大鼠急性心肌缺血模型制備詳細圖解_第1頁
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文檔簡介

1、模型的背景，心肌缺血模型分全心缺血和左心室缺血兩種，全心缺血主要靠注射藥物（如異丙腎上腺素等），左心室缺血主要靠手術對動物的冠狀動脈左降支進行緊扎實現(xiàn)。由于左心室缺血對臨床的意義更大，所以研究心肌缺血藥物時這個模型是必須的。（1）術前12小時給動物禁食（2）將動物注射10%水合氯醛（0.4mL/100g）麻醉后固定在手術臺上（3）用筆型靜脈置留針進行氣管插管，插好后可用手術刀柄靠近氣管，如果見氣霧，就證明成功，連接動物呼吸機，參數(shù)為：呼吸頻率85；呼吸比1：1；潮氣量為18ml（4）胸部被毛、酒精棉消毒，在胸部左側34肋間剪開皮膚，如圖1（5）分離肌肉露出肋骨，切口位置有兩塊肌肉，胸淺肌和胸深

2、肌，注意按照肌肉的紋路分離可以避免將肌肉扯爛，如圖2（6）在第三根肋骨下用止血鉗將肌肉分離開，然后左手用止血鉗挑住肋骨，右手持剪刀剪開第三根肋骨，如圖3 （7）用止血鉗將剪斷的肋骨夾住掰開，放入開瞼器，用止血鉗剝離心包膜，如圖4（8）用止血鉗將胸腺（心臟上面白的像脂肪一樣的東西）夾住拉出，如圖5（9）在左心耳與肺動脈圓錐間穿60號線，拉緊絲線，形成心肌缺血，觀察線扎緊的部位上下大約2mm范圍的心肌是發(fā)白色的，如圖6（10）閉合胸腔，注意將胸腔內的空氣擠出（這點非常關鍵，這個模型最容易失敗導致大鼠死亡的就是這個地方），對肌肉和皮進行縫合，擠空氣的手法如圖7（11）結扎術后6小時可進行TTC染色：將大鼠脫頸處死，打開胸腔，將心臟剪下，用生理鹽水將心臟清洗干凈并排出心臟內的淤血，沿冠狀溝將心房切除留下心室，用刀片將心臟切成1mm厚的切片，放入0.1%的TTC磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）37水浴710分鐘，取出切片用生理鹽水沖洗數(shù)次，觀察結果。非梗死區(qū)因脫氫酶還原TTC而呈紅色，梗死區(qū)因脫氫酶流失而呈白色，將梗死區(qū)和非梗死區(qū)分離并分別稱重，梗死范圍以梗死心肌占缺血心肌重量的百分比表示。下圖是染色的結果，圖8結扎位置，梗死的地方其實肉眼大致能看出，和其他地方相比發(fā)白，圖9：下面再

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