食品添加劑新品種氨基乙酸羥基乙腈法

1、附件1食品添加劑新品種 氨基乙酸（羥基乙腈法）英文名稱：Glycine（Glycolonitrile method）功能分類：增味劑、食品用香料(一) 用量及使用范圍用量及使用范圍符合GB2760中氨基乙酸（又名甘氨酸）的規(guī)定。(二) 質量規(guī)格要求1 范圍本質量規(guī)格適用于以羥基乙腈氨化、堿解制得的甘氨酸鈉，經(jīng)離子交換、膜脫色等工藝制得的食品添加劑氨基乙酸（羥基乙腈法）。2 分子式、結構式和相對分子質量2.1 分子式C2H5NO22.2 結構式2.3 相對分子質量75.07(按2013年國際相對原子質量)3 技術要求3.1感官要求：應符合表1 的規(guī)定。表1 感官要求項 目要 求檢驗方法色澤白色取

2、適量樣品，置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光線下，目視觀察其色澤和狀態(tài)。狀態(tài)結晶性顆粒或結晶性粉末3.2理化指標：應符合表2的規(guī)定。表2 理化指標項 目指 標檢驗方法甘氨酸（以干基計）,w/% 98.5101.5附錄A中A.4氯化物（以Cl計）, w/%0.007附錄A中A.5重金屬（以Pb計）/(mg/kg) 10附錄A中A.6干燥減量,w/%0.20附錄A中A.7灼燒殘渣,w/%0.10附錄A中A.8澄清度試驗通過試驗附錄A中A.9pH值（50g/L水溶液）5.57.0附錄A中A.10氨三乙酸,w/%0.05附錄A中A.11亞氨基二乙酸,w/%0.05附錄A中A.12硫酸鹽（以SO4計）,

3、w/%0.01附錄A中A.13砷（As）/(mg/kg) 1GB 5009.76附錄A檢驗方法A.1 安全提示本質量規(guī)格的檢驗方法中使用的部分試劑具有毒性或者腐蝕性，操作時應采取適當?shù)陌踩头雷o措施。A.2 一般規(guī)定本質量規(guī)格所用試劑和水在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T 6682規(guī)定的三級水。試驗中所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、制劑和制品，試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液；在沒有注明其他要求時均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603之規(guī)定制備。A.3 鑒別試驗A.3.1 試劑和材料A.3.1.1 茚三酮溶液：1g/L。 稱取1.0 g茚三

4、酮，溶于水，稀釋至1000 mL。 鹽酸溶液：1+3。 亞硝酸鈉溶液：100g/L。 稱取100 g亞硝酸鈉，溶于水，稀釋至1000mL。A.3.1.4 變色酸溶液 稱取0.5 g變色酸，加50 mL硫酸（2+1）溶解，搖勻，離心分離，使用上層清液。本溶液需使用前配制。A.3.2 分析步驟A.3.2.1 茚三酮試驗稱取約0.1g實驗室樣品（精確至0.01g），溶于100 mL水中，取此溶液5mL，加茚三酮溶液1mL，加熱至沸約3min內顯紫色。A.3.2.2 亞硝基試驗 稱取約1g實驗室樣品（精確至0.01g），溶于10mL水中，取此溶液5mL，加5滴鹽酸溶液和1mL新配制的亞硝酸鈉溶液，產(chǎn)生

5、無色氣體。取反應后剩余溶液5滴滴入試管中，煮沸后在水浴上蒸干，冷卻，向殘留物中加56滴變色酸溶液，在水浴中加熱約10min后顯深紫色。A.4 甘氨酸含量的測定A.4.1 方法提要試樣以甲酸為助溶劑，以冰乙酸為溶劑，以結晶紫為指示劑，用高氯酸標準溶液滴定，根據(jù)消耗高氯酸標準滴定溶液的體積計算甘氨酸的含量。A.4.2 試劑和材料 冰乙酸：分析純。 無水甲酸：分析純。 高氯酸標準溶液：c(HClO4)=0.1mol/L。 結晶紫指示劑：2g/L冰醋酸溶液。稱取0.2g結晶紫,溶于冰醋酸中，稀釋至100mL。A.4.3 分析步驟稱取約0.15g（精確至0.0001g）A.7.1 中干燥物A試樣，置于2

6、50mL干燥的錐形瓶中，加約2mL無水甲酸溶解，加30 mL冰乙酸，加2滴結晶紫指示液，用0.1mol/L高氯酸標準滴定溶液滴定至溶液由紫色變?yōu)榫G色為終點。在測定的同時，按相同的測定步驟，對不加試樣而使用相同數(shù)量的試劑溶液做空白試驗。A.4.4 結果計算甘氨酸含量（以干基計）的質量分數(shù)w1，數(shù)值以%表示，按公式（A.1）計算：················(A.1） 式中：V1 試料消耗高氯酸標準滴定溶液（A.4.2.3）體積的數(shù)值，

