色譜分析習(xí)題及答案(絕對(duì)精華)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上色譜分析綜合體填空：1. 氫火焰離子化檢測器和熱導(dǎo)池檢測器分別屬于_質(zhì)量型_和_溫度_型檢測器。氣相色譜儀的心臟是_色譜柱_。2. 固定液一般是按照_相似相溶_原理選擇；在用極性固定液分離極性組分時(shí)，分子間作用力主要是_誘導(dǎo)力_，極性愈大，保留時(shí)間就愈_長_。3. 固定液通常是高沸點(diǎn)的有機(jī)化合物，這主要是為了保證固定液在使用溫度下有_較好的熱穩(wěn)定性_，防止_發(fā)生不可逆的化學(xué)反應(yīng)_。4. 用于氣液色譜的擔(dān)體主要分為_白色擔(dān)體_、_紅色擔(dān)體_兩類。5. 與填充柱相比，毛細(xì)管色譜柱的相比 較大，有利于實(shí)現(xiàn)快速分析。但其柱容量_較小_。6. 在HPLC儀中，為了克服流動(dòng)相流經(jīng)

2、色譜柱時(shí)受到的阻力，要安裝_耐高壓的六通閥_。7. 氣相色譜分析中，載氣僅起輸送作用；而液相色譜分析中，流動(dòng)相還要直接參加_實(shí)際的分配過程_，要想提高高效液相色譜的柱效，最有效的途徑是_使用小粒徑填料_。8. 欲分離位置異構(gòu)體化合物，宜采用的高效液相色譜的分離模式是_梯度洗脫_。9、色譜法中，將填入玻璃管內(nèi)靜止不動(dòng)的一相稱為 固定相 ，自上而下運(yùn)動(dòng)的一相稱為 流動(dòng)相 ，裝有 固定相 的柱子稱為 色譜柱 。10、液相色譜檢測器一般可用 紫外可見分光光度檢測器 ，熒光檢測器 ；氣相色譜檢測器可用 熱導(dǎo)檢測器 ，氫火焰離子檢測器 ， 電子俘獲檢測器 等。色譜學(xué)分析基礎(chǔ)：1、 色譜塔板理論的假設(shè)？答、

3、(1) 在每一個(gè)平衡過程間隔內(nèi),平衡可以迅速達(dá)到；(2) 將載氣看作成脈動(dòng)（間歇）過程；(3) 試樣沿色譜柱方向的擴(kuò)散可忽略；(4) 每次分配的分配系數(shù)相同。(5)所有的物質(zhì)在開始時(shí)全部進(jìn)入零號(hào)塔板2、 色譜定性的方法都有哪些？答、(1) 用保留時(shí)間定性(2) 用相對(duì)值保留定性(3) 用保留指數(shù)定性(4)用化學(xué)反應(yīng)配合色譜定性 (5)用不同類型的檢測器定性色譜和各種光譜或波譜聯(lián)用3、 內(nèi)標(biāo)法定量分析時(shí)，內(nèi)標(biāo)物選擇應(yīng)滿足那些條件？答：試樣中不含有該物質(zhì)與被測組分性質(zhì)比較接近不與試樣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)出峰位置應(yīng)位于被測組分接近，且無組分峰影響4、 色譜分析中，固定相的選擇原則是什么？固定相的選擇：氣液色

4、譜，應(yīng)根據(jù)“相似相溶”的原則5、 色譜定量分析中為什么要用校正因子？在什么情況下可以不用?答：各種化合物在不同的檢測器上都有不同的應(yīng)答值，所以盡管往色譜儀中注入相同質(zhì)量的物質(zhì)，但得到峰面積卻不一樣，因此峰面積定量時(shí)就必須把由色譜儀上得到的峰面積乘上一個(gè)系數(shù)，得到此成分的質(zhì)量，在實(shí)際分析中，常用某物質(zhì)做標(biāo)準(zhǔn)，得到一個(gè)相對(duì)的校正系數(shù)，就叫相對(duì)校正因子試樣中不是所有組分6、 總結(jié)色譜法的優(yōu)點(diǎn)。答：色譜法特點(diǎn)（1）分離效率高（2） 靈敏度高（3） 分析速度快（4） 應(yīng)用范圍廣樣品用量少分離和測定一次完成易于自動(dòng)化，可在工業(yè)流程中使用7、 色譜流出曲線可解決的問題有哪些？8、 根據(jù)你所學(xué)知識(shí)，填寫下表。

