵等13，14采用家兔HIRI模型進(jìn)行研究， 結(jié)果觀察到隨著肝缺血再灌注時間的延長， 肝組織浸潤程度逐漸加重， 肝細(xì)胞形態(tài)學(xué)異常變化顯著， 川芎嗪在明顯減輕上

12、述異常變化的同時，可明顯減輕HIRI時血小板最大聚集率、聚集坡斜率、最大聚集時間的異常變化。提示川芎嗪可通過抑制血小板聚集、粘附、活化而減輕HIRI。    阿魏酸鈉（Sodium ferulate，SF）是阿魏酸的鈉鹽，是桂皮酸的衍生物之一，中藥川芎、當(dāng)歸、升麻等多種中藥都含有阿魏酸。具有抗炎、抑制血小板凝集、抑制血栓合成酶活性和抗自由基等作用15 。賀德等16發(fā)現(xiàn)SF對HIRI有明顯保護作用，而這種作用主要是通過對抗OFR來實現(xiàn)的，同時發(fā)現(xiàn)SF保護組再灌注2 h后，其肝臟的結(jié)構(gòu)和生化指標(biāo)均不能達(dá)到肝缺血前水平。賀德17研究結(jié)果顯示阿魏酸鈉清除OFR的作用遜色于

13、SOD， 但兩者對大鼠肝缺血再灌注所致肝細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能損傷的保護作用基本相同。    三七總皂甙（Panax notoginseng saponins，PNS）是從中藥三七中提取的活性有效成分，具有抑制血小板聚集和增加腦血流量的作用。彭寶崗等18的研究結(jié)果表明三七總皂甙阻斷效果優(yōu)于維拉帕米和垂體后葉素， 且呈劑量依賴性。另采用Asadawa法在大鼠左中肝缺血模型上行體內(nèi)實驗， 結(jié)果也證明三七總皂甙對HIRI的減輕效果明顯優(yōu)于維拉帕米。梁力健等19發(fā)現(xiàn)三七總皂甙可提高HIRI模型生存率， 其在降低ALT水平、減輕肝細(xì)胞壞死以及提高SOD活性方面均優(yōu)于維拉帕米。&#

14、160;   Caspase-3是caspase家族蛋白酶的重要成員之一?，F(xiàn)在一般認(rèn)為caspase-3是細(xì)胞凋亡過程中最主要的終末剪切酶，也是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）其殺傷機制的重要組成部分。李遠(yuǎn)明等20利用大鼠原位肝移植模型研究證實，在供肝再灌注后6 h時肝細(xì)胞凋亡最明顯，該時點的凋亡指數(shù)明顯高于其他時點。結(jié)果顯示，供肝再灌注后早期（2 h）caspase-3和肝組織腫瘤壞死因子（Tumor necrosis factor-，TNF-）的表達(dá)高于后期（24 h）；供肝再灌注后6 h轉(zhuǎn)氨酶最高。這說明肝細(xì)胞凋亡在移植后再灌注早

15、期即可發(fā)生，并可能參與肝移植后缺血再灌注早期損傷過程，caspase-3和TNF-是促進(jìn)細(xì)胞凋亡基因，移植肝組織中兩者的表達(dá)與肝細(xì)胞凋亡正相關(guān)關(guān)系。此實驗在切取供肝前用PNS預(yù)處理，通過其拮抗鈣離子、減少自由基的產(chǎn)生、保護線粒體等途徑達(dá)到阻遏或延遲細(xì)胞凋亡的作用。    燈盞花素是從菊科短亭飛蓬燈盞花中提取分離的黃酮類有效成分，具有活血化瘀、消炎止痛等功效。許多研究表明，燈盞花素對重要器官的缺血再灌注損傷有保護作用21。燈盞花素可通過調(diào)節(jié)Ca2+內(nèi)流抑制Ca2+超載，減少自由基22，阻止細(xì)胞凋亡，減輕腦缺血再灌注所致的神經(jīng)損傷。史小琴等23通過在HIRI模型上應(yīng)用

