定量項目分析性能驗證

1、 定量項目分析性能驗證方案定量項目分析性能驗證方案概述定量項目的分析性能驗證小結(jié) 臨床實驗室所用的檢驗方法、儀器等應(yīng)保證檢驗結(jié)果的準確可靠，臨床實驗室應(yīng)對所選購的商品定量試劑盒進行檢查，以保證所選用的試劑盒達到臨床實驗室要求的臨床性能、分析性能、經(jīng)濟性能等各方面的要求。 對未經(jīng)修改而使用的已確認的檢驗程序進行獨立驗證。分析性能驗證什么時候需要進行驗證？ 需要驗證哪些內(nèi)容？ 新項目開展、同一檢測項目新儀器上的使用、試劑換代等啟用新的檢測方法 影響到檢測系統(tǒng)的維修過后（如更換測量池、加樣針等）等已確認過的檢測程序發(fā)生變更 什么時候需要進行驗證？ 分析性能驗證 需要驗證哪些內(nèi)容？CNAS-CL02

2、醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力認可準則：分析性能驗證 需要驗證哪些內(nèi)容？CNAS-CL38 醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力認可準則在臨床化學領(lǐng)域的應(yīng)用：CNAS-CL39 醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力認可準則在臨床免疫學領(lǐng)域的應(yīng)用(僅針對定性項目):分析性能驗證生化項目：免疫定性項目：免疫定量項目：精密度精密度精密度正確度符合率正確度可報告范圍檢出限可報告范圍根據(jù)檢驗?zāi)康?、預(yù)期用途等選擇需要驗證的性能特征分析性能驗證 實驗室的參考區(qū)間可依據(jù)廠家說明書也可依據(jù)權(quán)威文獻，如存在地區(qū)、人群等差異，應(yīng)自行驗證生物參考區(qū)間 某些項目的診斷靈敏度對輔助臨床診斷、監(jiān)測病情、判斷預(yù)后有價值靈敏度/檢出限 對于需要稀釋的樣本，應(yīng)對稀釋樣本

3、進行驗證，才可將可報告范圍擴大至稀釋后的結(jié)果范圍。稀釋倍數(shù)驗證 常見的干擾如黃疸、溶血、脂血等，例如驗證黃疸對肝功能相關(guān)指標檢測的影響；或是針對某一情況（術(shù)后、服用某種藥物后等）對特定項目的影響。分析特異性（含干擾物）分析性能驗證準備工作驗證實驗數(shù)據(jù)處理結(jié)果判讀分析性能驗證驗證方案的選擇儀器處于良好的運行狀態(tài)人員要求樣本準備模仿日常操作條件確保每日閉環(huán)質(zhì)控在控數(shù)據(jù)有效性判斷離群值剔除及數(shù)據(jù)補充借助excel或統(tǒng)計學軟件判斷依據(jù)準備工作1. 確定驗證方案 根據(jù)項目的臨床價值、醫(yī)學決定水平、常見影響因素等確定驗證方案，即要驗證的內(nèi)容。2. 儀器處于良好運行狀態(tài)，人員熟練掌握性能驗證相關(guān)內(nèi)容 可通過

4、質(zhì)控情況監(jiān)測檢測系統(tǒng)狀態(tài)，或聯(lián)系廠家確認；人員應(yīng)盡量為平常做實驗的操作人員，能夠熟練操作儀器、進行校準等。3. 標本準備準備工作精密度正確度(比對方案)正確度(定值物質(zhì))線性范圍參考區(qū)間檢出限稀釋倍數(shù)分析特異性可選用的樣本類型患者血清患者血清室間質(zhì)評物質(zhì)患者血清健康個體血清患者血清患者血清患者血清需要的濃度水平220257挑選濃度水平依據(jù)醫(yī)學決定水平覆蓋檢測區(qū)間醫(yī)學決定水平及精密度最佳濃度覆蓋線性范圍在廠家聲明檢出限以下，配置梯度濃度接近分析測量范圍上限覆蓋檢測范圍每濃度水平最低用量15個測試2個測試10個測試2個測試1個測試20個測試2個測試2個測試注意：應(yīng)按照廠家聲明的樣本類型、穩(wěn)定期等進

