GB15979-2002一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

?

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫局

2002-03-05發(fā)布2002-09-01實(shí)施中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)Hygienicstandardfordisposablesanitaryproducts

GB15979—2002代替GB15979-1995前言

本標(biāo)準(zhǔn)全文強(qiáng)制。

GB15979-1995《一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》自1996年發(fā)布以來，使生產(chǎn)企業(yè)明確了衛(wèi)生要求和目標(biāo)，管理部門也有了監(jiān)督監(jiān)測(cè)依據(jù)，對(duì)推動(dòng)該行業(yè)的健康發(fā)展與衛(wèi)生水平的提高起到了積極作

用。與此同時(shí)，隨著產(chǎn)品種類與材料的發(fā)展，該標(biāo)準(zhǔn)有一些地方需要完善。因此提出修訂本標(biāo)準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)自實(shí)施之日起代替GB15979-1995。

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A至附錄G為標(biāo)準(zhǔn)的附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部提出。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：上海市疾病預(yù)防控制中心；參加起草單位：寶潔（中國(guó)）有限公司、強(qiáng)生

（中國(guó)）有限公司。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：沈偉、盧敏、楊宏平、周密、潘希和、劉育京。

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了一次性使用衛(wèi)生用品的產(chǎn)品和生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、消毒效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和相應(yīng)檢驗(yàn)方法，以及原材料與產(chǎn)品生產(chǎn)、消毒、貯存、運(yùn)輸過程衛(wèi)生要求和產(chǎn)品標(biāo)識(shí)要求。

在本標(biāo)準(zhǔn)中，一次性使用衛(wèi)生用品是指：

本標(biāo)準(zhǔn)適用于國(guó)內(nèi)從事一次性使用衛(wèi)生用品的生產(chǎn)與銷售的部門、單位或個(gè)人，也適用于經(jīng)銷進(jìn)口一次性使用衛(wèi)生用品的部門、單位或個(gè)人。

2引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí)，所示版本

均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會(huì)被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。

GB15981-1995消毒與滅菌效果的評(píng)價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn)3定義本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義：

一次性使用衛(wèi)生用品

使用一次后即丟棄的、與人體直接或間接接觸的、并為達(dá)到人體生理衛(wèi)生或衛(wèi)生保健（抗菌或抑菌）目的而使用的各種日常生活用品，產(chǎn)品性狀可以是固體也可以是液體。例如，一次性使

用手套或指套（不包括醫(yī)用手套或指套）、紙巾、濕巾、衛(wèi)生濕巾、電話膜、帽子、口罩、內(nèi)褲、婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品（包括衛(wèi)生護(hù)墊）、尿布等排泄物衛(wèi)生用品（不包括皺紋衛(wèi)生紙等廁所用紙）避孕套等，在本標(biāo)準(zhǔn)中統(tǒng)稱為“衛(wèi)生用品”。

4產(chǎn)品衛(wèi)生指標(biāo)外觀必須整潔，符合該衛(wèi)生用品固有性狀，不得有異常氣味與異物。

4.1不得對(duì)皮膚與粘膜產(chǎn)生不良刺激與過敏反應(yīng)及其他損害作用。

4.2產(chǎn)品須符合表1中微生物學(xué)指標(biāo)。

表1

產(chǎn)品種類

微生物指標(biāo)

初始污染菌1）

cfu/g

細(xì)菌

菌落總數(shù)

cfu/g或cfu/mL

大腸菌群

致病性化膿菌

2）

真菌

菌落總數(shù)

cfu/g或

cfu/mL

手套或指套、紙巾、濕巾、帽子

內(nèi)褲、電話膜

.

<200

不得檢出

不得檢出

<100

抗菌（或抑國(guó)）液體廠品

<200

不得檢出

不得檢出

<100

衛(wèi)生濕巾

.

<20

不得檢出

不得檢出

不得檢出

口罩

.

.

.

.

.

普通級(jí)

.

<200

不得檢出

不得檢出

<100

消毒級(jí)

<10000

<20

不得檢出

不得檢出

不得檢出

婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品

.

.

.

.

.

普通級(jí)

.

<200

不得檢出

不得檢出

<100

消毒級(jí)

<10000

<20

不得檢出

不得檢出

不得檢出

尿布等排泄物衛(wèi)生用品

.

.

.

.

.

普通級(jí)

.

<200

不得檢出

不得檢出

<100

消毒級(jí)

<10000

<20

不得檢出

不得檢出

不得檢出

避孕套

.

<20

不得檢出

不得檢出

不得檢出

1）如初始污染菌超過表內(nèi)數(shù)值，應(yīng)相應(yīng)提高殺滅指數(shù)，使達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的細(xì)菌與真菌限值。

2）致病性化膿菌指綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌與溶血性鏈球菌。

衛(wèi)生濕巾除必須達(dá)到表1中的微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)外，對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺滅率須》

90%,如需標(biāo)明對(duì)真菌的作用，還須對(duì)白色念珠菌的殺滅率》90%,其殺菌作用在室溫下至少須保持1年。

4.3抗菌（或抑菌）產(chǎn)品除必須達(dá)到表1中的同類同級(jí)產(chǎn)品微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)外，對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率須》50%（溶出性）或〉26%（非溶出性），如需標(biāo)明對(duì)真菌的作用，還須白色念珠菌的抑菌率R50%（溶出性）或〉26%（非溶出性），其抑菌作用在室溫下至少須保持1年。

250心g/g。

4.5任何經(jīng)環(huán)氧乙烷消毒的衛(wèi)生用品出廠時(shí)，環(huán)氧乙烷殘留量必須＜5生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo)3

5.1裝配與包裝車間空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)＜2500cfu/m。

5.2工作臺(tái)表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)＜20cfu/cm2。

5.3工人手表面細(xì)圍國(guó)洛總數(shù)應(yīng)＜300cfu/只手，并不得檢出致病困。

6消毒效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)6.1環(huán)氧乙烷消毒：對(duì)枯草桿菌黑色變種芽胞（ATCC9372）的殺滅指數(shù)應(yīng)》103。