7、單位為毫升（mL）；V2空白試驗消耗高氯酸標準滴定溶液體積的數(shù)值，單位為毫升（mL）；C 高氯酸標準滴定溶液的實際濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；M 試料的質量，單位為克（g）；M 甘氨酸的摩爾質量，單位為克每摩爾（g/mol）（M=75.07）。試驗結果以平行測定結果的算術平均值為準（保留1位小數(shù)）。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不大于0.3%。A.5 氯化物（以Cl計）的測定A.5.1 試劑和材料 硝酸溶液：1+9。A.5.1.2 硝酸銀溶液：17g/L。 氯化物（Cl）標準溶液：0.1mg/mL。氯化物（Cl）標準溶液：稱取氯化鈉0.165g，置1000mL容量瓶中，

8、加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液，該貯備液濃度0.1mg/mL。臨用前，精密量取儲備液10mL置100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得氯化物標準溶液（每1mL相當于0.010mgCl）。A.5.2 分析步驟稱取約1.0g實驗室樣品，精確至0.01g，置于50mL比色管中，加30mL水溶解，作為試驗溶液，加6mL硝酸溶液酸化試驗溶液，再加1mL硝酸銀溶液，加水至50mL，搖勻，放置10min，所呈濁度與標準比濁溶液比較。標準比濁溶液制備：精密吸取氯化物標準溶液7mL，置于50mL比色管中，稀釋至與試驗溶液相同體積，與同體積試驗溶液同時同樣處理。A.5.3 結果判斷將試驗溶液比

9、色管和標準比濁溶液比色管同置于黑色背景上，在自然光下，自上向下觀察，其濁度不得大于標準比濁溶液。A.6 重金屬（以Pb計）的測定A.6.1 試劑和材料 氫氧化鈉溶液：43g/L。 硫化鈉溶液：100g/L，本溶液需使用前配制。 鉛（Pb）標準溶液：0.01mg/mL。A.6.2 分析步驟稱取約1.0g實驗室樣品，精確至0.01g，置于25mL比色管中，加5mL氫氧化鈉溶液，加水溶解并稀釋至25mL，加5滴硫化鈉溶液，搖勻，放置2min，所呈顏色不得深于標準。標準是精密吸取1mL鉛（Pb）標準溶液（含鉛0.01mg），與試樣同時同法處理。A.7 干燥減量的測定A.7.1 分析步驟稱取約1.0g實

10、驗室樣品，精確至0.0001g，置于預先在105±2干燥至恒重的稱量瓶中，平鋪，厚度小于5mm，在105±2的恒溫干燥箱中干燥3 h，置于干燥器中冷卻30 min稱量。保留干燥物（此為干燥物A）用作甘氨酸含量的測定。A.7.2 結果計算干燥減量的質量分數(shù)w2，數(shù)值以%表示，按式(A.2)計算：················(A.2） 式中：m干燥前試料的質量，單位為克(g)；m1干燥后試料的質量，單位為克(g)。取

11、兩次平行測定結果的算術平均值為測定結果，兩次平行測定結果的絕對差值不大于0.02%。A.8 灼燒殘渣的測定A.8.1 試劑和材料 硫酸:分析純。 硫酸溶液：1+8。A.8.2 分析步驟稱取23g實驗室樣品，精確至0.0001g，置于預先在800±25灼燒至恒重的瓷坩堝中，加入適量的硫酸溶液將樣品完全浸濕。用小火加熱緩緩至樣品完全炭化，冷卻。加約0.5mL硫酸浸濕殘渣，低溫加熱至硫酸蒸氣逸盡。在800±25灼燒45min。放入干燥器中冷卻至室溫，稱量。A.8.3 結果計算灼燒殘渣的質量分數(shù)w3，數(shù)值以%表示，按公式（A.3）計算：····

12、;·············(A.3） 式中：m試料的質量，單位為克（g）；m1殘渣的質量，單位為克（g）。取兩次平行測定結果的算術平均值為測定結果，兩次平行測定結果的絕對差值不大于0.01%。A.9 澄清度試驗A.9.1 方法提要將試樣溶于水，與標準比濁溶液進行比較。A.9.2 試劑和材料 硝酸溶液：1+2。A.9.2.2 糊精溶液：20g/L。 硝酸銀溶液：20g/L。 濁度標準溶液：含氯（Cl）0.01mg/mL。 量取c(HCl）=0.1000mol/L 鹽

13、酸標準溶液14.10mL±0.02mL，置于50 mL容量瓶中，稀釋至刻度。量取該溶液10.0mL±0.02mL于1000mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。A.9.3 分析步驟稱取1.0g 實驗室樣品，準確至0.01g，置于比色管中，加水溶解并稀釋至25mL，作為試驗溶液；取另一只比色管，準確加入0.20mL濁度標準溶液，加水至20mL，加1mL硝酸溶液，0.2mL糊精溶液及1mL硝酸銀溶液，加水至25mL，搖勻，避光放置15min，作為標準比濁溶液。在自然光下，自上向下觀察，試驗溶液的濁度不得大于標準比濁溶液的濁度。A.10 pH值的測定按GB/T 9724的規(guī)定進行。

