化妝品中鉛的測(cè)定

1、中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化妝品中鉛的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法(1)及注解UDC 668.53：543.062(GB 7917.387)Standard methods of hygienic test for cosmetics Lead1 火焰原子吸收分光光度法(2)本方法適用化妝品中鉛的測(cè)定。本方法樣品最低檢測(cè)濃度為 4ppm。1.1 方法提要樣品經(jīng)預(yù)處理，使鉛以離子狀態(tài)存在于試液中，試液中鉛離子被原子化后，基態(tài)原子吸收來(lái)自鉛空心陰極燈發(fā)出的共振線， 其吸收量與樣品中鉛含量成正比。 在其他條件不變的情況下，根據(jù)測(cè)量被吸收后的譜線強(qiáng)度，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較，進(jìn)行定量。1.2 樣品采集同 GB7917.187化妝

2、品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 汞第 2 章1.3 試劑1.3.1 去離子水或同等純度的水：將一次蒸餾水經(jīng)離子交換凈水器凈水，貯存于全玻璃瓶或聚乙烯瓶中。注：所有試劑配制及分析步驟中所用的水均為此水。1.3.2 硝酸（密度 1.42g/ml）：優(yōu)級(jí)純。1.3.3 高氯酸（7072）：優(yōu)級(jí)純。1.3.4 過(guò)氧化氫（30）：優(yōu)級(jí)純。1.3.5 硝酸（11）。1.3.6 混合酸：硝酸（1.3.2）和高氯酸（1.3.3）按（31）混合。1.3.7 鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液1.3.7.1 稱取純度為 99.99的金屬鉛 1.000g，加入 20ml（11）硝酸（1.3.5），加熱使溶解，轉(zhuǎn)移到 1000ml 容量瓶中，用水稀

3、釋至刻度。此標(biāo)準(zhǔn)溶液 1ml 相當(dāng)于 1.00mg 鉛。1.3.7.2 稱取鉛標(biāo)準(zhǔn)液（1.3.7.1）10.0ml 至 100ml 容量瓶中，加 2ml（11）硝酸（1.3.5）用水稀釋至刻度，此溶液 1ml 相當(dāng)于 100g 鉛。1.3.7.3 稱取鉛標(biāo)準(zhǔn)液（1.3.7.2）10.0ml 至 100ml 容量瓶中，加 2ml（11）硝酸，用水稀釋至刻度，此溶液 1ml 相當(dāng)于 10.0g 鉛。1.3.8 MIBK（甲基異丁基酮）：分析純(3)。1.3.9 鹽酸（7N）：取 30ml 鹽酸（密度 1.19g/ml），加水至 50ml。1.3.10 BTB（溴麝香草酚藍(lán)）（0.1）：稱取 100

4、mgBTB，溶于 50ml 95乙醇溶液，加水至 100ml。1.3.11 檸檬酸銨（25）：必要時(shí)用 DDTC（1.3.14）和 MIBK（1.3.8）萃取除鉛(4)。1.3.12 氫氧化銨（11）：優(yōu)級(jí)純。1.3.13 硫酸銨（40）：必要時(shí)，以 DDTC（1.3.14）和 MIBK（1.3.8）萃取除鉛(4)。1.3.14 DDTC（二乙氨基二硫代甲酸鈉）（2）(5)。1.3.15 APDC（吡咯烷二硫代甲酸銨）（2）(6)。1.3.16 檸檬酸（20）：必要時(shí)用 APDC（1.3.15）和 MIBK（1.3.8）萃取除鉛(4)。1.4 儀器1.4.1 原子吸收分光光度計(jì)及其配件。1.4

5、.2 離心機(jī)。1.4.3 硬質(zhì)玻璃消解管或小型定氮消解瓶。1.4.4 比色管：10ml 及 25ml。1.4.5 分液漏斗：100ml。1.4.6 瓷坩堝：50ml。1.4.7 箱形電爐。1.5 分析步驟1.5.1 樣品預(yù)處理1.5.1.1 濕式消解法(8)(9)稱取約 1.002.00g 試樣置于消化管中。同時(shí)做試劑空白。含有乙醇等有機(jī)溶劑的化妝品，先在水浴或電熱板上將有機(jī)溶劑揮發(fā)。若為膏霜型樣品，可預(yù)先在水浴中加熱使瓶頸上樣品熔化流入消化管底部。加入數(shù)粒玻璃珠，然后加入 10ml 硝酸（1.3.2），由低溫至高溫加熱消解，當(dāng)消解液體積減少到 23ml，移去熱源，冷卻。然后加入 25ml 高