5、色譜分析法基本原理應(yīng)用領(lǐng)域分析對(duì)象缺點(diǎn)氣相色譜法液相色譜法氣相色譜1. 氣相色譜的基本設(shè)備包括那幾部分,各有什么作用?載氣系統(tǒng)去除載氣中的水、有機(jī)物等雜質(zhì)進(jìn)樣裝置：色譜柱：色譜儀的核心部件檢測系統(tǒng)2試以塔極高度H做指標(biāo)討論氣相色譜操作條件的選擇。3. 試述速率方程式中A、B、C三項(xiàng)的物理意義。答：A、渦流擴(kuò)散項(xiàng)B、縱向擴(kuò)散項(xiàng)C、傳質(zhì)阻力項(xiàng)4. 為什么可用分辨率R作為色譜柱的總分離效能指標(biāo)。5. 能否根據(jù)理論塔板數(shù)來判斷分離的可能性？為什么？6. 對(duì)載體和固定液的要求分別是什么?答：載體要求:具有化學(xué)惰性好的熱穩(wěn)定性有一定的機(jī)械強(qiáng)度有適當(dāng)?shù)谋缺砻妫砻鏌o深溝，以便是固定液成為均勻的薄膜，要有較大

6、的空隙率，以便減小柱壓降。對(duì)固定液的要求：應(yīng)對(duì)被分離試樣中的各組分具有不同的溶解能力，較好的熱穩(wěn)定性，并且不與被分離組分發(fā)生不可逆的化學(xué)反應(yīng)。7. 試比較紅色擔(dān)體和白色擔(dān)體的性能,它們各使用在哪些方面?答；紅色擔(dān)體適宜分析非極性化合物；白色單體適宜分析極性化合物；8. 固定液可分為哪幾類？為什么這樣劃分？如何選擇固定液。答：固定液按分子作用力分為不易極化非極性固定液易極化非極性固定液難成氫鍵的極性固定液受質(zhì)子的極性固定液按極性分類用典型化合物在固定液上的保留性能來表征固定液的選擇原則：“相似相容”原則，固定液和被分離物分子之間的特殊作用力，利用混合物固定液利用協(xié)同效應(yīng)選擇固定液9. 色譜定性的

7、依據(jù)是什么，主要有哪些定性方法。答;依據(jù)：保留時(shí)間定性方法：用保留時(shí)間定性用相對(duì)保留值定性用保留指數(shù)定性用化學(xué)反應(yīng)配合色譜定性用不同類型的檢測器定性色譜和各種光譜或波譜聯(lián)用 10假設(shè)一個(gè)未知油劑樣品，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一種氣象色譜分析方法，并概述分析過程。液相色譜：11、正相HPLC與反相HPLC的主要不同之處什么？各適合分離什么物質(zhì)？答：正相HPLC是指以親水性的填料做固定相，以疏水性溶劑或混合物做流動(dòng)相的液相色譜，主要用于分離 醇類，類脂代化合物、磷脂類化合物，脂肪酸以及其他化合物。反相HPLC是指以強(qiáng)疏水性的填料作固定相，以可以和水混合的有機(jī)溶劑做流動(dòng)相的液相色譜，主要用于分離生物大分子、鹵化物和肽

8、及蛋白質(zhì)，含盧芳烴，小分子的核酸、核苷酸、多環(huán)芳烴等；12、何為梯度洗脫？什么情況下采用梯度洗脫？答：梯度洗脫就是有兩種（或兩種以上）不同極性的溶劑，在分離過程中按一定程度連續(xù)的改變，以改變流動(dòng)相的配比和極性。適合:具有較寬K范圍的樣品，及所有的組分的色譜峰的K值不能在0.5-20之間大分子樣品，相對(duì)分子質(zhì)量大于1000的，尤其是生物樣品樣品中含有高保留時(shí)間的干擾成分，在一次分析中如不把他洗脫出去，就會(huì)污染色譜柱，并影響下一次分析。即使在使用等度時(shí)也可以使用梯度洗脫選擇流動(dòng)相的比例。3、液相色譜中最常用的檢測器是什么檢測器，它適合那些物質(zhì)的檢測？答：最常用的是紫外可見分光光度檢測器，適合在可見

9、或紫外光區(qū)有吸收物質(zhì)的檢測；4、某組分在ODS柱上,以80甲醇作流動(dòng)相時(shí)的保留時(shí)間為10min,如果用60甲醇作流動(dòng)相，組分的保留時(shí)間是增加，還是減小？如果將80甲醇換成80異丙醇后，又會(huì)怎樣變化呢？并請(qǐng)作出解釋。5、高效液相色譜法的特點(diǎn) 答:特點(diǎn)在于高分離性能、高靈敏度、高分析速度、可以自動(dòng)化運(yùn)行6、在一定條件下，兩個(gè)組分的保留時(shí)間分別為12.2s和12.8s，計(jì)算分離度。要達(dá)到完全分離，即R=1.5，所需要的柱長。(已知n=3600)解：分離度：7、在一定條件下，兩個(gè)組分的調(diào)整保留時(shí)間分別為85秒和100秒，要達(dá)到完全分離，即R=1.5 。計(jì)算需要多少塊有效塔板。若填充柱的塔板高度為0.1

