12級生化考試重點答案

1、醫(yī)學生物化學期末復習題題型：（1）選擇題25題（每題1分），占25分（2）填空題10題（每題1分），占10分 C3）名解15題（每題2分），占30分（4）問答5題（每題7分），占35分一章、蛋白質：【名解】（17）等電點：肽鍵、蛋白質的一級結構、亞基、空間構象、蛋白質的二級結構、蛋白質的三級結構、蛋白質的四級結構、a-螺旋、牛折疊、超二級結構、模體、結構域、分子伴侶、蛋白質組、協(xié)同效應、蛋白質變性【問答】C3）1）二十種氨基酸的中文名稱、英文三字母簡寫以及單字母簡寫。非極性脂肪族氨基酸極性中性氨基1爰甘氨酸GlyG絲氨酸Sers丙氨酸AlaA半胱氨酸Cysc繳氨酸ValV蛋氨酸MetM亮氨酸L

2、euL天冬酰胺AsnN異亮氨酸lie1谷氨酰胺GinQ脯氨酸ProP蘇氨酸ThrT 方香族氨基酸堿性氨基酸苯丙氨酸PheF賴氨酸LysK色氨酸TrpW精氨酸ArgR酪氨酸TyrY組氨酸HisH酸性氨基酸蛋氨酸：也稱甲硫氨酸天冬氨酸AspD谷氨酸GluE2）舉例說明蛋白質一級結構與功能關系。 一級結構是局級結構和功能的基礎一級結構是空間構象的基礎：一級結構是空間結構和生物功能的基礎，一級結構決定空間結構；一級結構并非決定空間結構的唯一因素，分子伴侶起著重要的作用；空間結構是生物活性的直接體現(xiàn)。一級空間結構相似的蛋白質具有相似的高級空間結構與功能一胰島素，不同的哺乳動物的胰島素一級結構相似，結構和

3、功能也類似。氨基酸序列提供重要的生物進化信息一細胞色素c,物種間越接近，則一 級結構越相似，其空間結構和功能也越相似。重要蛋白質的氨基酸序列改變可引起疾病一鐮刀形貧血癥，谷氨酸變成了結頁氨酸。2A蛋白質的功能依賴特定空間結構體內(nèi)蛋白質具有的特定空間構象都與其特殊的生理功能有著密切的關系，蛋白質構象的改變可引起疾病，如瘋牛病。3) 蛋白質分離與純化方法及應用分析，重點是用離子交換層析分離蛋白質組分或氨基酸組分及其層析圖譜分析。一、透析及超濾法可去除蛋白質溶液中的小分子化合物透析(dialysis):利用透析袋把大分子蛋白質與小分子化合物分開的方法。超濾法：應用正壓或離心力使蛋白質溶液透過有一定截

4、留分子量的超濾膜，達到濃縮蛋白質溶液的目的。二、丙酮沉淀、鹽析及免疫沉淀是常用的蛋白質沉淀方法丙酮沉淀：使用丙酮沉淀時，必須在 0? 4°C低溫下進行，丙酮用量一般 10倍于蛋 白質溶液體積。蛋白質被丙酮沉淀后，應立即分離。除了丙酮以外，也可用乙醇沉淀。鹽析:鹽析 (salt precipitation) 是將硫酸鉉、硫酸鈉或氯化鈉等加入蛋白質溶 液，使 蛋白質表面電荷被中和以及水化膜被破壞，導致蛋白質沉淀。免疫沉淀法:用某一純化蛋白質來免疫 (使某物產(chǎn)生抗性 )動物可獲得抗該 蛋白的特 異抗體。利用特異抗體識別相應的抗原蛋白，并形成抗原抗體復合物的性質，可從蛋白質混合溶液中分離獲得

5、抗原蛋白。三、利用荷電性質可用電泳法將蛋白質分離蛋白質在高于或低于其 pl 的溶液中為帶電的顆粒，在電場中能向正極或負極 移動。 這種通過蛋白 質在電場中泳動而達到分離各種蛋白質的技術， 稱為電 泳 (elctrophoresis)。根據(jù)支撐物的不同，可分為薄膜電泳、凝膠電泳等。 幾種重要的蛋白質電泳: SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳，常用于蛋白質分子量的測定。 等電聚焦電泳，通過蛋白質等電點的差異而分離蛋白質的電泳方法。 雙向凝膠電泳是蛋白質組學研究的重要技術。四、應用相分配或親和原理可將蛋白質進行層析分離層析(chromatography)分離蛋白質的原理：待分離蛋白質溶液 (流動相 )經(jīng)過一個