16、燈盞花素的實驗表明，燈盞花素能通過抑制OFR的生成，減少OFR， 并提高肝缺血再灌后SOD 活性，對HIRI起良好的抗脂質(zhì)過氧化作用。同樣是史小琴等24研究表明，使用燈盞花素保護家兔HIRI后，SOD和谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase， GSH-Px)活性顯著升高，MDA水平下降，肝細(xì)胞病變程度明顯減輕，且減輕程度具有一定的劑量依賴關(guān)系。    銀杏葉主要成分為銀杏黃酮，具有斂肺平喘，活血止痛功效，現(xiàn)主要應(yīng)用于肺虛咳喘，以及許多心腦血管疾病。銀杏提取物（ginkgo biloba extract， EGb）的主要有效成分為黃酮類和內(nèi)

17、酯類化合物，具有廣泛的藥理作用，大量研究已證實EGb具有多價的藥理作用。 威瑪舒培博士在數(shù)以千次銀杏葉提煉過程中發(fā)現(xiàn)第761次試驗提取物所含EGb純度最高、藥效最佳，命名為EGb761。25 班潤武等26采用肝熱缺血再灌注動物模型的實驗證實，缺血再灌注3 h時凋亡最明顯，與不同時間組間肝、腎、肺、小腸凋亡指數(shù)相比有顯著性差異，而且以上四器官的形態(tài)、功能改變與細(xì)胞凋亡情況具有一致性。說明細(xì)胞凋亡可能是缺血再灌注后多器官損傷的重要機制之一，EGb761可能是通過阻止細(xì)胞凋亡途徑而發(fā)揮對多器官的保護作用。張建華等27對豚鼠和SD大鼠非協(xié)調(diào)性異種肝移植缺血再灌注模型移植前給予金納多(第4代銀杏葉提取制

18、劑)，發(fā)現(xiàn)移植后供肝灌注充分、均勻，肝灌注障礙有所改善；超微結(jié)構(gòu)觀察顯示肝細(xì)胞腫脹減輕，竇狀隙血小板減少，內(nèi)皮細(xì)胞較完整，表明金納多對異種肝移植缺血再灌注損傷有保護作用。    景生虹等28通過在大鼠自體原位肝移植模型上應(yīng)用銀杏內(nèi)酯（Ginkgolide，G），觀察G對大鼠移植HIRI的保護作用。結(jié)果顯示在移植肝PV復(fù)流5min、30min、120min時血清中的NO水平顯著升高，酶學(xué)指標(biāo)及肝細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)變化較模型組有顯著改善，說明G對大鼠移植HIRI有顯著的保護作用，并推測這種作用可能由NO介導(dǎo)。另外本實驗G組在肝移植PV復(fù)流2 h后肝組織ATP含量較模型組顯

19、著增高，而MDA含量較模型組顯著降低，進(jìn)一步證實了其對線粒體的保護作用和對自由基的清除作用。而這一結(jié)論恰好被“G所含的萜內(nèi)酯A和B能降低線粒體對氧需求的敏感性”29所解釋，即在缺血缺氧條件下，仍能通過維持線粒體的呼吸功能而發(fā)揮保護肝細(xì)胞的缺血再灌注損傷作用。    周杰斌等30利用EGB對大鼠缺血再灌注原位肝移植模型進(jìn)行預(yù)處理，發(fā)現(xiàn)HIRI時TNF-和白細(xì)胞介素1（Interleukin-1 ，IL-1）含量明顯升高，伴肝臟酶學(xué)指標(biāo)增高，尤以NS再灌注組顯著，但使用EGB后，實驗大鼠肝臟血清酶學(xué)指標(biāo)水平、肝形態(tài)學(xué)異常變化及肝組織TNF-、IL-1活性水平均顯著低于