?、.....?■?3電離輻射消毒：對(duì)短小桿菌芽胞E6d(ATCC27142)的殺火指數(shù)應(yīng)支10。

6.2壓力蒸氣消毒：對(duì)嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC7953)的殺滅指數(shù)應(yīng)A103。

7測(cè)試方法產(chǎn)品測(cè)試方法

7.1.1產(chǎn)品外觀：目測(cè)，應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn)3.1的規(guī)定。

7.1.2產(chǎn)品毒理學(xué)測(cè)試方法：見附錄Ao產(chǎn)品微生物檢測(cè)方法：見附錄Bo

7.1.3產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性測(cè)試方法：見附錄Co產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量測(cè)試方法：見附錄Do

7.2生產(chǎn)環(huán)境采樣與測(cè)試方法：見附錄Eo消毒效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)方法：見附錄Fo

8原材料衛(wèi)生要求原材料應(yīng)無毒、無害、無污染；原材料包裝應(yīng)清潔，清楚標(biāo)明內(nèi)含物的名稱、生產(chǎn)單位、生產(chǎn)日期或生產(chǎn)批號(hào)；影響衛(wèi)生質(zhì)量的原材料應(yīng)不裸露；有特殊要求的原材料應(yīng)標(biāo)明保存條件和保

質(zhì)期。

8.1對(duì)影響產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量的原材料應(yīng)有相應(yīng)檢驗(yàn)報(bào)告或證明材料，必要時(shí)需進(jìn)行微生物監(jiān)控和采取相應(yīng)措施。

8.2禁止使用廢棄的衛(wèi)生用品作原材料或半成品。

9生產(chǎn)環(huán)境與過程衛(wèi)生要求生產(chǎn)區(qū)周圍環(huán)境應(yīng)整潔，無垃圾，無蚊、蠅等害蟲孳生地。

9.1生產(chǎn)區(qū)應(yīng)有足夠空間滿足生產(chǎn)需要，布局必須符合生產(chǎn)工藝要求，分隔合理，人、物分流，產(chǎn)品流程中無逆向與交叉。原料進(jìn)入與成品出去應(yīng)有防污染措施和嚴(yán)格的操作規(guī)程，減少生產(chǎn)環(huán)境微生物污染。

9.2生產(chǎn)區(qū)內(nèi)應(yīng)配置有效的防塵、防蟲、防鼠設(shè)施，地面、墻面、工作臺(tái)面應(yīng)平整、光滑、不起塵、便于除塵與清洗消毒，有充足的照明與空氣消毒或凈化措施，以保證生產(chǎn)環(huán)境滿足本標(biāo)準(zhǔn)第5章的規(guī)定。

9.4配置必需的生產(chǎn)和質(zhì)檢設(shè)備，有完整的生產(chǎn)和質(zhì)檢記錄，切實(shí)保證產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量。

9.5生產(chǎn)過程中使用易燃、易爆物品或產(chǎn)生有害物質(zhì)的，必須具備相應(yīng)安全防護(hù)措施，符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或規(guī)定。

9.6原材料和成品應(yīng)分開堆放，待檢、合格、不合格原材料和成品應(yīng)嚴(yán)格分開堆放并設(shè)明顯標(biāo)志。

倉(cāng)庫(kù)內(nèi)應(yīng)干燥、清潔、通風(fēng)，設(shè)防蟲、防鼠設(shè)施與墊倉(cāng)板，符合產(chǎn)品保存條件。

9.7進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)要換工作衣和工作鞋，戴工作帽，直接接觸裸裝產(chǎn)品的人員需戴口罩，清洗和消毒雙手或戴手套；生產(chǎn)區(qū)前應(yīng)相應(yīng)設(shè)有更衣室、洗手池、消毒池與緩沖區(qū)，從事衛(wèi)生用品生產(chǎn)的人員應(yīng)保持個(gè)人衛(wèi)生，不得留指甲，工作時(shí)不得戴手飾，長(zhǎng)發(fā)應(yīng)卷在工

作帽內(nèi)。痢疾、傷寒、病毒性肝炎、活動(dòng)性肺結(jié)核、尖銳濕疣、淋病及化膿性或滲出性皮膚病患者或病原攜帶者不得參與直接與產(chǎn)品接觸的生產(chǎn)活動(dòng)。

9.8從事衛(wèi)生用品生產(chǎn)的人員應(yīng)在上崗前及定期（每年一次）進(jìn)行健康檢查與衛(wèi)生知識(shí)（包括生產(chǎn)衛(wèi)生、個(gè)人衛(wèi)生、有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)范）培訓(xùn)，合格者方可上崗。

10消毒過程要求消毒級(jí)產(chǎn)品最終消毒必須采用環(huán)氧乙烷、電離輻射或壓力蒸氣等有效消毒方法，所用消毒設(shè)備必須符合有關(guān)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。

10.1根據(jù)產(chǎn)品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、初始污染菌與消毒效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)制定消毒程序、技術(shù)參數(shù)、工作制度，經(jīng)驗(yàn)證后嚴(yán)格按照既定的消毒工藝操作。該消毒程序、技術(shù)參數(shù)或影響消毒效果的原

材料或生產(chǎn)工藝發(fā)生變化后應(yīng)重新驗(yàn)證確定消毒工藝。

10.2每次消毒過程必須進(jìn)行相應(yīng)的工藝（物理）和化學(xué)指示劑監(jiān)測(cè)，每月用相應(yīng)的生物指示劑監(jiān)測(cè)，只有當(dāng)工藝監(jiān)測(cè)、化學(xué)監(jiān)測(cè)、生物監(jiān)測(cè)達(dá)到規(guī)定要求時(shí)，被消毒物品才能出廠。