6、氯酸如使用不當(dāng)，高氯酸有爆炸危險(xiǎn)。安全使用高氯酸，應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：1）灑濺出的高氯酸要立即用水沖洗。2）通風(fēng)櫥、導(dǎo)氣管和鞭他排除高氯酸蒸氣的裝置，應(yīng)由化學(xué)惰性物質(zhì)制成，并在消化完成后，用水沖洗擦凈。排氣系統(tǒng)應(yīng)安裝在安全的位置。3）避免在使用高氯酸消化的通風(fēng)櫥中使用有機(jī)物或其他產(chǎn)煙物質(zhì)。 4）應(yīng)使用護(hù)目鏡、防護(hù)板及其他個(gè)人防護(hù)設(shè)備。用聚氯乙烯手套，不能用橡膠用套。 5）用高氯酸濕法氧化，除非另有說(shuō)明，應(yīng)將樣品首先用硝酸破壞易氧化的有機(jī)物，并注意避免燒干。 6）高氯酸在濃度為 72(恒沸混合物，沸點(diǎn) 203)時(shí)，是穩(wěn)定的。如果高氯酸被脫水（如與強(qiáng)脫水劑接觸），形成無(wú)水高氯酸等，其穩(wěn)定性十分顯著的下

7、降，此時(shí)遇熱、撞擊或遇有機(jī)物、還原劑（如紙、木頭或橡皮）就會(huì)發(fā)生爆炸。，繼續(xù)加熱消解，不時(shí)緩緩搖動(dòng)使均勻，消解至冒白煙，消解液呈淡黃色或無(wú)色溶液。濃縮消解液至1ml 左右。冷至室溫后定量轉(zhuǎn)移至 10ml（如為粉類樣品，則至 25ml）具塞比色管中，以去離子水定容至刻度。如樣液混濁，離心沉淀后?？扇∩锨逡哼M(jìn)行測(cè)定。1.5.1.2 干濕消解法(10)稱取約 1.002.00g 試樣，置于瓷坩堝中，在小火上緩緩加熱直至炭化。移入箱形電爐中，500下灰化 6H 左右，冷卻取出。向瓷坩堝加入混合酸（1.3.6）約 23ml，同時(shí)作試劑空白。小心加熱消解。直至冒白煙，但不得干涸。若有殘存炭粒應(yīng)補(bǔ)加 23m

8、l 混合酸，反復(fù)消解，直至樣液為無(wú)色或微黃色。微火濃縮至近干。然后，定量轉(zhuǎn)移至 10ml 刻度試管（如為粉類，則至 25ml 刻度試管）中，用水定容至刻度。必要時(shí)離心沉淀。1.5.1.3 浸提法（本方法不適用于含蠟質(zhì)樣品）(11)稱取約 1.00g 試樣，置于比色管（1.4.4）中。同時(shí)做試劑空白。樣品中如含有乙醇等有機(jī)溶液，先在水浴中揮發(fā)，但不得干涸。加 2ml 硝酸樣品中含有碳酸鈣等碳酸鹽類的粉劑，在加酸時(shí)應(yīng)緩慢加入，以防二氧化碳?xì)怏w產(chǎn)生過(guò)于猛烈。（1.3.2）、5ml 過(guò)氧化氫（1.3.4），搖勻，于沸水浴中加熱 2H。冷卻后加水定容至 10ml（如為粉類樣品，則定容至 25ml）。如樣

9、品混濁，離心沉淀后，取上清液備用。1.5.2 測(cè)定(12)1.5.2 .1 稱取 0、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00ml 鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.3.7.3），分別置于數(shù)支10ml 比色管中，加水至刻度。按儀器規(guī)定的程序，分別測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)、空白和樣品溶液。但如樣品溶液含有大量離子如鐵、鉍、鋁、鈣等干擾測(cè)定時(shí)，應(yīng)預(yù)先按 1.5.2.2 進(jìn)行萃取處理。繪制濃度吸光度曲線，計(jì)算樣品含量。1.5.2.2 樣品如含有大量鐵離子。按 1.5.2.3 進(jìn)行萃取。如含有大量鉍等離子干擾，按 1.5.2.4 進(jìn)行萃取。如含有大量鋁、鈣等離子，按 1.5.2.5 進(jìn)行萃取。1.5.2.3 將標(biāo)準(zhǔn)、 空白和樣