10、 cm，柱長是多少？解： r21= 100 / 85 = 1.18 n有效 = 16R2 r21 / (r21 1) 2 = 16×1.52 ×(1.18 / 0.18 ) 2 = 1547（塊） L有效 = n有效·H有效 = 1547×0.1 = 155 cm 即柱長為1.55米時(shí)，兩組分可以得到完全分離。色譜法是一種分離技術(shù)，試樣混合物的分離過程也就是試樣中各組分在稱之為色譜分離柱中的兩相間不斷進(jìn)行著的分配過程。其中的一相固定不動(dòng)，稱為固定相；另一相是攜帶試樣混合物流過此固定相的流體（氣體或液體），稱為流動(dòng)相。色譜法：當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定

11、相時(shí)，其與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同，隨著流動(dòng)相的移動(dòng)，混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同，從而按一定次序由固定相中流出。2、色譜法分類 色 譜：氣相色譜GC、液相色譜LC、超臨界流體色譜 SFC2.色譜法分類 (1)氣相色譜：流動(dòng)相為氣體（稱為載氣）。 按分離柱不同可分為：填充柱色譜和毛細(xì)管柱色譜； 按固定相的不同又分為：氣固色譜和氣液色譜(2)液相色譜：流動(dòng)相為液體（也稱為淋洗液）。 按固定相的不同分為：液固色譜和液液色譜。 離子色譜：液相色譜的一種，以特制的離子交換樹脂為固定相，

12、不同pH值的水溶液為流動(dòng)相。(3)其他色譜方法薄層色譜和紙色譜：比較簡單的色譜方法凝膠色譜法：測聚合物分子量分布。超臨界色譜: CO2流動(dòng)相。3.色譜法的特點(diǎn)（1）分離效率高復(fù)雜混合物，有機(jī)同系物、異構(gòu)體。手性異構(gòu)體。（2） 靈敏度高 可以檢測出g.g-1(10-6)級(jí)甚至ng.g-1(10-9)級(jí)的物質(zhì)量。（3） 分析速度快一般在幾分鐘或幾十分鐘內(nèi)可以完成一個(gè)試樣的分析。（4） 應(yīng)用范圍廣 氣相色譜：沸點(diǎn)低于400的各種有機(jī)或無機(jī)試樣的分析。液相色譜：高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定、生物試樣的分離分析。不足之處：被分離組分的定性較為困難。二、色譜分離過程色譜分離過程是在色譜柱內(nèi)完成的。 填充柱色譜:氣固(

13、液固)色譜和氣液(液液)色譜，兩者的分離機(jī)理不同。氣固(液固)色譜的固定相: 多孔性的固體吸附劑顆粒。 固體吸附劑對(duì)試樣中各組分的吸附能力的不同。氣液(液液)色譜的固定相: 由 擔(dān)體和固定液所組成。固定液對(duì)試樣中各組分的溶解能力的不同。氣固色譜的分離機(jī)理:吸附與脫附的不斷重復(fù)過程；氣液色譜的分離機(jī)理：氣液(液液)兩相間的反復(fù)多次分氣相色譜儀主要部件1. 載氣系統(tǒng)：包括氣源、凈化干燥管和載氣流速控制；常用的載氣有：氫氣、氮?dú)?、氦氣；凈化干燥管：去除載氣中的水、有機(jī)物等雜質(zhì)（依次通過分子篩、活性炭等）；載氣流速控制：壓力表、流量計(jì)、針形穩(wěn)壓閥，控制載氣流速恒定。2. 進(jìn)樣裝置：進(jìn)樣裝置：進(jìn)樣器+氣

14、化室；氣體進(jìn)樣器（六通閥）：推拉式和旋轉(zhuǎn)式兩種。 試樣首先充滿定量管，切入后，載氣攜帶定量管中的試樣氣體進(jìn)入分離柱；氣化室：將液體試樣瞬間氣化的裝置。無催化作用。3. 色譜柱（分離柱）：色譜柱：色譜儀的核心部件。柱材質(zhì)：不銹鋼管或玻璃管，內(nèi)徑3-6毫米。長度可根據(jù)需要確定。柱填料：粒度為60-80或80-100目的色譜固定相。液-固色譜：固體吸附劑液-液色譜：擔(dān)體+固定液。柱制備對(duì)柱效有較大影響，填料裝填太緊，柱前壓力大，流速慢或?qū)?柱堵死，反之空隙體積大，柱效低。4. 檢測系統(tǒng)：色譜儀的眼睛， 通常由檢測元件、放大器、顯示記錄三部分組成；被色譜柱分離后的組分依次進(jìn)入檢測器，按其濃度或質(zhì)量隨時(shí)

15、間的變化，轉(zhuǎn)化成相應(yīng)電信號(hào)，經(jīng)放大后記錄和顯示，給出色譜圖；檢測器：通用型對(duì)所有物質(zhì)均有響應(yīng)；專屬型對(duì)特定物質(zhì)有高靈敏響應(yīng)；常用的檢測器：熱導(dǎo)檢測器、氫火焰離子化檢測器；5. 溫度控制系統(tǒng)：溫度是色譜分離條件的重要選擇參數(shù)；氣化室、分離室、檢測器三部分在色譜儀操作時(shí)均需控制溫度；氣化室：保證液體試樣瞬間氣化；檢測器：保證被分離后的組分通過時(shí)不在此冷凝；分離室：準(zhǔn)確控制分離需要的溫度。當(dāng)試樣復(fù)雜時(shí)，分離室溫度需要按一定程序控制溫度變化，各組分在最佳溫度下分離；氣固色譜固定相：1. 種類(1)活性炭 (2)活性氧化鋁 (3)硅膠(4)分子篩(5)高分子多孔微球（GDX系列）氣固色譜固定相的特點(diǎn)（1

