液相色譜常見問題及其對策

1、液相色譜常見問題及其對策現(xiàn)象：無壓力，流動相不流動可能原因1、保險絲斷或電源問題2、柱塞桿折斷3、泵頭內(nèi)有空氣或流動相不足4、單向閥損壞5、漏液6、壓力傳感器損壞(流動相流動正常，但無壓力)現(xiàn)象：壓力持續(xù)偏高或不斷上升1、流速設(shè)定過高2、保護(hù)柱或柱子篩板堵塞3、流動相使用不當(dāng)或有緩沖鹽出4、色譜柱選擇不當(dāng)5、進(jìn)樣閥損壞現(xiàn)象：壓力持續(xù)偏低1、流速設(shè)定過低2、色譜柱選擇不當(dāng)3、柱溫過高4、系統(tǒng)漏液現(xiàn)象：壓力波動可能原因1、泵頭中有氣泡2、單向閥損壞3、柱塞密封圈損壞4、脫氣不充分5、系統(tǒng)漏液6、使用了梯度洗脫接頭處漏液1、接頭處松動2、接頭磨損3、接頭被污染泵漏液1、單向閥松動2、泵密封損壞3、接

2、頭松動（不要擰的太緊）進(jìn)樣閥漏液可能原因1、轉(zhuǎn)子密封損壞2、定量環(huán)堵塞3、進(jìn)樣口密封松動4、進(jìn)樣針尺寸不合適5、廢液管產(chǎn)生虹吸6、廢液管堵塞檢測器漏液可能原因1、流通池墊片損壞2、流通池透鏡破碎3、手緊接頭處漏液4、廢液管堵塞5、流通池堵塞保留時間漂移保留時間漂移可能原因1、柱溫變化2、流動相組分變化3、色譜柱沒有平衡4、流速變化5、泵中有氣泡6、流動相選擇不當(dāng)7、緩沖容量不夠基線漂移基線漂移可能原因 1、溫度波動 2、流動相不均勻(脫氣，使用純度更高的溶劑) 3、流通池被污染或有氣泡 4、流動相配比不當(dāng)或流速變化 5、柱子平衡（約3060min） 6、流動相污染，變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成 7、

3、樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)以饅頭樣峰被洗出 8、檢測器沒有設(shè)定在最大吸收波長處基線噪聲（規(guī)則的）基線噪聲（規(guī)則的）可能原因1、流動相、泵、檢測器中有氣泡2、有地方漏液3、流動相混和不均勻4、溫度影響（檢測器和柱溫差別太大）5、其他電子設(shè)備的影響基線噪聲（不規(guī)則的）基線噪聲（不規(guī)則的）可能原因1、流動相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成2、有地方漏液3、流動相各溶劑不相溶或混和不均勻4、檢測池能量不足5、系統(tǒng)內(nèi)有氣泡 前沿峰、拖尾峰前沿峰、拖尾峰 可能原因 1、柱塞板堵塞 2、色譜柱塌陷 3、干擾峰 4、柱溫過低 5、緩沖不足或不合適 6、重金屬污染 7、樣品溶劑選擇不當(dāng) 8、樣品過載分叉峰分叉峰可能原因1、

4、保護(hù)柱或分析柱污染2、樣品溶劑不溶于流動相峰展寬1. 進(jìn)樣體積過大2. 流動相粘度過高3. 檢測池體積過大4. 保留時間過長5. 樣品過載鬼峰1、進(jìn)樣閥殘余峰2、柱未平衡3、水污染4、柱未平衡 重新平衡柱,用流動相作樣品溶劑 (尤其是離子對色譜) 維護(hù)流程圖吸濾頭單向閥柱塞密封圈線路過濾器手動進(jìn)樣器檢測器吸濾頭吸濾頭材料：不銹鋼燒結(jié)，孔徑10um故障：堵塞表現(xiàn)：管路中不斷有氣泡生成措施：用520的稀硝酸，超聲波清洗，再用蒸餾水清洗注意點：吸濾頭拆下時不必將塑料管剪斷單向閥單向閥故障1：寶石球粘附于墊片表現(xiàn)：泵無法吸液或排液，流路不通措施：1）用針筒抽出口單向閥以產(chǎn)生壓，使寶石球與墊片分開2）拆