20、NS再灌注組，表明銀杏葉提取物對缺血再灌注損傷有積極的防護作用，其機制可能是通過抑制 KC激活來減少KC釋放炎性細(xì)胞因子，降低肝組織TNF-和IL-1水平，減少OFR產(chǎn)生及減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。    HHI-的有效成分為杏仁提取物，具有很強的活血化瘀作用。已有研究31表明，用HHI-能改善臟器炎癥和缺血再灌注損傷時的微循環(huán)。微循環(huán)的改善可對造模動物起到保護作用。畢旭東等32利用大鼠部分肝缺血模型研究了HHI-預(yù)處理與缺血預(yù)處理對大鼠HIRI的保護作用，結(jié)果顯示HHI-可能通過改善肝臟微循環(huán)而改善大鼠機體之缺氧狀態(tài)，從而從源頭上減輕了HIRI。另外，還推斷HHI-能

21、通過抑制TNF-等細(xì)胞因子和細(xì)胞黏附分子的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，減輕肝組織中中性粒細(xì)胞的浸潤，從而減輕缺血再灌注對大鼠肝臟的損害。同樣是畢旭東等33發(fā)現(xiàn)HHI-的保護機制可能在于改善肝臟微循環(huán),減輕組織缺氧狀態(tài),并通過抑制TNF-和細(xì)胞間黏附分子（1intercellular adhesion mole-cule-1，ICAM-1）等細(xì)胞因子和細(xì)胞黏附分子的轉(zhuǎn)錄表達(dá),減輕肝組織中中性粒細(xì)胞的浸潤。    紅花是葡科植物紅花的花朵，其化學(xué)成分主要為紅花黃素、紅花苷和總酮類化合物等，其中查爾酮類化合物紅花黃素為紅花的主要有效成分，紅花黃素是紅花中具有較強藥理活性的一組生物堿?，F(xiàn)代

22、理學(xué)研究表明紅花有多種藥理作用。劉歆春34的研究將缺血再灌注組、紅花注射液預(yù)處理+缺血再灌注組分別與空白對照組比較，結(jié)果提示：在第一時間點，體內(nèi)此時已經(jīng)有一定量的損傷性細(xì)胞因子TNF-及自由基生成并對肝組織造成損傷；在第二時間點，缺血再灌注組、紅花注射液預(yù)處理+缺血再灌注組兩組ALT、AST的變化程度均進(jìn)一步加大，TNF-濃度與MDA活性更加增高，而SOD活性下降，同時，肝功能亦同步上升，并與TNF-濃度、MDA活性呈高度相關(guān)，與SOD活性呈負(fù)相關(guān)。此時，肝組織超微結(jié)顯示，肝竇淤血，炎性細(xì)胞浸潤，肝細(xì)胞呈點、片狀壞死(兩組均P<0.05)。這表明灌注期細(xì)胞因子及自由基釋放急劇增多，抗氧化

23、系統(tǒng)繼續(xù)被抑制，肝細(xì)胞損傷程度進(jìn)一步加重。結(jié)果提示，紅花注射液在肝缺血再灌注損傷中能顯著減少TNF-和自由基的生成，加速自由基的清除，對HIRI產(chǎn)生明顯的保護作用。    3.2  補虛藥    參附注射液是一種具有抗氧化作用的中成藥，其有益氣溫陽功效，可以提高SOD活性并減少MDA含量，使組織清除OFR的能力增強35。Na +- K+ - ATPase和Ca2 + - Mg2 + - ATPase是反映細(xì)胞能量代謝和建立跨膜的離子梯度與維持細(xì)胞內(nèi)外這些離子平衡的兩個重要的蛋白酶，它們在生理條件下又稱依賴ATP的膜結(jié)合蛋白酶

24、。肝臟缺血再灌注后兩者的活性降低，熱缺血時降低更為顯著，且與肝細(xì)胞死亡的方式相關(guān)36。彭松林等37研究發(fā)現(xiàn)參附注射液可通過改善兩酶的活性防護大鼠HIRI，同時證實參附注射液可以提高肝缺血再灌注后組織中Na + - K+ - ATPase、Ca2 + - Mg2 + - ATPase以及SOD的活性，說明缺血再灌注后Na + - K+ - ATPase和Ca2 + - Mg2 + - ATPase活性的改善可能是參附注射液提高SOD活性、抗OFR的結(jié)果。顧璽等38的實驗結(jié)果顯示， 肝缺血15min ， 再灌注1 、3 h后， 參附注射液組肝組織中Na + - K + - ATP 酶、Ca2 +-