6、固態(tài)物質 (固定相 )時，根據(jù)溶液中 待分離的蛋 白質顆粒大小、電荷多少及親和力等，使待分離的蛋白質組分在兩相中反復分配，并以不同速度流經(jīng)固定相而達到分離蛋白質的目的。蛋白質分離常用的層析方法： 離子交換層析：利用各蛋白質的電荷量及性質不同進行分離。凝膠過濾(gelfiltration)(分子篩層析)，利用各蛋白質分子大小不同分離a.大球是菊聚橫凝膠顆粒b. 樣品上柱后，小分子進入凝膠微孔，大分 子不能進人，故洗脫時大分子先洗脫下來c. 小分子后洗脫出來高子交換層析分離蛋白質a. 樣品全部交換并吸附到樹脂上b. 負電荷較少的分子用較稀的 a 或其他負離子溶液洗脫e.電荷多的分子隨Q濃度埴如依

7、次洗脫d.洗脫圖AJK,表示為280nm的吸光度圖2五、利用蛋白質顆粒沉降行為不同可進行超速離心分離超速離心法(ultracentrifugation)既可以用來分離純化蛋白質也可以用作測定蛋白質的分子量。蛋白質在離心場中的行為用沉降系數(shù)(sedime ntatio n coefficie nt, S)表示，沉降 系數(shù)與蛋白質的密度和形狀相關。因為沉降系數(shù)S大體上和分子量成正比關系，故可應用超速離心法測定蛋白質分子量，但對分子形狀的高度不對稱的大多數(shù)纖維狀蛋白質不適用。二章、核酸：【名解】(16)超螺旋結構及正、負超螺旋、Hoogsteen氫鍵、核小體、5,帽結構、Poly(A)-tail、h

8、nRNA、mRNA tRNA、snmRNA siRNA三聯(lián)體密碼、開放閱讀框、DNA變性、 增色效應、解鏈溫度、核酶【問答】(1)1) DNA雙螺旋結構模型特點及其意義1. DNA是反向平行、右手螺旋的雙鏈結構兩條多聚核昔酸鏈在空間的走向呈反向平行(anti-parallel)o兩條鏈圍繞著同一個螺旋軸形成右手螺旋(right-ha nded)的結構。雙螺旋結構的直徑為2.37 nm,螺距為 3.54nm。脫氧核糖和磷酸基團組成的親水性骨架位于雙螺旋結構的外側，疏水的堿基位于內(nèi)側。雙螺旋結構的表面形成了一個大溝(major groove)和一個小溝(minor groove) 2. DNA雙鏈

9、之間形成了互補堿基對堿基配對關系稱為互補堿基對 (compleme ntary base pair)o DNA分子中，腺嘿 吟與胸腺唯嚏配對(A=T)鳥喋吟與胞密嚏配對(GHC)oDNA的兩條鏈則互為互補鏈(complementary strand)。堿基對平面與螺旋軸垂直。3. 疏水作用力和氫鍵共同維系著 DNA雙螺旋結構的穩(wěn)定。相鄰兩個堿基對會有重疊，產(chǎn)生了疏水性的堿基堆積力(base stacki ngin teracti on) o堿基堆積力和互補堿基對的氫鍵共同維系著DNA結構的穩(wěn)定。三章、酶：【名解】(16)寡聚酶、多酶體系、結合酶、全酶、輔酶、酶的活性中心、同工酶、酶的專一性、酶

10、與底物結合的誘導契合、酶的抑制劑、酶的競爭抑制作用、酶的非競爭抑制作用、酶的反競爭抑制作用、變構酶、變構調(diào)節(jié)、酶原的激活【問答】(3)1)酶的反應特點(P68-70)(1) 八酶反應具有極高的效率酶的催化效率通常比非催化反應高1081儼°倍，比一般催化劑高1071013倍。例如服酶催化尿素的水解速率是H+催化作用的7X1012倍。a-胰凝乳蛋白酶 對本酰胺的水解速率是H+的6x106而且不需要較高的反應溫度。(2) 、酶促反應具有高度的特異性酶對其所催化的底物具有較嚴格的選擇性；即一種酶僅作用于一種或一類化合物，或一定的化學鍵，催化一定的化學反應并產(chǎn)生一定的產(chǎn)物，酶的這種特性稱為酶的