16、）性能與制備和活化條件有很大關(guān)系；（2）同一種固定相，不同廠家或不同活化條件，分離效果差異較大；（3）種類有限，能分離的對(duì)象不多；（4）使用方便。氣液色譜固定相 固定液+擔(dān)體（支持體） ：小顆粒表面涂漬上一薄層固定液。固定液特點(diǎn)：固定液在常溫下不一定為液體，但在使用溫度下一定呈液體狀態(tài)。1. 作為擔(dān)體使用的物質(zhì)應(yīng)滿足的條件：比表面積大，孔徑分布均勻；化學(xué)惰性，表面無吸附性或吸附性很弱，與被分離組份不起反應(yīng)；具有較高的熱穩(wěn)定性和機(jī)械強(qiáng)度，不易破碎；顆粒大小均勻、適度。一般常用6080目、80100目。1.檢測器類型濃度型檢測器：測量的是載氣中通過檢測器組分濃度瞬間的變化，檢測 信號(hào)值與組分的濃度

17、成正比。熱導(dǎo)檢測器；質(zhì)量型檢測器：測量的是載氣中某組分進(jìn)入檢測器的速度變化，即檢測信號(hào)值與單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入檢測器組分的質(zhì)量成正比。FID；通用型檢測器：對(duì)所有物質(zhì)有響應(yīng)，熱導(dǎo)檢測器；專屬型檢測器：對(duì)特定物質(zhì)有高靈敏響應(yīng)，電子俘獲檢測器；氫火焰離子化檢測器，特點(diǎn)簡稱氫焰檢測器 (1) 典型的質(zhì)量型檢測器;(2) 對(duì)有機(jī)化合物具有很高的靈敏度;(3) 無機(jī)氣體、水、四氯化碳等含氫少或不含氫的物質(zhì)靈敏度低或不響應(yīng);(4) 氫焰檢測器具有結(jié)構(gòu)簡單、穩(wěn)定性好、靈敏度高、響應(yīng)迅速等特點(diǎn);(5) 比熱導(dǎo)檢測器的靈敏度高出近3個(gè)數(shù)量級(jí)，檢測下限可達(dá)10-12g·g-1。影響氫焰檢測器靈敏度的因素 各種

18、氣體流速和配比的選擇 N2流速的選擇主要考慮分離效能， N2 : H2 = 1 : 11 : 1.5氫氣 : 空氣=1 : 10。極化電壓 正常極化電壓選擇在100300V范圍內(nèi)。載氣種類的選擇載氣種類的選擇應(yīng)考慮三個(gè)方面：載氣對(duì)柱效的影響、檢測器要求及載氣性質(zhì)。在職業(yè)病和法庭分析中，經(jīng)常要測定體液等中的苯、甲苯、二甲苯等有毒成分，采用頂空分析是一種有效、方便、快速的方法。司法部司法鑒定科學(xué)技術(shù)學(xué)院制訂了分析水、尿、血中苯類化合物的靜態(tài)頂空分析方法。5mL青霉素小瓶，取1mL試樣（水、尿、血），加入0.4內(nèi)標(biāo)物和約1g硫酸銨至飽和，加蓋密封，置于80 °C的恒溫器中30min，取0.

19、6mL頂空的氣樣色譜分析。色譜柱：2m× 2mm；80-100目；固定液 PEG 20M柱溫：110 °C ，以10 °C /min程序升溫到110 °C。分析血樣中的酒精是頂空氣相色譜應(yīng)用最廣泛的方法，可檢查汽車司機(jī)是否酒后駕車。方法：樣品平衡溫度 50°C；平衡時(shí)間 30min；色譜柱：30m × 0.53mm；石英毛細(xì)管柱； 固定液：聚二甲苯硅氧烷；固體樣品（塑料、食品等）的頂空分析。塑料食品包裝袋中的甲苯殘留量的測定。方法：將塑料食品包裝袋剪成30mm10mm裝入100mL玻璃注射器，在80°C預(yù)熱20min，用空氣

20、稀釋為100mL，恒溫10min后進(jìn)樣分析。 色譜柱： 500mm× 3mm ，填充柱，80-100目； 固定液： 20% 的 PEG 20M； 柱 溫：80 °C ；最小檢測濃度為0.031 mg/m2.高效液相色譜法的特點(diǎn)特點(diǎn)：高壓、高效、高速、 高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定有機(jī)及生化試樣的高效分離分析方法。一、單項(xiàng)選擇題1. 在液相色譜法中，按分離原理分類，液固色譜法屬于（ ）。A、分配色譜法 B、排阻色譜法 C、離子交換色譜法 D、吸附色譜法2. 在高效液相色譜流程中，試樣混合物在（ ）中被分離。A、檢測器 B、記錄器 C、色譜柱 D、進(jìn)樣器3. 液相色譜流動(dòng)相過濾必須使用何種