10.3產(chǎn)品經(jīng)消毒處理后，外觀與性能應(yīng)與消毒處理前無明顯可見的差異。

11包裝、運(yùn)輸與貯存要求執(zhí)行衛(wèi)生用品運(yùn)輸或貯存的單位或個(gè)人，應(yīng)嚴(yán)格按照生產(chǎn)者提供的運(yùn)輸與貯存要求進(jìn)行運(yùn)輸或貯存。

11.1直接與產(chǎn)品接觸的包裝材料必須無毒、無害、清潔，產(chǎn)品的所有包裝材料必須具有足夠的密封性和牢固性以達(dá)到保證產(chǎn)品在正常的運(yùn)輸與貯存條件下不受污染的目的。

12產(chǎn)品標(biāo)識(shí)要求產(chǎn)品標(biāo)識(shí)應(yīng)符合《中華人民共和國(guó)產(chǎn)品質(zhì)量法》的規(guī)定，并在產(chǎn)品包裝上標(biāo)明執(zhí)行的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)號(hào)以及生產(chǎn)日期和保質(zhì)期（有效期）或生產(chǎn)批號(hào)和限定使用日期。

12.1消毒級(jí)產(chǎn)品還應(yīng)在銷售包裝上注明“消毒級(jí)”字樣以及消毒日期和有效期或消毒批號(hào)和限定使用日期，在運(yùn)輸包裝上標(biāo)明“消毒級(jí)”字樣以及消毒單位與地址、消毒方法、消毒日期和有效期或消毒批號(hào)和限定使用日期。

附錄A

（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）產(chǎn)品毒理學(xué)測(cè)試方法

A1各類產(chǎn)品毒理學(xué)測(cè)試指標(biāo)當(dāng)原材料、生產(chǎn)工藝等發(fā)生變化可能影響產(chǎn)品毒性時(shí)，應(yīng)按表A1根據(jù)不同產(chǎn)品種類提供有效的

（經(jīng)政府認(rèn)定的第三方）成品毒理學(xué)測(cè)試報(bào)告。

表A1

產(chǎn)品種類

皮膚刺激試驗(yàn)

陰道粘膜刺激試驗(yàn)

皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)

手套或指套、內(nèi)褲

V

V

抗菌（或抑國(guó)）液體廠品

V

根據(jù)用途選擇”

V

濕巾、衛(wèi)生濕巾

V

根據(jù)用途選擇”

根據(jù)材料選擇

口罩

V

婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品

V

V

尿布等排泄物衛(wèi)生用品

V

V

避孕套

V

V

1）用于陰道粘膜的產(chǎn)品須做陰道粘膜刺激試驗(yàn)，但無須做皮膚刺激試驗(yàn)。

A2試驗(yàn)方法皮膚刺激試驗(yàn)、陰道粘膜刺激試驗(yàn)和皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)方法按衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（第三版）

第一分冊(cè)《實(shí)驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》（1999）中的“消毒劑毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)”中相應(yīng)的試驗(yàn)方法進(jìn)行。

固體產(chǎn)品的樣品制備方法按照A3進(jìn)行。

注1用于皮膚刺激試驗(yàn)中的空白對(duì)照應(yīng)為：生理鹽水和斑貼紙。

2在皮膚變態(tài)反應(yīng)中，致敏處理和激發(fā)處理所用的劑量保持一致。

A3樣品制備A3.1皮膚刺激試驗(yàn)和皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)

以橫斷方式剪一塊斑貼大小的產(chǎn)品。對(duì)于干的產(chǎn)品，如尿布、婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品，用生理鹽水潤(rùn)濕后貼到皮膚上，再用斑貼紙覆蓋。濕的產(chǎn)品，如濕巾，則可以按要求裁剪合適的面積，直接貼到皮膚上，再用斑貼紙覆蓋。

A3.2陰道粘膜刺激試驗(yàn)A3.2.1干的產(chǎn)品（如婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品）

以橫斷方式剪取足夠量的產(chǎn)品，按1g/10mL的比例加入滅菌生理鹽水，密封于萃取容器中攪拌后置于37c士1C下放置24ho冷卻到室溫，攪拌后析取樣液備檢。

A3.2.2濕的產(chǎn)品（如衛(wèi)生濕巾）在進(jìn)行陰道粘膜刺激試驗(yàn)的當(dāng)天，擠出濕巾里的添加液作為試樣。

A4判定標(biāo)準(zhǔn)以衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（第三版）第一分冊(cè)《實(shí)驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》（1999）中“毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果

的最終判定”的相應(yīng)部分作為試驗(yàn)結(jié)果判定原則。

附錄B

（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）產(chǎn)品微生物檢測(cè)方法

B1產(chǎn)品采集與樣品處理

于同一批號(hào)的三個(gè)運(yùn)輸包裝中至少抽取12個(gè)最小銷售包裝樣品，1/4樣品用于檢測(cè)，1/4樣品用于留樣，另1/2樣品（可就地封存）必要時(shí)用于復(fù)檢。抽樣的最小銷售包裝不應(yīng)有破裂，檢驗(yàn)前不得啟開。

在100級(jí)凈化條件下用無菌方法打開用于檢測(cè)的至少3個(gè)包裝，從每個(gè)包裝中取樣，準(zhǔn)確稱取10g±1g樣品，剪碎后加入到200mL滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個(gè)生理鹽水樣液。液體產(chǎn)品用原液直接做樣液。

如被檢樣品含有大量吸水樹脂材料而導(dǎo)致不能吸出足夠樣液時(shí)，稀釋液量可按每次50mL遞增，直到能吸出足夠測(cè)試用樣液。在計(jì)算細(xì)菌菌落總數(shù)與真菌菌落總數(shù)時(shí)應(yīng)調(diào)整稀釋度。

B2細(xì)菌菌落總數(shù)與初始污染菌檢測(cè)方法本方法適用于產(chǎn)品初始污染菌與細(xì)菌菌落總數(shù)(以下統(tǒng)稱為細(xì)菌菌落總數(shù))檢測(cè)。