10、品溶液轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿中， 在水浴上蒸發(fā)至干加入 10ml 7N 鹽酸 （1.3.9）(13)溶解殘?jiān)玫攘康?MIBK（1.3.8）萃取二次，再用 5ml 7N 鹽酸洗 MIBK 層，合并鹽酸溶液，必要時(shí)趕酸，定容，進(jìn)行直接測(cè)定或按 1.5.2.4 或 1.5.2.5 再次萃取，以除去其他干擾離子。1.5.2.4 將標(biāo)準(zhǔn)、空白或樣品溶液轉(zhuǎn)移至 100ml 分液漏斗中，加 2ml 檸檬酸銨（1.3.11）、1 滴 BTB 指示劑（1.3.10），用氫氧化銨（1.3.12）調(diào)溶液為綠色，加 2m 硫酸銨（1.3.13） ，加水到 30ml，加 2mlDDTC（1.3.14），混勻，放置數(shù)分鐘，加

11、10ml MIBK（1.3.8）振搖3min，靜置分層，取 MIBK 層進(jìn)行測(cè)定(14)。1.5.2.5 將標(biāo)準(zhǔn)試劑空白和樣品溶液轉(zhuǎn)移至 100ml 分液漏斗。加 2ml 檸檬酸（1.3.16），用（11）氫氧化銨（1.3.12）調(diào) PH 至 2.53.0，加水至 30ml，加 2ml 2APDC（1.3.15） ，混合，放置 3min，靜置片刻，加入 10mlMIBK 振搖萃取 3min，將有機(jī)相轉(zhuǎn)移至離心管中，于 3000/min，離心 5。取 MIBK 層溶液進(jìn)行測(cè)定(15)。1.6 分析結(jié)果的計(jì)算按式（1）計(jì)算鉛濃度：Pb（ppm）（AB）V/m.(1)式中：A從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得樣品溶液鉛

12、濃度，g/ml；B從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試劑空白鉛濃度，g/ml；V樣液總體積，ml；m樣品質(zhì)量，g。2 雙硫腙萃取分光光度法本方法適用于化妝品中鉛的測(cè)定。本方法最低檢出量為 1.0g 鉛，若取 1g 樣品測(cè)定。則最低檢測(cè)濃度為 1ppm。2.1 方法提要(16)樣品經(jīng)預(yù)處理后，在弱堿性下樣液中的鉛與雙硫腙作用生成紅色螯合物，用氯仿提取，比色定量。有大量錫存在下干擾測(cè)定。本方法不適用含有氧化鈦及鉍化合物的試樣。2.2 樣品采集見 GB 791787化妝品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 汞第 2 章。2.3 試劑2.3.1 去離子水或同等純度的水：同 1.3.1。2.3.2 氨水（11）：優(yōu)級(jí)純(17)。2.3.

13、3 鹽酸（11）：優(yōu)級(jí)純。2.3.4 酚紅指示液：0.1乙醇溶液。2.3.5 20鹽酸羥胺溶液：取鹽酸羥胺 20g，加 50ml 水溶液，加 2 滴酚紅指示液，加（11）氨水（2.3.2）調(diào)至 PH8.59.0，用雙硫腙氯仿溶液（2.3.10）提取，直至氯仿層綠色不變，再用氯仿（2.3.8）洗水層兩次。此水層以（11）鹽酸（2.3.2）調(diào)至酸性，加水至100ml 備用。2.3.6 20檸檬酸銨溶液：取檸檬酸銨 50g，溶于 100ml 水中，加 2 滴酚紅指示液，加（11）氨水（2.3.2）調(diào)至 PH8.59.0，用雙硫腙氯仿溶液提取數(shù)次，每次 1020ml，直至氯仿層綠色不變?yōu)橹?。水層再用?/p>

14、仿萃取數(shù)次至氯仿無(wú)色為止。棄除氯仿層，水層加水稀釋至 250ml。2.3.7 10氰化鉀溶液（注意有劇毒）：如試劑含鉛需純化時(shí)，應(yīng)先將 10g 氰化鉀溶于 20ml 水中，以下按 2.3.6 所述方法純化后再稀釋至 100ml。2.3.8 氯仿：不應(yīng)含氧化物。(18)2.3.9 雙硫腙貯備液(19)：0.1氯仿溶液，保存在冷暗處。必要時(shí)按下述方法純化：稱取 0.5g 研細(xì)的雙硫腙， 溶于 50ml 氯仿中， 如不全溶， 可用濾紙濾過(guò)于 250ml 分液漏斗中， 用 1：99 氨水提取三次,每次 100ml，合并提取液，再用 10ml 氯仿洗氨水溶液二次，用 6N 鹽酸調(diào)至酸性，將沉淀出的雙硫腙