21、粒徑的過濾膜？A、0.5m B、0.45m C、0.6m D、0.55m4. 在液相色譜中，為了改變色譜柱的選擇性，可以進(jìn)行如下哪些操作？A、改變流動(dòng)相的種類或柱子 B、改變固定相的種類或柱長 C、改變固定相的種類和流動(dòng)相的種類 D、改變填料的粒度和柱長5. 一般評(píng)價(jià)烷基鍵合相色譜柱時(shí)所用的流動(dòng)相為（ ）A、甲醇/水（83/17） B、甲醇/水（57/43） C、正庚烷/異丙醇（93/7）D、乙腈/水（1.5/98.5）6. 下列用于高效液相色譜的檢測器，（ ）檢測器不能使用梯度洗脫。A、紫外檢測器 B、熒光檢測器 C、蒸發(fā)光散射檢測器 D、示差折光檢測器 7. 在高效液相色譜中，色譜柱的長度

22、一般在（ ）范圍內(nèi)。A 、1030cm B、 2050m C 、12m D、25m8. 在液相色譜中, 某組分的保留值大小實(shí)際反映了哪些部分的分子間作用力（ ）A、組分與流動(dòng)相 B、組分與固定相 C、組分與流動(dòng)相和固定相D、組分與組分9. 在液相色譜中，為了改變柱子的選擇性，可以進(jìn)行（ ）的操作A、改變柱長 B、改變填料粒度 C、改變流動(dòng)相或固定相種類D、改變流動(dòng)相的流速10. 液相色譜中通用型檢測器是（ ）A、紫外吸收檢測器 B、示差折光檢測器 C、熱導(dǎo)池檢測器 D、氫焰檢測器11. 在環(huán)保分析中，常常要監(jiān)測水中多環(huán)芳烴，如用高效液相色譜分析，應(yīng)選用下述哪種檢波器A、熒光檢測器 B、示差折光

23、檢測器 C、電導(dǎo)檢測器 D、吸收檢測器12. 在液相色譜法中，提高柱效最有效的途徑是（ ）A、提高柱溫 B、降低板高 C、降低流動(dòng)相流速 D、減小填料粒度13. 在液相色譜中，不會(huì)顯著影響分離效果的是（ ）A、改變固定相種類 B、改變流動(dòng)相流速 C、改變流動(dòng)相配比 D、改變流動(dòng)相種類14. 不是高液相色譜儀中的檢測器是（ ）A、紫外吸收檢測器 B、紅外檢測器 C、差示折光檢測 D、電導(dǎo)檢測器15. 高效液相色譜儀與氣相色譜儀比較增加了（ ）A、恒溫箱 B、進(jìn)樣裝置 C、程序升溫 D、梯度淋洗裝置16. 在高效液相色譜儀中保證流動(dòng)相以穩(wěn)定的速度流過色譜柱的部件是（ ）A、貯液器 B、輸液泵 C、

24、檢測器 D、溫控裝置17. 高效液相色譜、原子吸收分析用標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制一般使用（ ）水A國標(biāo)規(guī)定的一級(jí)、二級(jí)去離子水 B國標(biāo)規(guī)定的三級(jí)水 C不含有機(jī)物的蒸餾水 D無鉛(無重金屬)水18. 高效液相色譜儀與普通紫外可見分光光度計(jì)完全不同的部件是（ ）A、流通池 B、光源 C、分光系統(tǒng) D、檢測系統(tǒng)19. 下列哪種是高效液相色譜儀的通用檢測器A、紫外檢測器 B、熒光檢測器 C、安培檢測器 D、蒸發(fā)光散射檢測器20. 高效液相色譜儀中高壓輸液系統(tǒng)不包括A、貯液器 B、高壓輸液泵 C、過濾器 D、梯度洗脫裝置 E、進(jìn)樣器二、判斷題：1. 液相色譜分析時(shí)，增大流動(dòng)相流速有利于提高柱效能。2. 高效液相色

25、譜流動(dòng)相過濾效果不好，可引起色譜柱堵塞。3. 高效液相色譜分析的應(yīng)用范圍比氣相色譜分析的大。4. 反相鍵合相色譜柱長期不用時(shí)必須保證柱內(nèi)充滿甲醇流動(dòng)相。5. 高效液相色譜分析中，使用示差折光檢測器時(shí)，可以進(jìn)行梯度洗脫。6. 在液相色譜法中，提高柱效最有效的途徑是減小填料粒度。7. 在液相色譜中，范第姆特方程中的渦流擴(kuò)散項(xiàng)對(duì)柱效的影響可以忽略。8. 由于高效液相色譜流動(dòng)相系統(tǒng)的壓力非常高，因此只能采取閥進(jìn)樣。9. 高效液相色譜儀的色譜柱可以不用恒溫箱，一般可在室溫下操作。10. 高效液相色譜中，色譜柱前面的預(yù)置柱會(huì)降低柱效。11. 液相色譜中，化學(xué)鍵合固定相的分離機(jī)理是典型的液液分配過程。12.