25、 Mg2 + - ATP酶水平顯著高于NS 組( P < 0.05) 。說明參附注射液對大鼠HIRI早期具有保護作用。參附注射液對ATP 酶的保護機制可能與其有效成分人參皂苷具有增加抗氧化酶的活性、清除OFR、抑制細(xì)胞脂質(zhì)過氧化的作用有關(guān)。本研究顯示再灌注24h 后兩組間以上指標(biāo)均無顯著性差異， 表明在大鼠HIRI 晚期參附注射液保護作用不明顯。    黃芪屬補虛類之補氣藥，具有補氣升陽，益衛(wèi)固表，利水消腫，托毒排膿及斂瘡生肌之功效。其注射液也具有補中益氣升陽之功效，對缺血再灌注造成的臟器損傷具有保護作用。程夢琳等39利用動物模型觀察了黃芪注射液對腸缺血再灌

26、注肝損傷后大鼠肝組織NO和SOD含量變化，發(fā)現(xiàn)不同劑量的黃芪注射液能明顯改善腸缺血再灌注損傷大鼠血清、肝組織的NO含量和SOD活性，且大劑量的逆轉(zhuǎn)效應(yīng)更強，表明黃芪對大鼠腸缺血再灌注后肝損傷有保護作用。其機制可能與單味黃芪具有抗OFR作用和在本實驗中提高SOD活性及降低NO含量等作用有關(guān)。    加味生脈散（在中藥生脈散基礎(chǔ)上加入黃芪、柴胡）中的人參、黃芪、五味子可提高體內(nèi)銅、鋅元素含量，增強抗自由基能力，其中的柴胡有擴血管和作鈣通道阻滯劑的作用。方中生脈散具有益氣生津，斂陰生脈的作用，黃芪補氣生陽，益氣固表；當(dāng)歸、芍藥、百合補血養(yǎng)陰安神；丹參、郁金、川芎、葛根活

27、血化瘀；檀香寬胸理氣止痛。全方具有益氣養(yǎng)陰、活血化瘀、寬胸安神的作用。竇科峰等40觀察加味生脈散對急性肝缺血損傷的保護作用實驗發(fā)現(xiàn)，隨著肝缺血再灌注時間的延長， 肝組織內(nèi)MDA和血中ALT含量逐漸升高， 而SOD活性及銅、鋅含量逐漸下降， 但術(shù)前應(yīng)用加味生脈散， 則顯著地提高SOD活性和銅、鋅含量， 降低肝組織及血中MDA、ALT含量， 減少肝細(xì)胞變性、壞死的程度和范圍，提示加味生脈散對HIRI有顯著的保護作用。    3.3  祛風(fēng)濕藥    海風(fēng)藤屬祛風(fēng)濕散風(fēng)熱藥，具有祛風(fēng)除濕，通經(jīng)活絡(luò)之功效。海風(fēng)藤酮（kadsuren

28、one）從中草藥海風(fēng)藤中提取，是目前國內(nèi)外公認(rèn)的血小板激活因子(platelet-activating factor， PAF)拮抗劑，其對大鼠腦缺血再灌注損傷有明顯的保護作用41。史留斌等42做了海風(fēng)藤酮對大鼠肝臟局部缺血再灌注損傷的保護作用實驗，結(jié)果顯示，HIRI時肝組織PAF含量增高，損傷隨再灌注時間的延長而加重，而海風(fēng)藤酮可以拮抗損傷過程中PAF增高所致的藥理作用，減輕肝臟脂質(zhì)過氧化程度，改善肝功能，減輕肝臟病變程度。    漢防己屬祛風(fēng)濕清熱藥，具祛風(fēng)濕、止痛之功效，更宜利水退腫。漢防己乙素（demethyl-tetrandrine，d-Tet）與粉防己