15、用氯仿提取 23 次，每次 100ml，合并氯仿層，加氯仿至總體積為 500ml。2.3.10 雙硫腙應(yīng)用液：0.001氯仿液去除鉛。(20)2.3.11 硝酸（1）。2.3.12 無(wú)鉛脫脂棉：醫(yī)用脫脂棉，必要時(shí)用雙硫腙氯仿液去除鉛。2.3.13 鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液：同 1.3.7。2.4 儀器2.4.1 分液漏斗：125ml，預(yù)先用稀酸浸泡，并經(jīng)去離子水洗。2.4.2 分光光度計(jì)。2.5 分析步驟2.5.1 樣品預(yù)處理2.5.1.1 濕式消解法同 1.5.1.1。2.5.1.2 干濕消解法同 1.5.1.2。2.5.2 測(cè)定取適量已按 2.5.1 處理的樣液，于 125ml 分液漏斗中，加水至總體積

16、為 50ml，另取 0、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50ml 鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.3.7.3）分別置于 125ml 分液漏斗中，各補(bǔ)加1硝酸溶液（2.3.11），至總體積為 50ml。然后向樣品溶液、試劑空白及鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液中各加 2ml20檸檬酸銨溶液（2.3.6）(21)、1ml 鹽酸羥胺溶液（2.3.5）(22)、2 滴酚紅指示液（2.3.4），用氨水（2.3.2）調(diào)節(jié)至紅色出現(xiàn)(23)，然后向各分液漏斗中加入 2ml10氰化鉀溶液（2.3.7）(24)，混勻。準(zhǔn)確加入 5ml 雙硫腙應(yīng)用液（2.3.10），劇烈振搖提取 1min，靜置分層，在分液漏斗下頸部塞入少許無(wú)鉛脫脂棉（2

17、.3.12），然后將氯仿層濾入比色中，以氯仿調(diào)零，在波長(zhǎng) 510nm 下測(cè)定吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(25)2.6 分析結(jié)果的計(jì)算按下式計(jì)算鉛濃度：Pb(ppm）(m1m0）V)/(mV1)（2）式中：m從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得樣液的鉛含量，g；m從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的試劑空白的鉛含量，g；m 樣液質(zhì)量，g；V 樣液總體積，ml；V1測(cè)定時(shí)樣液取用量，ml。附加說(shuō)明：本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測(cè)所歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由“化妝品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法”起草小組負(fù)責(zé)起草。本準(zhǔn)主要起草人鄭星泉、沈文、王鵬、劉桂蘭、陳辰。本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測(cè)所負(fù)責(zé)解釋。注解:(1)鉛是人本非必需元素。WHO 將鉛排

18、列在優(yōu)先研究的有害元素的第三位。我國(guó)化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：化妝品中鉛含量不得起過(guò) 40ppm；含鉛鹽的染發(fā)劑含鉛量不得超過(guò) 1%，并需在包裝上注明含鉛。在古代，鉛曾是粉劑化妝品中的原料，用以增加皮膚的潔白。近代對(duì)鉛毒性及代謝的研究， 確認(rèn)它可通過(guò)皮膚吸收而危害人類健康： 影響造血系統(tǒng)、 神經(jīng)系統(tǒng)、 腎臟、胃腸道、生殖功能、心血管、免疫與內(nèi)分泌系統(tǒng)，特別是影響胎兒的健康。禁止化妝品中含有超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的鉛是極為重要的?；瘖y品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法中規(guī)定鉛的檢驗(yàn)可以用原子吸收分光光度法和雙硫腙比色法，前者是首選方法。（2）原子吸收分光光度法因原子化的技術(shù)不同而分為火焰原子吸收法和非火焰原子吸收法。后者的靈敏

19、度約為前者的 1001000 倍。但本標(biāo)準(zhǔn)只推薦使用火焰原子吸收法，原因是如使用非火焰法，樣品需要多次稀釋才能符合儀器檢測(cè)的范圍，從而引進(jìn)了稀釋誤差；如減少稱樣量，則因化妝品本身的不均勻性，將帶進(jìn)誤差。（3）MIBK（甲基異丁基酮或 4-甲基戊酮-2）分子式：（CH3）2CHCH2COCH3；沸點(diǎn) 11.8。其物理性質(zhì)見表 2-2-5。（4） 檸檬酸銨、硫酸銨、檸檬酸常含有鉛，致使空白增高。使用前應(yīng)先用 DDTC 和 MIBK 絡(luò)合萃取除鉛。（5）DDTC（二乙氨基二硫代甲酸鈉）（C2H5）2NCS2Na3H2O分子量約 171g，白色以結(jié)晶粉末，易溶于水，常含有難溶的不純物，使用前需過(guò)濾。D

