殘留溶劑測(cè)定法

1、殘留溶劑測(cè)定法 藥品中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過(guò)程中使用的，但在工藝過(guò)程中未能完全去除的有機(jī)溶劑。藥品中常見(jiàn)的殘留溶劑及限度見(jiàn)附表1，除另有規(guī)定外，第一，第二，第三類溶劑的殘留限度應(yīng)符合附表1中的規(guī)定；對(duì)其他溶劑，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)工藝的特點(diǎn)，制定相應(yīng)的限度，使其符合產(chǎn)品規(guī)范，藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）或其他基本的質(zhì)量要求。 本法照氣相色譜法（通則0521）測(cè)定。 色譜柱 1、毛細(xì)管柱 除另有規(guī)定外，極性相近的同類色譜柱之間可以互換使用。 （1）非極性色譜柱固定液為100%的二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱。（2）極性

2、色譜柱固定液為聚乙二醇（PEG-20M）的毛細(xì)管柱。 （3）中極性色譜柱固定液為（35%）二苯基-（65%）甲基聚硅氧烷、（50%）二苯基-（50%）二甲基聚硅氧烷、（35%）二苯基-（65%）二甲基聚硅氧烷、（14%）氰丙基苯基-（86%）二甲基聚硅氧烷、（6%）氰丙基苯基-（94%）二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱等。 （4）弱極性色譜柱固定液為（5%）苯基-（95%）甲基聚硅氧烷、（5%）二苯基-（95%）二甲基聚硅氧烷共聚物的毛細(xì)管柱等。 2、填充柱以直徑為0.180.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他適宜的填料作為固定相。 系統(tǒng)適用性

3、試驗(yàn) （1）用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算，毛細(xì)管色譜柱的理論板數(shù)一般不低于5000,；填充柱的理論板數(shù)一般不低于1000。 （2）色譜圖中，待測(cè)物色譜峰與其相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。 （3）以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，對(duì)作品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，所得待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不大于5%；若以外標(biāo)法測(cè)定，所得待測(cè)物峰面積的RSD應(yīng)不大于10%。 供試品溶液的制備 1、頂空進(jìn)樣 除另有規(guī)定外，精密稱取供試品0.11g;通常以水為溶劑；對(duì)于非水溶性藥物，可采用N,N-二甲基甲酰胺，二甲基亞砜或其他適宜溶劑；根據(jù)供試品和待測(cè)溶劑的溶解度

4、，選擇適宜的溶劑且應(yīng)不干擾待測(cè)溶劑的測(cè)定。根據(jù)各品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要。 2、溶液直接進(jìn)樣 精密稱取供試品適量，用水或合適的有機(jī)溶劑使溶解；根據(jù)各品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測(cè)定的需要。 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取各品種項(xiàng)下規(guī)定檢查的有機(jī)溶劑適量，采用與制備供試品溶液相同的方法和溶劑制備對(duì)照品溶液；如用水作溶劑，應(yīng)先將待測(cè)有機(jī)溶劑溶解在50%二甲基亞砜或N,N-二甲基甲酰胺溶液中，再用水逐步稀釋。若為限度檢查，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定確定對(duì)照品溶液的濃度；若為定量測(cè)定，為保

5、證定量結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的實(shí)際殘留量確定對(duì)照品溶液的濃度；通常對(duì)照品溶液色譜峰面積不宜超過(guò)供試品溶液中對(duì)應(yīng)的殘留溶劑色譜峰面積的2倍。必要時(shí)，應(yīng)重新調(diào)整供試品溶液或?qū)φ掌啡芤旱臐舛取?#160;測(cè)定法 第一法（毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法） 當(dāng)需要檢查有機(jī)溶劑的數(shù)量不多，且極性差異較小時(shí)，可采用此法。 色譜條件柱溫一般為40100；常以氮?dú)鉃檩d氣，流速為每分鐘1.02.0ml;以水為溶劑時(shí)頂空瓶平衡溫度為7085，頂空瓶平衡時(shí)間為3060分鐘；進(jìn)樣口溫度為200；如采用火焰離子化檢測(cè)器（FID），溫度為250。 測(cè)定法取對(duì)照品溶液和供試品溶液

6、，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次，測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。 對(duì)色譜圖中未知有機(jī)溶劑的鑒別，可參考附表2進(jìn)行初篩。 第二法（毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法） 當(dāng)需要檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量較多，且極性差異較大時(shí)，可采用此法。 色譜條件柱溫一般在40維持8分鐘，再以每分鐘8的升溫速率升至120，維持10分鐘；以氮?dú)鉃檩d氣，流速為每分鐘2.0ml;以水為溶劑時(shí)頂空瓶平衡溫度為7085，頂空平衡時(shí)間為3060分鐘；進(jìn)樣口溫度為200；如采用FID檢測(cè)器，進(jìn)樣口溫度為250。 具體到某個(gè)品種的殘留溶劑檢查時(shí)，可根據(jù)該品種項(xiàng)下殘留溶劑的組成調(diào)整升溫程序。 測(cè)定法取