26、 高效液相色譜分析中，固定相極性大于流動(dòng)相極性稱為正相色譜法。13. 高效液相色譜分析不能分析沸點(diǎn)高，熱穩(wěn)定性差，相對(duì)分子量大于400的有機(jī)物。14. 在液相色譜法中，約7080的分析任務(wù)是由反相鍵合相色譜法來完成的。15. 在高效液相色譜儀使用過程中，所有溶劑在使用前必須脫氣。16. 填充好的色譜柱在安裝到儀器上時(shí)是沒有前后方向差異的。17. 保護(hù)柱是在安裝在進(jìn)樣環(huán)與分析柱之間的，對(duì)分析柱起保護(hù)作用，內(nèi)裝有與分析柱不同固定相。18. 檢測器、泵和色譜柱是組成高效液相色譜儀的三大關(guān)鍵部件。19. 紫外可見光檢測器是利用某些溶質(zhì)在受紫外光激發(fā)后，能發(fā)射可見光的性質(zhì)來進(jìn)行檢測的。20. 應(yīng)用光電二

27、極管陣列檢測器可以獲得具有三維空間的立體色譜光譜圖。三、簡答題1. 為什么作為高效液相色譜儀的流動(dòng)相在使用前必須過濾、脫氣？2. 高效液相色譜有哪幾種定量方法，其中哪種是比較精確的定量方法，并簡述之。參考答案一、選擇題 1.D 2.C 3.B 4.C 5.A 6.D 7.A 8.C 9.C 10.B 11.A 12.D 13.B 14.B 15.D 16.B 17.A 18.A 19.D 20.E二、判斷題 1.× 2. 3. 4. 5.× 6. 7.× 8.× 9. 10. 11.× 12. 13.× 14. 15. 16.

28、5; 17.× 18. 19.× 20.三、簡答題1. 高效液相色譜儀所用溶劑在放入貯液罐之前必須經(jīng)過0.45m濾膜過濾，除去溶劑中的機(jī)械雜質(zhì)，以防輸液管道或進(jìn)樣閥產(chǎn)生阻塞現(xiàn)象。所有溶劑在上機(jī)使用前必須脫氣；因?yàn)樯V住是帶壓力操作的，檢測器是在常壓下工作。若流動(dòng)相中所含有的空氣不除去，則流動(dòng)相通過柱子時(shí)其中的氣泡受到壓力而壓縮，流出柱子進(jìn)入檢測器時(shí)因常壓而將氣泡釋放出來，造成檢測器噪聲增大，使基線不穩(wěn)，儀器不能正常工作，這在梯度洗脫時(shí)尤其突出。2. 高效液相色譜的定量方法與氣相色譜定量方法類似，主要有歸一化法、外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法。其中內(nèi)標(biāo)法是比較精確的定量方法。它是將已知量的內(nèi)

29、標(biāo)物加到已知量的試樣中，在進(jìn)行色譜測定后，待測組分峰面積和內(nèi)標(biāo)物峰面積之比等于待測組分的質(zhì)量與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量之比，求出待測組分的質(zhì)量，進(jìn)而求出待測組分的含量一選擇題1在色譜分析中，用于定量的參數(shù)是 ( B )A 保留時(shí)間 B 調(diào)整保留值 C 峰面積 D 半峰寬2塔板理論不能用于 ( D ) A 塔板數(shù)計(jì)算 B 塔板高度計(jì)算 C 解釋色譜流出曲線的形狀 D 解釋色譜流出曲線的寬度與哪些因素有關(guān)3在氣-固色譜分析中, 色譜柱內(nèi)裝入的固定相為 ( D ) A 一般固體物質(zhì) B 載體 C 載體+固定液 D 固體吸附劑4當(dāng)載氣線速越小，范式方程中，分子擴(kuò)散項(xiàng)B越大，所以應(yīng)選下列氣體中哪一種作載氣最有利？ (

30、 D ) A H2 B He C Ar D N2 5試指出下述說法中, 哪一種是錯(cuò)誤的? ( C ) A 根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間可以進(jìn)行定性分析 B 根據(jù)色譜峰的面積可以進(jìn)行定量分析 C 色譜圖上峰的個(gè)數(shù)一定等于試樣中的組分?jǐn)?shù) D 色譜峰的區(qū)域?qū)挾润w現(xiàn)了組分在柱中的運(yùn)動(dòng)情況 6為測定某組分的保留指數(shù)，氣相色譜法一般采取的基準(zhǔn)物是： ( C ) A 苯 B 正庚烷 C 正構(gòu)烷烴 D 正丁烷和丁二烯 7試指出下列說法中，哪一個(gè)不正確？氣相色譜法常用的載氣是 （ C ）A N2 B H2 C O2 D He8試指出下列說法中，哪一個(gè)是錯(cuò)誤的？ （ A ）A 固定液是氣相色譜法固定相 B N2、H2 等