11、特異性或專一性?？煞譃槿悾?絕對特異性：這類酶只能作用于特定結構的底物，進行一種專一的反應，生成一種特定結構的產(chǎn)物。如服酶、琥珀酸脫氫酶。 相對特異性：這類酶特異性相對較差，可作用于一類化合物或一種化學鍵。如磷酸酶、脂肪酶、蔗糖酶。立體異構特異性：這類酶僅作用于底物分子的一種立體異構體。如糖代謝的酶類僅作用于D-葡萄糖及其衍生物，對 L葡萄糖及其衍生物則無作用；蛋 白質代謝的酶類僅 作用于L氮基酸，對D氮基酸則無作用。（3）、酶促反應具有可調(diào)節(jié)性酶促反應受多種因素的調(diào)控，以適應機體對不斷變化的內(nèi)外環(huán)境和生命活動的需要。例如：酶與代謝物在細胞內(nèi)的區(qū)域分布和進化過程中基因分化形成的各種同工酶使各

12、組織器官、各亞細胞結構具有各自的代謝特點。酶原的激活使酶在合適的環(huán)境被激活和發(fā)揮作用。代謝物通過對代謝途徑中關鍵酶、變構酶的抑制與激活和對酶的共價修飾，對酶活性進行快速調(diào)節(jié)。酶生物合成的誘導與阻遏、酶降解速率的調(diào)節(jié)可發(fā)揮對酶活性的長期調(diào)節(jié)作用。2）了解酶促反應動力學及米氏方程酶促反應動力學：研究酶促反應的速度規(guī)律以及各種因素對酶促反應速度的 影響影響酶促反應速度的因素包括：底物濃度、酶濃度、產(chǎn)物濃度、pH、溫度、抑制劑、激活素等v = LUS米氏方程：注：Vmax為最大反應速率， S時的反應速率。當?shù)孜餄舛群艿停榈孜餄舛?，Km為米氏常數(shù)，V是在不同SS ?Km）時，丫 =匕些5，反應速率與底

13、KmS ?Km）時，VMVmax反應速率達最 大，再增° Km + S物濃度呈正比。當?shù)孜餄舛群芨撸拥孜餄舛纫膊辉儆绊懛磻省?）溫度、pH對酶活性的影響C1）溫度的影響酶是生物催化劑，溫度對酶促反應速率具有雙重影響。升高溫度一方面可以加快酶促反應速率，同時也增加酶變性的可能性。酶促反應速率最快時反應體系的溫度稱為酶促反應的最適溫度。酶的最適溫度不是酶的特征性常數(shù)，它與反應進行的時間有關。酶可以在短時間內(nèi)耐受較高溫度。延長反應時間，酶的最適溫度便降低。酶的活性隨著溫度的下降而降低，但低溫一般不使酶破壞，而高溫可以使酶變性失活。酶的最適溫度相當于細胞最適生活環(huán)境的溫度，或稍高。C2

14、） pH的影響酶分子中的許多極性基團，在不同的 pH條件下解離狀態(tài)的不同，其所帶電 荷的種 類和數(shù)量也各不相同，酶活性中心的某些必須基團往往在某一解離狀態(tài)才能最容易與底物結合或具有最大催化活性。許多具有可解基團的底物和輔酶的荷電狀態(tài)也受pH改變的影響，從而影響酶對它們的親和力。pH還可以影響酶活性中心的空間結構，從而影響它的活性。酶催化活性最高的反應體系的pH成為酶促反應的最適 pHo最適pH不是酶的特征常數(shù)，它受底物濃度、緩沖液種類與濃度以及酶純度等因素的影響。接近最適pH,酶活性升高，遠離最適pH時，還會導致酶變性或失活。在測定酶活性時應該選用適宜的緩沖液以保持酶活性的相對恒定。4）確定酶