82.1操作步驟待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作菌落計(jì)數(shù)。共接種5個(gè)平皿，每個(gè)平皿中加入1mL

樣液，然后用冷卻至45c左右的熔化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15?20mL倒入每個(gè)平皿內(nèi)混合均勻。

待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置35c土2c培養(yǎng)48h后，計(jì)算平板上的菌落數(shù)。

82.2結(jié)果報(bào)告菌落呈片狀生長(zhǎng)的平板不宜采用；計(jì)數(shù)符合要求的平板上的菌落，按式(B1)計(jì)算結(jié)果：

X、—AX—Bl)式中：X細(xì)菌菌落總數(shù)，cfu/g或cfu/mL；

A——5塊營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上的細(xì)菌菌落總數(shù)；K稀釋度。

當(dāng)菌落數(shù)在100以內(nèi)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)采用二位有效數(shù)字。

如果樣品菌落總數(shù)超過本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，按B2.3進(jìn)行復(fù)檢和結(jié)果報(bào)告。

82.3復(fù)檢方法將留存的復(fù)檢樣品依前法復(fù)測(cè)2次，2次結(jié)果平均值都達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，則判定被檢樣品合格；

其中有任何1次結(jié)果平均值超過本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則判定被檢樣品不合格。

B3大腸菌群檢測(cè)方法B3.1操作步驟

取樣液5mL接種50mL乳糖膽鹽發(fā)酵管，置35c±2C培養(yǎng)24h,如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報(bào)告為大腸菌群陰性。

如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則劃線接種伊紅美藍(lán)瓊脂平板，置35c±2C培養(yǎng)18?24h,觀察平板上菌落形態(tài)。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤(rùn)，常具有金屬光澤，也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紅色，中心較深的菌落。

取疑似大腸菌落1?2個(gè)作革蘭氏染色鏡檢，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置35c±2C培養(yǎng)24h,觀察產(chǎn)氣情況。

B3.2結(jié)果報(bào)告在伊紅美藍(lán)平板上有典型大腸菌落,

在伊紅美藍(lán)平板上有典型大腸菌落,

革蘭氏

凡乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，染色為陰性無芽胞桿菌，可報(bào)告被檢樣品檢出大腸桿菌。

B4綠膿桿菌檢測(cè)方法B4.1操作步驟

取樣液5mL,加入到50mLSCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35c士2c培養(yǎng)18?24h。如有綠膿桿菌生長(zhǎng)，培養(yǎng)液表面呈現(xiàn)一層薄菌膜，培養(yǎng)液常呈黃綠色或藍(lán)綠色。從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑

取培養(yǎng)物，劃線接種十六烷三甲基澳化鏤瓊脂平板，置35c±2C培養(yǎng)18?24h,觀察菌落特征。

綠膿桿菌在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周圍培養(yǎng)基略帶粉紅色，其他菌不長(zhǎng)。

取可疑菌落涂片作革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性菌者應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：

氧化酶試驗(yàn)：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無菌玻棒挑取可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對(duì)苯二胺試液，30s內(nèi)出現(xiàn)粉紅色或紫紅色,

為氧化酶試驗(yàn)陽性，不變色者為陰性。

綠膿菌素試驗(yàn)：取2?3個(gè)可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基斜面，35c±2C培養(yǎng)24h,加入三氯甲烷3?5mL,充分振蕩使培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三氯甲烷呈

藍(lán)色時(shí)，用吸管移到另一試管中并加入1mol/L的鹽酸1mL,振蕩后靜置片刻。如上層出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽性，表示有綠膿菌素存在。

硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)：挑取被檢菌純培養(yǎng)物接種在硝酸鹽月東水培養(yǎng)基中，置35c±2C培養(yǎng)24h,培養(yǎng)基小倒管中有氣者即為陽性。

明膠液化試驗(yàn)：取可疑菌落純培養(yǎng)物，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內(nèi)，置35c±2C培養(yǎng)24h,取出放于4?10C,如仍呈液態(tài)為陽性，凝固者為陰性。

42c生長(zhǎng)試驗(yàn)：挑取可疑培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置42c培養(yǎng)24?48h,有綠膿桿菌生長(zhǎng)為陽性。

B4.2結(jié)果報(bào)告被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，證實(shí)為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶及綠膿桿菌試驗(yàn)均為陽性者，即可

報(bào)告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。如綠膿菌素試驗(yàn)陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42c生長(zhǎng)試驗(yàn)三者皆為陽性時(shí)，仍可報(bào)告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。

B5金黃色葡萄球菌檢測(cè)方法操作步驟

取樣液5mL,加入到50mLSCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35c土2c培養(yǎng)24h。

自上述增菌液中取1?2接種環(huán)，劃線接種在血瓊脂培養(yǎng)基上，置35c±2C培養(yǎng)24?48h。在血瓊脂平板上該菌菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。

挑取典型菌落，涂片作革蘭氏染色鏡檢，金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌，排列成葡萄狀，無芽胞與莢膜。鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：

甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：取上述菌落接種甘露醇培養(yǎng)液，置35c±2C培養(yǎng)24h,發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸者為陽性。

血漿凝固酶試驗(yàn)：玻片法：取清潔干燥載玻片，一端滴加一滴生理鹽水，另一端滴加一滴兔血漿，挑取菌落分別與生理鹽水和血漿混合，5min如血漿內(nèi)出現(xiàn)團(tuán)塊或顆粒狀凝塊，而鹽水滴

仍呈均勻混濁無凝固則為陽性，如兩者均無凝固則為陰性。凡鹽水滴與血漿滴均有凝固現(xiàn)象，再進(jìn)行試管凝固酶試驗(yàn)；試管法：吸取1：4新鮮血漿0.5mL,放滅菌小試管中，加入等量待檢菌

24h肉湯培養(yǎng)物0.5mL。混勻，放35c±2C溫箱或水浴中，每半小時(shí)觀察一次，24h之內(nèi)呈現(xiàn)凝塊即為陽性。同時(shí)以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)物各0.5mL作陽性與陰性對(duì)