14、測定時，稱取約1.0g 實驗室樣品，準確至 0.01g，加20mL無二氧化碳的水，溶解混勻后進行測定。A.11 氨三乙酸的測定A.11.1 方法提要在pH=1.62.0時，氨三乙酸與Fe3+離子定量絡合，以磺基水楊酸為指示劑，用硫酸鐵銨標準滴定溶液滴定至溶液微紫紅色。A.11.2 試劑和材料 硫酸：分析純。 磷酸：分析純。 鹽酸溶液：6mol/L。氯化亞錫溶液：400g/L。 硫磷混酸：取硫酸150mL，緩緩加入700mL水中，冷卻后再加入150mL磷酸，混勻。 二苯胺磺酸鈉指示液：5g/L。A.11.2.7 磺基水楊酸指示液：10g/L。 硫酸鐵銨標準滴定溶液：0.05mol/L 配制稱取硫

15、酸鐵銨FeNH4(SO4)2·12H2O24.1g，加水500mL，緩緩加入硫酸40mL，加熱使其溶解，冷卻，用水稀釋至1000mL，混勻。 標定精密吸取上述硫酸鐵銨溶液25mL于錐形瓶中，加鹽酸溶液10mL，加熱至近沸，滴加氯化亞錫溶液至無色，再過量12滴，在流水中冷卻，加入氯化汞飽和溶液10mL，搖勻，放置23min，再加入硫磷混酸10mL，加水至100mL，加二苯胺磺酸鈉指示液4滴，用重鉻酸鉀標準溶液 0.05mol/L滴定至溶液呈穩(wěn)定紫色。硫酸鐵銨標準滴定溶液濃度（單位mol/L）： 式中:c1重鉻酸鉀標準溶液的濃度，單位摩爾每升（mol/L）；V1消耗的重鉻酸鉀標準溶液體積

16、的數(shù)值，單位為毫升（mL）； V硫酸鐵銨溶液的體積，單位為毫升（mL）。A.11.3 分析步驟稱取10g實驗室樣品，精確至0.001g，置于250mL燒杯中，加入100mL溫度為 5055的水使溶解，加鹽酸溶液17mL，磺基水楊酸指示液1mL，在4050時，用硫酸鐵銨標準滴定溶液(A.11.2.8)滴定至溶液剛顯微紫紅色，硫酸鐵銨標準滴定溶液用量不超過0.5mL。A.12 亞氨基二乙酸的測定A.12.1 方法提要實驗室樣品用流動相溶解，以pH=2.2的磷酸二氫鉀水溶液和乙腈為流動相，使用強陰離子交換柱和紫外檢測器（195nm），對實驗室樣品中的亞氨基二乙酸進行高效液相色譜分離和測定，外標法定量

17、。A.12.2 試劑和材料A.12.2.1 乙腈：色譜純。 磷酸二氫鉀：分析純。 水：一級水。 磷酸：分析純。 磷酸溶液：50%。 亞氨基二乙酸標準品：已知亞氨基二乙酸質量分數(shù)98.0%。 A.12.3 儀器 高效液相色譜儀：具有可變波長紫外檢測器。 色譜數(shù)據(jù)處理機。 色譜柱：250mm×4.6mm，SAX 5µm不銹鋼柱。（或效果與其相當?shù)膹婈庪x子交換柱）。 過濾器：濾膜孔徑約0.45m。A.12.3.5 定量管：20L。 進樣器：50L或100L。 超聲波清洗器。A.12.4 高效液相色譜操作條件 流動相：稱取2.72g磷酸二氫鉀，用800mL水溶解，用磷酸溶液調pH=

18、2.2，加入200mL乙腈，濾膜過濾后超聲波震蕩10min。 流速：1.0 mL/min 柱溫：室溫（溫差變化應不大于2） 檢測波長：195nm 進樣體積：20L 亞氨基二乙酸保留時間：約45min 。 上述操作參數(shù)是典型的，可根據(jù)不同儀器和色譜柱特點作適當調整，以獲得最佳效果。典型的甘氨酸樣品中亞氨基二乙酸液相色譜圖見圖A.1。圖A.1 甘氨酸樣品溶液高效液相色譜圖注：圖中1亞氨基二乙酸A.12.5 分析步驟A.12.5.1 標樣溶液的制備稱取亞氨基二乙酸標準品0.05g，精確至0.0001g，置于100mL容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。準確吸取2mL于50mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。A.12.5.2 實驗室樣品溶液制備稱取實驗室樣品2.5g，精確至0.0001g，置于100mL容量瓶中，加入流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。 測定按本方法規(guī)定的操作條件，待儀器穩(wěn)定后，依次注入標樣溶液、實驗室樣品溶液。A.12.6 結果計算亞氨基二乙酸的質量分數(shù)w4 ，數(shù)值以%表示，按式（A.4）計算： ·················(