15、的活性中心有哪幾種方法？并解釋其原理。（自行添加）1. 化學修飾法：酶分子側鏈上的各種基團均可由特定的化學試劑進行共價修飾。當它被某一化學試劑修飾后，若酶活性顯著下降或喪失，則可初步推斷該基團為酶的必需基團。2. 動力學分析法：通過研究酶活性與 pH關系、改變反應溫度求出 Vmax和 Km與pH關系、在有機溶劑中測定酶 pK值與介電常數(shù)的關系，也有助于對活性部位的判斷。3. X 一射線衍射分析法：將酶與底物類似物或專一性抑制劑形成復合物，而后作X一射線衍射分析，從而得到有關酶活性中心構象、酶與底物的接觸狀況以及催化機理的信息。4. 蛋白質工程：利用基因定點突變技術將酶相應的互補 DNA（ CD

16、NA基因定點突變，突變的CDNA表達出被一個或幾個氨基酸置換的酶蛋白，再測定其活性就可以知道被置換的氨基酸是否為酶活性所必需。四章、糖代謝：【名解】（7）糖酵解、三蔑酸循環(huán)、磷酸戊糖途徑、糖異生、底物循環(huán)、乳酸循環(huán)、糖尿病【問答】（3）1）血糖的主要來源與去路血糖3.896.11mmol/L>CQ+H2 0州嫗-肝、肌糖原磷酸戊糖途徑等 ） 苴他糖食物糖消化吸收肝糖原非糖物質糖異生旅類'氨基酸也一 n脂肪、氨基酸等2） “狗急跳墻"的生理機制狗受到外界給予的應激性刺激，一方面交感神經(jīng)興奮，神經(jīng)沖動傳至腎上腺髓質，使之活動性增強，分泌兒茶酚胺，兒茶酚胺除引起中樞興奮外，還

17、引發(fā)一系列外周反應，包括促使外周血管收縮，升高血壓，提高骨骼肌緊張等；另一方面，應激原刺激還可啟動下丘腦-垂體-腎上腺皮質（HPA）軸應激反應，HPA軸興奮釋放促腎上腺皮 質激素釋放激素來增加腎上腺皮質激素釋放激素的分泌，進而使血漿中糖皮質激素的濃度升高，糖皮質激素分泌增加促進肝糖原分解，使得血糖濃度快速升高，骨骼肌供能增多，狗便擁有足夠了的力量以至跳過墻頭。3） 了解糖酵解、三蔑酸循環(huán)、磷酸戊糖途徑、糖異生等各反應步驟的反應物、反應 產(chǎn)物、關鍵酶及ATP產(chǎn)能情況糖酵解：葡萄糖經(jīng)酵解途徑分解為兩分子丙酮酸。 葡萄糖磷酸化為6-磷酸葡萄糖。（-1ATF） 6-磷酸葡萄糖轉變?yōu)?-磷酸果糖。 6-

18、磷酸果糖轉變?yōu)?,6-雙磷酸果糖。（-1ATF） 磷酸己糖裂解成2分子磷酸丙糖。 磷酸丙糖的同分異構化。 3-磷酸甘油醛氧化為1,3二磷酸甘油酸。（3或5ATP） 1,3-二磷酸甘油酸轉變成 3-磷酸甘油酸。（2ATF） 3-磷酸甘油酸轉變?yōu)?-磷酸甘油酸。 2-磷酸甘油酸轉變?yōu)榱姿嵯┐际奖帷?磷酸烯醇式丙酮酸轉變成丙酮酸，接著底物水平磷酸化生成ATPo （2ATP） 3個關鍵酶：（別構調(diào)節(jié)、共價修飾調(diào)節(jié)）（一）6-磷酸果糖激酶-1 （四聚體）對調(diào)節(jié)酵解途徑的產(chǎn)量最重要。（二）丙酮酸激酶是糖酵解的第二個重要的調(diào)節(jié)點。（三）己糖激酶受到反饋抑制調(diào)節(jié)。三梭酸循環(huán)：三埃酸循環(huán)是以形成檸檬酸為初始