照。

85.1結(jié)果報(bào)告凡在瓊脂平板上有可疑菌落生長(zhǎng)，鏡檢為革蘭氏陽性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固

酶試驗(yàn)陽性者，可報(bào)告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。

B6溶血性鏈球菌檢測(cè)方法B6.1操作步驟

取樣液5mL加入到50mL葡萄糖肉湯，35c±2C培養(yǎng)24h。

將培養(yǎng)物劃線接種血瓊脂平板，35c±2C培養(yǎng)24h觀察菌落特征。溶血性鏈球菌在血平板上為灰白色，半透明或不透明，針尖狀突起，表面光滑，邊緣整齊，周圍有無色透明溶血圈。

挑取典型菌落作涂片革蘭氏染色鏡檢，應(yīng)為革蘭氏陽性，呈鏈狀排列的球菌。鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：

鏈激酶試驗(yàn)：吸取草酸鉀血漿0.2mL(0.01g草酸鉀加5mL兔血漿混勻，經(jīng)離心沉淀，吸取上清液)，加入0.8mL滅菌生理鹽水，混勻后再加入待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5mL和0.25%氯

化車丐0.25mL,混勻，放35c±2C水浴中，2min觀察一次（一般10min內(nèi)可凝固），待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄溶化時(shí)間。如2h內(nèi)不溶化，繼續(xù)放置24h觀察，如凝塊全部溶化為陽性，24h仍不溶化為陰性。

桿菌肽敏感試驗(yàn)：將被檢菌菌液涂于血平板上，用滅菌鐐子取每片含0.04單位桿菌肽的紙片放在平板表面上，同時(shí)以已知陽性菌株作對(duì)照，在35c±2C下放置18?24h,有抑菌帶者為陽性。

B6.2結(jié)果報(bào)告鏡檢革蘭氏陽性鏈狀排列球菌，血平板上呈現(xiàn)溶血圈，鏈激酶和桿菌肽試驗(yàn)陽性，可報(bào)告被檢樣

品檢出溶血性鏈球菌。

B7真菌菌落總數(shù)檢測(cè)方法操作步驟

待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作真菌計(jì)數(shù)，共接種5個(gè)平皿，每一個(gè)平皿中加入1mL樣液，然后用冷卻至45c左右的熔化的沙氏瓊脂培養(yǎng)基15?25mL倒入每個(gè)平皿內(nèi)混合均勻，

瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置25c±2C培養(yǎng)7天，分別于3、5、7天觀察，計(jì)算平板上菌落數(shù)，如果發(fā)現(xiàn)菌落蔓延，以前一次的菌落計(jì)數(shù)為準(zhǔn)。

87.1結(jié)果報(bào)告菌落呈片狀生產(chǎn)的平板不宜采用；計(jì)數(shù)符合要求的平板上的菌落，按式（B2）計(jì)算結(jié)果：

X1XB2）式中：X2真菌菌落總數(shù)，cfu/g或cfu/mL；

B——5塊沙氏瓊脂培養(yǎng)基平板上的真菌菌落總數(shù)；K稀釋度。

當(dāng)菌落數(shù)在100以內(nèi)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)采用二位有效數(shù)字。

如果樣品菌落總數(shù)超過本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，按B7.3進(jìn)行復(fù)檢和結(jié)果報(bào)告。

87.2復(fù)檢方法將留存的復(fù)檢樣品依前法復(fù)測(cè)2次，2次結(jié)果都達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，則判定被檢樣品合格，其中

有任何1次結(jié)果超過本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則判定被檢樣品不合格。

B8真菌定性檢測(cè)方法B8.1操作步驟

取樣液5mL加入到50mL沙氏培養(yǎng)基中，25c士2c培養(yǎng)7天，逐日觀察有無真菌生長(zhǎng)。

B8.2結(jié)果報(bào)告培養(yǎng)管混濁應(yīng)轉(zhuǎn)種沙氏瓊脂培養(yǎng)基，證實(shí)有真菌生長(zhǎng)，可報(bào)告被檢樣品檢出真菌。

附錄C

（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性測(cè)試方法

C1樣品采集

為使樣品具有良好的代表性，應(yīng)于同一批號(hào)三個(gè)運(yùn)輸包裝中至少隨機(jī)抽取20件最小銷售包裝樣品，其中5件留樣，5件做抑菌或殺菌性能測(cè)試，10件做穩(wěn)定性測(cè)試。

C2試驗(yàn)菌與菌液制備C2.1試驗(yàn)菌

C2.1.1細(xì)菌：金黃色葡萄球菌（ATCC6538），大腸桿菌（8099或ATCC25922）。

C2.1.2酵母菌：白色念珠菌（ATCC10231）。

菌液制備：取菌株第3?14代的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物（18?24h）,用5mL0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（以下簡(jiǎn)稱PBS）洗下菌苔，使菌懸浮均勻后用上述PBS稀釋至所需濃度。

C3殺菌性能試驗(yàn)方法該試驗(yàn)取樣部位，根據(jù)被試產(chǎn)品生產(chǎn)者的說明而確定。

C3.1中和劑鑒定試驗(yàn)進(jìn)行殺菌性能測(cè)試必須通過以下中和劑鑒定試驗(yàn)。

C3.1.1試驗(yàn)分組1）染菌樣片+5mLPBS

2）染菌樣片+5mL中和劑3）染菌對(duì)照片+5mL中和劑

4）樣片+5mL中和劑+染菌對(duì)照片5）染菌對(duì)照片+5mLPBS

6）同批次PBS7）同批次中和劑

8）同批次培養(yǎng)基。

C3.1.2評(píng)價(jià)規(guī)定1）第1組無試驗(yàn)菌，或僅有極少數(shù)試驗(yàn)菌菌落生長(zhǎng)。

2）第2組有較第1組為多，彳!較第3、4、5組為少的試驗(yàn)菌生長(zhǎng)，并符合要求。

3）第3、4、5組有相似量試驗(yàn)菌生長(zhǎng)，并在1X104?9X104cfu/片之間，其組間菌落數(shù)誤差率不超過15%。

4）第6?8組無菌生長(zhǎng)。

5）連續(xù)3次試驗(yàn)取得合格評(píng)價(jià)。

C3.2殺菌試驗(yàn)C3.2.1操作步驟

將試驗(yàn)菌24h斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，制成菌懸液（要求的濃度為：用100aL滴于對(duì)照樣片上，回收菌數(shù)為1x104?9X104cfu/片）。

