化妝品中有毒有害物質(zhì)的檢驗(yàn)方法研究

1、化妝品中有毒有害物質(zhì)的檢驗(yàn)方法研究    1美白祛斑產(chǎn)品中糖皮質(zhì)激素的測(cè)定方法美白祛斑產(chǎn)品中7種糖皮質(zhì)激素(包括地塞米松磷酸鈉、氫化可的松、地塞米松、醋酸氫化可的松、醋酸可的松、醋酸地塞米松、丁酸氫化可的松)非法添加的分離測(cè)定(HPLC-DAD)研究。規(guī)范中其為禁用物質(zhì),但是卻沒有衛(wèi)生化學(xué)檢驗(yàn)方法。文獻(xiàn)報(bào)道中有6種糖皮質(zhì)激素或糖皮質(zhì)激素與其他激素成份的同時(shí)測(cè)定,但系統(tǒng)的研究和方法的制定還需開展。第一階段我們采用HPLC-DAD,以梯度洗脫的方式成功地分離測(cè)定了7種物質(zhì)。第二階段我們采用快速液相色譜(RPLC)-DAD在10分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)了7種物質(zhì)的快速分離分

2、析。色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(使用C18預(yù)柱),以0.025mol/L磷酸二氫鉀(含0.25%的三乙胺,磷酸調(diào)pH至3.4)-甲醇(4732)為流動(dòng)相A,以乙腈為流動(dòng)相B,檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm。分離度應(yīng)大于1.5。色譜條件2:以0.025mol/L磷酸二氫鉀(含0.25%的三乙胺,磷酸調(diào)pH至3.4)-甲醇(4732)為流動(dòng)相A,以乙腈為流動(dòng)相B,檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:分別準(zhǔn)確稱取地塞米松磷酸鈉、氫化可的松、地塞米松、醋酸氫化可的松、醋酸可的松、醋酸地塞米松、丁酸氫化可的松各50.00mg,至50ml量瓶中,用適量甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,配成

3、各組分質(zhì)量濃度為1.00mg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:準(zhǔn)確移取不同體積的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液于10mL容量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻。在設(shè)定色譜條件下,分別取10L進(jìn)行分析。以標(biāo)準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。供試品溶液的制備:準(zhǔn)確稱取樣品約1g于20mL量瓶中,加甲醇適量,振搖,超聲提取20min30min,放冷,加甲醇稀釋至刻度,搖勻。經(jīng)0.45m濾膜過濾,濾液作為待測(cè)溶液備用。測(cè)定法分別精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul,分別注入液相色譜儀,按標(biāo)準(zhǔn)曲線法以峰面積計(jì)算。2美白祛斑產(chǎn)品中11種磺胺類化合物殘留量的的測(cè)定方法2.1儀器與試藥:Agilent12

4、00高效液相色譜儀,電子天平,超聲儀,渦旋振蕩器。磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧噠嗪、磺胺氯噠嗪、磺胺甲基異噁唑、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺多辛、磺胺二甲氧嘧啶對(duì)照品,甲醇為色譜純,冰醋酸為分析純。2.2樣品來源:化妝品共67批,來自市場(chǎng)抽驗(yàn)。2.3色譜條件:色譜柱:AgilentSB-C18(1.8m,4.6mm×50mm),AgilentTechnologies;柱溫:50。流動(dòng)相A:甲醇-冰醋酸溶液(0.25100)(15:85),流動(dòng)相B:甲醇,梯度洗脫:06min,流動(dòng)相A為100%;69min,流動(dòng)相A為40%。流速:1.5mLmin-1

5、;檢測(cè)波長(zhǎng):270nm;進(jìn)樣量:10L。2.4線性關(guān)系試驗(yàn):分別稱取一定量的磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧噠嗪、磺胺氯噠嗪、磺胺甲基異噁唑、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺多辛、磺胺二甲氧嘧啶對(duì)照品,用流動(dòng)相A溶解并配制成100gmL-1的溶液,作為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量,用流動(dòng)相A稀釋制成濃度分別為0.1、0.3、1.0、4.0、10.0、30.0、80.0、100.0gmL-1系列濃度的工作溶液。按上述色譜條件用高效液相色譜儀測(cè)定,以測(cè)得峰面積Y為縱座標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度X為橫座標(biāo)進(jìn)行線性回歸,色譜峰面積與濃度呈良好線性關(guān)系?；前粪奏?、磺胺噻唑、磺胺吡啶、

6、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧噠嗪、磺胺氯噠嗪、磺胺甲基異噁唑、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺多辛、磺胺二甲氧嘧啶的相關(guān)系數(shù)均為1.000。2.5加樣回收率試驗(yàn):取未測(cè)出上述11種磺胺的化妝品作為空白樣品,混勻后取樣1.00g,分別向樣品中添加一定量11種磺胺的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,加流動(dòng)相A同樣品處理,離心后取上清液過濾即得。結(jié)果平均回收率均為93%104%之間,RSD在0.3%2.4%之間。結(jié)果表明,該殘留檢測(cè)方法可靠,重現(xiàn)性好,精密度和準(zhǔn)確度均能達(dá)到殘留分析的要求。2.6實(shí)際樣品分析:稱取1.00g樣品,加適量流動(dòng)相A混勻,超聲處理20分鐘,高速離心。轉(zhuǎn)移上清液過濾,進(jìn)樣測(cè)定。所得色譜圖見圖1、圖

7、2。在67批樣品中均未檢測(cè)出11種磺胺。2.7最低檢測(cè)限度試驗(yàn):將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液分別加入空白樣品中,按樣品處理方法處理后檢測(cè),磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧噠嗪、磺胺氯噠嗪、磺胺甲基異噁唑、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺多辛、磺胺二甲氧嘧啶的最小檢測(cè)濃度分別為1.0gg-1,1.0gg-1,1.1gg-1,1.1gg-1,2.7gg-1,2.6gg-1,2.5gg-1,2.5gg-1,2.5gg-1,5.10gg-1,1.1gg-1。3結(jié)語以上化妝品中四大類系物質(zhì)的快速液相測(cè)定法完善和填補(bǔ)了化妝品衛(wèi)生規(guī)范(2007年版)只有限度沒有方法的空白,而且是針對(duì)市場(chǎng)監(jiān)測(cè)的需求有的放矢進(jìn)行的方法研究。另外我們還進(jìn)行了化妝品中丙烯酰胺殘留的LC/MS/MS的研究,化妝品中限用禁用物質(zhì)的研究是一個(gè)系統(tǒng)工程,我們將在已完成工作基礎(chǔ)上這項(xiàng)研究持續(xù)進(jìn)行下去。