19、產(chǎn)物的循環(huán)反應系統(tǒng)。 乙酰CoA與草酰乙酸縮合成檸檬酸。 檸檬酸經(jīng)順烏頭酸轉變?yōu)楫悪幟仕帷?異檸檬酸氧化脫埃轉變?yōu)?a-酮戊二酸。（5ATP） a-酮戊二酸氧化脫埃生成琥珀酰 CoAo （5ATP 琥珀酰CoA合成酶催化底物水平磷酸化反應。（2ATR 琥珀酸脫氫生成延胡索酸。（3ATP） 延胡索酸加水生成蘋果酸。3個關鍵酶：（-）檸檬酸合酶（二）a酮戊二酸脫氫酶復合體（三）異檸檬酸脫氫酶磷酸戊糖途徑：葡萄糖經(jīng)過磷酸戊糖途徑產(chǎn)生磷酸核糖、NADPH和C02,而不是生成ATP,前者再進一步轉變成3-磷酸甘油醛和6-磷酸果糖的反應過程。其在胞質中進行，分兩個步驟： 1.6-磷酸葡萄糖在氧化階段生成磷

20、酸戊糖、C02和NADPHo 在第一階段中的磷酸戊糖和 2分子NADPH分別用于合成核甘酸和許化合物的合成代謝。在第二階段，經(jīng)過基團轉移反應，磷酸戊糖轉變?yōu)?-磷 酸葡萄糖和3-磷酸甘油醛而進入糖酵解途徑。1個關鍵酶：6-磷酸葡萄糖脫氫酶，其活性的高低決定G-6-P進入磷酸戊糖途徑的流量。此酶活性主要受NADPH/NADP+匕值的影響，比值升高則被抑制，降低則被激活。另外NADPH對該酶有強烈抑制作用。該途徑流量取決于NADPH的需 求。糖異生（gluconeogenesiS :從非糖化合物轉變?yōu)槠咸烟腔蛱窃倪^程。 糖異生途徑不完全是糖酵解的逆反應。 丙酮酸經(jīng)丙酮酸域化支路變?yōu)榱姿嵯┐际奖?/p>

21、酸。 1,6-雙磷酸果糖轉變?yōu)?-磷酸果糖。 6-磷酸葡萄糖水解為葡萄糖。2個關鍵酶：（-）丙酮酸埃化酶（pyruvate carboxylase，輔酶為生物素（反應在線粒體）（二） 磷酸烯醇式丙酮酸蔑激酶（反應在線粒體、胞液葡萄糖有氧氧化生成的 ATP反應輔酶最終獲得ATP第一階段：胞漿葡萄糖一 6-磷酸葡萄糖-16-磷酸果糖一1,6-二磷酸果糖-12X3磷酸甘油醛->2X1,3二磷酸甘油酸:2NADH*3 或 5:2x1,3-二磷酸甘油酸一2X3磷酸甘油酸22x磷酸烯醇式丙酮酸一 2x丙酮酸2第二階段：線粒體基質2x丙酮酸一2x乙酰CoA2NADH5第三階段：線粒體基質2x異檸檬酸一

22、2xa酮戊二酸2NADH52xa-酮戊二酸一 2X琥珀酰CoA2NADH52x琥珀酰CoA 一 2x琥珀酸22x琥珀酸一 2x延胡索酸2FADH23:2x蘋果酸一 2x草酰乙酸2NADH5有一個葡萄糖共獲得30 或 32獲得的ATP的數(shù)量取決于還原當量進入線粒體的穿梭機制（1） 2NADH （胞質）一 a-磷酸甘油穿梭一 2FADH3ATP(2) 2NADH (胞質)一蘋果酸-天冬氨酸穿梭一 2NADHH 5ATP五章、脂類代謝【名解】 (5)不飽和脂酸、甘油三酯、脂酸 B 氧化、脂肪動員、酮體、 【問答】 C3)1) 血漿脂蛋白根據(jù)其密度分為幾類及各自的主要功能。2) 脂肪動員的主要過程。3) 酮體的生成及生理意義。六章、生物氧化：【名解】 (6)生物氧化、氧化呼吸鏈、 P/0 比值、氧化磷酸化、底物水平磷酸化、高能磷 酸鍵、 【問答】 C3)1) 骨骼肌中和肝臟中，葡萄糖完全代謝的各途徑中ATP、NADH、FADH2 的 產(chǎn)生 情況。(見 174 頁的圖 6-17、6-18) o2) 魚藤酮中毒現(xiàn)象和寡霉素中毒現(xiàn)象對生物氧化的影響。(見課本168 頁的 圖