氣相色譜儀原理及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書

1、氣相色譜儀原理及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書貴州大學(xué)精細(xì)化工研究開發(fā)中心(綠色農(nóng)藥與生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室1. 實(shí)驗(yàn)類型:設(shè)計(jì)型實(shí)驗(yàn)(研究性實(shí)驗(yàn)2.課時(shí)安排:6課時(shí)。并運(yùn)用其數(shù)據(jù)資料的能力以及歸納總結(jié)的能力等。3.實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵饬x通過學(xué)習(xí)氣相色譜儀的構(gòu)成和使用方法,及其在定性、定量分析中的應(yīng)用,培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度、細(xì)致的工作作風(fēng)、實(shí)事求是的數(shù)據(jù)報(bào)告和良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣(準(zhǔn)備充分、操作規(guī)范,記錄簡(jiǎn)明,臺(tái)面整潔、實(shí)驗(yàn)有序,良好的環(huán)保和公德意識(shí)。培養(yǎng)培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力、理論聯(lián)系實(shí)際的能力、統(tǒng)籌思維能力、創(chuàng)新能力、獨(dú)立分析解決實(shí)際問題的能力、查閱手冊(cè)資料并運(yùn)用其數(shù)據(jù)資料的能力以及歸納總結(jié)的能力等。4. 實(shí)驗(yàn)原理氣相色譜分

2、離是利用試樣中各組分在色譜柱中的氣相和固定相間的分配系數(shù)不同,當(dāng)汽化后的試樣被載氣帶入色譜柱中運(yùn)行時(shí),組分就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次(103-106的分配(吸附-脫附-放出由于固定相對(duì)各種組分的吸附能力不同(即保存作用不同,因此各組份在色譜柱中的運(yùn)行速度就不同,經(jīng)過一定的柱長(zhǎng)后,便彼此分離,順序離開色譜柱進(jìn)入檢測(cè)器,產(chǎn)生的離子流信號(hào)經(jīng)放大后,在記錄器上描繪出各組分的色譜峰。5.實(shí)驗(yàn)設(shè)備氣相色譜儀、色譜柱、容量瓶、分析實(shí)驗(yàn)室常用玻璃儀器、氮?dú)?、農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品。6.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容了解并初步掌握氣相色譜儀的基本原理與構(gòu)造;了解氣相色譜儀常用的幾種檢測(cè)器工作原理和使用范圍;學(xué)習(xí)氣相色譜法分離化合物和檢測(cè)化合物

3、的含量的方法;通過測(cè)定對(duì)樣品的定性、定量測(cè)定,初步掌握獲得氣相色譜譜圖和數(shù)據(jù)的一般操作程序與技術(shù);學(xué)習(xí)樣品制備的方法;了解影響分析測(cè)定的重要因素,學(xué)會(huì)優(yōu)化分析條件;學(xué)習(xí)譜圖和數(shù)據(jù)的處理方法;結(jié)合實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目,完成一個(gè)分析檢測(cè)項(xiàng)目。1樣品制備樣品制備過程中,要同時(shí)考慮將被分析的樣品中,可能干擾欲測(cè)組分定量的物質(zhì)盡可能的分離出去。當(dāng)欲測(cè)組分含量很低時(shí),還要考慮通過樣品制備使欲測(cè)組分在試驗(yàn)樣品中的含量得以提高,便于進(jìn)行色譜分析。2定性、定量方法保留時(shí)間定性;峰高、峰面積定量(歸一法、外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法、標(biāo)準(zhǔn)加入法。3 方法可行性的驗(yàn)證聯(lián)用技術(shù)進(jìn)一步定性;準(zhǔn)確度(添加回收率實(shí)驗(yàn)、精密度實(shí)驗(yàn)。3數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)中

4、所有測(cè)量數(shù)據(jù)都要隨時(shí)記在專用的記錄本上,不可記在其他任何地方,記錄的數(shù)據(jù)不得隨意進(jìn)行涂改;其平行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)之間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD一般不應(yīng)大于5%;實(shí)驗(yàn)結(jié)果的誤差應(yīng)不超過±2%。4 儀器操作a. 準(zhǔn)備與開機(jī)b. 編輯GC分析方法c. 樣品分析與采集數(shù)據(jù)d. 報(bào)告輸出e. 關(guān)機(jī)7. 注意事項(xiàng)1 實(shí)驗(yàn)之前必須交預(yù)習(xí)報(bào)告,實(shí)驗(yàn)完后每人寫一份實(shí)驗(yàn)報(bào)告。2 嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度。3 做好實(shí)驗(yàn)記錄工作。8.思考題1常用的氣相色譜檢測(cè)器有哪幾種,簡(jiǎn)述其使用原理及應(yīng)用范圍。2樣品測(cè)定前要為何要確定檢測(cè)器的線性范圍,如何確定?3 影響氣相分離的因素有哪些?附:參考實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目蔬菜或水果中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定