20、DTC 水溶液在 pH6 以下不穩(wěn)定，遇酸則分解放出 CS2。水溶液保存時(shí)易生成聚合物而出現(xiàn)沉淀，對(duì)測(cè)定無(wú)影響。DDTC 可與包括鉛、鎘、鉍、鐵等在內(nèi)的 26 個(gè)元素絡(luò)合，適宜的絡(luò)合 pH 為 311。DDTC 的用量與測(cè)定元素有關(guān)。一般說(shuō)來(lái) DDTC 加入量應(yīng)比待測(cè)元素含量高 500 倍以上才能定量抽取。特別在共存離子多時(shí)，要加入過(guò)剩的量。（6） APDC（吡咯烷二硫代氨基甲酸銨）是廣譜絡(luò)合劑。它不與堿金屬、堿土金屬和稀土元素絡(luò)合；能與包括 Pb、Cd、Bi、Sn、Fe 在內(nèi)的 30 多種元素絡(luò)合，形成不溶于水而溶于酮、酯、醇等有機(jī)溶劑的絡(luò)合物，其適宜的絡(luò)合 pH 為酸性。APDC 易溶于水

21、，在水中解離度小，故溶液的 pH 變化小，只需加入少量的緩沖劑即可維持恒定的 pH。APDC 水溶液的穩(wěn)定性較差，在酸性下易分解，需每日配制使用，必要時(shí)過(guò)濾使用。APDC 不溶于酮和酯，可以用酮和酯提取以除去其中金屬雜質(zhì)。（7）所用的玻璃儀器使用前均用 3050（VV）HNO3 浸泡。（8）參見“測(cè)定無(wú)機(jī)成分的樣品預(yù)處理”硝酸的硝化作用， 可使有機(jī)物變成易于爆炸或難于氧化的硝基化合物。 如三硝基甘油為防止硝基化反應(yīng)的出現(xiàn)，可以向樣品中加入少量水，利用稀釋先將有機(jī)物水解。（9）為了安全使用這一有效的消化體系，標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法有如下敘述：“含有乙醇等有機(jī)溶劑的化妝品，先在水浴或電熱板上將有機(jī)溶劑揮發(fā)。

22、.加入 10ml HNO3,由低溫至高溫加熱消解,當(dāng)消解液體積減少到 23ml,移去熱源， 冷卻。 然后加入 25ml 高氯酸， 繼續(xù)加熱， .至冒白煙,消解液呈淡黃色或無(wú)色溶液.”值得提出的注意事項(xiàng)是:一定要在加入 HNO3 前預(yù)先將乙醇等可揮發(fā)的有機(jī)物趕掉。加入硝酸后，為防止反應(yīng)劇烈，試樣飛散、損失，可采取向試樣中加入少量水，在室溫放置過(guò)夜的方法。有機(jī)物多時(shí)，可連續(xù)添加硝酸。如高氯酸和硝酸已一同加入，當(dāng)在輕微地產(chǎn)生高氯酸白煙時(shí)，應(yīng)隨即進(jìn)行冷卻，添加 HNO3。在加熱過(guò)程中如需添加 HNO3 或高氯酸時(shí)，應(yīng)將容器移出電熱板，冷卻至 5060后再添加。為防止干涸，應(yīng)用表面皿或其他覆蓋物覆蓋容器

23、，使 HNO3 和高氯酸呈回流狀態(tài)。在消解過(guò)程中，要不停地仔細(xì)觀察試樣狀態(tài)。要防止在液面仍可見脂肪成分的漂浮物時(shí)使用或進(jìn)入高氯酸消解。（10）干濕消解法是集中干灰化法和濕灰化法的優(yōu)點(diǎn)而組成的一種消解方法，特別適合于含大量脂類的化妝品。表 2-2-4 不同化學(xué)品的熔點(diǎn)化學(xué)品熔點(diǎn)化學(xué)品熔點(diǎn)BaO2450AgI558B2O3460Ca（NO3）2561CuBr2498Ca（OH）2580Na2SO4500*Ba（NO3）2592PbCl2501CuI605MnO2535CuCl2620Sb2O3550MnCl2650*晶形變?yōu)榱浇Y(jié)晶干灰化法的優(yōu)點(diǎn)是安全、快速、沒(méi)有試劑對(duì)樣品和環(huán)境的污染；缺點(diǎn)是待測(cè)成分因揮發(fā)和待測(cè)成分與坩鍋壁的組分（如硅酸鹽）形成不溶性化合