7、對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次，測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。 對(duì)色譜圖中未知有機(jī)溶劑的鑒別，可參考附表3進(jìn)行初篩。 第三法（溶液直接進(jìn)樣法） 可采用填充柱，亦可采用適宜極性的毛細(xì)管柱。 測(cè)定法取對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣23次，測(cè)定待測(cè)峰的峰面積。 計(jì)算法（1）限度檢查除另有規(guī)定外，按各品種項(xiàng)下規(guī)定的供試品溶液濃度測(cè)定。以內(nèi)標(biāo)法測(cè)定時(shí)，供試品溶液所得被測(cè)溶劑峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比不得大于對(duì)作品溶液的相應(yīng)比值。以外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，供試品溶液所得被測(cè)溶劑峰面積不得大于對(duì)作品溶液的相應(yīng)峰面積。 （2）定量測(cè)定按內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法計(jì)

8、算各殘留溶劑的量。 【附注】 （1）除另有規(guī)定外，頂空條件的選擇：  應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的沸點(diǎn)選擇頂空平衡溫度。對(duì)沸點(diǎn)較高的殘留溶劑，通常選擇較高的平衡溫度；但此時(shí)應(yīng)兼顧供試品的熱分解特性，盡量避免供試品產(chǎn)生的揮發(fā)性熱分解產(chǎn)物對(duì)測(cè)定的干擾。  頂空平衡時(shí)間一般為3045分鐘，以保證供試品溶液的氣-液兩相有足夠的時(shí)間達(dá)到平衡。頂空平衡時(shí)間通常不宜過(guò)長(zhǎng)，如超過(guò)60分鐘，可能引起頂空瓶的氣密性變差，導(dǎo)致定量準(zhǔn)確性的降低。  對(duì)照品溶液與供試品溶液必須使用相同的頂空條件。 （2）定量方法的驗(yàn)證當(dāng)采用頂空進(jìn)樣時(shí)，供試品與對(duì)照品處于不完全相同

9、的基質(zhì)中，故應(yīng)考慮氣液平衡過(guò)程中的基質(zhì)效應(yīng)（供試品溶液與對(duì)照品溶液組成差異對(duì)頂空氣-液平衡的影響）。由于標(biāo)準(zhǔn)加入法可以消除供試品溶液基質(zhì)與對(duì)照品溶液基質(zhì)不同所致的基質(zhì)效應(yīng)的影響，故通常采用標(biāo)準(zhǔn)加入法驗(yàn)證定量方法的準(zhǔn)確性；當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)加入法與其他定量方法的結(jié)果不一致時(shí)，應(yīng)以標(biāo)準(zhǔn)加入法的結(jié)果為準(zhǔn)。 （3）干擾峰的排除供試品中的未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物對(duì)殘留溶劑的測(cè)定產(chǎn)生干擾。干擾作用包括在測(cè)定的色譜系統(tǒng)中未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物與待測(cè)物的保留值相同(共出峰)；或熱降解產(chǎn)物與待測(cè)物的結(jié)構(gòu)相同（如甲氧基熱裂解產(chǎn)生甲醇）。當(dāng)測(cè)定的殘留溶劑超出限度，但未能確定供試品中是否有未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解

10、物對(duì)測(cè)定有干擾作用時(shí)，應(yīng)通過(guò)試驗(yàn)排除干擾作用的存在。對(duì)第一類干擾作用，通常采用在另一種極性不同的色譜柱系統(tǒng)中對(duì)系統(tǒng)供試品再進(jìn)行測(cè)定，比較不同色譜系統(tǒng)中測(cè)定結(jié)果的方法。如兩者結(jié)果一致，則可以排除測(cè)定中有共出峰的干擾；如兩者結(jié)果不一致，則表明測(cè)定中有共出峰的干擾。對(duì)第二類干擾作用，通常要通過(guò)測(cè)定已知不含該溶劑的對(duì)照樣品來(lái)加以判斷。 （4）含氮堿性化合物的測(cè)定普通氣相色譜儀中的不銹鋼管路，進(jìn)樣器的襯管等對(duì)有機(jī)胺等含氮堿性化合物具有較強(qiáng)的吸附作用，致使其檢出靈敏度降低，應(yīng)采用惰性的硅鋼材料或鎳鋼材料管路；采用溶液直接進(jìn)樣法測(cè)定時(shí)，供試品溶液應(yīng)不呈酸性，以免待測(cè)物與酸反應(yīng)后不易氣化。 

11、;通常采用弱極性的色譜柱或其填料預(yù)先經(jīng)堿處理過(guò)的色譜柱分析含氮堿性化合物，如果采用胺分析專用柱進(jìn)行分析，效果更好。 對(duì)不宜采用氣相色譜法測(cè)定的含氮堿性化合物，如N-甲基吡咯烷酮等，可采用其他方法如離子色譜法等測(cè)定。 （5）檢測(cè)器的選擇對(duì)鹵素元素的殘留溶劑如三氯甲烷等，采用電子捕獲檢測(cè)器（ECD），易得到高的靈敏度。 （6）由于不同的實(shí)驗(yàn)室在測(cè)定同一供試品時(shí)可能采用了不同的實(shí)驗(yàn)方法，當(dāng)測(cè)定結(jié)果處于合格與不合格邊緣時(shí)，以采用內(nèi)標(biāo)法或標(biāo)準(zhǔn)加入法為準(zhǔn)。 （7）頂空平衡溫度一般應(yīng)低于溶解供試品所用溶劑的沸點(diǎn)10以下，能滿足檢測(cè)靈敏度即可；對(duì)于沸點(diǎn)過(guò)高的溶劑，如甲酰胺，2-甲氧基乙醇，2-乙氧基乙醇，乙二醇，N-甲基吡