5、一、目的要求1、了解氣相色譜儀及相關(guān)檢測(cè)器的使用范圍;2、了解電子捕獲檢測(cè)器(ECD的檢測(cè)原理和使用方法。3、掌握農(nóng)藥殘留量的測(cè)定方法。二、基本原理ECD是一種選擇性檢測(cè)器,對(duì)含X、S、P、N、O電負(fù)性強(qiáng)的物質(zhì),影響很大,而對(duì)非電負(fù)性物質(zhì),則影響很小。放射源(3H或63Ni產(chǎn)生的B射線將載氣N2電離成正離子和電子,這些離子和電子在電場(chǎng)作用下形成“基流”。當(dāng)電負(fù)性樣品進(jìn)入檢測(cè)器后,便捕獲自由電子,形成的負(fù)離子和載氣的正離子結(jié)合為中性分子,以使基流下降,產(chǎn)生對(duì)應(yīng)的負(fù)信號(hào)倒峰。在一定范圍內(nèi),檢測(cè)器的響應(yīng)信號(hào)和樣品組分的濃度成正比。六六六、DDT目前雖然已經(jīng)禁用,但其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,半衰期長(zhǎng),施用后殘留

6、在大氣、土壤、水體、植物中不易講解,嚴(yán)重危害人體健康。本法利用己烷提取樣品,采用石英毛細(xì)管氣相色譜柱進(jìn)行分離,ECD檢測(cè)器,外標(biāo)法定量。三、儀器與試劑儀器:氣相色譜儀(配ECD檢測(cè)器;HP-5石英毛細(xì)管色譜柱;離心機(jī);布氏漏斗;0.5*22cm玻璃層析柱;500mL分液漏斗2只試劑:無水硫酸鈉、硫酸鈉、正己烷、丙酮、濃硫酸(均為AR;-666、-666、-666、-666、p, p- DDE、o, p-DDT、p, p'-DDD,p, p'-DDT。四、實(shí)驗(yàn)步驟1、試樣的提取和凈化:將水果或蔬菜樣品置于多用食品加工機(jī)中攪碎,稱取20.0 g于250 mL分液漏斗中,加入100

7、mL丙酮一正己烷混合液(1:1,振搖數(shù)分鐘,中間放氣。再振蕩40 min,轉(zhuǎn)移,抽濾,殘?jiān)?0mL丙酮-正己烷混合液(1:1洗滌,洗滌液過濾,并于另一分液漏斗中,以50 mL 20 g/L 硫酸鈉溶液洗滌2次,以除去丙酮。正己烷相過無水硫酸鈉漏斗脫水并濾入梨形瓶中,用少量正己烷洗滌分液漏斗及無水硫酸鈉漏斗,洗脫液合并于梨形瓶中,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮至約5 mL。2、色譜條件:色譜柱,HP-5彈性石英毛細(xì)管柱(30 m×0.32 mm i.d., 0.25 m;色譜柱升溫程序,初溫80C保持1 min,升溫速率50 C /min,升溫至160C,再以0.5C/min升溫至165C,保持

8、1min,再以20C /min升溫至220C,保持20 min;氣化室溫度,220C檢測(cè)器;溫度,300;載氣、尾吹氣均為氮?dú)?純度為99.999%;載氣流速為5 mL/min,尾吹氣流速為60 mL/min;柱頭壓,138 kPa;進(jìn)樣方式,不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣量,1L。3、標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:用己烷配制-666、-666、-666、-666、p, p- DDE、o, p-DDT、p, p'-DDD,p, p' -DDT各為l00ppm的貯備液,操作溶液濃度與樣品濃度相近。4、色譜測(cè)定:(1 用各種濃度的六六六、DDT標(biāo)準(zhǔn)溶液注入色譜儀,確定ECD的線性范圍;(2 進(jìn)樣品溶液,根據(jù)樣品的峰高,用標(biāo)準(zhǔn)貯備液配制濃度相近的操作溶液;(3 在相同色譜條件下,依次進(jìn)樣品和標(biāo)樣,記錄t R和色譜圖。五、數(shù)據(jù)處理根據(jù)色譜圖測(cè)量蜂高,按下式計(jì)算蔬菜、水果中的六六六、DDT的