29、堿均為防己科千金藤屬植物粉防己塊根的有效成分。已有報道認(rèn)為粉防己堿具有抗炎、抗纖維化、抗氧化及免疫調(diào)節(jié)作用，還可作為一種非特異性鈣離子拮抗劑，對心、腦、肝等器官的缺血再灌注損傷產(chǎn)生保護作用43,44。劉正等45用漢防己乙素對大鼠B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2， bcl-2)和Bax蛋白在肝缺血再灌注時表達(dá)的影響進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Bax表達(dá)在缺血再灌注組較生理鹽水對照組和d-Tet組略有升高，其病理損傷也明顯減輕，表明d-Tet可以減少Bax表達(dá)，增加Bcl-2表達(dá)?，F(xiàn)代生物學(xué)已證明，促進(jìn)凋亡基因bax具有孔形成能力，并能誘導(dǎo)細(xì)胞色素C的釋放，激

30、活caspase-9，啟動凋亡級聯(lián)反應(yīng)。抑制凋亡基因Bcl-2有能抑制Bax誘導(dǎo)細(xì)胞色素C的釋放的作用，從而阻止細(xì)胞凋亡。結(jié)合以往研究，d-Tet減輕HIRI的可能機制為：清除OFR；阻斷鈣離子通道；調(diào)節(jié)細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)的產(chǎn)生和釋放；調(diào)節(jié)相關(guān)凋亡基因的表達(dá)。         3.4  利水滲濕藥    川西樟牙菜俗稱藏茵陳，屬龍膽科樟牙菜屬植物。王芳等46用大鼠肝缺血再灌注模型觀察了藏茵陳對其血清中NO含量及肝細(xì)胞組織學(xué)的影響。結(jié)果顯示，用藏茵陳灌胃7 d，缺血再灌注45 min大鼠

31、血清NO含量明顯高于灌胃前，肝細(xì)胞形態(tài)學(xué)異常變化減輕，血管擴張充血，表明藏茵陳對HIRI有明顯的保護作用。其保護作用機制可能為藏茵陳可誘導(dǎo)肝細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放NO，使血管擴張，改善微循環(huán)，保證了再灌后肝臟的血供和營養(yǎng)物質(zhì)的供給，從而對肝臟的血液動力學(xué)形態(tài)、功能、代謝起到調(diào)節(jié)和保護作用。    另外，利水滲濕藥虎杖內(nèi)含多酚類化合物白藜蘆醇（resveratrol， RES）。已有對RES生物學(xué)功能的研究提示，其對缺血再灌注導(dǎo)致的組織損傷具有潛在保護作用。孫水平等47通過對雄性SD大鼠HIRI模型進(jìn)行白藜蘆醇處理，結(jié)果提示，RES能明顯促進(jìn)肝功能恢復(fù)，改善肝臟顯微

32、結(jié)構(gòu)，對成年大鼠肝臟的缺血再灌注損傷有良好的保護作用。    3.5 其他類型中藥    葛根為豆科植物野葛的干燥根，具有解肌退熱，透發(fā)麻疹功效，其主要成分為葛根異黃酮類化合物（Pueraria Lobata Isoflavones， PLIs），而葛根素是從中藥葛根中提取的一種異黃酮單體，具有改善組織微循環(huán)以及抗OFR、抗氧化等藥理作用48。    李濤等49的實驗結(jié)果顯示，Puerarin組反映肝損害的指標(biāo)ALT、MDA、內(nèi)皮素I (endothelln-I， ET-I)和細(xì)胞總鈣均較對照組明顯下降；

33、而NO、SOD等保護性指標(biāo)則明顯升高。在光鏡下各病理改變均較對照組明顯減輕，并可見肝細(xì)胞的再生，以上結(jié)果從功能和形態(tài)兩方面均充分表明Puerarin預(yù)處理能明顯減輕HIRI。    許冬武等50通過觀察葛根素注射液對家兔HIRI的防治作用后發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用葛根素治療后，血漿黃嘌呤氧化酶(xanthine oxidase ，XO)活性及MDA含量顯著下降，SOD、ALT活性均顯著增高，電鏡下肝細(xì)胞腫脹明顯減輕，線粒體大部分恢復(fù)正常，表明葛根素能夠減輕OFR介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)對肝臟的損害，增強機體的抗氧化應(yīng)激能力。葛根素還能阻止Na+的內(nèi)流，舒張微動脈，改善微循環(huán)障礙。&