取被試本￥片（2.0cmx3.0cm）和對(duì)照樣片（與試樣同質(zhì)材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經(jīng)滅菌處理）各4片，分成4組置于4個(gè)滅菌平皿內(nèi)。

取上述菌懸液，分別在每個(gè)被試樣片和對(duì)照樣片上滴加100aL,均勻涂布，開始計(jì)時(shí)，作用2、5、10、20min,用無菌鐐分別將樣片投入含5mL相應(yīng)中和劑的試管內(nèi)，充分混勻，作適當(dāng)稀釋，

然后取其中2?3個(gè)稀釋度，分別吸取0.5mL置于兩個(gè)平皿，用涼至40?45c的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

（細(xì)菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（酵母菌）15mL作傾注，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其充分均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，35c±2C培養(yǎng)48h（細(xì)菌）或72h（酵母菌），作活菌菌落計(jì)數(shù)。

試驗(yàn)重復(fù)3次，按式（C1）計(jì)算殺菌率：

X3=（A-B）/AX100%...（C1）式中：X3殺菌率，%；

A——對(duì)照樣品平均菌落數(shù)；B——被試樣品平均菌落數(shù)。

C3.2.2評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)殺菌率A90%,產(chǎn)品有殺菌作用。

C4溶出性抗（抑）菌產(chǎn)品抑菌性能試驗(yàn)方法C4.1操作步驟

將試驗(yàn)菌24h斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，制成菌懸液（要求的濃度為：用100aL滴于對(duì)照樣片上或5mL樣液內(nèi)，回收菌數(shù)為1x104?9X104cfu/片或mL）。

取被試本￥片（2.0cmx3.0cm）或樣液（5mD和對(duì)照樣片或樣液（與試樣同質(zhì)材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經(jīng)滅菌處理）各4片（置于滅菌平皿內(nèi)）或4管。

取上述菌懸液，分別在每個(gè)被試樣片或樣7^和對(duì)照樣片或樣液上或內(nèi)滴加100心L,均勻涂布/混合，開始計(jì)時(shí)，作用2、5、10、20min,用無菌鐐分別將樣片或樣液（0.5mL）投入含5mLPBS

的試管內(nèi)，充分混勻，作適當(dāng)稀釋，然后取其中2?3個(gè)稀釋度，分別吸取0.5mL,置于兩個(gè)平皿，用涼至40?45c的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細(xì)菌）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（酵母菌）15mL作傾注，轉(zhuǎn)

動(dòng)平皿，使其充分均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平板，35c土2c培養(yǎng)48h（細(xì)菌）或72h（酵母菌），作活菌菌落計(jì)數(shù)。

試驗(yàn)重復(fù)3次，按式（C2）計(jì)算抑菌率：

X4=（A-B）/AX100%...（C1）式中：X4——抑菌率，%；

A——對(duì)照樣品平均菌落數(shù)；B——被試樣品平均菌落數(shù)。

C4.2評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)抑菌率A50%?90%,產(chǎn)品有抑菌作用，抑菌率A90%,產(chǎn)品有較強(qiáng)抑菌作用。

C5非溶出性抗（抑）菌產(chǎn)品抑菌性能試驗(yàn)方法C5.1操作步驟

稱取被試樣片（剪成1.0cmx1.0cm大?。?.75g分裝包好。

將0.75g重樣片放入一個(gè)250mL的三角燒瓶中，分別加入70mLPBS^5mL菌懸液，使菌懸液在PBS中的濃度為1x104?9X104cfu/mL。

將三角燒瓶固定于振蕩搖床上，以300r/min振搖1h以瓊脂傾注法接種平皿，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。

以瓊脂傾注法接種平皿，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。

取0.5mL振搖后的樣液，或用PBS做適當(dāng)稀釋后的樣液，同時(shí)設(shè)對(duì)照樣片組和不加樣片組，對(duì)照樣片組的對(duì)照樣片與被試樣片同樣大小，但不含抗菌成分，

其他操作程序均與被試樣片組相同，不加樣片組分別取5mL菌懸液和70mLPBSJ口入一個(gè)250mL三角燒瓶中，混勻，分別于0時(shí)間和振蕩1h后，各取0.5mL菌懸液與PBS的混合液做適當(dāng)稀釋，然后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。

試驗(yàn)重復(fù)3次，按式(C3)計(jì)算抑菌率：

X5=(A-B)/AX100%...(C1)式中：X5——抑菌率，%；

A——被試樣品振蕩前平均菌落數(shù)；B——被試樣品振蕩后平均菌落數(shù)。

C5.2評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)不加樣片組的菌落數(shù)在1x104?9X104cfu/mL之間，且樣品振蕩前后平均菌落數(shù)差值在10%以

內(nèi)，試驗(yàn)有效；被試樣片組抑菌率與對(duì)照樣片組抑菌率的差值〉26%,產(chǎn)品具有抗菌作用。

C6穩(wěn)定性測(cè)試方法C6.1測(cè)試條件

C6.1.1自然留樣：將原包裝樣品置室溫下至少1年，每半年進(jìn)行抑菌或殺菌性能測(cè)試。

C6.1.2加速試驗(yàn)：將原包裝樣品置54?57c恒溫箱內(nèi)14天或37?40c恒溫箱內(nèi)3個(gè)月，保持相對(duì)濕度＞75%,進(jìn)行抑菌或殺菌性能測(cè)試。