5、下單向閥，放入異丙醇或水中，用超聲波清洗故障2：寶石球或塑料墊片受污導(dǎo)致密封不好表現(xiàn)：系統(tǒng)壓力波動大措施：拆下單向閥，放入異丙醇或水中，用超聲波清洗故障：密封圈磨損而導(dǎo)致密封不良現(xiàn)象：系統(tǒng)壓力波動大或漏液措施：更換密封圈注意點：更換密封圈 拆卸泵頭前，柱塞桿復(fù)位手動進(jìn)樣閥故障：轉(zhuǎn)子密封損壞現(xiàn)象：漏液原因：a 擰的太緊b 樣品太臟c 針頭損壞或不使用液相專用針解決措施：更換轉(zhuǎn)子密封，并在使用時注意保養(yǎng)手動進(jìn)樣閥故障：載樣困難原因：a 定量環(huán)堵塞b 進(jìn)樣器污染解決措施：清洗或更換定量環(huán)、進(jìn)樣器柱子故障：系統(tǒng)高壓、峰型變差（拖尾峰、前沿峰、分叉峰），保留時間的改變解決措施：清洗正相柱，正庚烷、氯仿、

6、乙酸乙酯、丙酮、乙醇反相柱，甲醇、乙腈、氯仿、異丙醇、稀硫酸峰產(chǎn)生有肩或分叉的原因峰產(chǎn)生有肩或分叉的原因1. 柱子劣化柱子劣化（進(jìn)口處產(chǎn)生不均勻的空隙）（進(jìn)口處產(chǎn)生不均勻的空隙）2. 樣品劣化樣品劣化（生成氧化物、分解物等）（生成氧化物、分解物等）判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷標(biāo)準(zhǔn)所有的峰都產(chǎn)生有肩峰或分叉時則為柱子劣化所有的峰都產(chǎn)生有肩峰或分叉時則為柱子劣化延長柱壽命方法：延長柱壽命方法：倒沖柱倒沖柱換過濾片換過濾片修補(bǔ)柱頭修補(bǔ)柱頭 分析柱的維護(hù) 1、在使用新柱之前，最好用強(qiáng)溶劑在低流量下 ml/min)沖洗30 mins，長時間未用的分析柱也要同樣處理 2、定期使用強(qiáng)溶劑沖洗柱子 3、使用緩沖鹽時，要先用水

7、沖洗，再用有機(jī)溶劑沖洗 4、凈化樣品 5、分離條件 6、不使用時，要蓋上蓋子，避免固定相干枯 7、使用預(yù)柱 8、避免流動相組成及極性的劇烈變化 9、避免壓力脈沖的劇烈變化更換氘燈更換氘燈（紫外檢測器）判斷氘燈能量：設(shè)定220nm波長，檢查參比池能量，如 能量低于800，需更換氘燈。操作注意點：不要用手直接接觸氘燈表面一、脫氣除去流動相中溶解或因混合而產(chǎn)生的氣泡氣泡對測定的影響：1）泵中氣泡使液流波動，改變保留時間和峰面積2）柱中氣泡使流動相繞流，峰變形3）檢測器中的氣泡產(chǎn)生基線波動脫氣的目的脫氣的目的1. 防止由氣泡的產(chǎn)生引起的故障2. 防止由溶解（在液體中的）氣體量的變動引起的檢測不穩(wěn)定程度1）示差折射率檢測器*使折射率變化2）UV檢測器（200nm以下）*溶解氧氣有吸收二、緩沖液二、緩沖液選擇緩沖液的步