34、#160;   小柴胡湯出自于傷寒論,有“寒熱并用,攻補兼施,和解少陽疏利三焦、調(diào)達(dá)升降運行氣血”(醫(yī)宗金鑒)的功效?，F(xiàn)代研究證實,全方中含有大量的黃芩素、人參皂甙等成分,可減少細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度,防止“鈣超載”發(fā)生，且兩者都是良好OFR清除劑。張征等52研究表明HIRI能促進(jìn)肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞凋亡的發(fā)生，小柴胡湯預(yù)處理具有對HIRI大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的保護作用（即可減輕肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞損傷）。    4  結(jié)語    綜上所述，不管是某味中藥的有效成分，還是中藥復(fù)方中藥， 都對HIRI具有一定的防護作用。

35、在預(yù)處理時，特別強調(diào)應(yīng)用保護藥物應(yīng)在再灌注前或同時，若在再灌注后應(yīng)用將收不到有效的防護效果。從本文所復(fù)習(xí)的文獻(xiàn)可以發(fā)現(xiàn)，在預(yù)處理動物模型HIRI所涉及的中藥中，以活血化瘀藥居多，其機制可能是：HIRI相當(dāng)于中醫(yī)學(xué)中的因瘀生熱、瘀熱互結(jié)、因瘀致郁、肝氣郁結(jié)、肝膽疏泄不利的病理狀態(tài)。故中藥防治HIRI以活血化瘀藥為主，有其針對性，小柴胡湯是針對病機發(fā)揮疏肝解郁、泄熱散瘀之功效,使肝膽氣機暢利以抗御不良刺激損害之典型復(fù)方，達(dá)到了辨證論治“治病究根”的靶向效應(yīng)。中藥是從多水平、多環(huán)節(jié)、多靶點對缺血或再灌造成損傷的肝臟進(jìn)行適應(yīng)性保護，可謂一種復(fù)合性調(diào)節(jié)。不管以上中藥如何循其徑而奏其效，我們還是不難發(fā)現(xiàn)它

36、們至少是通過以下若干途徑發(fā)揮對HIRI的防治作用：清除OFR；減輕鈣超載；提高內(nèi)源性SOD活性，減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng)；穩(wěn)定細(xì)胞膜，保護細(xì)胞器，阻遏或延遲細(xì)胞調(diào)亡；增加內(nèi)皮細(xì)胞合成/釋放NO介導(dǎo)對HIRI的保護作用，并減少ET-的合成/釋放；降低血清ALT、AST、TB、MDA等含量；抑制血小板聚集、黏附和活化；干預(yù)炎性細(xì)胞因子；提高某些酶活性以介導(dǎo)保護作用；保護線粒體，改善能量代謝等。    當(dāng)前的研究工作呈現(xiàn)以下特點：（1）動物實驗研究居多， 而臨床研究較少；（2）單味藥及其有效成分研究較多， 中藥復(fù)方研究較少；（3）應(yīng)用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)進(jìn)行研究較多， 而在純中醫(yī)藥理

37、論指導(dǎo)下探討HIRI的研究缺乏；（4）中成藥的預(yù)處理尚不能完全使受損肝組織和細(xì)胞恢復(fù)至初始之完好狀態(tài)。    對HIRI具有保護作用的中草藥主要成分，是否存在中草藥預(yù)處理的作用點，如何鑒定、純化其有效成分，如何有效分離其化學(xué)單體及提高其生物活性等，都是需要深入研究的問題。今后若能結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)，在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下， 尋找出防治HIRI的理想切入點， 還將大幅提高中藥對HIRI的防護效果。參考文獻(xiàn)】  1 Katori M，Buelow R，Ke B， et al. Heme oxgenase-1 over expression protects rat

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