C6.2評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品經(jīng)自然留樣，其殺菌率或抑菌率達(dá)到附錄C3或附錄C4、附錄C5中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值，產(chǎn)品的

殺菌或抑菌作用在室溫下的保持時(shí)間即為自然留樣時(shí)間。

產(chǎn)品經(jīng)54c加速試驗(yàn)，其殺菌率或抑菌率達(dá)到附錄C3或附錄C4、附錄C5中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值，產(chǎn)品的殺菌或抑菌作用在室溫下至少保持一年。

產(chǎn)品經(jīng)37c加速試驗(yàn)，其殺菌率或抑菌率達(dá)到附錄C3或附錄C4、附錄C5中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值，產(chǎn)品的殺菌或抑菌作用在室溫下至少保持二年。

（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量測(cè)試方法

D1測(cè)試目的

確定產(chǎn)品消毒后啟用時(shí)間，當(dāng)新產(chǎn)品或原材料、消毒工藝改變可能影響產(chǎn)品理化性能時(shí)應(yīng)予測(cè)試。

D2樣品采集

環(huán)氧乙烷消毒后，立即從同一消毒批號(hào)的三個(gè)大包裝中隨機(jī)抽取一定量小包裝樣品，采樣量至少應(yīng)滿足規(guī)定所需測(cè)定次數(shù)的量（留一定量在必要時(shí)進(jìn)行復(fù)測(cè)用）。

分別于環(huán)氧乙烷消毒后24h及以后每隔數(shù)天進(jìn)行殘留量測(cè)定，直至殘留量降至本標(biāo)準(zhǔn)4.6所規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值以下。

D3儀器與操作條件儀器：氣相色譜儀，氫焰檢測(cè)器（FID）。

柱：Chromosorb101HP60?80目；玻璃柱長(zhǎng)2m,（））3mm。柱溫：120C。

檢測(cè)器：150C。

氣化器：150C。

載氣量：氮?dú)猓?5mL/min。

氫氣：35mL/min。

空氣：350mL/min。

柱前壓約為108kPa。

D4操作步驟D4.1標(biāo)準(zhǔn)配制

用100mL玻璃針筒從純環(huán)氧乙烷小鋼瓶中抽取環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣（重復(fù)放空二次，以排除原有空氣），塞上橡皮頭，用10mL針筒抽取上述100mL針筒中純環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣10mL,用氮?dú)庀?/p>

釋到100mL（可將10mL標(biāo)準(zhǔn)氣注入到已有90mL氮?dú)獾膸鹌と^的針筒中來完成）。用同樣的方法根據(jù)需要再逐級(jí)稀釋2?3次（稀釋1000?10000倍），作三個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)氣體。按環(huán)氧

乙烷小鋼瓶中環(huán)氧乙烷的純度、稀釋倍數(shù)和室溫計(jì)算出最后標(biāo)準(zhǔn)氣中的環(huán)氧乙烷濃度。

計(jì)算公式如下：

44X10*、/27322.4XXi273+t

式中：c——標(biāo)準(zhǔn)氣體濃度，^g/mL；

k——稀釋倍數(shù)；

t室溫,c。

D4.2樣品處理

至少取2個(gè)最小包裝產(chǎn)品，將其剪碎，隨機(jī)精確稱取2g,放入萃取容器中，加入5mL去離子水，充分搖勻，放置4h或振蕩30min待用。如被檢樣品為吸水樹脂材料產(chǎn)品，可適當(dāng)增加去離子水量，以確保至少可吸出2mL樣液。

D4.3分析

待儀器穩(wěn)定后，在同樣條件下，環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體各進(jìn)樣1.0mL,待分析樣品（水溶液）各進(jìn)樣2科L,每一樣液平行作2次測(cè)定。

根據(jù)保留時(shí)間定性，根據(jù)峰面積（或峰高）進(jìn)行定量計(jì)算，取平均值。

D4.4計(jì)算

以所進(jìn)環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣的微克（科g）數(shù)對(duì)所得峰面積（或峰高）作環(huán)氧乙烷工作曲線。

以樣品中環(huán)氧乙烷所對(duì)應(yīng)的峰面積（或峰高）在工作曲線上求得環(huán)氧乙烷的量A（科g）,并以式（D2）求得產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷的殘留量。

式中：X——產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷殘留量，^g/g；

A——從工作曲線中所查得之環(huán)氧乙烷量，Wg；

M所取卞￥品量，g；

V（萃）萃取液體積，mL；

V（進(jìn)）進(jìn)樣量，mL附錄E

（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）生產(chǎn)環(huán)境采樣與測(cè)試方法

E1空氣采樣與測(cè)試方法E1.1樣品采集

在動(dòng)態(tài)下進(jìn)行。

室內(nèi)面積不超過30m2,在對(duì)角線上設(shè)里、中、外三點(diǎn)，里、外點(diǎn)位置距墻1m；室內(nèi)面積超過30m2,設(shè)東、西、南、北、中5點(diǎn)，周圍4點(diǎn)距墻1m。

采樣時(shí)，將含營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的平板（直彳空9cm）置采樣點(diǎn)（約桌面高度），打開平皿蓋，使平板在空氣中暴露5min

E1.2細(xì)菌培養(yǎng)

在采樣前將準(zhǔn)備好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基置35c士2c培養(yǎng)24h,取出檢查有無污染，將污染培養(yǎng)基剔除。

將已采集的培養(yǎng)基在6h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室，于35c士2c培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，計(jì)數(shù)平板上細(xì)菌菌落數(shù)。

E1.3菌落計(jì)算.4X50000

XtT

.4X50000

XtT

(El)

式中：yi——空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)，cfu/m

A——平板上平均細(xì)菌菌落數(shù)；Si平板面積，cm;

t——暴露時(shí)間，min。

E2工作臺(tái)表面與工人手表面采樣與測(cè)試方法E2.1樣品采集

工作臺(tái)：將經(jīng)滅菌的內(nèi)徑為5cmX5cm的滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用一浸有滅菌生理鹽水的棉簽在其內(nèi)涂抹10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采