31、是氣相色譜流動(dòng)相C 氣相色譜法主要用來分離沸點(diǎn)低，熱穩(wěn)定性好的物質(zhì) D 氣相色譜法是一個(gè)分離效能高，分析速度快的分析方法9 在氣-液色譜法中, 首先流出色譜柱的組分是 ( A ) A 溶解能力小 B吸附能力小 C 溶解能力大 D 吸附能力大10根據(jù)范第姆特議程式，指出下面哪種說法是正確的？ （ A ）A 最佳流速時(shí)，塔板高度最小 B 最佳流速時(shí)，塔板高度最大 C 最佳塔板高度時(shí)，流速最小 D 最佳塔板高度時(shí)，流速最大二填空題1按流動(dòng)相的物態(tài)可將色譜法分為 氣相色譜法 和 液相色譜法 。前者的流動(dòng)相的 氣體 ，后者的流動(dòng)相為 液體 。2氣相色譜法多用 高 沸點(diǎn)的 有機(jī) 化合物涂漬在惰性載體上作為

32、固定相，一般只要在 450 以下，有 1.5 至 10 Kpa的蒸氣壓且 穩(wěn)定 性好的 有機(jī)和 無機(jī) 化合物都可用氣相色譜法進(jìn)行分離。3氣相色譜儀由如下五個(gè)系統(tǒng)構(gòu)成：氣路系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)和檢測記錄系統(tǒng)。4氣相色譜常用的檢測器有 熱導(dǎo)檢測器 ， 氫火焰檢測器 ， 電子捕獲檢測器 和 火焰光度檢測器 。三、簡答題 1、組分A、B在某氣液色譜柱上的分配系數(shù)分別為495和467。試問在分離時(shí)哪個(gè)組分先流出色譜柱。答：根據(jù)分配系數(shù)的定義： 分配系數(shù)小的組分先流出色譜柱，因此B先流出色譜柱。2、為什么說分離度R可以作為色譜柱的總分離效能指標(biāo)？答：由 及 可知R值越大，相鄰兩組分分離越好。

33、而R值的大小則與兩組分保留值和峰的寬度有關(guān)。對(duì)于某一色譜柱來說，兩組分保留值差別的大小主要取決于固定液的熱力學(xué)性質(zhì)，反映了柱選擇性的好壞；而色譜峰的寬窄則主要由色譜過程的動(dòng)力學(xué)因素決定，反映了柱效能的高低。因此R實(shí)際上綜合考慮了色譜過程的熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，故可將其作為色譜柱的總分離效能指標(biāo)。3、氣相色譜定性的依據(jù)是什么？主要有哪些定性方法？ 答：不同組分由于其結(jié)構(gòu)不同，與固定相的作用同，因而流出柱的時(shí)間不相同。4、如何選擇氣液色譜固定液？ 答：依據(jù)相似相溶原則選擇固定液。5、氣相色譜定量的依據(jù)是什么？為么要引入定量校正因子？有哪些主要的定量方法？各適于什么情況？答：色譜定量的依據(jù)是： 在一定

34、的色譜條件下，進(jìn)入檢測器的被測組分的質(zhì)量mi與檢測器產(chǎn)生的響應(yīng)信號(hào)（峰面積Ai或峰高h(yuǎn)i）成正比，即： 引入定量校正因子的原因：因?yàn)锳i的大小和組分的性質(zhì)有關(guān)，因此，同一檢測器對(duì)不同組分具有不同的響應(yīng)值，故相同質(zhì)量的不同物質(zhì)通過檢測器時(shí)，產(chǎn)生的峰面積不等，因而不能直接應(yīng)用峰面積計(jì)算組分的含量。為此，引入“定量校正因子”以校正峰面積，使之能真實(shí)反映組分含量。歸一化法 ：應(yīng)用該方法的前提條件是試樣中各組分必須全部流出色譜柱，并在色譜圖上都出現(xiàn)色譜峰。外標(biāo)法：即所謂校準(zhǔn)曲線法（Ac曲線）。外標(biāo)法簡便，不需要校正因子，但進(jìn)樣量要求十分準(zhǔn)確，操作條件也需嚴(yán)格控制。適用于日?？刂品治龊痛罅客悩悠返姆治?。