5、行樣本的挑選以及保存。準備工作以TSH做精密度實驗為例做樣本準備：1. 說明書中聲明，TSH的檢測范圍為0.005-100.0 uIU/mL，TSH的參考范圍為0.27-4.2 uIU/mL，2008年中國甲狀腺疾病診療指南-甲狀腺功能亢進癥診療指南中提出甲亢患者TSH一般小于1.0 uIU/mL。故，應(yīng)挑選1.0 uIU/mL，以及接近參考范圍上限4.2 uIU/mL的兩水平標本。2.普通干燥管收集，2-8可保存7天；-20可保存1個月，不可反復(fù)凍融。3. 一次檢測標本用量為50uL，每天需150uL，加上日立杯死腔量100uL，再多預(yù)留一些，則每天至少需要300uL樣本，總共需1.5mL。

6、因標本量小，且裝在同一子彈頭及日立杯中，在操作過程中應(yīng)避免不必要的蒸發(fā)。（此處計算的是最少用量，如果標本有富余應(yīng)多分裝一些子彈頭）驗證實驗校準：按照日常操作校準頻率進行校準 or 每個檢測批次進行校準質(zhì)控：閉環(huán)質(zhì)控，每日實驗樣本檢測前做室內(nèi)質(zhì)控，實驗樣本檢測結(jié)束后也應(yīng)做室內(nèi)質(zhì)控。當日質(zhì)控需均在控當日實驗數(shù)據(jù)才有效。樣本檢測：盡可能接近日常樣本檢測。標準操作流程 檢測系統(tǒng)定量實驗分析性能評價/驗證數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)有效性判斷 隨機誤差、操作失誤、標本問題等等； 產(chǎn)生的有問題數(shù)據(jù)若參與計算，會使結(jié)果判讀有較大偏差； 根據(jù)統(tǒng)計學方法找出離群值，剔除； 剔除離群值后應(yīng)找出問題原因并改正，缺少的標本數(shù)應(yīng)補全。

7、數(shù)據(jù)計算 借助Excel工具，行標和EP文件中都給了完整的數(shù)據(jù)統(tǒng)計表格形式。結(jié)果判讀精密度與廠家聲明相比較 or 與實驗室質(zhì)量目標相比較？ 性能驗證的目的，是為了確定實驗室現(xiàn)行方法能夠滿足臨床實驗室對分析性能的要求。 在模擬日常操作的情況下，滿足實驗室質(zhì)量目標即可。結(jié)果判讀精密度CLIA88 允許總誤差或衛(wèi)生部室間質(zhì)量評價標準 批內(nèi)不精密度 Sr 1/4 TEa 總不精密度 S1 1/3 TEa抽樣誤差確認限結(jié)果判讀精密度確認限的計算 需要消除由于抽樣誤差等造成的統(tǒng)計學差異1. 自由度v的計算以及假拒絕率的選擇 自由度是有關(guān)樣本數(shù)的數(shù)據(jù)；假拒絕率選擇后得到的為（1-/1）區(qū)間，一般取5,得到的即為95%置信區(qū)間。2. C值的確定 由確定的自由度v和查表得到。3. 確認限計算 其中，結(jié)果判讀正確度（室間質(zhì)評樣本）結(jié)果判讀線性范圍結(jié)果判讀參考區(qū)間 20名表觀健康個體的檢測值，不少于90%在參考區(qū)間以內(nèi)稀釋倍數(shù) 稀釋延伸出的檢測區(qū)間也應(yīng)滿足檢測范圍內(nèi)的線性相關(guān)檢出限 驗證濃度的20次測定結(jié)果CV