樣管內(nèi)送檢。

工人手：被檢人五指并攏，用一浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面，從指尖到指端來回涂擦10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。

E2.2細(xì)菌菌落總數(shù)檢測(cè)將已采集的樣品在6h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室，每支采樣管充分混勻后取1mL樣液，放入滅菌平皿內(nèi)，傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每個(gè)樣品平行接種兩塊平皿，置35c±2C培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)平板上細(xì)菌菌落

＞［二2X1?！?E2)

M=再X10(E3)式中：y2工作臺(tái)表面細(xì)菌菌落總數(shù)，cfu/cm;

A——平板上平均細(xì)菌菌落數(shù)；2

S2平板面積，cm;y3——工人手表面細(xì)菌菌落總數(shù)，cfu/只手。

E2.3致病菌檢測(cè)按本標(biāo)準(zhǔn)附錄B進(jìn)行。

附錄F

(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)

消毒效果生物監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)方法

F1環(huán)氧乙烷消毒F1.1環(huán)氧乙烷消毒效果評(píng)價(jià)用生物指示菌為枯草桿菌黑色變種芽胞(ATCC9372)。在菌量為5X

105?5X106cfu/片，環(huán)氧乙烷濃度為600mg/L±30mg/L,作用溫度為54+2C,相對(duì)濕度為60%±10%條件下，其滅殺90%微生物所需時(shí)間D值應(yīng)為2.5?5.8min,存活時(shí)間》7.5min,殺滅時(shí)間＜58min。

F1.2每次測(cè)試至少布放10片生物指示劑，放于最難殺滅處。消毒完畢，取出指示菌片接種營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液作定性檢測(cè)或接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基作定量檢測(cè)，將未處理陽性對(duì)照菌片作相同接種，兩者均置35c士2c培養(yǎng)。陽性對(duì)照應(yīng)在24h內(nèi)有菌生長(zhǎng)。定性培養(yǎng)樣品如連續(xù)觀察7天全部

無菌生長(zhǎng)，可報(bào)告生物指示劑培養(yǎng)陰性，消毒合格。定量培養(yǎng)樣品與陽性對(duì)照相比滅活指數(shù)達(dá)到103也可報(bào)告消毒合格。

F2電離輻射消毒F2.1電離輻射消毒效果評(píng)價(jià)用生物指示菌為短小桿菌芽胞E601(ATCC27142),在菌量為5X105

5X106cfu/片時(shí)，其殺滅90%微生物所需劑量Do值應(yīng)為1.7kGy。

F2.2每次測(cè)試至少選5箱，每箱產(chǎn)品布放3片生物指示劑，置最小劑量處。消毒完畢，取出指示菌片接種營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液作定性檢測(cè)或接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基作定量檢測(cè)，將未處理陽性對(duì)照菌片作相同接種，兩者均置35c±2C培養(yǎng)。陽性對(duì)照應(yīng)在24h內(nèi)有菌生長(zhǎng)。定性培養(yǎng)樣品如連

續(xù)觀察7天全部無菌生長(zhǎng)，可報(bào)告生物指示劑培養(yǎng)陰性，消毒合格。定量培養(yǎng)樣品與陽性對(duì)照相比滅活指數(shù)達(dá)到103也可報(bào)告消毒合格。

F3壓力蒸汽消毒

參儀GGB15981-1995規(guī)定執(zhí)行。

附錄G

(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)

培養(yǎng)基與試劑制備

G1營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

成分：

蛋白陳10g牛肉膏3g

氯化鈉5g瓊脂15g?20g

蒸播水1000mL

制法：除瓊脂外其他成分溶解于蒸播水中，調(diào)pH至7.2?7.4,加入瓊脂，加熱溶解，分裝試管，121c滅菌15min后備用。

G2乳糖膽鹽發(fā)酵管

成分:

20g

5g

10g

25mL

力口至1000mL

蛋白陳豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)乳糖

0.04%澳甲酚紫水溶液蒸播水

制法：將蛋白陳、膽鹽及乳糖溶于水中，校正pH至7.4,加入指示劑，分裝每管50mL,并放入一個(gè)小倒管，115c滅菌15min,即得。

G3乳糖發(fā)酵管

成分：

蛋白陳20g乳糖10g

0.04%澳甲酚紫水溶液25mL蒸播水加至1000mL

制法：將蛋白月東及乳糖溶于水中，校正pH至7.4,加入指示劑，分裝每管10mL,并放入一個(gè)小倒管，115c滅菌15min,即得。

G4伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)

成分：

蛋白陳10g乳糖10g

磷酸氫二鉀2g瓊脂17g

2%伊紅Y溶液20mL0.65%美藍(lán)溶液10mL

蒸播水

力口至1000mL

制法：將蛋白月東、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸儲(chǔ)水中，校正pH至7.1,分裝于燒瓶?jī)?nèi)，121c滅菌15min備用，臨用時(shí)加入乳糖并加熱溶化瓊脂，冷至55C,加入伊紅和美藍(lán)溶液搖勻，傾注平板。

G5SCDLP夜體培養(yǎng)基

成分：

酪蛋白月東17g大豆蛋白月東3g

氯化鈉5g磷酸氫二鉀2.5g

葡萄糖2.5g卵磷脂1g

吐溫807g蒸播水1000mL

制法：將各種成分混合（如無酪蛋白陳和大豆蛋白陳可用日本多月東代替），加熱溶解，調(diào)pH至7.2?7.3,分裝，121c滅菌20min,搖勻，避免吐溫80沉于底部，冷至25c后使用。

G6十六烷三甲基澳化鏤培養(yǎng)基

成分：

牛肉膏3g蛋白陳10g

氯化鈉5g十六烷三甲基澳鏤0.3g

瓊脂20g蒸播