35、內(nèi)標(biāo)法將一定量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物，加入到準(zhǔn)確稱取的試樣中，根據(jù)被測物和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量及其在色譜圖上相應(yīng)的峰面積比，求出某組分的含量。內(nèi)標(biāo)法準(zhǔn)確，操作條件要求不嚴(yán)。四、計(jì)算題1、在一根長3m的色譜柱上，分析某試樣時(shí)，得兩個(gè)組分的調(diào)整保留時(shí)間分別為13min及16min，后者的峰底寬度為1min，計(jì)算：1）該色譜柱的有效塔板數(shù)； 2）兩組分的相對(duì)保留值；3）如欲使兩組分的分離度R1.5，需要有效塔板數(shù)為多少？此時(shí)應(yīng)使用多長的色譜柱？解：若使R=1.5，柱效能為此時(shí)對(duì)應(yīng)的柱長為：2、丙烯和丁烯的混合物進(jìn)入氣相色譜柱后測得：空氣、丙烯、丁烯保留時(shí)間分別為0.5，3.5，4.8min，其相應(yīng)的峰寬分別為0

36、.2，0.8，1.0min。計(jì)算（1）丁烯在這個(gè)柱上的分配比是多少？（2）丙烯和丁烯的分離度是多少？解： 3、化合物A與正二十四烷及正二十五烷相混合注入色譜柱試驗(yàn)，測得的調(diào)整保留時(shí)間為：A 10.20min；nC24H50 9.18min；nC25H52 11.56min。計(jì)算化合物A的保留指數(shù)（IA）。4、對(duì)只含有乙醇、正庚烷、苯和乙酸乙酯的某化合物進(jìn)行色譜分析，其測定數(shù)據(jù)如下：化合物乙醇正庚烷苯乙酸乙酯Ai/cm25.0 9.0 4.0 7.0 fi¹0.64 0.70 0.78 0.79計(jì)算各組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。解：用歸一化法 同理正庚烷、苯和乙酸乙酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為34.7% 、

37、 17.2% 、30.5%。5、用甲醇作內(nèi)標(biāo)，稱取0.0573g甲醇和5.8690g環(huán)氧丙烷試樣，混合后進(jìn)行色譜分析，測得甲醇和水的峰面積分別為164mm2和186mm2，校正因子分別為0.59和0.56。 計(jì)算環(huán)氧丙烷中水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 解： 1、液相色譜有幾種類型 ? 它們的保留機(jī)理是什么 ? 在這些類型的應(yīng)用中 , 最適宜分離的物質(zhì)是什么 ?解 : 液相色譜有以下幾種類型 : 液 - 液分配色譜 ; 液 - 固吸附色譜 ; 化學(xué)鍵合色譜 ; 離子交換色譜 ; 離子對(duì)色譜 ; 空間排阻色譜等 . 液 - 固吸附色譜 是通過組分在兩相間的多次吸附與解吸平衡實(shí)現(xiàn)分離的 . 最適宜分離的物質(zhì)為中等

38、相對(duì)分子質(zhì)量的油溶性試樣，凡是能夠用薄層色譜分離的物質(zhì)均可用此法分離。 其中 ; 液 - 液分配色譜 的保留機(jī)理是通過組分在固定相和流動(dòng)相間的多次分配進(jìn)行分離的。可以分離各種無機(jī)、有機(jī)化合物 。 2、在ODS固定相上，以甲醇為流動(dòng)相，某組分的分配容量k1=1.2，如以乙腈為流動(dòng)相，其k增加還是減少? 為什么? 解：據(jù)題意為反相色譜體系。k值增加，在反相色譜體系中，流動(dòng)相由甲醇變?yōu)橐译妫軇O性參數(shù)由5.1變?yōu)?.8，增加了，但組分在流動(dòng)相中的溶解度反而減小，所以k值增大。由1.2增大為2.24。 3、在反相色譜中，流動(dòng)相從40%（V/V）甲醇水改變?yōu)?0%（V/V）甲醇水，問組分的調(diào)整保留值將

39、改變多少? 為什么? （P 甲醇=5.1，P 水=5.1） 提示：對(duì)于由溶劑A和B組成的二元混合溶劑，其極性可表示為 Pab =a P a b P b 式中a和b分別為溶劑A和B在混合溶劑中的分?jǐn)?shù)。 解：在40%配比時(shí)，混合溶劑的極性為 P1 =0.46×5.1 0.6×10.2=8.16 在60%配比時(shí)，混合溶劑的極性為 P2 =0.6×5.1 0.4×10.2=7.14 P2= P2- P2=7.14-8.16= -1.02 根據(jù)反相色譜體系 在反相色譜中，流動(dòng)相的極性變?nèi)酰≒由8.16變?yōu)?.14），溶劑強(qiáng)度增加，洗脫能力增加，因而使組分的調(diào)整保留時(shí)間減少到原來的1/3.2。 4、某色譜體系采用25%三氯甲烷/正己烷為流動(dòng)相，發(fā)現(xiàn)組分分離不十分理想，想通過改變流動(dòng)相的選擇性來改善分離選擇性，選用乙醚/正己烷為流動(dòng)相，問乙醚/正己烷的比例為多少? （P CHCl3=5.1，P乙醚=5.1） 提示：流動(dòng)相選擇性的改變是通過保持溶劑強(qiáng)度不變時(shí)改變流動(dòng)相組成來實(shí)現(xiàn)的